目的:探讨载万古霉素（Vm）微泡（MBs）联合超声靶向微泡破坏（UTMD）技术对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）生物膜形态结构、厚度及细菌活力的影响。方法:以薄膜水化法制备Vm-MBs。以MRSA为受试菌株，将直径13 mm的无菌盖玻片放置于24孔板中构建体外生物膜模型，结晶紫染色后通过肉眼、光镜观察生物膜形态。LIVE/DEAD、SYTO59和DIL分别对生物膜和MBs染色，染色后使用激光共聚焦显微镜观察生物膜形态及生物膜与MBs的位置关系。按随机数字表法将生物膜分为对照组、Vm组、Vm-MBs组、UTMD组、Vm-MBs+UTMD组，每组9个样本。各组生物膜给予相应处理后24 h，采用LIVE/DEAD染色，并使用激光共聚焦显微镜、扫描电镜观察各组生物膜形态结构变化；采用结晶紫染色，借助酶标仪测定并比较各组生物膜密度差异；使用激光共聚焦显微镜观察各组生物膜厚度及细菌活力差异。结果:制备的Vm-MBs符合实验要求。肉眼、光镜、激光共聚焦显微镜观察结果显示，生物膜结构致密，厚度为（13.8±0.2）nm，较均匀，膜内有少量死菌，活菌比例为（94.9±0.3）%。激光共聚焦显微镜结果显示，MBs能穿透进生物膜深层。各组给予相应处理后24 h，LIVE/DEAD染色、激光共聚焦显微镜、扫描电镜结果显示，与对照组、Vm组、Vm-MBs组、UTMD组比较，Vm-MBs+UTMD组生物膜形态结构破坏最显著，出现大量死菌，仅残存少量分散的浮游细菌，细胞膜形态出现不规则变化。结晶紫染色结果显示，与对照组比较，Vm-MBs+UTMD组生物膜密度显著降低（ P<0.05），Vm组、Vm-MBs组、UTMD组差异无统计学意义（ P均>0.05）。激光共聚焦显微镜结果显示，与对照组比较，Vm-MBs组、UTMD组、Vm-MBs+UTMD组生物膜厚度变薄（ P均<0.05），Vm组差异无统计学意义（ P>0.05）；与Vm组、Vm-MBs组、UTMD组比较，Vm-MBs+UTMD组生物膜厚度变薄（ P均<0.01），其他组间差异无统计学意义（ P均>0.05）。与对照组比较，Vm组、Vm-MBs组、UTMD组、Vm-MBs+UTMD组细菌活性显著降低（ P均<0.01）；与Vm组、Vm-MBs组、UTMD组比较，Vm-MBs+UTMD组细菌活性显著降低（ P均<0.01），其他组间差异无统计意义（ P均>0.05）。 结论:Vm-MBs联合UTMD技术能够有效破坏生物膜形态结构，减少生物膜厚度，同时释放抗生素，显著降低细菌活力，提高抗生素杀菌效能。

目的:探讨亚甲基蓝介导的光动力疗法（PDT）联合小檗碱对牙龈卟啉单胞菌（P.g）的体外抑制作用。方法:培养P.g至对数期中后期，将不同质量浓度亚甲基蓝加入P.g菌悬液中，作用5 min，激光（波长660 nm，功率140 mW/cm 2）照射2 min，寻找亚甲基蓝结合激光体外抑制P.g的最佳浓度；观察亚甲基蓝介导的PDT体外抑制P.g的效果以及小檗碱对P.g生长曲线的影响；探讨亚甲基蓝介导的PDT与小檗碱先后联合应用对P.g的抑制作用；扫描电子显微镜观察亚甲基蓝介导的PDT及小檗碱对P.g形态的影响；紫外分光光度仪测量各成分吸收峰。 结果:在660 nm激光激发下，亚甲基蓝质量浓度为24.414 1 μg/ml时，抑菌效果最好。与对照组比较，亚甲基蓝组和PDT组差异均有统计学意义（均 P<0.001）。0.05 mg/ml小檗碱对P.g浮游细菌具有抑制作用。与对照组比较，0.05 mg/ml小檗碱组菌落数降低，其差异有统计学意义（ P<0.01）；0.05 mg/ml小檗碱+光照组与对照组比较差异无统计学意义（ P>0.05）。当PDT与小檗碱联用时对P.g有协同抑制作用，且先PDT后小檗碱组较先小檗碱后PDT组菌落数降低，其差异均有统计学意义（均 P<0.01）。P.g经亚甲基蓝介导的PDT处理后，细菌细胞壁皱缩成团，经小檗碱处理后，细菌表面变得光滑且菌体长度较对照组增长。 结论:亚甲基蓝介导的PDT对P.g有抑制作用，当与小檗碱联用时，对P.g有协同抑制作用，且联合应用中先PDT后小檗碱作用时抑菌效果更好。

患者男，34岁。因左眼视力下降2年于2020年7月到北京协和医院眼科就诊。2018年7月，患者曾因左眼红、痛、视力下降在当地医院诊断为"左眼葡萄膜炎"，测得房水巨细胞病毒（CMV）-免疫球蛋白G（IgG）、单纯疱疹病毒（HSV）-IgG、水痘-带状疱疹病毒（VZV）-IgG、风疹-IgG均为阳性；白细胞介素（IL）-6、IL-8、IL-10及血管内皮生长因子（VEGF）水平升高，给予眼局部及口服糖皮质激素治疗效果不佳。2019年3月接受左眼玻璃体切割手术治疗，最佳矫正视力（BCVA）由0.08提高至0.5。5个月后患者左眼视力再次下降至眼前数指，于外院行白内障超声乳化、人工晶状体植入及玻璃体腔灌洗手术，玻璃体液病毒、细菌、结核杆菌和真菌检测均为阴性。第二次手术后患者BCVA提高至0.3，但其后视力逐渐下降，并反复出现眼痛。患者既往史：17岁时曾患"左眼葡萄膜炎"，治疗后好转。本次就诊眼部检查：右眼、左眼BCVA分别为1.5、光感；右眼、左眼眼压分别为17、25 mm Hg（1 mm Hg=0.133 kPa）。右眼眼前后节均未见异常。左眼结膜混合充血，角膜轻度水肿，细小灰白角膜后沉着物（KP），房水闪辉（++），浮游体（++++），下半前房积脓，虹膜新生血管，瞳孔膜闭，眼底观察不清（图1A）。B型超声检查，左眼玻璃体混浊，局部视网膜脱离。超声生物显微镜（UBM）检查，左眼睫状体、虹膜占位（图1B）。入院诊断：左眼葡萄膜炎，左眼虹膜及睫状体占位，左眼人工晶体眼，左眼玻璃体切割手术后。患者入院后在球后麻醉下行左眼玻璃体切割+人工晶状体取出+前房成形+硅油填充+睫状体活检手术，冲洗前房后发现瞳孔区新生血管膜并予以切除（图1C），手术中见局部渗出性视网膜脱离，视网膜下有黄白色病变。睫状体活检病理结果提示，睫状体组织伴散在淋巴细胞、浆细胞浸润。玻璃体液培养结果为羊布鲁菌感染，布鲁菌血清凝集试验阴性。追问病史，患者发病前饲养羊多年，2014年无明显诱因出现发热、胸痛、腹痛及膝关节痛，CT检查显示左侧胸腔积液、左肺下叶受压和肺不张（图2）；血液和胸腔积液培养结果均为阴性，经抗感染、对症治疗后症状好转。最终诊断：左眼羊布鲁菌眼内炎。给予盐酸米诺环素、利福平和复方磺胺甲恶唑治疗。患者左眼手术后出现虹膜新生血管膜复发，经玻璃体腔注射抗VEGF药物治疗后病情稳定。最终左眼视力无光感，随访至今眼内炎症未复发。

虾青素是一种深红色酮类胡萝卜素,自然界中主要由藻类、细菌和浮游植物产生.作为天然色素和抗氧化物质在日化用品、医药行业、食品保健业、水产畜牧业有广泛应用.相较于天然提取和化学合成,利用异源微生物合成虾青素是一种绿色环保、经济高效的方法.概述虾青素生物合成路径,对微生物合成虾青素的研究现状和酵母合成虾青素的工程化策略进行总结,并对未来发展方向进行了展望.

研究采用环境RNA技术探究西太平洋M4海山区细菌多样性,并与基于环境DNA技术的研究结果进行比较,解析细菌代谢活性特征.结果表明基于环境RNA和DNA技术检获的物种构成相似,但真光层中蓝细菌在RNA中的占比明显高于DNA,显示其高代谢活性;而α变形菌在RNA中的占比明显小于DNA,代谢活性低;γ变形菌在RNA中占比更大且随水层加深而增加.物种间关系网络复杂度随着水深的增加呈先升高后下降的趋势.基于RNA数据构建的网络较DNA数据网络简单,且随着水深增加变化趋势更加显著,去除蓝细菌后网络变化剧烈,而去除α变形菌对网络影响小.综上,研究基于环境RNA技术提供了海山区浮游细菌多样性及分布更加完整的认知,α变形菌在海山区多样性占比和其在群落中作用可能被高估.

[背景]高速公路收费站空气污染严重,收费人员存在较高的职业暴露风险,亟须研发适用于高速公路收费岗亭气载颗粒物和微生物病原体的净化方法.[目的]验证低温等离子体空气净化器对高速公路收费岗亭室内气载颗粒物和微生物的净化效果.[方法]基于对照干预实验设计,选取某高速公路收费站三个收费岗亭作为测点,开展 6 d的现场对照干预实验(无干预期:前3 d未开启低温等离子体净化器;干预期:后3 d每天9:00-17:00开启净化器).实验期间持续监测室内外等效直径小于 2.5 μm(PM2.5)和小于 10 μm(PM10)的可吸入颗粒物浓度;每天上午(9:00)、中午(12:00)和下午(17:00),使用浮游微生物采样器采集收费岗亭室内外空气样品,分析气载细菌总数;每天 9:00-17:00采用智能中流量颗粒物采样器持续采集最外侧出站口室内的气载颗粒样品,使用基因测序分析样品内含细菌和真菌种属明细及其相对丰度.采用独立样本t检验比较干预期和无干预期室内气载PM2.5、PM10 和细菌总数的浓度差异;采用α多样性分析、β多样性分析和t检验(两组比较),比较干预期 3 d和无干预期 3 d气载颗粒样品内含细菌和真菌具体种属及样品内含典型致病细菌和真菌病原体种属的物种多样性和相对丰度差异,以反映低温等离子体空气净化器对气载PM2.5、PM10 和微生物的净化效果.[结果]干预期室内PM2.5 和PM10 浓度及细菌总数的均值均低于无干预期室内均值(P<0.01或P<0.001);干预期 PM2.5 和 PM10 的室内浓度/室外浓度值(I/O)均低于无干预期(P<0.001);但干预期细菌总数的I/O值与无干预期比较,差异无统计学意义.以上午 9:00收费岗亭室内PM2.5 的平均浓度为基准,中午 12:00和下午 17:00的室内PM2.5 平均净化率分别为49.0%和 46.1%,PM10 为 49.7%和 45.4%,细菌总数为 50.8%和 49.9%.β多样性分析显示干预期和无干预期细菌种水平,真菌属水平和种水平上的物种组成成分均存在差异.与无干预期相比,干预期颗粒样品内含乳杆菌属等 10种细菌和圆酵母菌属等 7种真菌的相对丰度更低,但干预期枝孢霉科未分类属、多臂菌属和尾孢菌属真菌的丰度更高(均P<0.05).对于典型致病菌,干预期乳杆菌属细菌和狭窄梭菌属细菌的相对丰度分别降低了 73.5%和 86.9%,干预期篮状菌属真菌降低了53.5%,差异均有统计学意义(P<0.05).[结论]低温等离子体空气净化器对高速公路收费岗亭室内气载PM2.5、PM10 和浮游细菌具有较好的净化效果,但对室内气载颗粒内含部分真菌的净化作用可能有限.

珊瑚礁作为一种典型的海洋生态系统,具有巨大的固碳和储碳潜力.然而,目前对于珊瑚礁的净碳能力(碳释放与碳吸收)仍存在争议,主要归因于珊瑚共生体碳代谢的多样性和复杂性.珊瑚礁在生物钙化、呼吸过程中向大气释放二氧化碳(CO2);但在生物合成和沉积过程中却可以将碳进行固定与埋藏;为此,珊瑚礁的碳源碳汇身份还有待明确.现有部分研究表明,共生体通过碳代谢可以促进珊瑚礁吸收大气中的CO2.此外,珊瑚礁和海岸带蓝碳生态系统通常表现出很强的连通性,珊瑚共生体碳代谢能有效提高海岸带盐沼植被、海草床、海洋浮游植物等生物的碳汇功能.为了加深对珊瑚礁碳源-碳汇功能的理解,综述了珊瑚共生体的碳代谢特征,梳理了共生体中碳的关键生态过程(有机碳的迁移、无机碳的转化、两者的赋存状态),总结了细菌-虫黄藻-病毒在共生体碳代谢中的作用,评述了珊瑚礁碳源-碳汇特征及影响因子.旨在阐明珊瑚共生体碳代谢的关键过程,并基于此寻求有效的珊瑚礁碳增汇技术,形成以碳增量为主的珊瑚保护与修复技术,提升珊瑚礁在蓝碳生态系统中的贡献.

目的 研究一种等离子体空气消毒机对动态有人和静态无人室内空气消毒效果.方法 选择一间幼儿园教室,用等离子体空气消毒机分别在教室有人和无人时消毒,比较消毒前后空气中浮游菌、沉降菌、颗粒物和微生物负荷,综合评估等离子体空气消毒效果.结果 在无人室内,消毒60 min时室内空气自然菌消亡率＞90%;在有人室内,尽管人员活动持续污染空气,空气消毒仍达到50%以上的自然菌消亡率.无论室内是否有人活动,消毒后空气中沉降菌、颗粒物和微生物负荷均下降.结论 该等离子体空气消毒机可以有效消除空气中细菌和颗粒物,能够在有人时使用,为预防经空气传播疾病在室内传播提供有效消毒方法.

目的 探究生物安全型内镜清洗防护装置对气溶胶的阻断效果.方法 用大肠杆菌对灭菌后的软式内镜腔道进行模拟染菌,并模拟处理过程.采用空气浮游菌采集培养计数与粒子计数器计数2种方法评价生物安全型内镜清洗装置不同工作状态下气溶胶的阻断情况.结果 在内镜再处理过程中,工作模式1(防护罩、吸引)、工作模式2(仅吸引)、常规模式(无防护罩、不吸引)在A点(水槽上方)、B点(防护罩外水槽边缘中点)和C点(距水槽边缘中点水平90 cm处)的生物气溶胶浓度组间比较差异均具有统计学意义(P＜0.05).其中在A点,工作模式1和常规模式相比差异具有统计学意义(P＜0.017);在B点,3种模式组间两两比较差异均具有统计学意义(P＜0.017);在C点,工作模式1和工作模式2相比差异具有统计学意义(P＜0.017),工作模式1和常规模式相比差异具有统计学意义(P＜0.017).该装置在工作状态下防护罩内外的空气浮游菌采集培养计数结果显示,防护罩内的细菌菌落数为(414.3±179.1)cfu/m3,明显高于防护罩外细菌菌落数(5.8±5.9)cfu/m3,两者比较差异具有统计学意义(P＜0.001).结论 生物安全型内镜清洗防护装置能有效降低内镜再处理清洗过程中周围环境内的生物气溶胶.

目的:通过对洁净手术室条件下白内障超声乳化手术空气质量进行动态检测分析,了解不同时间点术中空气质量情况,为白内障连台手术空气质量管理提供参考依据.方法:采用空气质量检测仪和空气微生物采样器,对温州医科大学附属眼视光医院洁净手术室白内障超声乳化手术术中空气质量进行动态检测分析与评价.结果:白内障超声乳化手术从患者入室到切口关闭整个过程空气洁净度呈"N"字型,以麻醉开始空气中颗粒物浓度为最高,周边区颗粒物浓度略高于手术区,差异有统计学意义(P＜0.01),各采样时间点细菌数均符合洁净级别标准;12台连台白内障超声乳化手术第1至第7台手术区气溶胶浓度呈平稳波动态势,第8台开始PM2.5(0.17 μg/m3)、PM10(0.27 μg/m3)有上浮趋势,在第12台有较明显高值(PM2.50.3 μg/m3、PM10 0.4 μg/m3、粒子数21.67个/L),且浮游菌检测在第12台检测为2 cfu/m3;周边区PM2.5(0.1～0.2 μg/m3)、PM10(0.17～0.23 μg/m3)、粒子数(9.67～16.67个/L)均呈平稳波动态势,浮游菌检测浮动范围为0～1 cfu/m3,符合动态标准.结论:洁净手术室能够持续有效维持手术间的空气清洁,白内障超声乳化手术连台方式可取,考虑到临床人力安排与实际工作,建议白内障超声乳化手术可在连台11～12台(手术开展4～4.5 h)后进行术间自净,使手术室管理更加高效.