目的 寄生虫感染与癌症的关系已成为研究热点之一.目前胃肠癌患者肠道单一原虫感染已有报道,但共感染报道较少见.本研究旨在明确胃肠癌患者肠道原虫共感染情况.方法 根据人五毛滴虫、十二指肠贾第虫、微小隐孢子虫、人芽囊原虫、脆弱双核阿米巴和毕氏肠微孢子虫特异的基因序列设计引物进行巢氏PCR扩增,检测195例临床胃肠癌患者肠道原虫共感染情况.结果 巢氏PCR检测结果显示胃肠癌患者肠道原虫总感染率为48.72％(95/195).其中2种原虫共感染23例(8例:人五毛滴虫+人芽囊原虫;11例:人五毛滴虫+微小隐孢子虫;3例:人五毛滴虫+十二指肠贾第虫;1例:十二指肠贾第虫+微小隐孢子虫),占肠道原虫感染的24.21％.3种原虫共感染为3例(1例:人五毛滴虫+微小隐孢子虫+人芽囊原虫;2例:人五毛滴虫+十二指肠贾第虫+微小隐孢子虫),占原虫感染的3.16％.1种原虫感染67例(56例:人五毛滴虫;9例:微小隐孢子虫;1例:人芽囊原虫;1例:脆弱双核阿米巴),占原虫感染的70.52％,未检测到毕氏肠微孢子虫感染.结论 胃肠癌患者存在肠道原虫共感染且感染率较高.单因素方差分析发现人五毛滴虫单独感染病例显著高于含人五毛滴虫的2种原虫共感染(P=0.0022)以及3种原虫共感染病例(P=0.0019),而2种和3种原虫共感染病例的感染率间无明显差异(P=0.2775),表明胃肠道癌症患者中人五毛滴虫单独感染病例高于2种或以上原虫共感染病例.BLAST和单核苷酸多态性分析发现,不同感染原虫的基因序列除个别与GenBank参考序列同源性为100％外,其他基因序列在不同位点出现不同程度的碱基突变、插入或丢失现象.该研究结果为今后胃肠癌患者病因学以及诊断和防治提供了重要参考.

目的 了解上海市宠物犬、猫毕氏肠微孢子虫和卡耶塔环孢子虫感染情况及分子特征,评估人兽共患传播风险.方法 2021年11月一2022年6月,采集上海市某宠物医院犬和猫的新鲜粪样,提取粪样基因组DNA,巢式PCR扩增毕氏肠微孢子虫核糖体内转录间隔区(ITS)和卡耶塔环孢子虫小亚基核糖体RNA(SSU rRNA)序列,阳性产物经双向测序后在GenBank数据库中进行BLAST比对.使用MEGA 11.0软件基于邻接法构建系统进化树.结果 本研究共采集145份粪样(犬粪样99份、猫粪样46份),毕氏肠微孢子虫总阳性率为4.1％(6/145),卡耶塔环孢子虫总阳性率为4.8％(7/145);犬的毕氏肠微孢子虫和卡耶塔环孢子虫阳性率分别为3.0％(3/99)和6.1％(6/99),猫的毕氏肠微孢子虫和卡耶塔环孢子虫阳性率分别为6.5％(3/46)和2.2％(1/46).6条毕氏肠微孢子虫ITS序列与人源基因型A(GenBank登录号:MK982500)的序列一致性均为100％,归在组1;7条卡耶塔环孢子虫SSU rRNA序列与人源卡耶塔环孢子虫(GenBank登录号:KJ569533)的序列一致性均为100％.系统进化树分析结果显示,毕氏肠微孢子虫分离株与已报道的人源毕氏肠微孢子虫基因型A分离株归为同一分支,卡耶塔环孢子虫的分离株与已报道的人源卡耶塔环孢子虫分离株归为同一分支.结论 上海市宠物犬、猫中存在毕氏肠微孢子虫和卡耶塔环孢子虫感染,均为人兽共感染型虫株.

目的 明确宁夏银川地区奶牛毕氏肠微孢子虫的感染情况及其主要基因型.方法 2021年8月—2022年8月,在银川市及周边县6个规模化奶牛场采集奶牛新鲜粪样(包括腹泻粪样和非腹泻粪样),提取粪样基因组DNA,用毕氏肠微孢子虫内部转录间隔区(ITS)引物进行巢式PCR,回收PCR产物后送测序并进行BLAST比对,鉴定毕氏肠微孢子虫基因型.采用SPSS 25.0软件进行分析,不同月龄奶牛毕氏肠微孢子虫阳性率差异的比较采用x2检验.结果 共采集奶牛粪样772份,巢式PCR扩增结果显示,奶牛毕氏肠微孢子虫阳性率为8.7％(67/772),目的条带大小约为400 bp.不同牧场的奶牛毕氏肠微孢子虫阳性率为4.8％(6/124)～11.5％(18/156),差异有统计学意义(x2=30.828,P＜0.05).5～7月龄犊牛的阳性率最高(15.6％,23/147),12月龄以上育成牛的最低(3.4％,5/149),不同月龄的奶牛阳性率差异有统计学意义(x2=59.529,P＜0.05).腹泻粪样中毕氏肠微孢子虫的阳性率为10.6％(42/398),高于非腹泻粪样(6.7％,25/374)(x2=3.419,P＜0.05).测序共检出66条毕氏肠微孢子虫序列,分为CHN4、BEB4、J、I型等4种基因型,提交GenBank获得的登录号分别为OR352930、OR352929、OR352932 和 OR352931.其中 CHN4 型 3 条(占 4.5％),与 G1 亚群 CHN4 基因型(HM992511)的序列一致性为98.4％;BEB4型18条(占27.3％),与G2亚群BEB4基因型(AY331008)的序列一致性为96.3％;J型22条(占33.3％),与G2亚群J基因型(AF135837)的序列一致性为93.1％;I型23条(占34.9％),与G2亚群I基因型(AF135836)的序列一致性为91.1％.不同月龄奶牛感染的毕氏肠微孢子虫的优势基因型不同,BEB4型、J型和I型毕氏肠微孢子虫在奶牛的各个月龄段均存在,3种基因型的总和分别占阳性腹泻粪样和阳性非腹泻粪样的88.1％(37/42)和60.0％(15/25),二者差异有统计学意义(x2=3.419,P＜0.05).结论 宁夏银川地区奶牛存在毕氏肠微孢子虫感染,主要基因型为BEB4、J和I基因型.

研究通过组织病理分析、超微结构观察以及分子特征分析对石斑鱼(Epinephelus spp.)苗种肠道微孢子虫病病原进行了鉴定.其为一肠孢虫属新种,命名为石斑鱼肠孢虫(Enterospora epinepheli sp.n.),专性寄生于细胞核内,发育过程与肠孢虫属模式种黄道蟹肠孢虫(Enterospora canceri)一致.早期单核裂殖体通过一层简单的电子薄膜与宿主细胞核质隔离.随后,单核裂殖体发育形成多核裂殖原质团.此时,细胞核出现明显肥大,有的甚至被裂殖子胀破.裂殖原质团进一步发育形成多核产孢体,并开始出现许多高电子密度的囊泡状结构.这些与极丝及锚状盘有关的囊泡状结构聚集在藕核周围,并组装形成微孢子虫特征性结构(挤出装置)前体.随后,产孢体原生质团通过连续分裂形成一个个孢子母细胞.孢子母细胞与细胞核直接接触,并直接发育形成成熟孢子.成熟孢子椭圆形,孢子长(1.56±0.31)μm(1.07—1.96μm),宽(1.08±0.98)μm(0.93—1.28μm).孢壁分为3层,外壁电子密度高,厚(15.51±0.95)nm(9.87—26.18 nm),内壁为电子透明层,较外层更厚(81.13±2.71)nm(57.16—110.81 nm),最里面为孢质膜.极丝为同型极丝,共5—6圈,分2排排列.组织病理学分析发现该微孢子虫寄生于肠道上皮杯状细胞核内,肠壁脱落的内容物中也发现大量的微孢子虫.序列比对发现该种与之前报道的石斑鱼肠道微孢子虫待定种(Microsporidium sp.)序列基本一致,与其他相似性较高的种类的遗传距离在0.162—0.225.系统发育关系分析显示肠胞虫科的种类明显分为两支,石斑鱼肠孢虫和肠孢虫属其他种类及毕氏肠胞虫聚为一个独立分支,但不与该分枝中任何种类形成姊妹支.

毕氏肠微孢子虫是引起人体和多种动物腹泻的新发人兽共患病原体.种内呈现遗传多样性,已经鉴定出400多种毕氏肠微孢子虫基因型.迄今为止,在非人类灵长类动物中报道了73种基因型,其中51种基因型归聚在具有人兽共患传播特性的群组1,表明非人灵长类动物携带的毕氏肠微孢子虫具有人畜共患的可能性.本文就毕氏肠微孢子虫在非人灵长类动物中的感染率、基因型、人畜共患风险和致病性进行综述.

毕氏肠微孢子虫是一种新现的人兽共患病原体,以前被认为是一种肠道原虫,最近被划分为真菌.该病原体主要侵染宿主小肠上皮细胞引起腹泻等临床症状,并且可通过食物和水源传播,具有重要公共卫意义.研究表明,啮齿动物可感染或携带多种毕氏肠微孢子虫基因型,对人类健康构成威胁.本文就近年来啮齿动物毕氏肠微孢子虫感染率、基因型、人兽共患风险等进行综述.

目的 了解安徽省猪毕氏肠微孢子虫基因型分布及感染情况. 方法 从安徽省7个规模化猪场采集500份新鲜粪样,提取基因组DNA,采用基于毕氏肠微孢子虫间隔区序列(ITS)基因的特异巢式PCR方法进行检测,对阳性扩增产物进行测序分析,以确定其基因型. 结果 安徽省规模化猪场生猪毕氏肠微孢子虫感染率为49.20％(246/500).其中育肥猪毕氏肠微孢子虫感染率为61.90％,保育猪为39.60％,断奶前仔猪为37.50％,差异有统计学意义(x2=23.20,P=0.00;x2 =14.13,P=0.00);保育猪与断奶前仔猪比较感染率差异无统计学意义(x2=0.12,P=0.80).阳性扩增产物测序分析共获得13种基因型,包括6个已知基因型(CS-4,CH5,CTS3,EbpA,CHS5和CHG23)和7个新基因型(AHP1,AHP2,AHP3,AHP4,AHP5,AHP6和AHP7),其中CS-4,AHP1,CH5,CTS3和EbpA为优势基因型.进化树分析显示本次获得的基因型均属于人兽共患Group 1. 结论 安徽省规模化猪场生猪毕氏肠微孢子虫感染率较高,其基因型分布具有多样性,获得的基因型均属于人兽共患的Group 1,提示猪可能成为人毕氏肠微孢子虫感染的重要来源.

目的 调查河南省奶牛毕氏肠微孢子虫和芽囊原虫流行情况及评估其人兽共患传播风险.方法 基于毕氏肠微孢子虫SSU rRNA内部转录间隔区(ITS)和芽囊原虫核糖体小亚基(SSU rRNA)基因位点对从河南省5个地区,10个奶牛场共采集的1 020份粪便样品进行PCR检测.结果 奶牛毕氏肠微孢子虫和芽囊原虫的感染率分别为21.7％(221/1 020)和19.2％(196/1 020),其中混合感染率为3.5％(36/1 020).序列分析显示共鉴定了 5种毕氏肠微孢子虫人兽共患基因型(D、J、I、BEB4、BEB6)和4种芽囊原虫人兽共患基因型(ST1、ST2、ST4、ST5).结论 本研究首次对河南地区奶牛芽囊原虫流行情况进行了调查,鉴定的人兽共患基因型具有重要公共卫生意义.

目的 了解云南大理在校大学生蓝氏贾第鞭毛虫、人芽囊原虫、毕氏微孢子虫的感染情况,为青少年肠道寄生原虫病的防治工作提供参考依据.方法 采集426份云南大理在校大学生粪便样本,提取DNA,根据设计的引物序列进行PCR扩增,通过测序和序列比对,确定其基因型并构建遗传进化树.应用软件SPSS 19.0进行统计学分析.结果 426份在校大学生粪便样本中PCR扩增出25份阳性样本,3种原虫感染率分别为:蓝氏贾第鞭毛虫4.23％(18/426)、人芽囊原虫1.41％(6/426)、毕氏微孢子虫0.23％(1/426);蓝氏贾第鞭毛虫感染率在不同性别、民族之间差异均无统计学意义(P＞0.05),来自农村的学生感染率5.57％显著高于城镇学生0.83％ (P＜0.05);人芽囊原虫感染率在不同性别之间差异无统计学意义(P＞0.05),少数民族感染率1.99％略高于汉族感染率0.57％,但不同民族、生源地之间差异均无统计学意义(P＞0.05).经鉴定蓝氏贾第鞭毛虫、人芽囊原虫、毕氏微孢子虫的基因型分别为AⅠ亚型、ST1型、EbpC型,且均为人兽共患基因型.结论 大理在校大学生存在蓝氏贾第鞭毛虫、人芽囊原虫、毕氏微孢子虫感染,具备潜在的传播风险.学校应加强对青少年学生的卫生宣传教育,培养学生养成良好卫生习惯,提高学生自我保健能力.

毕氏肠微孢子虫是一种新发机会性感染病原体.人类免疫缺陷病毒(HIV)/获得性免疫缺陷综合征(AIDS)合并毕氏肠微孢子虫感染可导致患者长期持续性腹泻,甚至死亡.近年来HIV/AIDS合并感染毕氏肠微孢子虫的情况引起了研究者的广泛关注,本文就其研究进展作一综述,为毕氏肠微孢子虫感染的预防和控制提供参考.