心房颤动(房颤)是临床上最常见的心律失常之一，其发病率随增龄而增加，心脏晚钠电流增强与房颤的发生相关，抑制晚钠电流已成为抗心律失常治疗的新的靶点。晚钠电流抑制剂通过抑制心房晚钠电流发挥抗房颤作用，其独特的作用机制和较好的安全性，有可能成为房颤治疗的新策略。

目的:探讨抑制晚钠电流的药物对短QT间期心脏可能的电生理作用及其机制。方法:采用Langendorff灌流装置制备兔离体心脏电生理研究模型。选择新西兰大耳白兔80只，首先任意选取34只，未用药时为对照A组（ n=34）、给予I KATP开放剂吡那地尔后为吡那地尔A组（ n=34），再从吡那地尔A组中选取27只，联用钠通道抑制剂或传统的用于治疗短QT综合征的药物奎尼丁后分为雷诺嗪联用组（ n=9）、美西律联用组（ n=9）、奎尼丁联用组（ n=9）。在剩余的46只新西兰兔中选取19只，未用药时为对照B组（ n=19），给予吡那地尔后为吡那地尔B组（ n=19）。其余27只分为雷诺嗪单用组（ n=9）、美西律单用组（ n=9）、奎尼丁单用组（ n=9）。采集对照A组、吡那地尔A组的心电生理参数，在对照B组、吡那地尔B组中采用程序电刺激诱发室性心律失常并采集心电图。采集吡那地尔联用组和单用药物组的心电生理参数，同时诱发室性心律失常并采集心电图。吡那地尔、雷诺嗪、美西律、奎尼丁药物浓度分别为30、10、30、1 μmol/L。 结果:与对照A组相比，吡那地尔A组的QT间期、心外膜和心内膜动作电位复极化完成90%处的时程（MAPD 90）缩短、跨室壁复极离散度（TDR）增大、有效不应期（ERP）和复极后不应期（PRR）降低（ P<0.05）。与吡那地尔A组相比，美西律联用组、奎尼丁联用组心外膜和心内膜MAPD 90和QT间期延长（ P<0.05），雷诺嗪联用组则不发生改变；TDR在3个联用组均显著降低，但ERP和PRR则延长（ P<0.05）。程序电刺激时对照B组室性心律失常诱发率为0，吡那地尔B组升高至10/19（χ2=13.6， P<0.05）。雷诺嗪联用组、美西律联用组和奎尼丁联用组室性心律失常的诱发率分别为1/9、1/9和0，均低于吡那地尔B组（χ2=4.5、4.5、7.4， P均<0.05）。 结论:在QT间期缩短的心脏，抑制晚钠电流不会加重电生理异常，而且会降低恶性心律失常发生的危险性，其机制与逆转短QT情况下TDR的增大和不应期（包括ERP及PRR）的缩短有关。

目的 探讨雷诺嗪对家兔舒张性心力衰竭动物模型心室肌细胞晚钠电流的影响.方法 健康家兔24只,随机分为假手术组、模型组、河豚毒素(tetradotoxin,TTX)组和雷诺嗪组,每组6只.4组均采用腹主动脉缩窄法制备兔左心室压力超负荷模型,其中假手术组仅游离腹主动脉而不行缩窄术.模型制作8周后取各组兔心室肌细胞进行试验,记录电流前3 min,TTX组灌流2 μmol/L TTX,雷诺嗪组灌流10 μmol/L雷诺嗪,假手术组和模型组均灌流无钙和钾的细胞外液,应用全细胞膜片钳技术记录1、3、5 Hz刺激频率下各组兔心室肌细胞晚钠电流成分,并进行比较.结果 1、3、5 Hz刺激频率下,模型组晚钠电流成分[(5.45±0.49)、(5.33±0.46)、(5.51±0.50) pA/pF]明显高于假手术组[0、0、0 pA/pF]、TTX组[(3.88±1.05)、(3.78±0.12)、(3.81±1.06)pA/pF]和雷诺嗪组[(4.80±0.33)、(4.76±0.38)、(4.35±0.39)pA/pF](P＜0.05),TTX组和雷诺嗪组高于假手术组(P＜0.05),TTX组与雷诺嗪组比较差异无统计学意义(P＞0.05);模型组和TTX组在1、3、5 Hz刺激频率下的晚钠电流成分比较差异无统计学意义(P＞0.05),雷诺嗪组在5 Hz刺激频率下的晚钠电流成分低于3 Hz和1 Hz时,3 Hz时低于1 Hz时(P＜0.05).结论 雷诺嗪可抑制超负荷家兔心室肌细胞晚钠电流,改善舒张性心力衰竭的功能.

目的 探讨同型半胱氨酸(Hcy)对乳鼠心房肌细胞(NRIC)钙超载的作用及其机制.方法 分离出生1～3 d的SD大鼠NRIC.NRIC接种后第3天分成以下几组:(1)对照组(不做任何处理):(2)Hcy不同浓度组:NRIC中分别加入终浓度为50、100、200、500 μmol/L的Hcy培养48 h;(3)抗氧化剂(NAC)组:NRIC中加入10 μmol/L NAC培养24 h;(4) Hcy+NAC组:NRIC中加入终浓度为500μ.mol/L的Hcy培养48 h,然后加入10 μmol/L NAC培养24 h;(5)钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡδ)抑制剂(KN-93)组:NRIC加入3 μmol/L的KN-93孵育5h;(6)特异性钠电流抑制剂(ELE):NRIC中加入1 μmol/L的ELE孵育5 h;(7)Hcy+KN-93组:NRIC加入终浓度为500 μmol/L的Hcy培养48 h,然后加入3μmol/L的KN-93孵育5 h;(8)Hcy +ELE组:NRIC中加入终浓度为500 μmol/L的Hcy培养48 h,后加入1μmol/L的ELE孵育5 h;(9) Hcy+KN-93+ELE组:NRIC中加入终浓度为500 μmol/L的Hcy培养48 h,然后加入3μmol/L的KN-93和1μmol/L的ELE孵育5h.慢病毒感染NRIC的分组及其干预:将NRIC以2×106个细胞/ml的密度接种于6孔板,培养48 h至细胞融合度达70％～80％.将包装的慢病毒载体原液加入完全培养基中,分别组成CaMKⅡδ-siRNA组和Nav1.5-siRNA组.阴性感染组仅加入含绿色荧光蛋白(GFP)的阴性慢病毒载体原液.3组MOI值均为10,感染24 h.在倒置荧光显微镜下观察感染后24 h各组细胞GFP荧光百分比,判断慢病毒感染效率,定期传代并进行Puro筛选,培养扩增稳转细胞,在构建成功的慢病毒干扰组的基础上加入Hcy处理,并分为Hcy+CaMKⅡδ-siRNA组、Hcy+Nav 1.5-siRNA组和Hcy+阴性感染组3组.采用Fluo-4/AM荧光探针检测NRIC内Ca2+浓度([Ca2+]i).采用以2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)作为探针,用流式细胞仪检测NRIC内活性氧(ROS),硫代巴比妥酸比色法检测丙二醛(MDA)和黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD)活力.Western blot法和实时荧光定量PCR法分别检测NRIC中CaMKⅡδ和Nav1.5蛋白和mRNA的表达水平.结果 (1)各组NRIC内ROS水平和MDA、SOD活力:Hcy 50、100、200和500 μ mol/L组NRIC内ROS水平和MDA活力均明显高于对照组(P均＜0.05),SOD活力则均明显低于对照组(P均＜0.05),且均呈现一定的浓度依赖性.另外,NAC组NRIC内ROS水平与对照组比较差异无统计学意义.(2)各组NRIC[Ca2+]i:Hcy 50、100、200和500μmol/L组NRIC [Ca2+]i分别为(155.57±7.25)、(187.43±13.07)、(248.98±27.22)和(307.36±15.09)nmol/L,其中Hcy 500 μmol/L组明显高于对照组[123.18±7.24)nmol/L,P＜0.01].另外,Hcy+NAC组NRIC[Ca2+]i明显低于Hcy 500μmol/L组[(222.87±23.71) nmol/L比(305.15±39.45) nmol/L,P＜0.05],NAC组与对照组比较差异则无统计学意义.(3)各组NRIC内CaMKⅡδ和Nav1.5蛋白表达:Hcy 50、100、200和500 μmol/L组NRIC内CaMKⅡδ和Nav1.5蛋白表达水平均高于对照组,且后3组差异均有统计学意义(P均＜0.01),Hcy对NRIC内CaMKⅡδ和Nav 1.5蛋白表达水平的影响呈现一定的浓度依赖性.另外,NAC组NRIC内CaMKⅡδ-Thr287蛋白表达水平明显低于Hcy 500 μmol/L组(P＜0.01),NAC组与对照组NRIC内CaMKⅡδ-Thr287和Nav1.5蛋白表达水平差异均无统计学意义.(4)各组NRIC内CaMKⅡδ-Thr287蛋白表达水平和[Ca2+]i:Hcy+KN-93组和Hcy+KN-93+ELE组NRIC内CaMKⅡδ-Thr287蛋白表达水平均明显低于Hcy 500 μmol/L组(P均＜0.05),且以Hcy+KN-93+ELE组为甚,Hcv+ELE组亦低于Hcy 500 μmol/L组,但差异无统计学意义.Hcy+KN-93组、Hcy+ ELE组和KN-93+ ELE+ Hcy组NRIC [Ca2+]i均明显低于Hcy 500 μmol/L (P均＜0.05),且以KN-93+ELE+Hcy组为甚.(5)慢病毒感染各组NRIC内CaMKⅡδ、Nav1.5蛋白和mRNA表达:慢病毒感染NRIC 24 h时GFP表达最理想(可达90％),CaMKⅡδ-siRNA组和Nav1.5-siRNA组NRIC内CaMKⅡδ、Nav1.5蛋白和mRNA表达水平均明显低于阴性感染组(P均＜0.05),而阴性感染组与对照组比较差异则均无统计学意义.另外,Hcy+Nav1.5-siRNA组NRIC内CaMKⅡδ-Thr287和CaMKⅡδ蛋白以及mRNA表达水平均明显低于Hcy+阴性感染组(P均＜0.05),Hcy+CaMKⅡδ-siRNA组与Hcy+阴性感染组比较Nay 1.5蛋白和mRNA水平差异则均无统计学意义.结论 高Hcy可诱导NRIC内钙超载,其机制可能为高Hcy使机体处于高氧化应激状态,通过上调钠通道蛋白,激活晚钠电流,并磷酸化CaMKⅡδ,从而共同引起钙超载.

慢性心力衰竭是大多数心血管疾病发展的终末阶段,死亡率居高不下,其主要死亡原因是心力衰竭和恶性心律失常.而晚钠电流异常增加导致的恶性心律失常是慢性心力衰竭患者死亡的重要分子机制.大量研究表明microRNA在心脏相关疾病中起重要作用,可负调控晚钠电流相关基因的表达,现就microRNA与慢性心力衰竭晚钠电流的关系做一综述.

心律失常是心力衰竭患者主要的死亡原因之一.晚钠电流在慢性心力衰竭患者心肌中异常增高并参与恶性心律失常的发生.现代医学对心衰心律失常的治疗虽然取得了很大的进步,但与此同时也存在着难以克服的使用局限性和患者难以耐受的不良反应.研究表明,中医药可综合干预心脏功能和电生理,发挥抗心律失常作用且安全性较高.一些临床用于治疗心律失常的中药及单体已被证实具有抑制晚钠电流的作用,晚钠电流可成为未来研究中医药干预心衰心律失常的新靶点之一.

急性心肌梗死后晚钠电流异常升高已被认为是导致其他离子电流紊乱的主要原因之一,进而诱发心律失常.晚钠电流及其速率依赖性在心律失常的发生机制中起着至关重要的作用,现就晚钠电流及其速率依赖性和急性心肌梗死后心律失常的关系的研究进展做一综述.

目的:观察不同模拟缺血时间下大鼠左室心肌细胞晚钠电流(INaL)的变化规律及阿托伐他汀对该过程的作用.方法:Wistar大鼠共40只,分离左室心肌细胞,分为正常组、缺血组、正常-他汀组和缺血-他汀组.用全细胞膜片钳分别记录4组细胞基线状态下INaL,再灌流3 min后,每2 min记录1次,记录10 min,观察INaL的变化规律.计算I/Imax作为标准化INaL,比较4组INaL标准化值.结果:取-40 mV测试电压下,(1)正常组,基线状态和记录3、5、7、9min4个时间点的INaL分别为1、0.82+0.24、1.00+0.36、0.92±0.32和1.03+0.38,各记录时间点与基线之间均无差别(分别P＞0.05);(2)缺血组,基线状态INaL为1,在模拟缺血3～7 min时,INaL增大,并于3 min时达峰(1.79±0.66);(3)正常-他汀组,基线状态和4个记录时间点的INaL分别为1、0.88±0.28、1.06±0.23、1.03±0.27和0.94±0.19,各记录时间点与基线之间均无差别(分别P＞0.05);(4)缺血-他汀组,与基线状态相比,模拟缺血3 min时的INaL无变化,5 min时较基线值减少0.43±0.31(P=0.035),7 min时较基线值减少0.48±0.37(P=0.044);(5)在模拟缺血3 min时,相比于正常组,缺血组INaL增大(P=0.001);相比于缺血组,缺血-他汀组INaL则减小(P=0.004);正常组和缺血-他汀组的INaL之间并无差别(P＞0.05).结论:模拟缺血早期(10 min内)心室肌细胞INaL呈时间依赖性增大;5 μmol/L阿托伐他汀不改变正常状态下的INaL,却可抑制缺血状态下INaL的异常增大.

目的:从组织层面探究SCN10A在心肌组织中的分布及其在心脏电生理中的作用.方法:实验动物选择为标准Wistar大鼠和新西兰大耳兔.应用免疫组化的方法,探究SCN10A在心脏组织中的分布.使用兔楔形心肌块模型,将实验动物分为四组,分别为正常对照组、正常+ A-803467组、ATX-Ⅱ组和ATX-Ⅱ+ A-803467组,研究使用A-803467特异性阻断SCN10A,观察其对QT间期、动作电位时程(APD)、跨心室壁复极离散度(TDR)和心律失常事件发生率的影响.结果:免疫组化结果提示,在大鼠心脏组织中可见SCN10A表达.在兔楔形心肌块实验中,ATX-Ⅱ+ A-803467组较ATX-Ⅱ组,其90％内膜动作电位时程(513.83vs.760.09ms,P＜0.05)和90％外膜动作电位时程(550.67vs.809.19ms,P＜0.05)均明显缩短,QT间期明显缩短(703.83vs.1018.71ms,P＜0.05),心律失常发生率也明显下降(0vs.57.1％,P＜0.05).结论:SCN10A在大鼠心脏组织中表达,特异性阻断SCN10A具有缩短动作电位时程、QT间期以及抗心律失常的作用.

肥厚型心肌病的治疗正处在由传统药物治疗过渡到靶向治疗的转型期.以肾素-血管紧张素-醛固酮系统、心肌细胞钙离子内环境、肌球蛋白ATP酶靶点、晚钠电流异常、心肌能量代谢通路为代表的多种发病机制的相关靶点逐渐由基础研究阶段转化为临床药物试验阶段,为改善预后及治愈肥厚型心肌病带来希望.