树枝状大分子聚酰胺-胺(PAMAM dendrimers)是近年来研究较为广泛的树状大分子之一,其表面具有大量可修饰的官能团,内部具有大量空腔,且具有良好的生物相容性、渗透性及稳定性,这些特点使PAMAM dendrimers在药物和基因载体等领域应用广泛,并可能成为新型吸收促进剂.为具体研究PAMAM dendrimers的促吸收作用,该课题选取甘草苷为模型药物,其具有补脾益气、解毒保肝等功效,但有研究表明其经口服后不易被胃肠道吸收,且存在首过效应等,生物利用度较低,因此在临床上尚未被广泛应用.该课题以体内肠道吸收的2个主要决定性因素溶解性和渗透性为核心,通过对甘草苷理化性质的研究,并辅以目前广泛应用的肠渗透性模型Caco-2单层细胞膜,对比分析了含或不含不同表面活性官能团的PAMAM dendrimers的甘草苷溶液跨Caco-2细胞膜转运量,并利用MTT试验分析比较了不同官能团的PAMAM dendrimers对细胞的毒性大小.结果显示,0.1％的G4代PAG能安全、有效的促进甘草苷吸收,并适合进一步开发成新型药用辅料.

目的 探讨可降解聚酰胺树枝状大分子(SS-PAMAM)复合基因载体对于人肝癌细胞系HepG2细胞蛋白表达及细胞增殖迁移的影响.方法 将人肝癌细胞学HepG2细胞分为观察组和对照组,观察组给予复合型PAMAM基因载体处理,对照组给予空载体处理,蛋白质印迹法检测CDH13蛋白表达,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法和划痕实验检测肿瘤细胞的增殖和迁移能力.结果 观察组HepG2细胞CDH13蛋白表达为(0.981±0.019),明显高于对照组的(0.420±0.017),差异有统计学意义(P<0.05);观察组HepG2细胞24 h增殖吸光度值及划痕愈合率分别为(0.554±0.013)和(0.198±0.011),均明显低于对照组(P<0.05).结论 复合型PAMAM基因载体可使人肝癌HepG2细胞的增殖和迁移能力减弱.

目的 制备聚酰胺-胺树枝状大分子包载白藜芦醇纳米载体复合物(Res-PAMAM-Ac),并考察其稳定性和安全性.方法 采用发散法合成空白载体,并进行乙酰化修饰,核磁共振图谱(1H-NMR)、红外光谱(IR)对载体进行表征,粒径及Zeta电位检测考察载体性质;逆相蒸发法制备Res-PAMAM-Ac,HPLC检测载药量、包封率以及稳定性;MTT法考察载体和复合物对人肺癌A549细胞的细胞毒性;溶血性试验评价载体和复合物的生物安全性.结果 成功合成Res-PAMAM-Ac,大小均匀,平均粒径(167.30±21.70) nm,PDI为0.115±0.006,电位(19.27±0.35) mV;平均载药量(76.99±1.30) mg/g,包封率(29.63±2.70)％,稳定性参数(KE)小于0.15,且药物无明显析出;复合物质量浓度在30tg/mL以下时对人肺癌A549细胞具有较小毒性;载体及复合物溶血率低于5％,视为生物安全.结论 制备的Res-PAMAM-Ac粒径均匀、载药量较好、稳定性高、毒性小.

目的 制备乳糖酸(LA)修饰聚酰胺-胺树枝状大分子(PAMAM)接枝白藜芦醇(Res)的纳米颗粒,并进行体外评价.方法 采用发散法合成G3.0 PAMAM,将末端部分羧基化(PAMAM-COOH),经酯化反应键合Res、酰胺化反应接枝LA在载体表面,制备LA-PAMAM-Res纳米颗粒,用核磁共振氢谱(1H-NMR)、红外光谱(IR)进行表征;LA-PAMAM-Res物理包载Res制备LA-PAMAM-Res/Res纳米颗粒,并用透析法检测其包封率;HPLC检测2种纳米颗粒的载药量,激光粒度分析法考察其粒径,透析法测定其体外药物释放性能,溶血性实验评价其生物安全性;MTT法考察PAMAM、PAMAM-COOH、Res、LA-PAMAM-Res和LA-PAMAM-Res/Res的细胞毒性及抗癌活性.结果 成功制备了LA-PAMAM-Res和LA-PAMAM-Res/Res纳米颗粒.LA-PAMAM-Res/Res的包封率为(75.1±2.2)％,LA-PAMAM-Res和LA-PAMAM-Res/Res的载药量分别为(7.2±0.9)％和(18.4±1.1)％,粒径分别为(126.3±3.4) nm和(251.0±15.7) nm,72 h时体外药物释放度分别为(23.83±0.43)％和(35.28±0.72)％,溶血率均低于5％,且载体PAMAM-COOH比PAMAM具有较小的细胞毒性,LA-PAMAM-Res和LA-PAMAM-Res/Res仍具有抑制肿瘤增殖活性.结论 制备了能使药物缓慢释放、生物相容性良好、低细胞毒性和具有抗癌活性的LA-PAMAM-Res和LA-PAMAM-Res/Res纳米颗粒,且LA-PAMAM-Res/Res进一步提高了Res的载药量.

目的·构建负载第4代树枝状大分子聚醜胺-胺(generation 4 polyamindoamine,G4 PAMAM)/布洛芬(ibuprofen,IBU)复合物(G4 PAMAM-IBU)的基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)响应性明胶(gelatin,Gel)水凝胶,并探究其体外特征.方法·将IBU粉末加入G4PAMAM溶液中,经超声振荡得到G4 PAMAM-IBU复合物,利用紫外分光光度计检测饱和G4 PAMAM-IBU溶液中IBU的浓度,研究G4 PAMAM对IBU的增溶能力和G4 PAMAM-IBU复合物中IBU的释放.采用CCK-8试剂盒评估IBU与G4PAMAM-IBU对大鼠成纤维细胞增殖的抑制能力.同时,为实现G4 PAMAM-IBU的按需释放,利用Gel与甲基丙烯酸酐的加成反应合成甲基丙烯酸酯明胶(methacrylate gelatin,GeIMA),并在365 nm光交联下形成MMP响应性水凝胶,并将G4 PAMAM-IBU复合物包载于该水凝胶之中.扫描电子显微镜观察水凝胶的微观形态,紫外分光光度计测定水凝胶中药物的释放量.之后,将载药GeiMA水凝胶与成纤维细胞共培养,采用CCK-8试剂盒与活/死细胞染色法评估水凝胶对成纤维细胞增殖的影响.采用单因素方差分析进行组间定量资料的比较.结果· IBU与G4PAMAM成功组成复合物,并使IBU在水中的溶解度显著提高,且IBU在12h内与G4PAMAM逐渐解离并释放.与空白对照组相比,单纯的IBU浓度需达到300 pg/mL才具有抑制成纤维细胞增殖的能力(P=0.023),而G4 PAMAM-IBU中IBU的浓度为100p.g/mL时即可显著抑制成纤维细胞增殖(P=0.000).所制备的G4 PAMAM-IBU/GeIMA水凝胶经MMP处理后,内部孔隙增大,药物释放加快.同时,体外实验发现,与载IBU的GeiMA水凝胶相比,G4 PAMAM-IBU/GelMA水凝胶处理后的成纤维细胞活细胞减少,死细胞增多,对细胞增殖的抑制作用显著增强(均P=0.000);且加入MMP后,抑制作用进一步增强.结论· G4PAMAM对IBU具有显著的增溶作用并可增强其药物效应;G4 PAMAM-IBU/GelMA水凝胶具有MMP响应性的药物缓释行为,并能够持续抑制成纤维细胞增殖.

聚酰胺-胺(Polyamidoamine,PAMAM)树枝状大分子具有结构规整、高度枝化、反应活性良好的特点,广泛用作肿瘤靶向给药系统的载体.然而,由于PAMAM表面大量氨基导致其具有一定的毒性.研究者们采用表面工程化、靶向配体修饰、环境响应性基团修饰等多种修饰方式对PAMAM进行改性从而获得性能更加优良的改性聚酰胺-胺用于肿瘤治疗,取得了不错的效果.本文将对改性PAMAM树状大分子修饰改性方式以及其在肿瘤治疗中的应用研究现状与进展进行简要综述,以期为PAMAM在肿瘤治疗中更好应用提供参考.

目的 为口服药物吸收促进剂的合理使用及开发提供参考.方法 分析影响口服药物吸收的具体因素,结合国内外研究成果介绍吸收促进剂的常用种类及具体应用,阐述吸收促进剂增加肠道通透性、提高口服药物生物利用度的机制.结果 与结论口服药物生物利用度的影响因素包括消化道物理、化学屏障及药物处方组成等.口服药物吸收促进剂包括表面活性剂、螯合剂、壳聚糖及其衍生物、多肽类、聚酰胺-胺型树枝状大分子、生物黏附材料.表面活性剂为常用吸收促进剂,其一方面可提高药物的表观溶解度,进而提高亲脂性药物口服递送效率,另一方面可减少多种酶对药物的代谢作用,破坏消化道紧密连接、改善细胞膜流动性、促进肠淋巴转运吸收、增强药物与上皮细胞的亲和性,进而增加药物在消化道的渗透效率,从而提高口服生物利用度.目前能真正用于临床含吸收促进剂的药物仍较少,且安全性有待提高.