目的:分析低聚糖的成分构成及其在潞党参中的抗炎作用.方法:采用DEAE-52阴离子纤维素和Sepha-dex G-15葡聚糖凝胶色谱柱分离纯化低聚糖组分.利用体外细胞实验、Griess法、Western blot检测法检测其抗炎活性.结果:得到了相对分子量为1 452 Da的低聚糖组分D1,得率为0.13%±0.05%,蛋白杂质含量为(31.08±1.25)μg/mg,纯度为96.89%.单糖组成研究表明低聚糖D1主要由葡萄糖(63.40%)、阿拉伯糖(30.06%)和甘露糖(6.54%)组成.体外细胞实验表明,低聚糖D1样品在25～400 μg/mL浓度范围对RAW 264.7巨噬细胞无细胞毒作用.在LPS诱导的RAW 264.7巨噬细胞炎症模型中,低聚糖D1能有效地抑制炎症因子NO的释放.Western blot检测发现,低聚糖D1样品的共孵育处理能剂量依赖性抑制iNOS蛋白的表达.结论:潞党参中低聚糖组分D1能通过抑制炎症介质NO的释放,起到良好的抗炎作用.

目的 研究潞党参化学成分及其抗炎活性.方法 潞党参 70％乙醇提取物采用硅胶、ODS、制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构.采用RAW264.7 模型评价其体外抗炎活性.结果 从中分离得到16 个化合物,分别鉴定为ethylsyringin(1)、7-O-ethyltangshenoside Ⅱ(2)、triandrin(3)、反式异松柏苷(4)、甲基丁香苷(5)、9-acetoxy syringin(6)、鬼针聚炔苷 B(7)、codonopiloenynenoside A(8)、codonopilodiynoside F(9)、铜锤玉带草炔苷 B(10)、党参炔苷(11)、落叶松脂醇-4-O-β-D-葡萄糖苷(12)、dihydrodehydrodiconiferyl alcohol 4′-O-β-D-glucoside(13)、苍术内酯Ⅲ(14)、白曼陀罗酰胺(15)、苯甲醇-7-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-(1→ 6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(16).化合物 1～2、5、7～11、13～15 具有一定的抗炎活性,其中 11、14～15 活性较强,IC50值分别为(18.23±4.18)、(17.73±3.12)、(14.89±2.47)μmol/L.结论 化合物 3、6、13、16 为首次从桔梗科植物中分离得到,2、5、15 为首次从该植物中发现.化合物 11、14、15 具有良好的抗炎活性.

党参作为我国药食同源的大宗药材之一,其种植面积与市场需求与日俱增.党参基原众多、品种复杂、产地分布广,其质量往往良莠不齐.本文对党参道地品种的历史沿革、产地变迁及产区现状进行系统考证,发现当今党参并非古籍中的上党人参;人工种植和引种栽培导致党参产地逐渐向西北、西南地区变迁;我国 46 种党参属植物有药用历史,2020 年版《中国药典》收录桔梗科植物党参、素花党参、川党参作为党参法定基原;在历史变迁过程中形成的党参道地品种主要有山西长治和晋城的潞党、山西五台山的台党、陕西凤县的凤党、湖北板桥的板桥党参、重庆巫山的庙党、四川九寨沟的刀党、甘肃渭源和陇西的白条党、甘肃文县的纹党、贵州道真的洛党、贵州毕节的威党、东北的东党及青海的西党.通过对党参道地品种历史沿革的考证、产地变迁路径的梳理及产区现状的调查,可为其资源研究、品种溯源和改良、引种栽培、产地优化、品质一致性评价等提供科学依据.

为了挖掘影响山西道地药材潞党参道地性形成的转录因子,该研究基于山西潞党参与甘肃白条党转录组数据筛选潞党参特异性转录因子,并对其进行基因表达模式分析,为通过分子辅助育种进行潞党参优种选育提供理论基础.根据不同产地潞党参与白条党转录组数据,对差异转录因子进行GO功能注释、鉴定、保守基序分析及基因表达模式分析.自转录组数据库中共筛选出 61 个差异基因,分属最多的AP2/ERF-ERF家族的保守基序为[2X]-[LG]-[3X]-T-[3X]-[AARAYDRAA]-[3X]-[RG]-[2X]-A-[2X]-[NFP].分析发现,差异基因中 43 个在潞党参中表达量显著高于白条党,包括AP2/ERF-ERF家族 11 个、NAC 家族5 个、bHLH家族1 个、RWP-RK家族2 个,而有18 个转录因子基因在白条党中上调表达.转录结合活性、代谢进程、应激反应相关的 GO terms 分别为 103、26、23 个.不同器官特异性表达分析表明转录因子基因 CpNAC92、Cp-NAC100、CpbHLH128、CpRAP2-7不仅在潞党参中上调表达,在根系中表达量也显著高于其他器官.环境胁迫条件下基因表达模式分析发现,除CpNAC100 基因只响应低温、过铁胁迫外,其他 3 个基因均可响应低温、温差、过铁胁迫.潞党参特异性转录因子基因CpNAC92、CpNAC100、CpbHLH128、CpRAP2-7的筛选与表达分析,为进一步研究潞党参道地性形成机制奠定了理论基础.

目的 利用网络药理学结合体内实验,探讨潞党参治疗小鼠大脑局部缺血后再灌注损伤的潜在作用机制.方法 对C57BL/6小鼠大脑构建中动脉闭塞再灌注模型(middle cerebral artery occlusion/reperfusion,MCAO/R),建模成功后,将其分为假手术组,MCAO/R模型组,潞党参低、中、高剂量组,进行连续7d潞党参药物治疗;通过Zea Longa 5级评分法评估MCAO/R小鼠的神经功能损伤情况;利用网络药理学和分子对接技术预测党参治疗缺血性脑卒中(IS)的潜在作用机制和靶点,在此基础上利用Western Blot验证预测靶点.结果 Zea Longa 5级评分法显示,与假手术组相比,模型组小鼠神经功能损伤严重,差异有统计学意义(P＜0.05);与模型组相比,潞党参高剂量组小鼠的神经功能有所改善,差异有统计学意义(P＜0.05).网络药理学机制研究表明,潞党参抗IS的作用可能与氧化应激、脂代谢以及神经炎症通路相关.分子对接结果显示,潞党参中的苍术内酯Ⅲ和补骨脂内酯可能通过IL-2、MMP12和CXCL12基因靶点改善IS后的神经功能.Western Blot验证结果显示,与模型组相比,潞党参高剂量组分别对MMP12和CXCL12有着不同程度的抑制作用,且差异有统计学意义(P＜0.05);党参高剂量组对TNF-α的表达有明显的下调作用(P＜0.01).结论 潞党参可能通过抑制神经炎症反应来缓解IS/R的神经功能损伤.其发挥抗炎作用可能是通过下调MMP12、CXCL12和TNF-α的表达水平实现的.

[目的]总结孙伟教授运用中医药治疗尿酸性肾病的临证思路和经验用药.[方法]通过跟随孙伟教授临诊,记录相关医案,分析典型案例,从病因病机、临证施治等方面总结归纳孙伟教授诊治尿酸性肾病的临证思路和经验用药,并举验案一则以佐证.[结果]孙伟教授认为尿酸性肾病的病因是湿浊瘀滞,病机是脾肾衰败、浊瘀毒邪阻络,创"益肾泄浊法"为基本治疗大法,具体施治时强调益肾健脾以固先后天之本,清利止痛以治其标,解毒泄浊以清其根源.孙师主要经验用药为生黄芪、潞党参、老苏梗、淮山药、制苍术、炒白术、土茯苓等,临证常随病情变化加减化裁.以"益肾泄浊"法为基本治疗大法,指导临床遣方用药,验案所示收效良好.[结论]孙伟教授运用"益肾泄浊法"治疗尿酸性肾病的临证思路和经验用药在实践中行之有效,有降低尿酸、改善肾功能的作用,值得推广.

探讨王灵台运用“肝八味”治疗慢性肝病的临床经验.认为慢性肝病病机为正气亏损、邪毒为患;治以益气活血通络、健脾柔肝补肾、清热解毒散结、调和阴阳;常用药物为潞党参、生地黄、川石斛、炙鳖甲、全当归、淫羊藿、炒白术、虎杖等八味.并附验案1则.

以山西上党地区著名道地药材潞党参为材料,分析其多糖成分的抗补体活性.首先,通过细胞溶血实验,分析潞党参多糖(Lu Codonopsis pilosula polysaccharides,LCPP)对补体经典途径和旁路途径的影响.结果表明,LCPP具有一定抗补体活性,CH50值为2.061± 0.127 mg/mL,AP50值为6.725±0.895 mg/mL,并表现为明显的量效关系.随后,利用人HepG2细胞,通过实时定量PCR实验,分析LCPP对补体系统重要成分C3表达的影响,发现LCPP能够显著抑制肿瘤坏死因子α (tumornecrosis factor-α, TNF-α)诱导的人HepG2细胞中C3的表达.以上结果提示,潞党参是一种潜在的补体抑制剂,在治疗补体过度激活所导致的自身免疫性疾病方面具有应用前景.

目的:运用逼近理想解排序法(TOPSIS)对潞党参的5个指标进行质量的综合评价,以筛选优质潞党参的栽培基地.方法:利用水溶性浸出物测定法、醇溶性浸出物测定法、紫外-可见分光光度法、高效液相色谱法的检测技术,分别测定不同栽培地潞党参中的水溶性浸出物、醇溶性浸出物、总皂苷、党参炔苷、总多糖5个指标含量,并结合熵权TOPSIS数学模型综合评价山西省平顺县潞党参的品质.结果:S1(青羊镇老马岭村)的最优解欧式贴近度(Ci)值为0.837 4,整体质量高于其他栽培基地,而S7(杏城镇黑虎村河湾)的Ci值为0.535 7,相对来说整体质量是较差的.S1,S4(龙溪镇南小沟村驮言角),S6(龙溪镇淙上村)Ci分别为0.837 4,0.824 0,0.810 5,在所有样品中排名前3,表明这3个地点所产药材质量较优,可作为栽培潞党参的优选之地.结论:TOPSIS评价模型是将多维问题转化为一维问题,具有科学性、准确性和客观性,其理论完善、计算简便、易于操作,因此该模型适合用于评价最优的货源基地,为制药企业对潞党参栽培基地的选择提供参考依据.同时此评价模型也可推广应用于其他中药材多指标的综合质量评价.

梳理并分析山西代表性道地药材生产技术与质量标准研究现状,以期较为客观地概述晋产道地药材生产与质量标准研究现状,服务于晋药生产、研发与可持续利用.通过文献调研与实地调研研究山西代表性道地药材潞党参、恒山黄芪等资源概况、生态种植(野生抚育)技术、采收加工技术及质量标准研究现状.结果发现晋产道地药材规范化种植技术采用现代农业栽培、生态种植、仿野生栽培技术.采收方法包括人工采收和机械采收2种.药材加工多沿用传统加工方法.中药材合作社多采用传统仓储方式,大型中药材及饮片生产企业采用气调贮藏技术.晋产道地药材质量标准研究方法先进,拟订标准高于2015年版《中国药典》所载标准,并体现了山西道地药材特色与优势.最具代表性的几种晋产道地药材栽培方式体现了生态种植特点,产地加工保留了道地药材传统加工技术特色;晋产道地药材质量优良并且生产规模逐年扩大,在中药产业发展中具有不可替代的作用.