目的:总结利福平耐药结核分枝杆菌（MTB）对A组抗结核药物的耐药性。方法:本研究为回顾性研究，收集2016—2021年北京市结核病防治系统（简称北京结防系统，包括区结核病防治机构和区级结核病定点医疗机构）疑似耐多药肺结核患者分离培养阳性菌株，经MPB64抗原检测试验鉴定为MTB的菌株1 226例，经比例法药敏检测利福平（RFP）和异烟肼（INH）的耐药情况，筛选出利福平耐药结核病（RR-TB）患者菌株，用微孔板法检测左氧氟沙星（LFX）、莫西沙星（MFX）、贝达喹啉（BDQ）、利奈唑胺（LZD）的耐药性。总结4种A组抗结核药物的耐药率、耐药水平和最低抑菌浓度（MIC）分布情况，分析RR-TB、耐多药结核病（MDR-TB）、准广泛耐药结核病（pre-XDR-TB）、广泛耐药结核病（XDR-TB）4类耐药肺结核患者不同特征的分布差异、LFX、MFX交叉耐药、耐BDQ和耐LZD菌株耐药谱以及RR-TB患者治疗转归情况。计数资料采用率或构成比表示，组间和组内采用χ 2检验，以 P<0.05为差异有统计学意义。 结果:1 226例疑似耐多药肺结核患者中RR/MDR/pre-XDR/XDR-TB患者检出率分别为20.8%（255/1 226）、15.2%（186/1 226）、5.7%（70/1 226）、0.5%（6/1 226）例；在年龄和初复治情况分布差异均有统计学意义（ χ2=14.95， P=0.020； χ2=15.91， P=0.001）；在RR-TB患者菌株中LFX、MFX、BDQ和LZD耐药率分别为27.5%（70/255）、27.5%（70/255）、0.4%（1/255）、2.4%（6/255）；LFX、MFX和LZD敏感菌MIC主要集中在0.25 mg/L，BDQ敏感菌MIC主要集中在0.03 mg/L；同时对LFX和MFX均耐药的菌株有25.1%（64/255），单耐LFX和单耐MFX菌株均为6例，呈不完全双向交叉耐药；研究检出1株耐BDQ菌株，6株耐LZD菌株；RR-TB患者治疗成功率为74.4%（151/203），含LFX的方案中耐药和敏感患者治疗转归差异有统计学意义（Fisher′s精确检验， P=0.012）。 结论:利福平耐药MTB氟喹诺酮类药物（LFX和MFX）耐药形势严峻；LFX和MFX呈不完全双向交叉耐药；抗结核新药BDQ和LZD目前耐药率不高，有广阔的临床应用前景；加强耐药检测将有助于进一步提高治疗成功率。

目的:调查北京市东城区基层医疗卫生机构降压药物的使用情况并分析其合理性。方法:该研究为横断面调查。对2019年1月1日至12月31日北京市东城区8家社区卫生服务中心的降压药物处方进行分析。以解剖学、治疗学及化学分类系统（ATC）编码判断药物类别。使用ATC信息对包含降压药物的数据进行筛选，并按ATC类别分组统计数量和占比。由通用名判断药物品种。依据处方中的诊断信息筛选出包含高血压西医诊断的处方。该研究中高血压合并症包括糖尿病、慢性肾脏病、冠心病、心力衰竭、心房颤动、卒中和血脂异常7种。处方合理性分析包括联合用药合理性、药物用量合理性和药物价格合理性。采用约定日剂量（DDD）法来分析药物用量合理性。将药物利用指数（DUI）作为估计用药合理性的定量指标，DUI >1判定为用药过量。药物价格合理性基于药品的价格和是否为“4+7”方案中的药物进行判断。 结果:共筛选出658 140张包含高血压诊断及降压药物的处方，销售总金额为9 658.11万元人民币，涉及7类、60种常用降压药物。钙通道阻滞剂（CCB）在各合并症高血压患者的处方中开具的数量均为最多，α-肾上腺素受体拮抗剂最少。合并心力衰竭的高血压患者处方中利尿剂的占比为21.17%（505/2 385），远高于其他合并症的患者（ P均<0.05）。合并血脂异常的高血压患者处方中利尿剂的占比则低于其他合并症的患者（ P均<0.05），而β-受体阻滞剂（BB）或血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂（ARB）更易被选择［BB为59 348（21.08%），ARB为51 356（18.24%）］。合并慢性肾脏病的高血压患者处方中BB的占比低于其他合并症的患者（ P均<0.05），但ARB和复方制剂的占比均较高（ P均<0.05）。合并冠心病的高血压患者处方中BB的占比高于其他合并症（ P均<0.05）。合并心房颤动或卒中的高血压患者处方中CCB的占比较高（ P均<0.05）。单一降压药物处方数占比最高，为61.19%（402 745/658 140）。联合用药处方中二联用药处方占比最高，为72.19%（184 392/255 395）。在二联用药处方中，以CCB为基础的组合处方数最多，为122 350张（66.36%）。在三联用药处方中，以ARB为基础的组合处方数最多，为48 915张（89.50%），其次为CCB［44 732（81.85%）］。不合理联合用药的处方数为2 174张（0.33%）。60种降压药物中48种DUI>1。处方中共计出现7种“4+7”方案中的降压药物，分别为氨氯地平、厄贝沙坦、氯沙坦、依那普利、福辛普利、赖诺普利和厄贝沙坦氢氯噻嗪，总处方数为109 227张（16.60%），占所有可能“4+7”方案降压药物的40.92%（109 227/266 993）。 结论:北京市东城区基层医疗卫生机构开具的降压药物种类众多、药物选择基本合理，但降压药物联合应用方案欠合理的问题较为突出，且存在用药过量以及“4+7”方案未完全落实的情况。

[目的]探索胡颓子科叶绿体基因组演化趋势,为胡颓子科植物物种鉴定以及资源开发利用提供理论依据.[方法]该研究从头组装并注释了沙棘属和野牛果属共4个类群的叶绿体基因组,结合已发表的叶绿体基因组序列,比较了胡颓子科各类群叶绿体基因组的基因构成、重复序列和结构特征,建立了系统发育树,并通过高分化区定位了该科叶绿体基因组的潜在DNA条形码区域.[结果]胡颓子科各属叶绿体基因组在四分体结构、基因数量和排列上高度相似;沙棘属和野牛果属的反向重复区(IR)和整个基因组重复序列数目较胡颓子属有扩张和增加的趋势.胡颓子科18个类群的叶绿体全基因组序列的系统发育树中,胡颓子属个体聚为一支,最先分化出来,沙棘属和野牛果属各自聚为一支,具有最近的共同祖先;从长单拷贝区(LSC)和短单拷贝区(SSC)筛选出3个DNA条形码候选区,其中ycfI基因的鉴定效果最佳.[结论]胡颓子科的叶绿体基因组结构保守,但其非编码区序列在各属间存在明显差异,且IR区序列与重复序列在演化过程中分别有扩张和增多的趋势.研究选定的DNA条形码序列能很好区分胡颓子科各属之间以及胡颓子属内物种间关系.

目的 归纳总结中医药治疗慢性支气管炎(CB)的用药规律,为临床用药提供参考.方法 基于健康信息系统(HIS)电子病历数据提取2016年1月1日-2021年12月31日于河南中医药大学第一附属医院呼吸科住院的CB患者病历资料.经筛选后,将处方中药录入Excel 2019建立数据库.基于Lantern5.0软件对频率>6%的中药进行隐结构模型学习,得到隐变量及显变量,对模型进行诠释.利用SPSS Modeler 18.0软件将频率>6%的中药用Apriori算法建立模点,得到药物之间的关联规则,分析中医药治疗CB的用药规律.结果 共纳入病例3 410例,涉及中药423味,累计用药82 766次,其中频率>6%的中药109味,累计频次为69 845,频次前5位中药依次为川贝母、茯苓、白术、紫菀、陈皮,以化痰止咳平喘药、补虚药、清热药、解表药、活血化瘀药为主.药性偏温、寒、平,药味以苦、甘、辛为主,主归肺经、脾经、肝经、胃经.隐结构模型分析得到隐变量49个、隐类149个,结合专业知识推断得到10个综合聚类模型,21个核心方剂,如桑白皮汤、血府逐瘀汤、小青龙汤、二陈汤、沙参麦冬汤、六味地黄丸、银翘散、止嗽散、玉屏风散、血府逐瘀汤合导痰汤等,推断CB证候有痰热郁肺证、气滞血瘀证、寒饮射肺证、痰湿蕴肺证、肺气阴两虚证、肾阴虚证、风热犯肺证、风寒袭肺证、肺脾气虚证、痰瘀互结证.关联规则分析共得到强关联规则41条,其中二项强关联规则5条,三项强关联规则36条,置信度较高的为防风+黄芪→白术、防风+党参→白术、党参+陈皮→白术等,提升度较高的为柴胡+桑白皮→黄芩、紫苏子+射干→川贝母、苦杏仁+清半夏→陈皮等.结论 中医药治疗CB以化痰止咳平喘为主,且常用活血化瘀法以助化痰,并注重补肺固表、健脾益气等法的应用.

目的 探讨龙胆苦苷(GPS)对单侧输尿管梗阻(UUO)小鼠肾间质纤维化的改善作用及其机制.方法 将25只C57BL/6雄性小鼠随机分为假手术组、模型对照组、GPS低剂量组、GPS高剂量组、厄贝沙坦组,每组各5只.假手术组正常饲养,其余四组采用结扎单侧输尿管的方式建立UUO模型.造模成功后,GPS低、高剂量组分别给予0.1、0.2 g/kg GPS腹腔注射,厄贝沙坦组给予0.02 g/kg厄贝沙坦腹腔注射,模型组和假手术组给予等体积生理盐水腹腔注射,连续7 d.处死小鼠,取肾脏组织,采用HE染色法观察肾组织形态学变化,Masson染色法观察肾组织纤维化情况,采用Western blotting法、RT-qPCR法检测肾组织纤连蛋白(Fn)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白及mRNA表达.另取6只小鼠,随机分为模型组和干预组各3只,建立UUO模型后,干预组给予0.2 g/kg GPS腹腔注射,模型组给予等体积生理盐水腹腔注射,连续7 d.处死小鼠,取肾脏组织进行转录组测序,分析两组差异表达基因,并进行GO和KEGG通路富集,最后采用RT-qPCR法进行验证.结果 与假手术组比较,模型对照组肾小管明显扩张,肾组织大量炎性细胞浸润,肾间质大量胶原纤维沉积;与模型对照组比较,GPS低、高剂量组肾脏组织肾小管扩张、炎性细胞浸润有一定程度减轻,肾间质纤维化改善,其中GPS高剂量组改善效果更明显.与假手术组比较,模型对照组肾脏组织Fn、α-SMA蛋白及mRNA表达水平均升高;与模型对照组比较,GPS低、高剂量组肾脏组织Fn、α-SMA蛋白及mRNA表达水平均降低,且GPS高剂量组低于低剂量组(P均<0.05).测序分析结果显示,模型组与干预组存在710个差异表达基因.GO富集分析显示,差异表达基因主要集中在细胞进程、生物调节、生物进程调控等方面;KEGG通路富集分析发现,差异表达基因涉及Ras、Rap1、PI3K/AKT、MAPK信号通路等.筛选出2个有效基因HGF、CCDC3进行验证,干预组肾组织HGF、CCDC3表达水平较模型组升高(P均<0.05),与测序结果一致.结论 GPS能够有效改善UUO小鼠肾脏纤维化,且高剂量GPS改善作用更明显;其作用机制可能与上调HGF及CCDC3表达作用于Rap1、Ras、PI3K/AKT、MAPK信号通路等生物学途径有关.

目的 联合应用高通量液相色谱-串联质谱的蛋白质定量分析技术和同位素标记的相对及绝对定量技术(iTRAQ)技术,分析贝沙罗汀抗脑缺血/再灌注损伤(CIRI)的作用并对关键通路中的关键靶点进行验证.方法 随机将39只小鼠分组:13只假手术组,13只模型组,13只实验组.实验组和模型组小鼠建立CIRI模型.实验组小鼠给予贝沙罗汀5 mg·kg-1·d-1,腹腔注射,模型组则腹腔注射等量溶剂,造模后72 h,获取检测标本.各组取3只,联合应用高通量液相色谱-串联质谱的蛋白质定量分析技术和iTRAQ技术,用Proteinpilot软件筛选差异表达的蛋白质,取"模型组vs实验组"与"模型组vs假手术组"的交集差异蛋白,即为贝沙罗汀作用于CIRI的潜在靶点,在STRING 11.5平台上,构建靶点交联互作网络,用Cytoscape 3.8.2软件制图,利用R语言,对贝沙罗汀抗CIRI的潜在靶点进行GO富集分析及KEGG富集通路分析,预测潜在机制.各组取10只,用蛋白质印迹法验证贝沙罗汀抗脑缺血/再灌注损伤的潜在靶点.结果 筛选出贝沙罗汀抗CIRI的潜在靶点214个,通过PPI网络分析,获取度值排名前十的关键靶蛋白有Hspa8、Alb、Dlg4、Hsp90aa1、Hsp90ab1等.GO结果显示,细胞成分主要涉及髓磷脂、神经元间的突触等,分子功能主要有肌动蛋白丝绑定、伴侣蛋白绑定等,参与突触的组织、蛋白交联等生物学过程.通过KEGG显示,潜在作用通路有Nod样受体信号通路、坏死性凋亡通路、脂质和动脉粥样硬化通路等.结论 贝沙罗汀干预CIRI小鼠后脑组织蛋白质存在明显的差异性表达,通过生物信息学分析,涉及多靶点、多通路,为进一步探索、筛选贝沙罗汀作用于CIRI治疗新靶点提供了重要参考.

柑橘自交不亲和由S位点基因控制,前期SSH文库中筛选出1个自交不亲和相关的S蛋白同源基因(S-protein homologous gene,SPH),但其功能尚不明确.研究以'无籽沙糖橘'和'沙糖橘'为材料,利用反转录PCR技术克隆CrSPH基因,通过qPCR技术分析该基因表达特性,并进行原核表达和花粉萌发实验.结果表明,(1)CrSPH的CDS长度为417 bp,编码138个氨基酸,两材料间的CDS区存在3个碱基替换,引起2个氨基酸突变.(2)Southern杂交实验表明,CrSPH基因在两材料基因组中均以单拷贝形式存在.(3)qPCR实验表明,CrSPH基因在'沙糖橘'花器官不同部位表达差异显著,子房中表达量最大,花瓣、花丝等组织中表达量均较低;在高表达的子房中,'沙糖橘'表达量是'无籽沙糖橘'的16倍,表明CrSPH基因在'沙糖橘'中具有高度的组织表达特异性.(4)CrSPH基因在异交授粉第6,7天表达量最高,与其他时段差异均达到显著水平,第6天表达量是第1天表达量的12.4倍.(5)原核表达实验成功诱导出CrSPH蛋白,离体花粉萌发实验表明,随着异源'无籽沙糖橘'CrSPH蛋白浓度的增加,'无籽沙糖橘'萌发率受到显著的抑制.研究表明,CrSPH基因具有表达特异性,可能与柑橘自交不亲和有关.

目的 基于美国FDA不良事件报告系统(FAERS)数据库,对未成年人群中引起肝衰竭的药物进行数据挖掘,以期为相关药物的临床合理应用提供参考.方法 检索美国FAERS数据库2013年第1季度—2022年第3季度未成年(小于18岁)人群发生肝衰竭的药物不良事件(ADE)报告数据并对其进行挖掘与分析,按不同年龄段分为婴儿(≤1岁)、幼儿(＞1～＜6岁)、儿童(6～＜12岁)和少年(12～＜18岁),利用比例失衡法中的报告比值(ROR)法、比例报告比值法和贝叶斯置信区间递进神经网络法筛选ADE信号.结果 共收集到未成年人群的肝衰竭ADE报告1051份,涉及60种药物.少年的肝衰竭发生率最高(410例,占39.01%),其次是幼儿(297例,占28.26%);有14个药物的说明书未提及肝胆系统损伤和肝衰竭风险,包括左乙拉西坦31例(占2.95%),甲硝唑18例(占1.71%),托吡酯、甲泼尼龙各16例(各占1.52%),地塞米松12例(占1.14%),替沙仑赛11例(占1.05%),硫酸亚铁、二甲双胍和白消安各10例(各占0.95%),丙泊酚9例(占0.86%),onasemnogene abeparvovec 8例(占0.76%),苯海拉明、奥美拉唑各5例(各占0.48%),sebeliesterase α 4例(占0.38%),共计165例,占报告总数的15.70%.其中二甲双胍与已知的肝脏安全性相反;甲硝唑和左乙拉西坦作为新的风险信号,引起的临床结局较为严重.结论 发现了导致未成年人群肝衰竭的14个新的药物警戒信号,在使用这些药物时,应该密切监测患者肝功能,其中二甲双胍既不经过肝脏代谢,也未见相关文献报道,其引发的肝衰竭风险值得进一步关注;甲硝唑和左乙拉西坦引起的临床结局较为严重,需要引起足够重视.

目的:基于数据挖掘技术研究中药专利复方治疗支气管扩张的用药规律,为临床用药及新药研发提供参考依据.方法:在中国专利公布公告网站搜索治疗支气管扩张的中药专利复方数据;利用古今云医案平台(V2.3.5)对药物进行频次统计分析;借助IBM SPSS Modeler 18.0对药物进行关联规则分析;通过Cytoscape3.8.2建立核心药物复杂网络图;运用IBM SPSS Statistics 26.0对药物进行系统聚类分析.结果:共筛选出自建库到2022年4月3日治疗支气管扩张的中药专利复方85项,涉及药物347味,高频药物包括桑白皮、黄芩、甘草、地黄等;性味主要以甘寒、苦寒为主,主要归肺、肝经;常用药对包括黄精-甘草、大蓟-小蓟、大蓟-甘草等,角药组合为地黄-桑白皮-黄芩、苦杏仁-仙鹤草-黄芩等;新方有"黄芩、苦杏仁、桑白皮、地黄、仙鹤草、地骨皮、枇杷叶、南沙参、白茅根、川贝母"等.结论:根据中药专利复方治疗支气管扩张用药规律,临床上可灵活运用清热化痰、滋阴润肺、凉血止血之法治疗支气管扩张,为今后临床用药及新药研发提供参考.

目的 建立单核细胞增生李斯特菌hlyA基因TaqMan探针实时荧光PCR,用于食品卫生检验的快速筛查.方法 根据单核细胞增生李斯特菌hlyA基因设计特异的引物与TaqMan探针,建立和优化实时荧光PCR反应体系,评估其特异性、灵敏度、稳定性,并在食品卫生检验中与细菌分离方法同步应用比较.结果 建立了单核细胞增生李斯特菌TaqMan探针实时荧光PCR反应体系,经优化其最佳退火/延伸的温度为58℃,25 μL反应体系中上、下游引物和探针最佳终浓度配比分别为0.7、0.7、0.4 μmol/L;该实时荧光PCR反应体系可在35 min内完成检测,与沙门菌、绵羊李斯特菌、英诺克李斯特菌等16种非目标菌无交叉反应,对阳性克隆质粒的检测下限可达100拷贝/μL的稀释梯度,对同一核酸浓度样本20次检测的Ct值变异系数为0.46％;在对120份食品安全风险监测标本的快速检测应用中,6份标本单核细胞增生李斯特菌实时荧光PCR扩增阳性,从相应样本中分离出6株单核细胞增生李斯特菌,实时荧光PCR与分离培养方法检测结果相一致.结论 针对单核细胞增生李斯特菌hlyA基因建立的TaqMan探针实时荧光PCR具有快速、特异、灵敏、稳定等优势,可用于食品卫生检验中单核细胞增生李斯特菌的快速、高效筛查.