目的:观察自体富血小板凝胶(APG)治疗2型糖尿病足(DF)患者的临床疗效及对外周血单个核细胞(PBMCs)中肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)表达的影响。方法:选取2021年2月至2022年5月南京医科大学康达学院附属医院收治的62例DF患者，采用随机数字表法分为对照组(30例)和观察组(32例)，对照组采用超声清创换药治疗，观察组采用超声清创联合APG治疗。观察治疗6周后两组患者治疗的有效率、经皮氧分压(TcPO 2)，血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素6(IL-6)、血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子α(HIF-1α)水平，PBMCs中MALAT1表达，并采用Pearson相关分析MALAT的表达改变(△MALAT1)与治疗总有效率的关系。 结果:观察组总有效率高于对照组[93.75%(30/32) vs 73.33%(22/30)， P<0.05]。治疗后，两组收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA 1c)、尿微量白蛋白/肌酐(UACR)、尿酸(UA)、白细胞(WBC)、TNF-α和IL-6均较前降低，HIF-1α、VEGF和MALAT1较治疗前升高(均 P<0.05)；且治疗后，观察组的UA、HIF-1α、VEGF和MALAT1与对照组比较差异有统计学意义(均 P<0.05)。Pearson相关分析显示，DF患者△MALAT1与TNF-α( r＝－0.61， P＝0.02)、IL-6( r＝－0.52， P＝0.04)、WBC( r＝－0.53， P＝0.03)呈负相关，与VEGF( r＝0.58， P＝0.03)、HIF-1α( r＝0.54， P＝0.03)呈正相关。△MALAT高改变组DF治疗的总有效率更高[88.37%(38/43) vs 73.68%(14/19)， P<0.05]。两组的不良反应发生率差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:APG可明显上调MALAT的表达，改善创面组织血液灌注、创面血管生成和炎症反应，促进溃疡愈合，且MALAT表达量的变化有助于判断DF的预后。

目的:探究铁死亡相关基因在人瘢痕疙瘩组织中的表达及意义。方法:收集新疆医科大学第一附属医院整形科2022年1月至2022年6月诊治的35例瘢痕疙瘩及因其他手术切除的20例正常皮肤组织标本，应用免疫组织化学染色法检测瘢痕疙瘩和正常皮肤组织中铁死亡标志物谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的表达情况，实时定量聚合酶链反应技术(RT-qPCR)检测各组GPX4、溶质载体家族7成员11(SLC7A11，又称xCT)、转铁蛋白受体(TFRC)及核转录因子红系2相关因子2(Nrf2) mRNA的表达水平，蛋白质印迹法检测各组GPX4、xCT、TFRC及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达水平，比色法检测各组组织铁含量。计量资料符合正态分布时，组间比较采用 t检验，若不符合正态分布，组间比较采用Mann-Whitney- U检验。 结果:免疫组织化学染色结果显示，瘢痕疙瘩组铁死亡标志物GPX4的蛋白表达水平低于正常皮肤组(0.77±0.08比0.92±0.09， t＝－3.54， P<0.01)。RT-qPCR结果显示，瘢痕疙瘩组GPX4、xCT及Nrf2 mRNA的表达水平低于正常皮肤组[GPX4：0.74±0.29比1.14±0.49， t＝－3.22， P<0.01；xCT：0.81(0.71，1.25)比1.52(0.86，4.64)， Z＝－2.679， P<0.01；Nrf2：0.49(0.38，1.04)比1.25(0.49，1.73)， Z＝－2.234， P<0.05]，TFRC mRNA的表达水平高于正常皮肤组[1.68(1.13，2.36)比0.87(0.48，1.35)， Z＝－3.886， P<0.01]。蛋白质印迹法结果显示，瘢痕疙瘩组GPX4、xCT的蛋白表达水平低于正常皮肤组[GPX4：0.75(0.42，0.91)比1.04(0.92，1.96)， Z＝－3.731；xCT：0.71(0.55，0.86)比0.98(0.95，1.14)， Z＝－4.941， P均<0.001]，TFRC及α-SMA的蛋白表达水平高于正常皮肤组(TFRC：1.13±0.22比0.62±0.16， t＝6.342；α-SMA：1.33±0.12比0.51±0.21， t＝9.669， P均<0.001)。瘢痕疙瘩组铁含量高于正常皮肤组[(7.59±1.60) μg/g比(3.05±1.28) μg/g， t＝9.086， P<0.01]。 结论:瘢痕疙瘩中存在铁死亡现象。

目的:探讨矽肺患者外周血单个核细胞（PBMCs）中硫辛酸合成酶基因（ LIAS）及核因子E2相关因子2基因（ NRF2）的表达及其与矽肺的相关性。 方法:于2019年5月，采用随机数字表法从正常健康体检人群中选取45人作为对照组，从矽肺患者中选取107人作为病例组。调查研究对象的基本资料并进行体格检查，采集外周血进行血细胞常规检测；采用免疫荧光法检测核因子E2相关因子2（NRF2）蛋白表达，实时荧光定量PCR测定 LIAS、 NRF2 mRNA表达水平。采用限制性三次样条（RCS）结合logistic回归分析PBMCs中 LIAS、 NRF2 mRNA表达水平的剂量-效应关系及其与矽肺的关联。 结果:与对照组比较，病例组单核细胞数明显增高，第一秒用力呼气量（FEV 1.0）降低，差异均有统计学意义（ P<0.05）；壹期组矽肺患者PBMCs中NRF2阳性表达率明显高于对照组，贰期、叁期组矽肺患者NRF2阳性表达率均低于对照组及壹期组矽肺患者，差异均有统计学意义（ P<0.01）。RCS结果显示， LIAS与 NRF2 mRNA表达水平呈线性剂量-效应关系（总体关联性检验χ 2=223.230， P<0.01；非线性检验χ 2=1.340， P=0.511）。相关性分析显示， LIAS与 NRF2 mRNA表达呈正相关（ r=0.651， P<0.01）。多因素分析结果显示，调整潜在混杂因素（年龄、受教育程度、体质指数和吸烟）后， LIAS、 NRF2与壹期矽肺发病风险的升高有关（ OR=11.184、4.332， P<0.05）；在矽肺贰期、叁期患者中 NRF2显示为矽肺发病的保护因素（ OR=0.225、0.208， P<0.05）。 结论:矽肺患者PBMCs中 LIAS、 NRF2 mRNA表达存在线性剂量-效应关系，并与矽肺发病相关。

目的:探讨托法替布对系统性红斑狼疮（SLE）早期动脉粥样硬化的影响；探究狼疮肾炎（LN）与SLE早期动脉粥样硬化可能的关系。方法:选择8周龄无特定病原体（SPF）级雌性MRL/lpr小鼠16只，体质量20~25 g，通过完全随机法分为治疗组与安慰剂组，每组8只。治疗组通过0.9%氯化钠溶液稀释托法替布，按照10 mg·kg -1·d -1剂量灌胃，安慰剂组（淀粉片剂）用药方法同治疗组，共给药8周。ELISA方法检测2组小鼠血清抗dsDNA抗体水平；Bradford法蛋白浓度测定小鼠尿蛋白水平；全自动生化分析仪检测血脂、尿素氮、血肌酐、补体C3、补体C4水平；蛋白印迹法测定主动脉及肾组织单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、非受体型蛋白酪氨酸激酶家族1（JAK1）、信号转导与转录激活因子（STAT）1、STAT2蛋白表达水平；主动脉弓切片后采用油红O染色，使用Image J软件评估血管斑块面积及内中膜厚度；肾脏取病理切片后采用HE染色，使用肾小球活动性评分系统评估LN活动性病变；组间统计学比较采用两独立样本 t检验，相关性分析使用Spearman法。 结果:①治疗组血清抗dsDNA抗体表达水平[（5.2±1.0）U/ml]低于安慰剂组[（6.9±1.2）U/ml]（ Z=-3.07， P=0.008），补体C3、补体C4水平均高于安慰剂组[（293±10）mg/L与（260±19）mg/L， Z=2.72， P=0.017；（16±6）mg/L与（8±9）mg/L， Z=3.78， P=0.006]。治疗组与安慰剂组血清尿素氮、血肌酐之间差异无统计学意义[（10.6±0.7）mmol/L与（11.5±1.1）mmol/L， Z=-1.96， P=0.071；（17±5）μmol/L与（22±6）μmol/L， Z=-1.79， P=0.095]。②与安慰剂组相比，治疗组小鼠LDL、TC、TG水平均下降[（0.83±0.15）mmol/L与（1.08±1.05）mmol/L， Z=-3.95， P=0.001；（2.90±0.08）mmol/L与（1.81±0.97）mmol/L， Z=-5.17， P=0.001；（1.10±0.08）mmol/L与（1.60±0.42）mmol/L， Z=-3.23， P=0.013]，HDL水平升高[（2.02±0.99）mmol/L与（1.81±0.97）mmol/L， Z=4.42， P=0.001]。③治疗组主动脉MCP-1、JAK1、STAT1、STAT2水平较安慰剂组降低（0.17±0.30与0.23±0.05， Z=-3.06， P=0.009；0.83±0.09与1.05±0.19， Z=-3.07， P=0.008；0.77±0.07与0.94±0.13， Z=-2.83， P=0.014；0.70±0.07与0.82±0.09， Z=-2.83， P=0.013），主动脉斑块面积及主动脉内中膜厚度低于安慰剂组[（12±31）μm 2与（1 242±1 101）μm 2， Z=-3.12， P=0.016；（63±7）μm与（82±8）μm， Z=-5.13， P<0.001]。④与安慰剂组相比，治疗组尿蛋白水平及肾小球肾炎活动性评分均降低[（0.08±0.03）mg/ml与（0.20±0.11）mg/ml， Z=-3.08， P=0.015；（1.79±0.38）分与（2.79±0.14）分， Z=-7.08， P<0.001]，肾组织MCP-1、JAK1、STAT1、STAT2水平较安慰剂组降低（0.364±0.040与0.425±0.021， Z=-3.85， P=0.003；0.689±0.074与0.838±0.068， Z=-4.19， P=0.001；0.508±0.070与0.646±0.119， Z=-2.85， P=0.015；0.618±0.062与0.740±0.101， Z=-2.94， P=0.013）。⑤2组小鼠肾小球活动性评分与LDL、TC、TG、主动脉斑块面积、主动脉内中膜厚度均呈正相关（ r=0.51， P=0.043； r=0.79， P<0.001； r=0.64， P=0.008； r=0.82， P<0.001； r=0.74， P=0.001），与HDL呈负相关（ r=-0.53， P=0.036）。2组小鼠尿蛋白水平与LDL、TC、TG、主动脉斑块面积、主动脉内中膜厚度均呈正相关（ r=0.67， P=0.004； r=0.68， P=0.004； r=0.53， P=0.033； r=0.80， P<0.001； r=0.74， P=0.001），与HDL呈负相关（ r=-0.57， P=0.021）。 结论:LN严重程度与SLE早期动脉粥样硬化及血脂异常具有一定相关性；托法替布可能减轻MRL/lpr小鼠早期动脉硬化程度及LN程度，并降低血脂水平，对于改善SLE预后、提高患者生存率可能有效。

目的:探讨豆蔻明对机械通气相关性肺损伤（ventilation-associated lung injury, VALI）的影响。方法:选取8~12周健康C57BL/6小鼠32只，采用随机数字表法分为4组（每组8只）：对照组（Sham组）、机械通气组（M组）、机械通气+豆蔻明组（MC组，机械通气前30 min豆蔻明80 mg/kg灌胃）、机械通气+豆蔻明+ML385组（MCM组，机械通气前7 d腹腔注射ML385 30 mg·kg -1·d -1，机械通气前30 min豆蔻明80 mg/kg灌胃）。采用潮气量28 ml/kg机械通气4 h制备小鼠VALI模型。通气完毕后收集支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid, BALF），BCA法测定BALF中蛋白浓度，ELISA法测定BALF中IL-6、TNF-α浓度。H-E染色观察肺组织病理学变化并进行肺损伤评分。Western blot法检测肺组织核转录因子红系2相关因子2 (nuclear factor-erythroid 2-related factor 2, Nrf2）及超氧化物歧化酶2 （superoxide dismutase 2, SOD2）蛋白水平。 结果:与Sham组比较，M组、MC组、MCM组的肺损伤评分及BALF中蛋白、IL-6、TNF-α浓度升高（ P<0.05），肺组织中Nrf2、SOD2蛋白水平升高（ P<0.05）。与MC组比较，M组和MCM组的肺损伤评分及BALF中蛋白、IL-6、TNF-α浓度升高（ P<0.05），肺组织Nrf2、SOD2蛋白水平降低（ P<0.05）。M组和MCM组各指标比较差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:豆蔻明预处理可通过增加肺组织Nrf2及SOD2蛋白水平抑制VALI。

患者，男，42岁，因"乏力伴呼吸困难10余天"于2021年11月11日至当地医院就诊。患者既往体健，无特殊病史。查体：神志清，精神较差，贫血貌，全身皮肤黏膜无黄染，无瘀点、瘀斑，双肺呼吸音粗，未闻及明显干湿啰音，心律齐，各瓣膜未闻及病理性杂音，腹软，无压痛、反跳痛，肝脾未触及，双下肢无水肿。入院后查血常规：WBC 147.7×10 9 /L，HGB 27 g/L，PLT 18×10 9 /L。骨髓象：增生活跃，粒系、红系增生受抑，全片见巨核细胞20个。淋巴细胞占98.5%，其中原始及幼稚淋巴细胞占97.5%，其形态特点：胞体大小不等，核圆形或类圆形，部分细胞可见核切迹，核染色质细腻，核仁清晰或隐匿，胞质量少，染天蓝色。细胞化学染色：MPO：阴性；PAS：7%阳性（细颗粒状）；NBE：阴性。血液肿瘤免疫分型：在CD45/SSC点图上设门分析，原始向CD45阴性延伸的分布区域可见异常细胞群体，约占有核细胞的96%，主要表达HLA-DR、CD10、CD19、CD22、CD34、CD38、CD58、CD123、cCD79a、TdT。染色体核型：46,XY,?t（14;18）（q32;q21）,-16,+mar,inc[2]/46,XY[18]。白血病43种融合基因筛查定性检测：阴性。急性淋巴细胞白血病（ALL）相关46种基因突变分析：检测到PAX5基因移码突变（p.Arg199GlysTer45，48.3%）。明确诊断为急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）。2021年11月17日行VDCP方案化疗，具体为：长春地辛6 mg第1、8、15天，伊达比星20 mg第1、8天，泼尼松30 mg第1~28天，环磷酰胺1.6 g第1、18天。2021年12月7日复查骨髓示形态学完全缓解（CR），微小残留病（MRD）：1.45%，染色体：46,XY,add（5）（q31）,?t（14;18）（q32;q21）,-16,add（16）（p13）,+mar,inc[2]/46,XY[18]。2021年12月23日起行Hyper-CVAD A方案巩固化疗，2022年1月26日于我院复查骨髓发现87%的原始幼稚细胞，提示患者B-ALL复发，同时加做转录组测序（RNA-seq）发现了ZEB2-JAK2融合基因。2022年1月31日行VP方案再诱导化疗，具体为：长春地辛4 mg第1、8天，地塞米松10 mg第1~14天，同时入组了ssCART-19临床试验（U01S0152201）。2022年2月16日复查骨髓：增生明显活跃，原始幼稚细胞占65.5%。该患者明确诊断为伴有JAK2重排的难治复发性Ph样B-ALL。2022年2月21日行FC方案预处理，具体为：环磷酰胺700 mg第1~3天，氟达拉滨70 mg第1~3天。2022年3月3日骨髓象：增生减低，原始幼稚细胞占40%，MRD：42.54%。2022年3月4日回输CD19 +CAR-T细胞，总量为15×10 5/kg。回输第9天出现了细胞因子释放综合征3级反应，予地塞米松、芦可替尼、输注血制品等对症处理后好转。CAR-T细胞回输28 d后复查骨髓示形态学CR，MRD：10.4%。患者因经济原因后续没有选择行造血干细胞移植治疗。2022年5月6日患者外周血涂片发现88%的原始幼稚细胞，流式细胞术提示原始异常细胞约占93%，患者本病再次复发，随访至2022年6月30日，患者于当地医院治疗中，本病仍处未缓解状态。

目的:探讨长基因间非蛋白质编码核糖核酸174(LINC00174)调控骨质疏松分子机制。方法:选择烟台山医院47例骨质疏松症患者和47例正常健康人为研究对象。人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)购自美国ScienCell公司。过表达LINC00174质粒(pcDNA-LINC00174)、过表达阴性对照(pcDNA-NC)、LINC00174小干扰RNA(si-LINC00174)、小干扰RNA阴性对照(si-NC)转染至hBMSCs。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测基因信使核糖核酸(mRNA)表达；噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖活性；流式细胞仪检测细胞凋亡率；蛋白质印迹法检测蛋白表达；酶联免疫吸附法检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及过氧化氢酶(CAT)水平。两组间比较行 t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD- t检验。 结果:骨质疏松症患者血清中LINC00174表达水平显著高于健康对照(2.38±0.21比1.00±0.11)，差异有统计学意义( t＝39.908， P<0.05)。pcDNA-LINC00174组hBMSCs细胞LINC00174表达(3.01±0.25比1.00±0.08)、凋亡率[(23.25±1.42)%比(12.46±1.07)%]和活化的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved Caspase-3)表达(0.75±0.05比0.39±0.03)显著高于pcDNA-NC组，增殖活性(0.53±0.04比0.91±0.06)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、(0.42±0.05比0.86±0.06)、碱性磷酸酶(ALP)(0.37±0.03比0.65±0.05)、Runt相关转录因子2(RUNX2)(0.41±0.04比0.83±0.06)和骨钙蛋白(OCN)(0.27±0.03比0.72±0.05)蛋白表达显著低于pcDNA-NC组，差异有统计学意义( t＝15.671、20.877、9.564、12.431、17.498、21.652、18.932、21.774， P<0.05)。si-LINC00174组hBMSCs细胞LINC00174表达(0.38±0.04比1.01±0.09)、凋亡率[(8.46±0.78)%比(13.73±1.43)%]和cleaved Caspase-3(0.26±0.02比0.45±0.04)表达显著低于si-NC组，增殖活性(1.21±0.08比0.78±0.05)、Cyclin D1(0.78±0.06比0.54±0.04)、ALP(0.75±0.06比0.49±0.04)、RUNX2(0.89±0.06比0.53±0.05)和OCN(0.92±0.06比0.68±0.05)蛋白表达显著高于si-NC组，差异有统计学意义( t＝13.032、16.541、10.125、19.356、15.238、18.981、9.237、11.343， P<0.05)。pcDNA-LINC00174组hBMSCs细胞Nrf2(0.39±0.03比0.88±0.06)和Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)(0.24±0.02比0.59±0.05)蛋白表达显著低于pcDNA-NC组，差异有统计学意义( t＝17.238、14.045， P<0.05)。si-LINC00174组hBMSCs细胞核因子红系2相关因子2(Nrf2)(0.94±0.05比0.72±0.04)和Keap1(0.86±0.05比0.47±0.04)蛋白表达显著高于si-NC组，差异有统计学意义( t＝13.032、16.541， P<0.05)。 结论:LINC00174可调控骨质疏松，其机制可能与通过Nrf2/Keap1信号通路调控hBMSCs增殖、成骨细胞分化、凋亡及氧化应激有关。

糖尿病通过氧化应激、炎症和阻碍再上皮化显著延迟创面愈合。武汉大学同仁医院暨武汉市第三医院Yao Paul教授团队在《Burns & Trauma》杂志发文《Betulinic acid accelerates diabetic wound healing by modulating hyperglycemia?induced oxidative stress, inflammation and glucose intolerance》，探讨桦木酸对糖尿病创面愈合的潜在作用及其机制。作者首先通过体外实验观察到桦木酸可改善高血糖诱导的氧化应激和炎症反应，逆转人脐静脉内皮细胞中内皮型NOS（eNOS）、核转录因子红系2相关因子2（Nrf2）信号通路和核因子κB p65亚基（NF?κB p65）激活的高糖基化抑制。高血糖可降低葡萄糖转运体4型（GLUT4）基因的活性，而桦木酸可逆转高血糖介导的GLUT4 mRNA和蛋白表达降低，其机制是桦木酸通过调节GLUT4启动子上的组蛋白甲基化，部分逆转了高血糖介导的GLUT4抑制。在体内实验中，作者通过链脲佐菌素诱导大鼠糖尿病并制备创面，通过腹腔注射或局部注射给予桦木酸进行创面治疗，证实桦木酸可改善糖尿病介导的葡萄糖不耐受，部分减轻循环系统和创面组织中糖尿病介导的氧化应激和炎症，腹腔注射和局部注射2种方法给予桦木酸均可显著加速糖尿病创面愈合。作者得出结论，桦木酸通过激活GLUT4表达来改善糖尿病介导的葡萄糖耐受不良，减少Nrf2的激活，抑制NF?κB p65信号通路，减轻高血糖诱导的氧化应激和炎症反应，并通过刺激eNOS的表达发挥血管保护作用，从而加速糖尿病创面愈合，桦木酸可能是一种有效促进糖尿病创面愈合的药物。

目的:观察促肾上腺皮质激素(ACTH)对小鼠骨髓间充质干细胞(D1细胞系)成骨分化的影响。方法:将D1细胞分成6组，对照组、对照组+低浓度ACTH组、对照组+高浓度ACTH组、成骨组、成骨组+低浓度ACTH组、成骨组+高浓度ACTH组；各组孵育细胞6 d后通过茜素红染色法评价成骨分化；分别孵育细胞1、3、6 d后，采用聚合酶链反应(PCR)技术定量分析核心结合蛋白因子-2(Runx2)、碱性磷酸酶(ALP)、黑皮质素受体-3(MC3R)和血管内皮生长因子a(VEGFa)成骨相关基因的表达水平；孵育细胞3、6 d后，采取蛋白质印迹法(Western blot)技术分析成骨分化相关基因Runx2和骨涎蛋白(BSP)表达水平。两样本均数比较采用独立样本 t检验，多样本均数比较采用单因素方差分析。 结果:RT-PCR检测结果发现，第3天成骨组+高浓度ACTH(1×10 -8 mol/L)组黑色素3蛋白受体(MC3R)表达(1.33±0.01)低于成骨组(1.82±0.11)，差异有统计学意义( t＝5.039， P<0.05)；第6天成骨组+高浓度ACTH(1×10 -8 mol/L)组Runx2表达(0.72±0.01)低于成骨组(1.16±0.08)，差异有统计学意义( t＝5.542， P<0.05)；成骨组+高浓度ACTH(1×10 -8 mol/L)组血管内皮生长因子(VEGFa)表达(0.58±0.02)显著低于成骨组(2.23±0.06)，差异有统计学意义( t＝7.238， P<0.05)；成骨组+高浓度ACTH(1×10 -8 mol/L)组茜素红染色吸光度( A)值(0.270±0.012)显著低于成骨组(0.361±0.015)，差异有统计学意义( t＝4.435， P<0.05)；在蛋白水平，Runx2、BSP基因蛋白表达都有下降的趋势；成骨组+低浓度ACTH(1×10 -9 mol/L)组茜素红染色 A值(0.363±0.013)同成骨组(0.360±0.016)比较差异无统计学意义( t＝1.345， P>0.05)，且对成骨基因和蛋白表达作用差异无统计学意义。 结论:高浓度ACTH(1×10 -8 mol/L)对小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化有抑制作用，而且在基因和蛋白水平对成骨特异性转录因子Runx2有明显的抑制作用。

目的:评价TANK结合激酶-1(TBK1)在急性肾损伤小鼠肾纤维化中的作用及其与内质网应激的关系。方法:雄性野生型C57BL/6小鼠24只，8~10周龄，体重20~25 g。采用随机数字表法分为4组( n＝6)：对照组(CON组)、急性肾损伤组(AKI组)、对照+TBK1抑制剂组(CON-GSK组)和急性肾损伤+TBK1抑制剂组(AKI-GSK组)。AKI组和AKI-GSK组小鼠腹腔注射叶酸250 mg/kg制备AKI模型，叶酸注射后第1天开始，AKI组隔天腹腔注射1次1%二甲基亚砜20 ml/kg，AKI-GSK组隔天腹腔注射1次TBK1抑制剂GSK8612 1.5 mg/kg，共7次。CON组和CON-GSK组隔天分别腹腔注射1次1%二甲基亚砜20 ml/kg或GSK8612 1.5 mg/kg，共7次。叶酸注射后第14天，取小鼠眼球血标本检测血清BUN和Cr的浓度；并提取小鼠肾组织，行天狼星红染色、Masson染色和HE染色观察肾组织病理学结果，测定肾纤维化面积，并行肾小管间质损伤评分；采用免疫荧光法检测肾组织纤连蛋白、Ⅰ型胶原蛋白和α-平滑肌肌动蛋白的表达；采用免疫印迹法检测肾组织磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶(p-PERK)、磷酸化真核细胞起始因子2α(p-eIF2α)、活化转录因子4(ATF4)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、磷酸化肌醇需求激酶1α(p-IRE1α)、肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF2)、凋亡调节信号激酶1(ASK1)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-12(caspase-12)和磷酸化c-Jun氨基末端蛋白激酶(p-JNK)的表达。 结果:与CON组比较，AKI组和AKI-GSK组血清BUN和Cr浓度升高，肾纤维化面积增大，肾小管间质损伤评分升高，肾组织纤连蛋白、Ⅰ型胶原蛋白、α-平滑肌肌动蛋白、p-PERK、p-eIF2α、ATF4、CHOP、p-IRE1α、TRAF2、ASK1、caspase-12和p-JNK表达上调( P<0.05)，CON-GSK组上述指标差异无统计学意义( P>0.05)；与AKI组比较，AKI-GSK组血清BUN和Cr浓度降低，肾纤维化面积减小，肾小管间质损伤评分降低，肾组织纤连蛋白、Ⅰ型胶原蛋白、α-平滑肌肌动蛋白、p-PERK、p-eIF2α、ATF4、CHOP、p-IRE1α、TRAF2、ASK1、caspase-12和p-JNK表达下调( P<0.05)。 结论:TBK1参与AKI小鼠肾纤维化的过程，其机制可能与促进内质网应激有关。