目的:探讨矽肺患者外周血单个核细胞（PBMCs）中硫辛酸合成酶基因（ LIAS）及核因子E2相关因子2基因（ NRF2）的表达及其与矽肺的相关性。 方法:于2019年5月，采用随机数字表法从正常健康体检人群中选取45人作为对照组，从矽肺患者中选取107人作为病例组。调查研究对象的基本资料并进行体格检查，采集外周血进行血细胞常规检测；采用免疫荧光法检测核因子E2相关因子2（NRF2）蛋白表达，实时荧光定量PCR测定 LIAS、 NRF2 mRNA表达水平。采用限制性三次样条（RCS）结合logistic回归分析PBMCs中 LIAS、 NRF2 mRNA表达水平的剂量-效应关系及其与矽肺的关联。 结果:与对照组比较，病例组单核细胞数明显增高，第一秒用力呼气量（FEV 1.0）降低，差异均有统计学意义（ P<0.05）；壹期组矽肺患者PBMCs中NRF2阳性表达率明显高于对照组，贰期、叁期组矽肺患者NRF2阳性表达率均低于对照组及壹期组矽肺患者，差异均有统计学意义（ P<0.01）。RCS结果显示， LIAS与 NRF2 mRNA表达水平呈线性剂量-效应关系（总体关联性检验χ 2=223.230， P<0.01；非线性检验χ 2=1.340， P=0.511）。相关性分析显示， LIAS与 NRF2 mRNA表达呈正相关（ r=0.651， P<0.01）。多因素分析结果显示，调整潜在混杂因素（年龄、受教育程度、体质指数和吸烟）后， LIAS、 NRF2与壹期矽肺发病风险的升高有关（ OR=11.184、4.332， P<0.05）；在矽肺贰期、叁期患者中 NRF2显示为矽肺发病的保护因素（ OR=0.225、0.208， P<0.05）。 结论:矽肺患者PBMCs中 LIAS、 NRF2 mRNA表达存在线性剂量-效应关系，并与矽肺发病相关。

目的:观察α-硫辛酸(ALA)对侧脑室注射(intracerebroventricular injection, icv)链脲菌素(streptozotocin, STZ)致大鼠学习记忆障碍的影响并探讨作用机制。方法:45只雄性SD大鼠被随机分为3组，即对照组、icv-STZ组和icv-STZ+ALA组，每组15只。STZ通过大鼠侧脑室脑立体定位注射，ALA干预用灌胃法，对照组采用侧脑室注射人工脑脊液及生理盐水灌胃，灌胃4周后用Morris水迷宫检测大鼠的空间学习记忆能力。同时，用免疫组化方法检测小胶质细胞与星形胶质细胞数量，电子显微镜检测线粒体完整性，蛋白免疫印迹检测炎症因子、磷酸化Tau蛋白、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)和糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase 3β，GSK-3β)的表达或活性水平。结果:行为学检测结果显示，侧脑室注射STZ 4周后大鼠空间学习记忆能力显著下降，ALA干预可显著改善大鼠的空间学习记忆能力。多层面分子水平检测结果显示，STZ组大鼠海马组织铁离子水平显著升高，同时伴有脂质过氧化、线粒体完整性显著破坏、氧化还原系统失衡、胶质细胞数目增加、磷酸化的Tau蛋白水平显著升高、MAPK与GSK-3β通路激活。进一步检测发现，STZ激活Janus激酶2/信号转导与转录激活子3(JAK2/STAT3)通路，并转录抑制过氧化物酶GPX4表达。抑制STAT3活性则可阻断STZ诱导GPX4下调与Tau蛋白过度磷酸化。结论:ALA通过抑制JAK2/STAT3通路，恢复GPX4蛋白水平，从而螯合铁离子、改善线粒体功能与脂质过氧化，平衡机体的氧化还原系统，降低Tau蛋白过度磷酸化，改善STZ诱导的大鼠空间学习记忆障碍。

目的:通过检测pSS患者粪便中菌群种类及分布情况，探究肠道菌群变化及其代谢特征与患者淋巴细胞亚群的关系及其在pSS发生、发展中的潜在作用。方法:收集2019年1月至2020年1月在山西医科大学第二医院风湿免疫科住院治疗的101例pSS患者以及以及在山西省人民医院同期健康体检中心体检的101名年龄、性别匹配的健康对照（HC）的粪便样本，进行16s rDNA扩增子分析。采用R软件4.0.3进行统计学分析。Wilcoxon检验及相似性分析（ANOSIM）比较2组间Alpha多样性及Beta多样性。采用 t检验进行差异菌群分析。同时通过流式微球分析技术检测pSS患者外周血淋巴细胞亚群水平，并利用Pearson相关分析淋巴细胞亚群、ESR、CRP、唾液基础流率和刺激后流率等临床指标与特征菌群的关系。 结果:与HC相比，pSS患者的肠道菌群丰富度（Chao1指数、ACE指数）和多样性（Shannon指数、Simpson指数）受损，整体肠道微生物群组成差异有统计学意义（ANOSIM， r=0.09， P=0.001）。在门水平上，pSS患者厚壁菌门水平相对丰度减少，变形菌门的相对丰度增加。在属水平上，pSS中大肠杆菌-志贺菌属（ P<0.001）、乳酸杆菌（ P<0.001）、双歧杆菌（ P<0.001）、罕见小球菌（ P<0.001）、另枝菌属（ P<0.001）、产粪甾醇真杆菌（ P=0.002）比例增高；粪杆菌属（ P<0.001）、普氏菌属（ P<0.001）、罗氏菌属（ P<0.001）、巨单胞菌属（ P<0.001）、无杆菌属（ P<0.001）、毛螺菌属（ P<0.001）、毛螺菌属NK4A136（ P=0.006）、挑剔真杆菌（ P<0.001）比例明显降低。PICRUST分析显示pSS患者中氨基酸代谢如牛磺酸和亚牛磺酸代谢（ P<0.001）、脂肪酸代谢如丙酸代谢（ P<0.001）、谷胱甘肽代谢（ P=0.002）、硫辛酸代谢（ P=0.002）、脂多糖合成（ P=0.003）、非核糖体肽合成酶介导的铁载体生物合成（ P=0.005）、氨基苯甲酸酯降解（ P=0.002）等途径被富集。Pearson相关结果显示，HC和pSS 2组间具有不同丰度的关键菌群，这些关键菌与基础唾液流率、Th17细胞及Treg细胞的绝对数量密切相关。 结论:肠道微生物菌群的失调和代谢的改变会导致宿主免疫细胞的稳态发生变化，这可能与pSS的发生发展密切相关。

目的 采用网络药理学方法探讨水臌贴治疗肝硬化腹水的潜在靶标及作用机制.方法 利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)获取水臌贴中活性成分及其活性成分所对应的药物靶点.通过人类基因综合数据库(GeneCards)、美国国家生物技术信息中心(NCBI)数据库获取肝硬化腹水的疾病靶点.利用韦恩(Venn)在线工具获得水臌贴活性成分和肝硬化腹水的共同作用靶点.运用Cytoscape软件构建水臌贴活性成分与靶点间相互作用网络关系图.应用Webgetal数据库进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库信号通路富集分析.通过文献获得调控铜死亡的靶基因并筛选其与水臌贴活性成分、肝硬化腹水3者的共同靶基因,采用CB-Dock2分子对接技术评估水臌贴活性成分与共同靶基因的结合潜力.结果 从水臌贴中筛选出具有作用靶点的50个有效活性成分,其中关键成分为槲皮素、山柰酚、异鼠李素等,水臌贴调控铜死亡治疗肝硬化腹水的核心作用靶点基因为铁氧还原蛋白1基因(FDX1)、二氢硫辛酸脱氢酶基因(DLD)、谷氨酰胺合成酶基因(GLS)、环粒蛋白激酶抑制剂2A基因(CDKN2A),KEGG分析涉及的信号通路主要为D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢、精氨酸生物合成、近端小管碳酸氢盐回收等.结论 水臌贴可以靶向铜死亡过程的关键基因构成的网络,发挥治疗肝硬化腹水的系统药理作用.

目的 探讨铜死亡在脓毒症急性肝损伤中的作用.方法 50 只雄性C57BL/6J小鼠均分为盲肠结扎穿刺术诱导脓毒症组(CLP组,n =25)和假手术组(Sham组,n =25),术后 24h采集心脏血及分离肝组织,采用全自动生化分析仪检测2 组小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平,采用苏木精-伊红染色法(HE)染色观察2 组小鼠肝脏组织的形态学特征,采用蛋白印迹法检测2 组小鼠肝脏组织中铁氧还蛋白 1(FDX1)、硫辛酸合成酶(LIAS)、二氢硫辛酸转乙酰基酶(DLAT)、二氢硫辛酸琥珀酰转移酶(DLST)、琥珀酸脱氢酶B(SDHB)、硫辛酰化DLAT(Lip-DLAT)、硫辛酰化DLST(Lip-DLST)蛋白的表达,采用免疫组织化学(IHC)技术检测2 组小鼠肝脏组织中FDX1、Lip-DLAT及Lip-DLST的表达和定位情况;取对数生长期的人肝癌HepG2细胞,分为脂多糖(加50 mg/L脂多糖,刺激细胞24 h)组和空白对照组(不做任何处理),采用蛋白印迹法检测2组HepG2 细胞中FDX1 蛋白的表达.结果 CLP组小鼠血清ALT、AST较Sham组均明显升高(P＜0.01),HE染色可见CLP组小鼠肝细胞明显肿胀坏死,上述结果表明脓毒症导致急性肝损伤小鼠模型建立成功;CLP组小鼠肝脏组织中FDX1、LIAS、DLAT、DLST、SDHB、Lip-DLAT及Lip-DLST的表达较Sham组均降低(P＜0.05),脂多糖组HepG2 细胞中FDX1 表达低于对照组(P＜0.05);免疫组织化学染色显示,2 组小鼠肝脏组织中FDX1、Lip-DLAT及Lip-DLST均主要表达于肝细胞的细胞质内,且CLP组小鼠肝组织中FDX1、Lip-DLAT及Lip-DLST表达均较Sham组减少(P＜0.05).结论 在盲肠结扎穿刺术制作的脓毒症模型小鼠和脂多糖刺激的脓毒症细胞模型中,铜死亡参与了脓毒症急性肝损伤的发生发展过程.

目的:探讨前列舒通胶囊与α-硫辛酸在2型糖尿病勃起功能障碍中老年患者中的应用效果.方法:选取我院2015年2月至2016年3月收治的82例2型糖尿病勃起功能障碍中老年患者进行研究,按随机数字表法将其分为研究组(前列舒通胶囊+α-硫辛酸)和对照组(α-硫辛酸),治疗3周后比较两组患者同型半胱氨酸(Hcy)、一氧化氮合成酶(NOS)、一氧化氮(N0)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化(SOD)、丙二醛(MDA)、内皮素(ET-1)血清水平及国际勃起功能指数表(IIEF-5)评分.结果:治疗后两组患者Hcy血清水平均降低,NOS与NO血清水平增高,与治疗前比较差异有统计学意义(P＜0.05).治疗后研究组患者Hcy血清水平较对照组低,NOS与NO血清水平较对照组高,差异均有统计学意义(P＜0.05).治疗后两组患者MDA血清水平均降低,GSH-Px与SOD血清水平增高,与治疗前比较差异有统计学意义(P＜0.05).治疗后研究组患者MDA血清水平较对照组低,GSH-Px与SOD血清水平较对照组高,差异均有统计学意义(P＜0.05).治疗后两组患者ET-1血清水平均降低,IIEF-5评分增高,与治疗前比较差异有统计学意义(P＜0.05).治疗后研究组患者ET-1血清水平较对照组低,IIEF-5评分较对照组高,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:前列舒通胶囊可辅助α-硫辛酸提高2型糖尿病勃起功能障碍中老年患者SOD、GSH-Px、NOS与NO血清水平,降低MDA、ET-1与Hcy血清水平,对勃起功能障碍有较好治疗效果.

目的 检测瘦素受体缺陷的Leprdb/db小鼠体内肝、肾中硫辛酸合成酶(LIAS)的表达.方法 分别选取10周龄Leprdb/ +与Leprdb/db雄性小鼠各8只,禁食8 h后,测量两组小鼠体重及空腹血糖(FPG);用乙醚麻醉动物,经腹主动脉采血,处死动物,取肝、肾并称重.取肝右叶和左肾经4%多聚甲醛固定,进行肝、肾组织病理学检查.分离血清,用试剂盒检测血清中CHO、TG、HDL、LDL含量.应用线粒体分离试剂盒分离肝、肾组织线粒体,提取总蛋白,采用western blot方法检测 LIAS蛋白的表达.结果 组织病理观察,发现 Leprdb/ +小鼠肝肾结构完整,而Leprdb/db小鼠肝细胞出现脂肪变性,肾小球肥大,基底膜增厚,系膜区增宽;与Leprdb/ +小鼠比较,Leprdb/db小鼠体重、GLU、CHO、TG、LDL及AST明显增高,差异有显著性(P<0.05);与Leprdb/ +小鼠比较,Leprdb/db小鼠肝肾线粒体内LIAS蛋白表达量均增高,差异有显著性(P<0.05).结论 瘦素受体缺陷的Leprdb/db小鼠存在糖脂代谢紊乱、肝肾细胞损伤、肝肾组织线粒体LIAS蛋白的表达增高.

目的 探讨川陈皮素(NOB)改善糖尿病认知功能障碍的作用及可能机制.方法 12周龄健康雄性SD大鼠40只,随机选取32只,腹腔注射1％链脲佐菌素(STZ)溶液建立糖尿病大鼠模型;余8只设为正常对照组给予等剂量缓冲液注射.造模成功后,随机分为糖尿病组(n=8),NOB高剂量组(n=6,30 mg/kg)、中剂量组(n=6,20 mg/kg)和低剂量组(n=6,10 mg/kg),阳性对照组即α-硫辛酸组(n=6,60 mg/kg).正常对照组、糖尿病组均予腹腔注射等量生理盐水,1次/d,连续8 w.22周龄时行Mor-ris水迷宫实验测试大鼠学习记忆能力及空间探索能力比较各组认知功能,采用Western印迹方法检测海马CA1区γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(GCS)、血红素氧合酶(HO)-1、Caspase-12的表达.结果 与正常对照组比较,糖尿病组水迷宫实验中潜逃潜伏期明显延长(P<0.01)、在目标象限停留时间明显缩短(P<0.01),提示大鼠学习记忆的能力明显下降;糖尿病组海马CA1区γ-GCS、HO-1、Caspase-12表达量增加(P<0.01).与糖尿病组比较,NOB治疗后各组潜逃潜伏期明显延长、在目标象限停留的时间明显缩短(P<0.01,P<0.05),海马CA1区γ-GCS、HO-1表达量增加(P<0.05,P<0.01)、Caspase-12表达量减少(P<0.05,P<0.01),以中、高剂量组效果显著,两组间比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 NOB能够通过上调海马CA1区γ-GCS、HO-1表达、减少Caspase-12蛋白表达,增强抗氧化应激和抑制凋亡而改善糖尿病大鼠的学习和记忆能力.

目的:探讨中等强度有氧运动对大鼠心房肌蛋白质组及其基因差异表达的影响,为运动心脏重塑和慢性心血管疾病康复研究提供研究依据.方法:20只雄性SD大鼠按照体重随机配对分为对照组、实验组(n=10),实验组大鼠每次按照速度24 m·min-1、持续训练40 min(负荷强度相当于60％ ～70％VO2max),每周训练6 d,持续训练4周中等强度有氧运动.应用双向凝胶电泳技术(2-DE)分离心房肌蛋白质点,串联飞行时间质谱仪技术鉴定电泳结果中表达量上调≥5倍以上,下调至1/5以下的13个备选目标蛋白质点.并对其中6个目标蛋白质用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测其mRNA.结果:通过软件分析,实验组与对照组比较,其中表达量下调至20％以下的点8个,上调5倍及以上点有5个,质谱鉴定分析其中的13个蛋白质点,最终鉴定出8种蛋白质和一个分子量为54 KDa的未知蛋白,包括:丙酮酸脱氢酶E1α1、线粒体乌头酸水合酶、蛋白质二硫键异构酶A3、甲基丙二酸半醛脱氢酶[酰基]、线粒体二氢硫辛酸脱氢酶、异戊酰辅酶A脱氢酶、谷胱甘肽合成酶、丝裂素活化蛋白激酶3等.RT-PCR检测结果表明,与对照组相比,4周中等强度有氧运动后,大鼠心房肌中甲基丙二酸半醛脱氢酶的mRNA表达量降低(P<0.05),线粒体二氢硫辛酸脱氢酶、蛋白质二硫键异构酶A3、线粒体乌头酸水合酶、谷胱甘肽合成酶的mRNA表达量降低(P>0.05);异戊烯辅酶A脱氢酶的mRNA表达量增高(P>0.05),表明mRNA表达水平与质谱鉴定结果的变化不完全一致.结论:4周的中等强度有氧运动诱导大鼠心房肌蛋白质组发生显著变化,有13个明显变化的目标蛋白,多数为能量物质代谢酶,这些目标蛋白质的变化与其mRNA表达量的变化并不完全一致,表明中等强度运动可能影响这些目标蛋白质上游基因转录的调控,也可影响下游翻译、修饰等的调控,导致表达的差异变化.

目的 探讨瘦素受体完全缺陷的Lepredb/db小鼠肾损伤机制.方法 选取28周龄瘦素受体杂合缺陷的Leprdb/+(作为对照)与Leprdb/db雄性小鼠各10只,禁食8h后,分别测量两组小鼠体质量、空腹血糖(FBG)和糖化血红蛋白(HbAlc)水平.小鼠经股动脉采血后处死.采用试剂盒检测血清中肌酐(CRE)、尿素氮(BUN)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)的水平.酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中炎性细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平.取肾进行病理观察.Western blot检测肾组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)及核因子-κB(NF-κB)蛋白表达.提取肾组织细胞线粒体,Western blot检测线粒体中硫辛酸合成酶(lipoic acid synthase,LIAS)蛋白的表达水平.结果 与Le prdb/+小鼠相比,Lepdb/db小鼠体质量、FPG、HbAlc、CRE、BUN水平均升高,差异有统计学意义(P＜0.05).病理观察发现,Leprdb/+小鼠肾细胞结构完整,而Leprdbdb/db小鼠肾小球体积增大,基底膜及毛细血管壁增厚,系膜细胞和系膜基质增多.与Leprdb/+小鼠相比,Leprdb/db小鼠血清中GSH水平降低,MDA和炎性因子MCP-1、IL-1β、TNF-α水平均升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);Leprdb/db组小鼠肾脏线粒体内LIAS和肾组织中Nrf2蛋白表达量均降低,而NF-κB蛋白水平升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 28周龄Leprdb/db小鼠存在氧化应激和炎症反应,肾损伤机制可能与LIAS调控Nrf2和NF-κB有关.