目的:探讨炎调方对老年急性胆囊炎(AC)行经皮经肝胆囊穿刺置管引流术(PTGD)后患者的临床疗效.方法:采用随机、单盲、安慰剂对照临床研究方法.纳入72例老年AC行PTGD患者,随机分为对照组和治疗组,每组各36例.PTGD后所有患者均给予常规干预,在此基础上,对照组患者予以炎调方安慰剂口服治疗,治疗组患者予以炎调方口服治疗,治疗周期为4周.治疗前后检测并比较两组患者的炎症反应指标[包括白细胞(WBC)、中性粒细胞百分比(N％)、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、白介素(IL)-6]、肝功能指标[包括总胆红素(TBIL)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酰转肽酶(GGT)、凝血酶原时间(PT)]水平,比较两组患者的中医临床症状总积分.结果:试验过程中,对照组4例患者被剔除,治疗组6例患者被剔除,最终纳入统计分析者对照组32例、治疗组30例.①治疗后,两组患者的WBC、N％、CRP、PCT、IL-6水平较治疗前均显著降低(P＜0.05),且治疗组患者的CRP、PCT、IL-6水平低于对照组(P＜0.05).②治疗后,两组患者的TBIL、PT水平较治疗前均显著降低(P＜0.05),但组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).③治疗后,两组患者的中医临床症状总积分较治疗前均显著降低(P＜0.01),且治疗组患者的总积分低于对照组(P＜0.05).结论:老年AC患者PTGD后使用炎调方内服有助于进一步减轻胆囊穿刺后的炎症反应、改善临床症状,值得临床推广应用.

脓毒症急性肾损伤,病位主要在肾,涉及心肺肝脾和膀胱、三焦等脏腑,以脏腑虚损、瘀毒互结为基本病机,虚、瘀、毒三者相互转化,据此确立了补虚化瘀解毒治疗原则,临床多采用炎调方加减,收效甚佳.附验案一则.

目的 研究炎调方对脓毒症大鼠T淋巴细胞及T淋巴细胞表面表面程序性死亡蛋白(PD-1)、程序性死亡蛋白配体(PD-L1)表达的影响.方法 SD大鼠(雄性)分为正常组、假手术组、模型组和炎调方组.盲肠结扎穿孔(CLP)制备脓毒症大鼠模型,于造模后 12、24、48、72 h采集外周血处死大鼠(每个时间点各 5 只大鼠),采用流式细胞分析法测定CD3+、CD4+、CD8+比例;双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定CD4+及CD8+表面PD-1、PD-L1 表达水平.结果 白介素-6(IL-6)在脓毒症模型组 12h分泌达到高峰后逐渐下降,降钙素原(PCT)在模型组 24h达到高峰后逐渐下降;炎调方组在 12h降低IL-6 的水平(P＜0.05),24 h时明显降低IL-6、PCT的水平(P＜0.01).模型组CD3+、CD4+、CD8+比例早期分泌开始减少,48 h分泌达最低点(P＜0.01);炎调方组在 48h时可升高 CD3+、CD4+、CD8+比例,提高CD4+/CD8+的比值而具体调节T细胞活化和增殖的功能.模型组CD4+、CD8+表面PD-1、PD-L1 表达水平早期 24h即表达增多(P＜0.01),72 h表达最多;炎调方组 24h时即可抑制PD-1、PD-L1 的表达水平而具体改善T细胞衰竭的作用.CD4+的比例与CD4+表面PD-1、PD-L1 的表达呈负相关(P＜0.01);CD8+比例与CD8+表面PD-1、PD-L1 的表达呈负相关(P＜0.01).结论 脓毒症早期 48h内即出现了T细胞活化和增殖的功能衰竭引起的T细胞免疫抑制.炎调方能在脓毒症早期改善T细胞活化和增殖的功能,其机制可能与抑制PD-1/P-L1 通路有关.

目的 探讨炎调方调控Rho/ROCK信号通路对脓毒症急性胃肠损伤小鼠肠上皮细胞凋亡的影响.方法 取70只BALB/c小鼠随机分为空白组、假手术组和造模小鼠.除空白组、假手术组外,各组小鼠均采用盲肠结扎穿孔术(cecum ligation and puncture,CLP)构建脓毒症急性胃肠损伤小鼠模型,将造模成功的小鼠随机分为模型组、炎调方低、中、高剂量组和ROCK抑制剂组.采用HE染色观察小鼠回肠组织病理学改变;ELISA法检测各组小鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10水平;免疫组织化学检测观察PCNA、Ki-67的表达;蛋白印迹法检测回肠组织凋亡指标cleaved caspase3蛋白、Bax蛋白表达;RT-qPCR检测小鼠回肠组织ROCK mRNA、MLC mRNA表达.结果 较空白组和假手术组相比,模型组小鼠的Chiu's病理评分、促炎介质(IL-1β、IL-6、TNF-α)水平、cleaved caspase3蛋白、Bax蛋白、ROCKmRNA、MLC mRNA水平升高(P＜0.05),而抑炎介质(IL-10)水平和回肠组织中PCNA、Ki-67表达降低(P＜0.05).与模型组比较,炎调方各组随着剂量增加,回肠组织病理学改变均得到不同程度改善,其Chiu's 病理评分、血清中 IL-1β、IL-6、TNF-α 水平、cleaved caspase3 蛋白、Bax 蛋白、ROCK mRNA、MLC mRNA 的表达降低(P＜0.05),而IL-10水平、回肠组织中PCNA、Ki-67表达升高(P＜0.05).结论 炎调方可能通过调控Rho/ROCK信号通路抑制脓毒症急性胃肠损伤小鼠的肠上皮细胞凋亡,从而具有减轻肠道组织炎症反应,最终达到防止肠黏膜组织损伤的作用.

目的 观察炎调方调节Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho激酶(ROCK)信号通路对急性胰腺炎(AP)大鼠肠屏障损伤的影响.方法 将84只大鼠随机分为对照组、模型组、炎调方低剂量组、炎调方高剂量组、乌司他丁组、溶血磷脂酸(LPA)组、炎调方+LPA组,每组12只.除对照组外,其他组构建AP大鼠模型.造模成功后立即进行给药处理,每6小时给药1次,共4次.ELISA法检测大鼠血清中淀粉酶、脂肪酶、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、D-乳酸、二胺氧化酶(DAO)水平;HE染色检测大鼠胰腺组织和回肠组织病理变化;免疫组化染色检测大鼠回肠组织中ZO-1、Occludin蛋白平均光密度;Western blotting检测回肠组织中RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达.结果 与对照组比较,模型组大鼠胰腺组织和回肠组织病理损伤严重,淀粉酶、脂肪酶、TNF-α、IL-6、D-乳酸、DAO水平及RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达升高,ZO-1、Occludin蛋白平均光密度降低(P＜0.05);与模型组比较,炎调方低剂量组、炎调方高剂量组、乌司他丁组大鼠胰腺组织和回肠组织病理损伤减轻,淀粉酶、脂肪酶、TNF-α、IL-6、D-乳酸、DAO水平及RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达降低,ZO-1、Occludin蛋白平均光密度升高,LPA组对应指标变化趋势与上述相反(P＜0.05);与炎调方高剂量组比较,炎调方+LPA组大鼠胰腺组织和回肠组织病理损伤加剧,淀粉酶、脂肪酶、TNF-α、IL-6、D-乳酸、DAO水平及RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达升高,ZO-1、Occludin蛋白平均光密度降低(P＜0.05).结论 炎调方可能通过抑制RhoA/ROCK信号通路改善AP大鼠炎症反应及肠屏障损伤.

目的 探讨炎调方调控长链非编码RNA-心肌梗死相关转录本(LncRNA-Miat)对急性脓毒症患者肠道微生态、免疫功能的保护作用.方法 选取 2020 年 1 月至 2022 年 10 月收治的急性脓毒症患者 108 例,根据随机数字表法分为对照组和观察组,每组 54 例.对照组采取常规对症治疗,观察组采用常规对症治疗+炎调方,2 组均连续治疗 10 d.观察组 6 例因意识改变或昏迷无法口服中药退出研究,为保持例数一致,对照组剔除 6 例,观察组和对照组各有 48 例进入研究.统计 2 组中医疗效、中医证候积分、LncRNA-Miat、磷脂酶张力蛋白同源物(PTEN)表达水平、免疫功能[核因子κB(NF-κB)mRNA、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白 3(NLRP3)mRNA、白介素-1β(IL-1β)、IL-18]、肠道微生态(乳酸杆菌、肠杆菌、葡萄球菌)、28 d病死率.结果 观察组总有效率为 83.33%(40/48)高于对照组62.50%(30/48),观察组发热、口渴饮冷、汗出、气喘、乏力评分低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组PTEN、LncRNA-Miat、NF-κB、NLRP3 mRNA、IL-1β、IL-18、葡萄球菌、肠杆菌低于对照组,乳酸杆菌高于对照组(P<0.05);与对照组相比,观察组APACHEⅡ、SOFA较低(P<0.05);2 组28d病死率对比,差异无统计学意义(P>0.05).结论 联合炎调方治疗急性脓毒症患者,可有效调控LncRNA-Miat表达,改善患者肠道微生物平衡,提高机体免疫,缓解临床病症,促进病情好转.

目的:观察炎调方药物血清对离体巨噬细胞中热休克蛋白70(HSP70)及其他相关细胞因子的调控效应,以验证炎调方治疗脓毒症的作用途径和位点.方法:培养大鼠巨噬细胞RAW 264.7,将培养后的巨噬细胞RAW 264.7分为空白对照组(RAW 264.7+培养液)、正常血清组(RAW 264.7+正常大鼠血清)、炎调方药物血清组(RAW 264.7+炎调方药物血清),每组设4个平行孔.采用MTT比色法测定细胞增殖,确定炎调方药物血清的无毒性剂量范围;采用qRT-PCR方法检测细胞HSP70、核因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-1β、IL-8的mRNA表达;采用Western blot方法检测细胞HSP70、NF-κB蛋白表达,以ELISA方法检测细胞TNF-α、IL-1β、IL-8蛋白表达.结果:炎调方药物血清的无毒性浓度范围包括10％～30％,故后续实验选取20％浓度的炎调方药物血清进行.正常血清组的各项指标与空白对照组比较,其差异均无统计学意义(P＞0.05);与空白对照组和正常血清组比较,炎调方药物血清组RAW 264.7细胞的HSP70 mRNA和蛋白表达均明显升高(P＜0.01),NF-κB、TNF-α、IL-1β、IL-8的mRNA和蛋白表达均明显降低(P＜0.01).结论:炎调方治疗脓毒症的作用机制可能是上调HSP70的表达,进而抑制NF-κB的活化和相关细胞因子的表达.

肺是脓毒症最易受损靶器官,急性肺损伤(ALI)出现最早,发生率最高.M1型肺泡巨噬细胞(AM)过度活化是ALI肺部失控炎症反应的核心,TRAF6介导的NF-κB/p38MAPK通路是M1型AM细胞过度活化的关键.我们研究发现,炎调方能有效降低脓毒症患者及大鼠多种炎症介质水平,减轻肺损伤.本文旨在阐述我们对脓毒症导致ALI中医理论及炎调方的临床运用,并探讨炎调方减轻肺损伤作用可能机制,为中医药治疗ALI提供理论依据.

目的 以CLP大鼠为模型,观察“炎调方”调节糖基化终末产物受体(RAGE)及其配体S100A12表达,探讨其对大鼠脓毒症急性肺损伤的保护作用.方法 将50只雄性SD大鼠随机分为对照组、生理盐水组、炎调方组、假手术组.采用盲肠结扎穿孔法制备大鼠脓毒症急性肺损伤模型,并于造模后6、12h予以相应药物灌胃.24 h后观察大鼠肺部病理改变;RT-PCR法检测RAGE及其配体S100A12 mRNA表达.ELISA法检测大鼠血浆sRAGE、S100A12及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,并作相关性分析.结果 SD大鼠CLP造模后大鼠肺部RAGE mRNA、S100A12 mRNA;外周血sRAGE、S100A12、TNF-α水平较对照组、炎调方组及假手术组显著升高(P＜0.01);造模大鼠经“炎调方”灌胃后上述指标均显著下降(P＜0.01).大鼠肺部RAGE及其配体S100A12 mRNA表达与外周血sRAGE及S100A12水平具有显著正性相关性(相关系数RS＞0.5).结论 “炎调方”可下调CLP诱导的脓毒症急性肺损伤大鼠肺部RAGE、S100A12 mRNA表达,从而降低大鼠外周血sRAGE、S100A12及TNF-α水平,可能是通过该作用机制抑制肺部炎症反应,从而发挥保护大鼠脓毒症急性肺损伤作用.

目的 观察炎调方对脓毒症大鼠肠黏膜屏障及Toll样受体9(TLR9)信号通路的影响.方法 将大鼠分为假手术组、模型组、地塞米松组及炎调方低、中、高剂量组,每组12只.进行盲肠结扎穿孔法建立脓毒症大鼠模型,术后24 h取材.苏木精-伊红染色(HE)观察各组大鼠小肠组织黏膜病理及通透性改变,进行Chiu评分,细菌移位率变化,检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及小肠组织中二胺氧化酶(DAO)、肠型脂肪酸结合蛋白(i-FABP)水平、实时荧光定量(qRT-PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测TLR9、MyD88、核转录因子-κB(NF-κB)表达.结果 与假手术组比较,模型组大鼠细菌移位率,小肠黏膜Chiu评分、TNF-α、IL-6水平、TLR9、MyD88、NF-κB表达显著升高,黏膜厚度、绒毛高度、DAO及i-FABP水平显著降低(P<0.05);与模型组比较,炎调方各剂量组和地塞米松组细菌移位率、Chiu评分、TNF-α、IL-6水平、TLR9、MyD88、NF-κB表达降低,黏膜厚度、绒毛高度及DAO、i-FABP水平升高,且炎调方各剂量组之间呈剂量依赖性(P<0.05);炎调方高剂量组和地塞米松组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 炎调方可能通过介导TLR9信号对脓毒症大鼠肠黏膜屏障起保护作用.