慢喉瘖是中医耳鼻喉科临床常见病、多发病,其病因病机复杂,具有一定的反复性、难治性.朱镇华教授根据多年临床诊疗经验,认为慢喉瘖发病与肺、脾、肾三脏密切相关,将慢喉瘖主要分为气虚痰凝证、肺脾气虚证、阴虚肺热证,常用参苓白术散、补中益气汤、养阴清肺汤、六味地黄丸等方剂治疗,运用从脾论治、以形补形、形神共养、内外结合的组方策略与治疗法则,辨证分型论治,充分发挥中医药特色与优势,临床疗效显著,具有临床推广应用价值.

喉源性咳嗽的特征性表现为咳嗽伴咽异感症;其病机关键是痰凝气滞.半夏厚朴汤齐备化痰解凝、散寒解表、调畅气机之功用,可用于喉源性咳嗽的治疗,临证时可加射干、桔梗、生甘草、木蝴蝶、百部等药,并需注意辨识兼夹症,灵活进行加减:合并少阳证者,可加小柴胡汤;咽喉部郁热甚者,可加银翘马勃散;瘀血征象明显者,可加桂枝茯苓丸;咽痒甚,病久者,可加蝉蜕、僵蚕、全蝎.

目的:基于中医古方挖掘探究中医药治疗黄疸的用药规律,并通过网络药理学研究其潜在作用机制.方法:通过中医资源网检索治疗黄疸的方剂,统计所涉及药物的性味归经、分类及频次,采用关联规则分析及聚类分析获得治疗黄疸的核心药物组合.通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、中医药百科全书数据库(ETCM)及文献,检索和筛选核心药物组合所涉及药物的化学成分,运用SwissTargetPrediction数据库进行靶点预测.通过 OMIM(Online Mendelian Inheritance in Man)、GeneCards、TTD(Therapeutic Target Database)等数据库收集黄疸相关靶点.将成分靶点与疾病靶点相映射,获得交集靶点,采用STRING平台进行蛋白相互作用分析,构建"中药-成分-靶点-疾病"网络,获得治疗黄疸的关键靶点和潜在活性成分.基于Metascape平台对关键靶点进行京都基因和基因组百科全书(KEGG)和基因本体(GO)富集分析,构建"靶点-通路"网络,获得核心靶点.结果:共纳入处方273首,涉及中药329味.纳入中药的药性以寒、温为主,药味以苦、辛、甘为主,主要归胃、肝、肺、脾经,功效以利水渗湿、清热、补虚、解表为主.高使用频次中药共计80味,通过关联规则分析共获得核心药物组合18条,核心药物组合共涉及10味中药,聚类分析获得3首核心基础方.网络药理学结果显示,核心药物组合治疗黄疸的作用机制与物质基础聚焦得到16个潜在活性成分、8个核心靶点,富集得到25条相关通路.结论:中医古方中治疗黄疸的核心药物主要有茵陈、栀子、大黄等10味中药,功效以利水、清热、燥湿、补虚为主,其作用机制可能是通过木蝴蝶素、西红花酸、槲皮素、β-谷甾醇等活性成分,作用于肿瘤坏死因子(TNF)、肿瘤抑制蛋白p53(TP53)、信号转导因子和转录激活因子3(STAT3)、白介素-8(IL-8)等核心靶点,进而影响磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路、缺氧诱导因子-1(HIF-1)信号通路、Toll样受体(TLR)信号通路、核因子-κB(NF-κB)信号通路、细胞凋亡信号通路等,发挥治疗黄疸的作用.

目的 采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术对玉蝴蝶祛斑膏的中间体及单药味进行化学成分鉴定及综合分析,并对其化学成分进行药味归属,为建立玉蝴蝶祛斑膏特征图谱奠定基础.方法 以 phenomenex Luna Omega Polar C18(2.1 mm× 100 mm,1.6 μm)为色谱柱,以 0.2％乙酸水溶液为流动相A,乙腈为流动相B,梯度洗脱(0～1 min,12％～17％B;1～5 min,17％～28％B;5～10 min,28％～90％B;10～11 min,90％～100％B;11～14 min,100％B);检测波长为300 nm;柱温为25 ℃,流速为0.25 mL·min-1.并采用G6530C型Q-TOF-MS,质谱检测分别在正、负离子模式下进行,干燥气温度:350℃,干燥气流速:10 L·min-1,雾化气压力:35 psi,鞘气温度:350℃,鞘气流速:12L·min-1,毛细管电压:4000 V(正模式)和3500 V(负模式),一级质谱选用MS模式,质量扫描范围:100～1500 m/z.二级质谱选用Auto-MS/MS模式,质量扫描范围:100～1000 m/z,碰撞电压:10、15、20、30 eV.所得数据由Agilent MassHunter软件采集.数据处理采用Agilent软件Qualitative Navigator(B.08.00)和 Qualitative Workflows(B.08.00).对玉蝴蝶祛斑膏及单药味进行 UPLC-UV和UPLC-TOF-MS分析,在正负离子模式下采集数据.结果 在正负离子模式条件下共鉴定和推测出19个化合物,结合质谱碎片信息对各色谱峰进行指认和归属.其中5个化合物归属到柿叶,14个化合物归属到木蝴蝶,5个化合物归属到菟丝子;结合文献报道和对照品对比,鉴定出15个化合物,主要为黄酮类化合物,其中包括黄芩苷、木蝴蝶苷B、金丝桃苷、芹菜素等.结论 本研究比较全面地阐明了玉蝴蝶祛斑膏的化学组成,对玉蝴蝶祛斑膏的鉴别和质量评价研究有重要的参考价值.

目的 研究木蝴蝶苷B(OB)的抗肾纤维化能力及机制.方法 建立转化生长因子-β1诱导的人肾小管上皮(HK-2)细胞纤维化模型和腺嘌呤诱导的大鼠肾间质纤维化模型,用不同浓度的OB进行干预.用Western Blot-ting检测HK-2和大鼠肾组织中大麻素受体-1(CB1)、p-Akt、Akt、上皮-间充质转化(EMT)蛋白的表达,采集大鼠血液检测血清肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN),肾组织切片行HE、Masson染色.结果 在HK-2纤维化模型中,OB(25 μmol·L-1)降低了CB1、Snail、α-SMA、FN蛋白的表达和P-Akt/Akt,增加了E-cadherin蛋白的表达(P<0.05).在腺嘌呤诱导模型中,高、低剂量OB均能降低Scr和BUN水平(P<0.05);高剂量OB(20.0 mg·kg-1)降低了肾组织中的CB1、Snail、α-SMA蛋白的表达和P-Akt/Akt,并增加了E-cadherin蛋白的表达(P<0.05).结论 OB能通过抑制肾脏CB1/Akt/Snail信号传导抑制EMT,进而抑制大鼠肾间质纤维化,为靶向CB1的OB抗肾纤维化提供了科学依据.

目的 探讨新型冠状病毒感染后肺纤维化的发病机制,并基于逆向网络药理学思维进行中药组方预测.方法 获取COVID-19和PF靶点取交集得出二者共有靶点后进行蛋白互作网络,确定关键靶点,进行GO和KEGG富集分析明确发病机制与通路.由关键靶点逆向收集中药成分,进行分子对接验证,再由成分收集中药,整理其性、味、归经.结果 获取142个COVID-19与PF的共有靶点,筛选后有18个关键靶点匹配到31种中药成分,进行28次分子对接验证,结果稳定.逆向收集287种中药,以寒性药、苦味药、肝、肺经居多,高度值中药为苦参、连翘、木蝴蝶、山豆根.结论 本研究运用逆向网络药理学思维及分子对接对COVID-19后PF进行靶点、通路、成分和中药预测,为今后临床中药组方拓宽思路.

目的 研究木蝴蝶治疗咽炎的物质基础,优化木蝴蝶的提取工艺.方法 利用网络药理筛选木蝴蝶治疗咽炎的有效成分,通过分子对接技术进行验证;采用设计空间法优化木蝴蝶的提取工艺;并按木蝴蝶的最佳提取工艺制备木蝴蝶提取物,通过96孔板法验证木蝴蝶提取物的抗菌活性.结果 经网络药理学获得槲皮素、黄芩素等有效成分,分子对接结合能均＜-5.0 kJ/mol;经设计空间法获得木蝴蝶的最佳提取工艺:加乙醇量为30倍、浸泡时间为30 min、乙醇浓度为30％～70％、提取时间为30～90min、提取次数为1～2次;经96孔板法获得木蝴蝶提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌的MIC值为0.3～0.7 mg/mL,MBC值为10～40 mg/mL.结论 网络药理学表明木蝴蝶治疗咽炎的有效成分为黄酮类成分,分子对接构象稳定;设计空间法表明木蝴蝶的最佳提取工艺符合生产实际;96孔板法表明木蝴蝶提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌具有较强的抗菌活性,为进一步开发利用木蝴蝶提供思路.

目的 利用网络药理学方法研究黄芩治疗白癜风的作用靶点和机制.方法 使用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)筛选得到黄芩中的活性成分及其作用靶点,通过SwissTargetPrediction数据库检索补充各个活性成分的作用靶点;通过OMIM、GeneCards数据库获取白癜风的相关靶点,与活性成分作用靶点取交集;将黄芩活性成分和白癜风的交集靶点导入String数据库构建靶点间的蛋白相互作用(PPI)网络;利用Cytoscape 3.9.1 软件,构建"黄芩-活性成分-白癜风靶点"网络并筛选核心靶点;使用 Metascape 数据库对潜在作用靶点进行基因本体论(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;使用AutoDockTools 1.5.7 软件进行分子对接验证并使用PyMol软件对结果进行可视化处理.结果 共筛选得到黄芩素、汉黄芩素、刺槐素、木蝴蝶素 a、表小檗碱、去甲汉黄芩素、5,7,4′-三羟基-8-甲氧基黄酮等 36 个活性成分,作用于 3868 个潜在靶点,白癜风相关靶点 1349 个,黄芩-白癜风的交集靶点 113 个;PPI网络分析得到肿瘤蛋白P53(TP53)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶 1(AKT1)、信号转导和转录激活因子 3(STAT3)、肿瘤坏死因子(TNF)、丝裂原活化蛋白激酶 1(MAPK1)、白细胞介素-6(IL-6)、胱天蛋白酶 3(CASP3)、雌激素受体(ESR1)共 8 个核心作用靶点;GO 和 KEGG 富集分析显示,黄芩治疗白癜风主要涉及胰腺癌、内分泌抵抗、神经营养素信号通路、细胞凋亡、乙型肝炎、细胞衰老等信号通路.分子对接结果显示黄芩素、汉黄芩素、刺槐素、木蝴蝶素a、表小檗碱、去甲汉黄芩素、5,7,4′-三羟基-8-甲氧基黄酮 7 个核心成分与核心靶点具有较好的结合能.结论 黄芩可能通过调控内分泌、神经、细胞衰老和凋亡以及炎症等方面发挥治疗白癜风的作用,为后续研究黄芩治疗白癜风提供参考.

目的:建立木蝴蝶药材指纹图谱;考察芪贞慢咽宁颗粒制备过程中,木蝴蝶的主要成分在工艺过程各阶段的含量变化.方法:采用HPLC法,Kromasil 100-5 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1％磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长270 nm,柱温30℃;采用“中药指纹图谱相似度评价系统”确定共有峰;对芪贞慢咽宁颗粒水提浓缩、醇沉、浓缩、干燥各工艺阶段的提取液进行检测,计算木蝴蝶的主要成分含量.结果:指认了指纹图谱中15个共有峰,以木蝴蝶苷B峰为参比峰,10种木蝴蝶样品相似度与对照图谱相似度均大于0.95,多种木蝴蝶药材成分类型一致,含量差异较大.木蝴蝶中的6个主要成分在水提工序含量明显下降,2个主要成分在醇沉工r序含量明显增高.不同密度水提液中木蝴蝶主要成分含量有明显差异,不同醇沉浓度对含量无明显影响.结论:该方法简便、准确、重复性好,可为木蝴蝶的质量控制提供依据;这种基于药材特征图谱研究主要成分含量变化的方法可更好地指导制剂研究,提高有效成分转移率.

目的 建立芪贞慢咽宁颗粒的HPLC指纹图谱.方法 该药物甲醇提取液的分析采用ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;检测波长224 nm;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃.同时,将单味药材及其阴性对照与制剂指纹图谱进行对比,归属共有峰.结果 10批样品指纹图谱中标定了19个共有峰,相似度均大于0.97,均能在对应药材(女贞子、黄芪、木蝴蝶、白术)中得到归属,其中有4个色谱峰得到指认,分别为毛蕊异黄酮葡萄糖苷、特女贞苷、木蝴蝶苷B、白术内酯Ⅲ.结论 该方法稳定可靠,可用于芪贞慢咽宁颗粒的质量控制.