吲哚是平面杂环分子,对乳腺癌、肺癌、结肠癌等具有广泛的抗癌活性,在药物设计中发挥重要作用.从吲哚-3-甲醇及其代谢产物3,3'-二吲哚甲烷的结构修饰、吲哚骨架结构修饰、氧化吲哚衍生物及氮杂吲哚衍生物的结构修饰入手,并综合吲哚衍生物对Lumina型乳腺癌、三阴性乳腺癌、人表皮生长因子受体2(HER-2)过表达型乳腺癌的影响,从细胞水平、乳腺癌相关蛋白、受体、经典通路、体内外药理模型建立以及相关指标的变化等方面对其抗乳腺癌作用进行系统综述,以期为抗乳腺癌新药研发提供依据.

目的 研究骆驼蓬Peganum harmala子醇提液酸溶碱沉后总生物碱的化学成分.方法 采用多种色谱技术进行分离纯化,通过MS、NMR及合成等方法对化合物结构进行鉴定,并以CCK-8法测定部分化合物对人结肠癌HCT116细胞的体外抗肿瘤活性.结果 从骆驼蓬子总生物碱中分离得到了 12个化合物,分别为1.甲基-2-甲氧甲基-7-甲氧基-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚-2-盐酸盐(1)、对苯二甲酸二(2-乙基)己酯(2)、鸭嘴花酮碱(3)、鸭嘴花碱(4)、harmalanine(5)、去氢骆驼蓬碱(6)、哈尔满(7)、哈尔酚(8)、norharmane(9)、骆驼蓬碱(10)、四氢骆驼蓬碱(11)、骆驼蓬酚(12).体外抗肿瘤实验表明,化合物 5 的 24h 半数抑制浓度(median inhibition concentration,IC50)为(36.41±1.91)μmol/L.结论 化合物 1 为新化合物,命名为氮杂缩醛去氢骆驼蓬碱A,化合物2为骆驼蓬植物中首次分离得到,而较强共轭系统的化合物5具有潜在的抗癌活性.

背景:肌萎缩侧索硬化为一种进行性神经退行性疾病,常导致大脑和脊髓神经元死亡.肌萎缩侧索硬化发病机制极为复杂,难治率、死亡率高且目前其治疗药物仅有2种,因此开发新治疗方法以改善患者预后迫在眉睫.目的:综述中药及间充质干细胞调控免疫反应治疗肌萎缩侧索硬化的作用机制.方法:以"traditional Chinese medicine,mesenchymal stem cells,ALS,immune response"为英文检索词,以"中药,间充质干细胞,肌萎缩侧索硬化,免疫反应"为中文检索词,检索万方、中国知网、PubMed及Web of Science数据库 2010-2023年的相关文献,最终纳入69篇文献进行综述分析.结果与结论:①中药调控免疫反应治疗肌萎缩侧索硬化可总结为5个机制:主要包括冰片和黄芪甲苷等中药促进闭锁小带蛋白1、闭合蛋白5表达重建血液中枢神经系统屏障完整性;复方扶芳藤合剂调节自然杀伤细胞表面受体分子抑制其自身毒性;半枝莲和广藿香等作用补体系统因子抑制其异常激活;雷公藤和钩藤等介导细胞外信号调节激酶1/2衰减诱导型一氧化氮合酶产生而抑制小胶质细胞活化;左归丸、栝蒌根等促进白细胞介素10表达调控T细胞改善免疫环境.②通过现有研究总结了间充质干细胞调控免疫反应治疗肌萎缩侧索硬化可总结为5个机制:减少水通道蛋白4表达和降低内皮型一氧化氮合酶信号传导等方面修复免疫屏障完整性;释放吲哚胺2,3-双加氧酶和前列腺素E2等因子抗自然杀伤细胞毒性;分泌因子H干扰转化酶活性抑制补体系统异常激活;调控CX3CL1/CX3CR1系统轴或分泌转化生长因子β等途径改变小胶质细胞表型抑制其活性;增加白细胞介素10表达或激活STATS磷酸化通路来恢复T细胞功能.③目前中药联合间充质干细胞治疗肌萎缩侧索硬化研究较少,已知的相关研究报道显示,肌萎灵注射液可促进干细胞增殖分化以及补阳还五汤联合骨髓间充质干细胞显著提高血脑屏障完整性,未来还需进一步探讨两者对难治性肌萎缩侧索硬化的协同治疗效果.

目的 探讨骨形成蛋白(BM P)2与Wnt/β-链蛋白(β-catenin)信号通路对间充质干细胞分化为成骨细胞的作用.方法 将间充质干细胞C3H10T1/2分为五组:A组用正常培养基培养,B组用成脂诱导液IFMD(含有吲哚美辛10 μg/ml、10% FBS、1-甲基-3-异丁基黄嘌呤0.5 mmol/L和地塞米松1 mmol/L)处理,C组在IFMD处理的同时加入BM P-2100 ng/ml,D组在IFMD处理的同时加入氯化锂(LiCl)20 mmol/L,E组在IFMD处理的同时加入BM P-2100 ng/ml和LiCl 20 mmol/L.处理第8天,用 ALP染色及油红O染色鉴定成骨细胞及脂肪细胞的分化情况;处理第2、4、8天,检测Ⅰ型胶原(Col1a1)、骨钙素(Ocn)以及CCAAT增强子结合蛋白(C/EBPα)、脂肪酸结合蛋白(aP2)和葡萄糖转运蛋白4(Glut4)的表达;重亚硫酸盐测序法检测C/EBPα在各组细胞中启动子区甲基化情况.结果 A组无ALP及油红O阳性细胞,B组有大量油红O染色阳性细胞,E组细胞ALP活性最高.与B组比较,C组和E组Runx2、Col1a1和Ocn mRNA表达较高(P<0.05或P<0.01),C组、D组和E组C/EBPα、aP2和Glut4 mRNA表达较低(P<0.05或P<0.01).E组C/EBPα启动子区出现较高的甲基化水平,经5-氮杂胞苷处理后,C/EBPα mRNA表达升高(P<0.01),大部分细胞分化为脂肪细胞.结论 在易成脂的病理微环境中,BMP-2和Wnt/β-catenin信号通路单独作用均不能有效促进成骨细胞分化,需要两者协同作用才能使间充质干细胞分化为成骨细胞,具体机制与C/EBPα启动子区甲基化有关.

目的 探讨局部移植同种异体脂肪源性间充质干细胞(ADSCs)对大鼠皮肤创面巨噬细胞表型的影响. 方法 将冻存的原代SD大鼠ADSCs复苏并进行传代培养,取生长良好的第3代细胞进行实验.36只SD大鼠在背部脊柱两侧建立全层皮肤缺损创面.按随机数字表法分为ADSCs组(18只)和对照组(18只).造模后ADSCs组创面皮下环形注射0.2 ml经活细胞染色剂氯甲基-1,1'-双十八烷基-3,3,3',3'-四甲基-吲哚-羰花青-高氯酸盐(CM-Dil)标记的ADSCs悬液(浓度为5×106个/ml);对照组分别予以无血清杜尔伯科改良伊格尔培养基(DMEM)0.2 ml环形注射于创面周围皮下.伤后3,7,14d,各组每个时相点分别取6只大鼠,测量创面面积并计算愈合率;切取创面组织,HE染色观察组织形态;免疫组化染色观察创面皮肤白细胞介素-10(IL-10)表达情况;伤后14d,倒置荧光显微镜下观察CM-Dil标记的ADSCs在创面组织中的分布情况;免疫荧光染色观察白细胞分化抗原68(CD68)与诱导型一氧化氮合酶(iNOS)双阳性(M1型巨噬细胞)和CD68与精氨酸酶1(Arg-1)双阳性(M2型巨噬细胞)的表达情况.结果 (1)伤后3d,ADSCs组与对照组创面见血痂皮覆盖,周围稍红肿,愈合率相差较大(P＜0.01);伤后7d,ADSCs组与对照组创面均明显减小,ADSCs组创面愈合速度明显快于对照组,ADSCs组创面愈合率明显高于对照组(P＜0.01);伤后14 d,ADSCs组创面基本完全愈合,愈合率接近99％ (P ＜0.01),且ADSCs组的创面愈合皮肤组织质地优于对照组.(2)伤后3d,两组创面均有大量炎性细胞出现,胶原纤维排列均紊乱,无明显差异;伤后7d,ADSCs组创面炎性细胞浸润相对于对照组减少,对照组胶原纤维相对杂乱;伤后14 d,ADSCs组与对照组创面炎性细胞均明显减少,ADSCs组新生血管数量较对照组多,ADSCs组胶原纤维相对于对照组排列更加整齐、规则.ADSCs组创面愈合组织可见CM-Dil标记的ADSCs;对照组未见CM-Dil标记的ADSCs.(3)伤后3d,ADSCs组与对照组创面M1型巨噬细胞分布差异不大,ADSCs组M2型巨噬细胞数量明显比对照组多(P＜0.01),IL-10的表达量不高且两组差异不大;伤后7,14 d,ADSCs组M1型巨噬细胞数明显较对照组少,而M2型巨噬细胞数较对照组明显增多(P＜0.01),ADSCs组IL-10表达量均明显高于对照组(P＜0.01).结论 同种异体ADSCs局部移植可以促进M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞转化,促进皮肤缺损创面的再生愈合.

目的 研究5-氮杂胞嘧啶核苷(5-AZA)对小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)凋亡的影响.方法 从小鼠股骨和胫骨骨髓中分离BMSCs;利用免疫荧光染色检测间充质干细胞特异性标记分子CD44和CD90在BMSCs上的表达;应用0、10和20 μmol/L的5-AZA体外诱导培养BMSCs 48 h,应用4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色和荧光标记的半胱天冬酶抑制剂(FLICA)凋亡试剂盒检测5-AZA处理后细胞的凋亡率;应用Western blot检测凋亡相关蛋白Annexin V和Caspase-3在处理后的细胞表达水平.结果 实验中,BMSCs阳性表达间充质干细胞特异性标记蛋白CD44和CD90.DAPI染色和Caspase-3染色均显示10和20 μmol/L 5-AZA可增加BMSC的凋亡率;对照组、10 μmol/L组5-AZA和20 μmol/L 5-AZA组DAPI染色阳性凋亡率分别为(21.086±2.601)％、(34.467 ±3.724)％和(46.512±3.864)％,Caspase-3染色阳性凋亡率分别为(5.354±0.735)％、(15.462±2.385)％和(28.190 ±4.190)％,组间比较差异均有统计学意义(P均＜0.01).Westernblot检测显示Annexin V和Caspase-3在5-AZA处理后表达均显著增高;对照组、10 μmol/L组5-AZA和20μmol/L 5-AZA组Annexin V相对表达水平分别为(26.612±2.184)％、(42.873 ±4.313)％和(50.056±4.457)％,Caspase-3的相对表达水平分别为(19.231 ±2.683)％、(38.618 ±5.385)％和(91.235 ±7.116)％,组间比较差异均有统计学意义(P均＜0.01).结论 常规剂量的5-AZA可诱导BMSCs凋亡.

目的:综述抗结核分枝杆菌化合物的结构特征及体外活性,为抗结核分枝杆菌的新药设计提供参考.方法:以"抗结核""结核分枝杆菌""化合物""Antituberculosis""Mycobacterium tuberculosis""Compounds"等为关键词,组合查询2008年1月-2019年1月在中国知网、万方数据、Science Direct、ACS、Wiley、Springer Link等数据库中的相关文献,对文献中具有抗结核分枝杆菌活性的化合物结构特征及体外活性[以最低抑菌浓度(MIC)评价]进行归纳总结.结果与结论:共检索到相关文献188篇,其中有效文献47篇.目前,抗结核分枝杆菌的化合物有喹啉类化合物、吲哚类化合物、三唑类化合物、苯并噻吩类化合物(MIC为0.91μg/mL)、嘧啶类化合物和金属配合物.喹啉类化合物中具有抗结核分枝杆菌活性的有喹唑啉酮苯甲酸酯衍生物(MIC均为2.5μg/mL)、 唑并喹啉衍生物(MIC均为1.0μg/mL)、 唑酯类喹啉衍生物(MIC均<5.0μg/mL)、碳酰腙类喹啉衍生物(MIC均为1.0μg/mL);吲哚类化合物中具有抗结核分枝杆菌活性的有酰胺吲哚类化合物(MIC均≤0.25μg/mL)、氮杂吲哚类化合物(MIC均≤1.03μg/mL);三唑类化合物中具有抗结核分枝杆菌活性的有苯并咪唑类三唑衍生物(MIC均≤0.58μg/mL)、羰基三唑类衍生物(MIC均为2.5μg/mL);嘧啶类化合物中具有抗结核分枝杆菌活性的有氟苯嘧啶类衍生物(MIC为3.58μg/mL)、吡咯三唑嘧啶衍生物(MIC均为0.78μg/mL);金属配合物中具有抗结核分枝杆菌活性的有芳香类金属配合物(MIC均≤1.25μg/mL)、氟喹诺酮类金属配合物(MIC为0.31μg/mL)等.上述化合物可通过抑制ATP合成酶、乙酰羧酸合成酶、十聚异戊烯磷酰基-β-D-核糖氧化酶或烯酯酰基载体蛋白还原酶等活性发挥抗结核分枝杆菌活性.这些化合物的发现可为研发新型抗结核分枝药物奠定基础,但由于并未进行体内活性评价,因此,在后续研究中还需通过动物实验进一步评价其体内活性.

吲哚作为一种典型的氮杂环芳烃化合物,在自然界中广泛存在.近年来,越来越多的研究表明吲哚具有一定的生物活性,是一种新型种间及跨界的信号分子.研究发现,吲哚不仅可以调节微生物的毒性、耐药性、生物膜形成以及群感效应等生理生化行为,调控植物生长发育和防御系统的形成过程,还能够影响动物的肠道炎症、细胞氧化压力及荷尔蒙分泌等生理健康.因此吲哚在微生物代谢、动物健康和植物生长等多个方面扮演了重要角色,具有重要的生物学及生态学双重意义.文中综述了吲哚从生物代谢到信号传递的研究历史,及其在微生物种内或种间以及微生物-动植物之间跨界的信号传导与调控作用的研究进展,旨在为揭示复杂环境中吲哚生物代谢及信号调控的生物学意义与生态学机制提供重要的理论指导.

吲哚,又称2,3-苯并吡咯,广泛应用于化工、医药、染料等行业,是工业上重要的前体物质,但其释放到环境中也是一种典型的氮杂环污染物.同时,作为一种常见的微生物代谢产物,自然界中无时无刻不发生着吲哚的合成—转化—降解过程.吲哚对微生物生物膜的形成、运动能力、毒性、质粒稳定性及抗生素抗性等多种生物功能有显著影响.因此,吲哚也被认为是新型且具有多功能的种间及跨界信号分子,在微生物生理学和动物行为学等领域发挥了重要作用.研究微生物介导的吲哚代谢机制,阐明其生物学功能的基础,是揭示吲哚在自然环境中的行为归趋和生态学意义的关键.本文系统地总结吲哚代谢的微生物资源及途径,介绍其作为信号分子的重要功能,并对有关吲哚-微生物相互作用的研究进行总结,以期为揭示复杂环境中吲哚生物代谢机制提供重要的理论参考.

将已感染表达狂犬病毒糖蛋白的重组痘苗病毒的细胞，印到硝基纤维素膜上，用用抗狂犬病毒糖蛋白的单克隆抗体及碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶复合物（APAAP）作免疫酶染色，以氮兰四唑（NBT）加五溴四氯三吲哚磷酸盐（X-phosphate）作底物，能特异地产生清晰的深褐色斑点且病毒不被灭活。此方法可以代替原位杂交方法，简便快速地直接筛选表达阳性的重组痘苗病毒。还用APAAP免疫酶法代替荧光方法对重组痘苗病毒进行纯度签定，也获得了满意的结果。