艾滋病患者合并人类细小病毒B19感染较为少见，而因其导致脑膜炎则更为罕见。本例患者以贫血起病，考虑为纯红细胞再生障碍性贫血。患者因粪便常规发现蓝氏贾第鞭毛虫包囊而就诊于感染科，检查发现艾滋病和隐性梅毒。诊治过程中患者出现发热，伴头痛、头晕，血液人类细小病毒B19抗体阴性，腰椎穿刺检查显示脑膜炎改变，血液及脑脊液的宏基因组学二代测序显示人类细小病毒B19，诊断明确。给予静脉注射免疫球蛋白和抗反转录病毒治疗。

目的:了解大理白族自治州居民蓝氏贾第鞭毛虫、隐孢子虫和人芽囊原虫的感染情况，并对样本检测结果进行基因分析。方法:2022年9月6至12日，在大理白族自治州2个县设置采样点。共收集808份人粪便样本。采用巢式聚合酶链反应（PCR）法扩增隐孢子虫核糖体小亚基RNA和蓝氏贾第鞭毛虫β-giardin基因，PCR法扩增人芽囊原虫核糖体小亚基RNA。阳性产物送测序，采用BLAST分析比对，运用MEGA 11软件基于邻接法构建进化树，确定基因型。采用SPSS 24.0软件对数据进行分析。结果:居民隐孢子虫、蓝氏贾第鞭毛虫和人芽囊原虫总感染率为1.61%（13/808）。人芽囊原虫感染率为0.99%（8/808），其中白族居民感染率为0.88%（4/452），低于汉族居民感染率4.17%（4/96）（ χ2=12.533， P=0.049）；烹饪时砧板食物生熟不分开者感染率为1.95%（7/359），高于分开者感染率0.22%（1/449）（ χ2=6.071， P=0.035）；饮生水居民感染率为3.68%（5/136），高于不饮生水居民感染率0.45%（3/672）（ χ2=12.038， P=0.003）；养殖家畜居民感染率为1.67%（8/478），高于不养殖者（ χ2=5.578， P=0.045）。隐孢子虫感染率为0.37%（3/808）。蓝氏贾第鞭毛虫感染率为0.25%（2/808）。基因鉴定后分别为猪隐孢子虫、蓝氏贾第鞭毛虫集聚体AⅡ亚型和兔人芽囊原虫ST7型感染。 结论:大理白族自治州居民存在肠道猪隐孢子虫、蓝氏贾第鞭毛虫集聚体AⅡ亚型和兔人芽囊原虫ST7型感染，感染率处于较低水平。

目的:探讨BioFire公司FilmArray胃肠道感染检测卡(FGP)在急性胃肠炎住院患儿中实际应用的临床意义。方法:纳入2018年10月~2020年9月住院，医生采用FGP化验粪便样本的患儿，统计患儿的一般资料、临床信息和粪便化验结果，进行回顾性分析。结果:评估依据FGP检测结果调整患儿抗生素治疗方案的临床意义。140例腹泻患儿中，传统法检出24例患儿中的25种病原体，FGP鉴定出56例患儿中的75种病原体( P<0.05)。FGP检出弯曲菌、志贺菌、轮状病毒、蓝氏贾第鞭毛虫和隐孢子虫的阳性率较高。FGP对于17/140腹泻患儿(12%)具有临床意义，在既往体健(19%)和实体器官移植(15%)患儿中临床意义较高。 结论:研究发现FGP检测可以提高腹泻住院患儿尤其是既往健康及器官移植患儿的病原检出率，并影响临床决策。

患者,男,40岁,上海市居民.2018年7月因"急性腹泻"就诊于同济大学附属杨浦医院急诊内科.患者自述水样便腹泻1d.患者发病前1个月有巴拿马旅行史,无饮生水和食生肉史.血常规检查结果C反应蛋白升高(16.17 mg/L),其余指标正常,提示感染.患者粪样涂片镜检查见蓝氏贾第鞭毛虫包囊和滋养体.间接免疫荧光试验检测结果显示,蓝氏贾第鞭毛虫滋养体被患者血清(1:50)识别,虫体表面有较强的荧光染色.提取患者粪样DNA,PCR扩增出147 bp的蓝氏贾第鞭毛虫特异性18S核糖体基因片段,该片段序列与蓝氏贾第鞭毛虫集聚体A(GenBank登录号:KY706490)的序列一致性为100％,在邻接法构建的系统进化树上与蓝氏贾第鞭毛虫集聚体A聚在同一分支上.结合患者临床表现和相关检查结果,诊断患者为蓝氏贾第鞭毛虫感染.临床给予患者甲硝唑(每日20mg/kg,分3次口服,连服7d)治疗.2周后复查血常规和粪便常规,均恢复正常,患者病情好转.

对1例蓝氏贾第鞭毛虫感染者进行虫种分子鉴定并分析其感染来源.收集患儿与其父母、保姆的新鲜粪样,碘液染色后镜检,提取粪样DNA,采用巢式PCR扩增贾第虫磷酸丙糖异构酶(tpi)、谷氨酸脱氢酶(gdhi)、β-贾第素(bg)基因并测序,通过BLAST、ChromasPro和MEGA 11.0等软件对基因序列进行系统进化分析并判断其集聚体类型.结果显示,镜下可见患儿粪样中有贾第虫滋养体和包囊.巢式PCR均扩增出约500 bp的条带,与贾第虫属tpi、gdh、bg基因片段一致,确认该患儿为贾第虫感染;患儿父母和保姆均无腹泻症状,但在其父亲粪样中发现贾第虫包囊,结合巢式PCR与测序结果分析,其父为贾第虫带虫者.基因比对分析结果显示,患儿父子二人粪样扩增出的tpi、gdh、bg基因序列一致性分别为99.8％、100％和98.5％,其中tpi基因序列与贾第虫集聚体AⅡ型(GenBank登录号:LC183963)的序列一致性分别为100％、99.8％,gdh基因序列与贾第虫集聚体AⅡ型(GenBank登录号:KF843931)的序列一致性分别为99.6％、100％,患儿bg基因序列与集聚体AⅢ型(GenBank登录号:LC183968)的序列一致性为99.2％,患儿父亲bg基因序列与集聚体AⅡ型(GenBank登录号:LC183975)的序列一致性为100％.系统进化树分析结果显示,患儿与其父亲所感染的贾第虫均与集聚体A型虫株聚在一支,且以tpi和gdh为靶基因进行亚型分析均与贾第虫集聚体AⅡ型聚在一支.由此判断患儿为贾第虫集聚体AⅡ型感染,且可能为家庭内部传播导致的家庭聚集性感染.

目的 构建C2株蓝氏贾第鞭毛虫cDNA文库.方法 Trizol对C2株贾第虫滋养体RNA进行提取,逆转录获得cDNA单链,LD-PCR扩增获得ds cDNA,经纯化后,与pGADT7-Rec共转化酵母株Y187中.通过营养缺陷型平板SD/-Leu培养获得转化子即包含蓝氏贾第鞭毛虫cDNA文库,并对文库的库容及DNA重组率进行鉴定.结果 以RNA为模板,经逆转录、LD-PCR、纯化等,得到了较为理想的双链cDNA.将ds cDNA和pGADT7-Rec转化到酵母菌株,经分离培养,最终得到转化成功的酵母转化子,建立了贾第虫的cDNA文库,文库容量为2.715×107/mL,重组率76.7%,插入片段的大小主要集中在300~1000.结论 成功的构建了较为理想的C2株贾第虫cDNA文库.

目的 研究利用流式细胞仪对蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia)孢囊和微小隐孢子虫(Crypto sporidium parvum)卵囊的高浓度混合样本进行计数,为“两虫”标准品制备提供技术支撑,以期能降低“两虫”检测试剂成本.方法 利用已知浓度的荧光微球对经免疫荧光染色的“两虫”混合样本进行计数,采用非参数检验中两个相关样本检验方法对流式细胞仪和荧光显微镜计数结果进行统计学分析比较.结果 流式细胞仪方法计数蓝氏贾第鞭毛虫孢囊和微小隐孢子虫卵囊的相对标准偏差(RSD)分别为14.7％和15.2％,比荧光显微镜计数结果的RSD(14.1％和15.1％)稍高.利用Wilcoxon检验得出两种方法对孢囊和卵囊的计数结果差异均无统计学意义(Z=-0.91 8,P=0.359和Z=-0.102,P=0.919).结论 利用流式细胞仪计数高浓度“两虫”混合样本的方法能达到生物学实验要求的精确度,并与荧光显微镜计数方法具有等效性,可弥补荧光显微镜无法直接计数高浓度样本的不足,并为“两虫”标准品的筛选与分装奠定基础.

[目的]克隆、原核表达、纯化C2株蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia,简称贾第虫)醛糖还原酶(Aldose reductase,AR)基因,并进行生物信息学分析.[方法]从C2株贾第虫基因组DNA中克隆贾第虫AR编码区,双酶切连入原核表达载体pET-28a(+),酶切和测序进行验证,并进行生物信息学分析;将构建成功的重组质粒pET-28a(+)-AR转化大肠杆菌Rosetta(DE3)并进行诱导表达,SDS-PAGE及Western Blot验证表达效果;镍亲和层析纯化AR蛋白,SDS-PAGE观察纯化效果.[结果]成功克隆了C2株贾第虫AR蛋白编码区并构建了原核表达载体,SDS-PAGE及Western Blot显示,AR表达载体转化的大肠杆菌经诱导可表达出相对分子量约37.2kDa的目的蛋白,与预期一致;重组蛋白通过亲和层析获得了高效纯化;生物信息学分析显示贾第虫AR蛋白主要二级结构为无规则卷曲,整体为一个NADPH依赖的氧化还原酶结构域.AR蛋白在真核生物中相当保守,贾第虫AR蛋白在进化上相对独立.[结论]证实了贾第虫AR蛋白的存在并明确了其结构和进化上的特征,为贾第虫AR抗体的制备和功能的研究提供了基础.

HIV/AIDS合并肠道寄生虫感染可加速疾病进程,是HIV感染者长期腹泻的主要原因之一,严重者可导致死亡.目前,HIV/AIDS合并肠道原虫感染仍是一个被忽视的公共卫生问题,且其危害性往往被低估.本文就HIV/AIDS合并常见肠道原虫,如人芽囊原虫(Blastocystis hominis)、隐孢子虫(Cryptosporidium spp.)、蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia)和溶组织内阿米巴(Entamoeba histolytica)感染情况进行综述,以了解全球经济发展程度不同地区HIV/AIDS合并肠道原虫感染状况,为HIV/AIDS合并肠道原虫感染的防控提供参考.

目的 了解福建省人体肠道原虫病流行现状.方法 按全国统一调查方案,以分层整群随机抽样方法,抽取15个调查县(市、区),每个县(市、区)调查5个点,每个调查点调查人数不少于250人.每份标本采用卢戈氏碘液涂片法与生理盐水直接涂片法检查肠道原虫包囊或滋养体.结果 共调查15县(市、区)75个点(村)10 652人,阳性者222人,各种肠道原虫总感染率为2.08％.检出6种肠遭原虫,即人芽囊原虫、微小内蜒阿米巴、结肠内阿米巴、哈门氏内阿米巴、波列基内阿米巴及蓝氏贾第鞭毛虫,其感染率分别为0.79％、0.58％、0.41％、0.18％、0.09％与0.02％.男性感染率为0.84％,女性为1.25％,女性高于男性(x2 =8.8126,P＜0.05).感染者最大年龄86岁,最小3岁,以高年龄组(56岁以上)为主,占38.3％.感染者分布于多种职业,其中农民占77.9％,其次为学生占14.4％.调查地区感染率以平潭为最高7.04％,其次为漳浦4.62％与周宁3.92％.浙闽山地丘陵生态功能区感染率为1.52％(83/5469),滇桂粤中部闽南山地丘陵生态功能区为2.68％(139/5183),两者差异具有统计学意义(x2=17.674,P＜0.01).结论 本次调查的人群原虫总感染率大幅降低,感染虫种明显减少,并以人芽囊原虫为常见的肠道原虫,应列为今后防制重点.