目的 探讨皮肤再生医疗技术湿润暴露疗法(MEBT)/湿润烧伤膏(MEBO)对糖尿病创面诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶1(Arg1)表达水平的影响.方法 选取48只Wistar雄性大鼠随机分为4组,空白组、MEBO组、贝复新组和对照组,每组各12只,其中空白组构建正常大鼠急性创面模型,MEBO组、贝复新组和对照组构建糖尿病大鼠创面模型.模型建立后,MEBO组和贝复新组分别给予创面外敷两层MEBO纱条和重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶(贝复新?)纱布,对照组和空白组以两层生理盐水纱布覆盖.通过HE染色、免疫荧光法和qRT-PCR检测观察各组大鼠造模后第3、7、14天创面愈合情况、组织形态学变化,以及创面组织中M1/M2型巨噬细胞标志物iNOS、Arg1 mRNA表达变化.结果 (1)造模后第7、14天,MEBO组、空白组、贝复新组愈合率均高于对照组(P＜0.05);(2)造模第3天,MEBO组、对照组和贝复新组iNOS mRNA表达水平高于空白组,而Arg1 mRNA表达水平低于空白组;造模后第7、14天,与对照组相比,MEBO组、贝复新组Arg1 mRNA表达水平较高,iNOS mRNA表达水平较低(P＜0.05).结论 MEBT/MEBO可加速糖尿病创面愈合,其作用机制可能与抑制iNOS、促进Arg1表达,参与调控巨噬细胞M1/M2极化有关.

目的 观察湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(MEBT/MEBO)对大鼠慢性难愈合创面组织中基质金属蛋白酶 2(MMP-2)、趋化因子配体1(CXCL1)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)蛋白表达的影响.方法 将72 只SD大鼠随机分为急性皮损组、慢性创面组、贝复新组、美宝组各18 只,除急性皮损组外,其余组皮下注射氢化可的松建立慢性难愈合创面,注射完成后用生理盐水清理创面,贝复新组创面敷贝复新凝胶,美宝组创面敷美宝烧伤膏,均每日上下午各换药1 次.观察各组大鼠伤后第3,7,14 天创面情况并取创面肉芽组织,Masson染色观察创面中胶原纤维生成情况,ELISA法检测肉芽组织中MMP-2 含量,免疫组化法检测创面组织中CXCL1、GM-CSF蛋白表达情况.结果 美宝组大鼠创面愈合速度快于慢性创面组和贝复新组.Masson染色显示各组创面组织中胶原纤维含量随伤后时间的延长逐渐增加;伤后第3,7 天,美宝组胶原纤维含量均明显高于慢性创面组和贝复新组(P均<0.05);伤后第14 天,各组胶原纤维含量比较差异均无统计学意义(P均>0.05).创面组织中MMP-2 含量,贝复新组随伤后时间延长而增加(P<0.05),美宝组随伤后时间延长而减少(P<0.05);伤后第3 天,美宝组创面组织中MMP-2 含量明显高于慢性创面组(P<0.05);伤后第7 天,美宝组和贝复新组创面组织中MMP-2 含量下降但与慢性创面组比较差异均无统计学意义(P均>0.05);伤后第14 天,美宝组创面组织中MMP-2 含量明显低于慢性创面组和贝复新组(P均<0.05).贝复新组伤后创面组织中CXCL1 表达平均光密度随伤后时间延长降低,伤后第 14 天明显低于伤后第3 天(P<0.05);伤后第3,7,14 天创面组织中GM-CSF表达平均光密度比较差异均无统计学意义(P均>0.05).美宝组伤后第 3,7,14 天创面组织中CXCL1 表达平均光密度比较差异均无统计学意义(P均>0.05);伤后第7,14 天创面组织中GM-CSF表达平均光密度均明显低于伤后第3 天(P均<0.05),且伤后第14 天明显低于伤后第7 天(P<0.05).慢性创面组、贝复新组、美宝组伤后第 3,7,14 天创面组织中CXCL1 表达平均光密度和伤后第7 天创面组织中GM-CSF表达平均光密度比较差异均无统计学意义(P均>0.05).伤后第3 天,美宝组创面组织中GM-CSF表达平均光密度与慢性创面组比较差异无统计学意义(P>0.05),但明显高于贝复新组(P<0.05);伤后第14 天,美宝组创面组织中GM-CSF表达平均光密度明显低于慢性创面组(P<0.05).结论 MEBT/MEBO 可能通过促进胶原纤维的生成,调节MMP-2 及GM-CSF、CXCL1 蛋白的表达,从而加快慢性难愈合创面组织的修复.

目的 探讨糖尿病大鼠难愈合创面再上皮化的病理变化及湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(MEBT/MEBO)对其干预的机制.方法 80 只Wistar雄性大鼠,随机取18 只作为急性创面组,其余大鼠建立糖尿病创面模型.将糖尿病创面造模成功的 54 只大鼠随机分为糖尿病创面组、MEBT/MEBO组、贝复新组,每组18 只.各组大鼠换药前均以呋喃西林液清洁创面,急性创面组和糖尿病创面组均外敷2 层生理盐水纱布,MEBT/MEBO组外敷2 层MEBO 纱条(0.2 g/cm2),贝复新组外敷2 层贝复新浸透纱布(60 IU/cm2),均每日换药2 次.分别于造模后第3,7,14 天,统计各组创面愈合率,HE染色和Masson染色观察创面病理变化,免疫荧光观察创面组织中层黏连蛋白3(LAMA3)蛋白表达情况,RT-PCR法检测创面组织中LAMA3、整合素α3(ITGA3)、E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)mRNA表达量.结果 造模后第7,14 天,糖尿病创面组创面愈合率均明显低于其他组(P均＜0.05),MEBT/MEBO组和贝复新组比较差异无统计学意义(P均＞0.05).HE染色和Masson染色显示:造模后第3 天,各组创面均处于炎症浸润状态;造模后第 7 天,糖尿病创面组创面处于炎症浸润状态,胶原纤维稀疏,边缘表皮增厚且无明显迁移,其他组炎症浸润均减轻,表皮增厚并明显迁移;造模后第14 天,糖尿病创面组创面仍有炎症浸润,表皮再上皮化不全,其他组创面表皮覆盖且再上皮化明显.造模后第3,7,14 天,糖尿病创面组创面组织中LAMA3 蛋白阳性表达光密度值和LAMA3、ITGA3 mRNA表达量均明显低于其他组(P均＜0.05),ZEB1 mRNA表达量均明显高于其他组(P均＜0.05),MEBT/MEBO组创面组织中LAMA3 蛋白阳性表达光密度值和LA-MA3、ITGA3、ZEB1mRNA表达量与贝复新组比较差异均无统计学意义(P均＞0.05).结论 糖尿病大鼠难愈合创面再上皮化延迟,而MEBT/MEBO能促进创面再上皮化修复,其机制可能与上调再上皮化区LAMA3、ITGA3 表达和下调ZEB1 表达有关.

目的 对比观察CO2激光打孔除痂疗法与耕耘疗法对中、小面积Ⅲ度烧伤创面痂皮的溶痂效果.方法 选择Ⅲ度烧伤患者20例(23处创面),在同一个创面上分均等的两部分(上下或左右),分别用耕耘疗法和CO2激光打孔除痂疗法,涂抹湿润烧伤膏2mm厚,4～5小时按烧伤湿润暴露疗法规范操作换药1次,直至痂皮彻底溶解.结果 20例患者(23处创面),经不同方法治疗后,创面痂皮均逐步液化排除,其中CO2激光组有5处创面经过2次激光操作,1处创面经过3次激光操作.CO2激光组痂皮开始液化时间、痂皮开始到液化高峰期时间、痂皮完全液化后时间均短于耕耘组,差异有显著性(P<0.01).结论 运用CO2激光技术,溶痂速度优于耕耘疗法,能明显缩短创面溶痂液化时间.

目的 观察烧伤湿润暴露疗法及湿润烧伤膏(MEBT/MEBO)治疗糖尿病足的临床疗效及其对创面组织血管内皮生长因子(VEGF)和表皮细胞生长因子(EGF)水平的影响.方法 将58例糖尿病足溃疡患者随机分为研究组和对照组,每组29例.研究组用MEBT/MEBO处理创面,对照组用重组牛碱性成纤维细胞生长因子处理创面.比较治疗后两组患者的临床疗效、创面局部症状评分,治疗前及治疗后 14 d、28 d 的创面面积、溃疡深度、创面 VEGF 和 EGF 水平.结果 治疗28 d后,研究组患者溃疡面积小于对照组、深度浅于对照组、局部症状体征评分低于对照组(均P＜0. 05);临床疗效优于对照组(P＜0. 05).治疗后第14天、28天,研究组VEGF及EGF水平均高于对照组(均P＜0. 05).结论 MEBT/MEBO治疗糖尿病足溃疡可以促进创面愈合,这可能与其上调创面生长因子水平有关.

目的 探讨湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)干预磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)-蛋白激酶B(Akt)-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路促进体表慢性难愈合创面的修复机制.方法 将160只雄性SD大鼠随机分为空白组24只、对照组(急性全层皮肤缺损组)34只和慢性难愈合创面组102只,慢性难愈合创面组(全层皮肤缺损+注射醋酸氢化可的松)造模成功后再随机分为模型组34只、贝复新组34只和MEBT/MEBO组34只.各组分别干预治疗后观察:(1)创面愈合情况,记录统计创面愈合时间;于第3、7、14天固定焦距拍照创面计算愈合率;(2)并同时于第3、7、14天取创面组织,石蜡切片HE常规染色观察第3、14天病理改变;(3)提取第3、7、14天创面组织蛋白,Western Blot法检测PI3K、p-Akt (S473)、p-mTOR(Ser2448)、p-p70 S6K (Thr389)、p-4E BP1 (Thr37/46)蛋白表达水平.结果 (1)与模型组比较,贝复新组及MEBT/MEBO组显著缩短大鼠创面愈合时间和提高创面愈合率(P＜0.05).(2)造模及干预治疗14天后,贝复新组及MEBT/MEBO组大鼠创面组织病理学形态学改善明显优于模型组.(3)与模型组比较,造模及干预治疗7天后贝复新组及MEBT/MEBO组大鼠创面组织PI3K和磷酸化Akt蛋白高表达(P＜0.05),MEBT/MEBO组mTOR及其下游效应分子p70 S6K和4E BP1磷酸化水平显著升高(P＜0.05).结论 MEBT/MEBO可促进体表慢性难愈合性创面的愈合,较好改善其组织病理形态学改变,其作用机制可能与激活PI3K-Akt-mTOR信号通路,促进大量与愈合相关的蛋白质合成有关.

美国当地时间2019年4月2日,北京荣祥再生医学研究所主办的"烧伤创疡再生医疗技术(原称烧伤湿润暴露疗法)30年成果与公益活动展"在纽约联合国4楼PDR厅隆重举行,来自克林顿基金会、奥巴马基金会、美国徐荣祥基金会、中国红十字基金会、芝加哥大学、哥伦比亚大学等非盈利机构以及阿里巴巴、华美银行、美宝集团等企业的领导及委员应邀出席了本次展会.

目的 探讨湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(MEBT/ME-BO)作用MMP-2和MMP-9促进慢性创面愈合的机制.方法 90只Wistar大鼠随机分为5组:MEBO组、贝复新组、慢性组、急性组和空白组,每组18只,构建慢性难愈合创面模型.采用ELISA、Western blot和qRT-PCR技术,检测d 3、14创面组织中MMP-2和MMP-9表达变化.结果 (1)与慢性组相比,MEBO组和贝复新组创面愈合时间明显缩短且愈合率升高(P<0.05);且生长情况及病理形态学改变更好;(2)与慢性组相比,d 3标本匀浆中,MEBO组和贝复新组MMP-2和MMP-9表达均增高(均P<0.05);而d 14,MEBO组和贝复新组MMP-2和MMP-9均降低(P<0.05);(3)与慢性组相比,d 3标本,MEBO组和贝复新组MMP-2和MMP-9表达量均增高(P<0.05);而d 14,MEBO组和贝复新组MMP-2和MMP-9表达均降低(P<0.05).结论 MEBT/MEBO促进慢性创面愈合可能与调控MMP-2和MMP-9,来参与ECM的降解与重塑相关.

目的 通过观察湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(MEBT/MEBO)是否通过同源性磷酸酶张力蛋白(PTEN)/磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)通路影响慢性难愈合创面中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达,探讨MEBT/MEBO的作用机制.方法 150只Wistar雄性大鼠被随机分为5组,美宝组(30只)、贝复新组(30只)、模型组(30只)、急性组(30只)和空白组(30只),并构建创面模型.于造模的第3、7、14天观察创面愈合情况,并采取创面标本组织,进行HE染色及Masson染色观察各组创面组织形态学变化和Western Blot检测各组PTEN、p-AKT、MMP-2及MMP-9蛋白表达情况.结果 (1)贝复新组及美宝组创面愈合时间显著短于模型组(P＜0.05),创面愈合率高于模型组(P＜0.05),且创面组织染色结果更好;(2)在造模第3天,贝复新组及美宝组中PTEN蛋白表达量明显低于模型组(P＜0.05),p-AKT、MMP-2、MMP-9蛋白表达高于模型组(P＜0.05);第14天,与模型组比较,贝复新组及美宝组中PTEN蛋白表达增高(P＜0.05),p-AKT、MMP-2、MMP-9蛋白表达降低(P＜0.05).结论 MEBT/MEBO可促进慢性难愈合创面的愈合,其可能作用机制是通过激活PTEN/AKT信号通路影响创面组织中MMP-2、MMP-9表达,及基底膜(BM)的降解与重塑.