目的:使用微阵列比较基因组杂交技术，分析自然流产组织的染色体核型，探讨偶发流产和复发流产的遗传学差异，提供遗传学指导。方法:收集2016年7月至2019年9月就诊于大连市妇女儿童医疗中心确诊为自然流产的患者，对于符合纳入标准的患者进行流产组织基因芯片检测分析。结果:共收集病例618例，其中345例符合纳入标准，偶发流产133例（38.55%），复发流产212例（61.45%）。共检测出异常染色体237例，其中22号三体型（10.14%）、16号三体型（9.86%）、19号单体型（7.25%）发生率较高。复发流产组中的染色体核型异常率更低，但两组染色体核型的异常率比较差异无统计学意义（ P>0.05）；经过不同年龄和孕周亚组分析后，单体型和三体型的染色体畸形发生率比较差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:部分核型异常在流产组织中较为常见，在复发性流产组织中，染色体核型的异常率更低，但偶发流产和复发流产患者的遗传学背景无显著差异。

目的:探讨1号染色体长臂部分三体综合征的临床表型及遗传学特点。方法:回顾分析1例经染色体核型分析联合比较基因组杂交芯片(array-comparative genomic hybridization，array-CGH)确诊为1号染色体长臂部分三体综合征患儿的临床资料，并文献复习。结果:患儿临床表现为Pierre Robin序列征，伴手指屈曲、耳廓畸形、发育落后、凝血异常。经染色体核型分析及array-CGH检测提示1号染色体1q24.2q31.3存在约28.43Mb的重复。对患儿父母进行外周血染色体核型分析显示，患儿父亲1号和7号染色体均异常，考虑患儿父亲1号染色体异常是诱发患儿1号染色体长臂重复插入的重要原因。在PubMed检索，近30年报道此类疾病4例，共同的临床表现为Pierre Robin序列征和手指屈曲畸形，并发现此畸形的共同染色体异常是1q25三倍重复。结论:单纯间质段1号染色体长臂部分三体综合征的主要临床表现为Pierre Robin序列征、手指屈曲、耳廓畸形、发育落后等，染色体核型分析及array-CGH检测有助于临床确诊。

近年来,随着分子遗传学检测技术的发展,Phe-lan-McDermid综合征(PMS)的报道逐渐增多.该病染色体片段的缺失可表现为单纯缺失、环状染色体、不平衡易位等.其中环状染色体较为罕见,在新生儿中的发病率仅约为1/50 000[1],且多为新发突变,最易成环的为D组和G组染色体,其中r(22)发病率仅次于(13)和r(X)[2],目前国内仅有4例r(22)PMS报道.PMS的临床表型较为广泛,常见的有智力障碍、语言发育迟缓、肌张力减退、自闭症、畸形等,但胎儿期并不具有特异性的表型,这给PMS的产前诊断带来挑战.本研究中我们采用染色体核型分析技术和拷贝数变异测序(copy number varia-tion sequencing,CNV-seq)或基于芯片的比较基因组杂交技术(array-based comparative genomic hybridiza-tion,aCGH),对4个PMS家系中表型异常的患儿进行遗传学检测和分析,扩展了PMS的临床表型和基因突变谱,为疾病的临床诊断和遗传咨询提供依据.

目的 明确1例智力低下、发育迟缓的患儿染色体拷贝数变异的性质及来源,分析其与表型的相关性.方法 采用常规G显带分析患儿及其父母的外周血染色体核型,并用微阵列比较基因组杂交(array comparative genomic hybridization,aCGH)技术进行检测.结果 患儿及其父母核型未见异常,aCGH检测结果显示患儿染色体9q34.3区存在405 kb的杂合缺失,该区域包含EHMT1基因和部分CACNA1B基因,其父母则未携带染色体微重复/微缺失.结论 患儿染色体9q34.3区的杂合缺失为新发突变,可能是患儿患病的原因.EHMT1可能是9q34.3微缺失综合征关键基因之一.

目的 建立非洲地区较为高发的7种重要病毒病基于荧光微球的多重核酸检测方法完成初步的评价分析.方法 比较分析引起裂谷热、黄热,马尔堡,埃博拉、拉沙热、克里米亚-刚果出血热和基孔肯雅热等病原体的基因组序列,结合前期实时荧光PCR检测方法,设计合成特异性多重扩增引物和杂交探针,建立基于荧光微球的核酸检测方法,采用化学合成DNA和体外转录RNA等方法制备相关病原体模拟样本和参考品,评价检测方法的灵敏度和稳定性,利用30份登革热、汉城出血热等疑似患者标本和32份正常人血标本评价特异性.结果 所建立的基于荧光微球的针对7种非洲多发病毒病核酸检测方法可特异性检出相应病原体核酸,检测限可达102 ～105拷贝/μl,特异性为100％,组内变异系数均在12％以下,组间变异系数在15％以下,具有较高的稳定性.结论 初步建立了基于荧光微球的7种非洲多发病毒病核酸检测方法,为相关疑似传染病筛查提供了新的选择.

目的 对1例发育迟缓伴多发畸形患儿进行遗传学检测,分析其预后及发生机制,为临床咨询提供依据.方法 采用常规G显带和微阵列比较基因组杂交(array comparative genomic hybridization,aCGH)技术分析患儿及其父母的外周血染色体核型和DNA.结果 G显带分析结果显示,患儿染色体核型为46,XX,del(6)(q22),inv(6) (p21.1q21),其父母染色体核型未见异常.aCGH检测结果显示患儿6p21.1区存在800 kb杂合缺失,包含RUNX2基因,6q21-q22.31区存在11.79 Mb杂合缺失,其父母未检测到染色体微重复/微缺失.结论 患儿为染色体新发倒位,两处微缺失均为新发突变,具有致病性.6p21.1区域RUNX2基因微缺失导致锁骨颅骨发育不良,6q21-q22.31区域微缺失可能与患儿脑部结构发育异常相关.

目的 筛选活动性结核患者DNA甲基化水平显著变化的基因并进行验证.方法 ①纳入年龄与性别匹配的9例活动性结核患者、3例潜伏性结核患者和3例健康对照,将人血中单个核细胞DNA与芯片杂交,比较结核组与健康组的甲基化差异基因,并对差异基因进行GO功能和Pathway功能分析,以及与表达芯片进行联合分析;②收集年龄与性别匹配的活动性结核与健康对照各60例,分别提取全血DNA,使用焦磷酸测序方法对甲基化芯片预测出的结核病相关基因(TLR1、TLR2、TLR4)进行甲基化程度检测.结果 ①活动性结核患者与健康对照对比,大部分呈现甲基化下调状态,GO分析和Pathway分析结果显示,甲基化差异基因的功能主要富集在白细胞分化、凋亡、自噬、细胞因子调节及炎症反应等与结核密切相关的生物过程中;②待验证的3个基因TLR1、TLR2、TLR4包含10个CpG位点,其中TLR1基因的CpG1位点(P＜0.001)呈现高甲基化状态,TLR4基因的CpG2位点(P=0.012)呈现低甲基化状态.结论 在结核分枝杆菌感染过程中存在基因组DNA的甲基化状态改变,以低甲基化变化为主.其中TLR1基因呈现高甲基化状态,TLR4呈现低甲基化状态,提示上述基因可能在结核病的发生发展过程中具有一定的作用.

目的:探讨常规G显带染色体核型分析及染色体芯片分析(CMA)技术在肾盂增宽胎儿产前诊断中的应用价值,探讨肾盂增宽可能的遗传学病因.方法:选取产前超声发现肾盂增宽并选择行侵入性产前诊断的102例胎儿.对102例胎儿采用常规G显带染色体核型分析,并对部分染色体核型结果正常的胎儿行CMA分析.对所有胎儿的妊娠结局及预后进行电话随访和病例资料追踪,新生儿随访至2岁.结果:102例肾盂增宽病例中,101例胎儿染色体正常,1例异常,为47,XX,+18,染色体异常率为0.98％(1/102).60例CMA结果均成功获得分析,其中4例胎儿存在致病性拷贝数异常(CNVs)(6.6％,4/60),包括17q12微缺失综合征2例、15q11.2微缺失综合征1例、2q23.1微缺失综合征1例,CNVs大小范围0.467～1.53Mb.将进行CMA检测的肾盂增宽病例分为孤立性肾盂增宽(30例)和肾盂增宽合并其他异常(30例)两组,致病性CNVs的检出率分别为6.6％(2/30)、6.6％(2/30);根据肾盂增宽程度将行CMA检测的60例病例分为3组:轻度肾盂增宽、中度肾盂增宽和重度肾盂增宽,致病性CNV检出率分别为0(0/21)、11.1％(1/9)、10％(3/30).产前胎儿肾盂增宽消退率63.5％,总消退率(含出生后消退)85.8％,胎儿肾积水出生后手术率12.9％.结论:核型和CMA检测结果正常的胎儿肾盂增宽多于产前或出生后消退,染色体非整倍体和染色体微缺失微重复是胎儿肾盂增宽的致病原因之一;核型和CMA检测对肾盂增宽胎儿进行产前诊断具有一定的价值.

目的 应用微阵列比较基因组杂交技术(array-based comparative genomic hybridization,array-CGH)检测54例自然流产和胚胎停育的绒毛的全基因组拷贝数变异(copy number variations,CNVs),探讨该技术的临床应用价值.方法 采用Affymetrix Cytoscan optima芯片对54例自然流产和胚胎停育的绒毛组织进行基因组CNVs检测,用相应软件对检测结果进行分析,分析其是否具有致病性.结果 全部54例标本均成功获得芯片检测结果,成功率100％.共检测出异常30例(55.6％),其中非整倍体27例(50.9％),单纯性CNVs 2例,非整倍体合并CNVs 1例,单亲二倍体1例.结论 自然流产和胚胎停育的绒毛染色体微阵列比较基因组杂交检测成功率高,为临床咨询流产和胚胎停育原因提供了一种更有效地遗传学检测方法,array-CGH芯片检测是目前临床检测流产绒毛是否存在基因异常最有效的方法.

目的 探讨高通量测序(NGS)技术在检测自然流产绒毛样本的遗传学分析准确性和异常结果检出率中的应用价值.方法 选取早期自然流产患者的绒毛组织作为研究对象,采用NGS方法对流产绒毛组织的染色体拷贝数变异情况进行检测.同时,我们采用比较基因组杂交芯片(a-CGH)法进行验证,以确保NGS检测结果 的准确性.结果本研究共纳入256例绒毛样本,检测成功率100％.染色体异常共计145例(56.64％),染色体未见明显异常共计111例(43.36％).染色体微缺失/微重复共34例(13.28％).在染色体异常结果中,非整倍体128例(50％),其中三体共计94例(36.72％),主要涉及22号和16号染色体,占三体总例数的50％;单体共24例(9.37％),Turner综合征为22例(91.7％);四体共10例(3.91％).染色体结构异常共17例(6.64％).随机选取的5例样本同时采用a-CGH芯片检测,结果与高通量测序结果一致.结论 NGS技术是一项敏感、高效的遗传学检测手段,可有助于明确自然流产的遗传学因素,以期指导下次妊娠.