目的 检测利奈唑胺不敏感革兰阳性球菌对新型噁唑烷酮类抗菌药物特地唑胺的敏感性,并探讨特地唑胺不敏感菌株的耐药机制.方法 收集临床分离非重复革兰阳性球菌 170 株,包括利奈唑胺耐药头状葡萄球菌 46 株、利奈唑胺敏感头状葡萄球菌 19 株、利奈唑胺不敏感肠球菌 55 株、利奈唑胺敏感肠球菌 12 株、甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌 19 株、甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌 18 株、利奈唑胺耐药金黄色葡萄球菌 1 株.采用微量肉汤稀释法检测所有菌株对特地唑胺和利奈唑胺的最小抑菌浓度(MIC),并比较两种药物的抗菌活性.采用PCR结合Sanger测序技术分析特地唑胺不敏感革兰阳性球菌cfr、optrA基因携带情况及 23S rRNA V区突变.结果 利奈唑胺耐药头状葡萄球菌(MIC90＞256 μg/mL)对特地唑胺的MIC值为 4～32 μg/mL;利奈唑胺不敏感肠球菌(MIC值4～16 μg/mL)中,特地唑胺的敏感率为10.9%,其MIC值为0.5～2 μg/mL;1 株利奈唑胺耐药金黄色葡萄球菌对特地唑胺敏感,MIC值为 0.5 μg/mL.特地唑胺对利奈唑胺敏感的金黄色葡萄球菌和肠球菌的MIC值均为 0.5 μg/mL,对利奈唑胺敏感头状葡萄球菌的MIC值为0.125 μg/mL.耐药基因分析显示,特地唑胺耐药头状葡萄球菌cfr基因携带率为 87.0%(40/46),23S rRNA V区G2576T的突变率为 100%;特地唑胺不敏感肠球菌optrA基因携带率为85.7%(42/49),显著高于特地唑胺敏感株的 22.2%(P＜0.001);1 株利奈唑胺耐药特地唑胺敏感的金黄色葡萄球菌携带cfr基因.结论 对于利奈唑胺不敏感的革兰阳性球菌,特地唑胺的抗菌活性是利奈唑胺的 8～32 倍,其耐药机制可能与携带optrA基因及 23S rRNA V区G2576T突变有关.

目的 抗菌药磷酸特地唑胺的工艺研究.方法 QbD理念指导工艺研究,以中间体A和焦磷酸四苄酯为原料合成磷酸特地唑胺.结果 以58％的总收率实现了磷酸特地唑胺的制备,HPLC纯度为99.2％.结论 新开发的工艺反应条件温和,有效地避免了水解杂质、二聚体杂质的产生,保证了磷酸特地唑胺的产品质量.

目的 建立同时测定磷酸特地唑胺原料药中甲醇、二氯甲烷、乙酸乙酯和二氧六环4种有机溶剂残留量的方法.方法 采用顶空毛细管气相色谱法.色谱柱为DB-624毛细管柱,检测器为氢火焰离子化检测器(FID),柱温采用程序升温(初始温度50℃,保持5min,以15℃/min的速度升温至220℃,再保持5min),进样口温度为200℃,检测器温度为250℃,载气使用高纯氮气,流速为3.0mL/min,分流比设置为5∶1,顶空瓶温度设置为100℃,平衡时间设定为30min,顶空进样体积为1.0mL.结果 甲醇、二氯甲烷、乙酸乙酯和二氧六环4种有机溶剂峰之间的分离度符合要求,线性关系良好(r≥0.9990),定量限分别为0.5716、0.8190、0.3625和0.6133μg/mL,检测限分别为0.1715、0.2457、0.1087和0.1840μg/mL;精密度试验的RSD＜2.0％,稳定性、重复性试验中只检出甲醇,RSD＜2.0％;平均回收率在97.12％～104.83％范围内,RSD分别为0.92％、1.64％、0.70％和1.72％,3批磷酸特地唑胺原料药检测结果均符合限度要求.结论 该方法快速、灵敏、准确,适用于磷酸特地唑胺原料药中残留溶剂的检测.

为比较分析耐多药结核分枝杆菌(MDR-MTB)对利奈唑胺(Lzd)和特地唑胺(Tzd)的药物敏感性,笔者采取直接抽选法选取2018年1-11月间重庆市公共卫生医疗救治中心中心实验室培养分离并经药物敏感性试验(简称“药敏试验”)鉴定为MDR-MTB的40株菌株,采用微孔板法测定Lzd和Tzd的最低抑菌浓度(MIC),并分析相关结果.结果 发现,Lzd对MDR-MTB的MIC的中位数(四分位数)为0.500 (0.500,1.000) mg/L,其中87.5％(35/40)的菌株MIC处于0.500～1.000 mg/L;Tzd对MDR-MTB的MIC的中位数(四分位数)为0.250(0.250,0.250) mg/L,其中87.5％(35/40)的菌株MIC处于0.125～0.250 mg/L.Lzd对MDR-MTB的MIC50和MIC90分别为0.500、1.000 mg/L;Tzd对MDR-MTB的MIC50和MIC90均为0.250mg/L.Tzd的MIC明显小于Lzd的MIC,差异有统计学意义(Z=-5.51,P＜0.001).参照比例法药敏试验结果,40株MDR-MTB临床分离株可分为13株MDR-MTB,20株前广泛耐药结核分枝杆菌(pre-XDR-MTB)和7株广泛耐药结核分枝杆菌(XDR-MTB).Lzd对MDR-MTB、pre-XDR-MTB、XDR-MTB菌株的MIC中位数(四分位数)均为0.500(0.500,1.000) mg/L;Tzd对MDR-MTB、pre-XDR-MTB菌株、XDR-MTB菌株的MIC中位数(四分位数)均为0.250(0.250,0.250) mg/L,差异均无统计学意义(Lzd:H=0.84,P=0.659;Tzd:H=0.59,P=0.746).可见,Lzd和Tzd对MDR-MTB菌株均有很好的杀菌效果,Tzd具有较Lzd更好的抗结核效果.

目的:通过构建耐甲氧西林表皮葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus epidermidis,MRSE)植入物相关性骨髓炎大鼠模型,观察特地唑胺对MRSE相关性骨髓炎的治疗效果.方法:将预先定植MRSE生物膜的不锈钢丝植入大鼠的胫骨近端,感染1周后将94只大鼠随机分为6组,分别为对照组(n=18)、特地唑胺治疗组(n=16)、特地唑胺-利福平联合治疗组(n=15)、利福平治疗组(n=15)、万古霉素-利福平联合治疗组(n=15)以及万古霉素治疗组(n=15).在建模感染后1周后以及治疗完成后,分别对每组中的5只大鼠进行骨和钢丝的细菌定量培养以及骨组织的苏木精-伊红染色.结果:感染1周后,胫骨培养的葡萄球菌中位数为4.89 lg CFU/g[四分位数间距为(3.83～5.33)lg CFU/g],并且每组大鼠的植入钢丝均检出葡萄球菌.药物治疗3周后,骨培养的葡萄球菌的中位数为3.70 lg CFU/g.除单用万古霉素治疗组(2.78 lg CFU/g)外,所有治疗组大鼠骨内葡萄球菌数量均显著低于未治疗组,利福平治疗组、特地唑胺-利福平联合治疗组以及万古霉素-利福平联合治疗组均未检测到葡萄球菌.结论:MRSE植入物相关性骨髓炎大鼠模型对利福平、特地唑胺及万古霉素敏感.特地唑胺联合利福平在MRSE外源性骨髓炎大鼠模型中具有较好的治疗作用.

特地唑胺(tedizolid)是第二代噁唑烷酮类抗菌药,于2014年6月由美国食品和药物管理局(FDA)批准上市,用于成人急性细菌性皮肤及皮肤结构感染.特地唑胺不仅可以静脉输注,还可以口服给药,具有抗菌活性强、口服生物利用度高、半衰期长及给药剂量无需根据清除器官的功能或给药途径进行调整等优点,并对某些万古霉素、利奈唑胺耐药的菌株也具有很强的体外抗菌活性,是较为理想的抗菌药.

为控制磷酸特地唑胺的质量以及推动其质量标准的建立,制备了磷酸特地唑胺5种杂质:[(R)-3-[3-氟-4-[6-(2-甲基-2H-四唑-5-基)吡啶基-3-基]苯基]-2-氧唑烷-5-基]甲基三氢二磷酸酯(有关物质A);(5R)-3-[3-氟-4-[6-(2-甲基-2H-四唑-5-基)-3-毗啶基]苯基]-5-(氯甲基)-2-唑烷酮(有关物质B);双[[(R))-3-[3-氟-4-[6-(2-甲基-2H-四唑-5-基)吡啶-3-基]苯基]-2-氧唑烷-5-基]甲基]氢磷酸酯(有关物质C);二磷酸P,P'-二[[(R))-3-[3-氟-4-[6-(2-甲基-2H-四唑-5-基)-吡啶-3-基]苯基]-2-氧唑烷-5-基]甲基]酯(有关物质D);(5R)-3-[3-氟-4-[6-(2-甲基-2H-四唑-5-基)-1-氧代-3-吡啶基]苯基]-5-[(磷酰氧基)甲基]-2-唑烷(有关物质E),其中有关物质A、D、E未见文献报道.5种杂质的结构均经HRMS、1H NMR确证.

目的 评估2种磷酸特地唑胺片200 mg在中国健康受试者中的生物等效性及安全性.方法 本研究采用开放、随机、双周期、双交叉设计,空腹组和餐后组均纳入24例健康成年受试者分别单次口服磷酸特地唑胺片受试制剂或参比制剂200 mg.用LC-MS/MS法测定血浆中特地唑胺的浓度,用SAS 9.4处理血浆中特地唑胺的浓度-时间数据,以非房室模型法计算特地唑胺药代动力学参数,并进行生物等效性及安全性评价.结果 空腹试验受试制剂和参比制剂的特地唑胺Cmax分别为(2405.00±433.00)和(2409.00±469.00)ng·mL-1,tmax分别为3.00和1.50 h,t1/2分别为(9.84±1.30)和(9.86±1.05)h,AUC0-t分别为(26578.00±7127.00)和(26322.00±6358.00)ng·mL-1·h,AUC0-∞分别为(27612.00±7706.00)和(27301.00±6800.00)ng·mL-1·h;餐后试验受试制剂和参比制剂的特地唑胺Cmax分别为(2218.00±426.00)和(2201.00±343.00)ng·mL-1,tmax分别为3.25和3.00 h,t1/2分别为(9.92±1.19)和(10.03±1.29)h,AUC0-t分别为(28635.00±5407.00)和(28605.00±5677.00)ng·mL-1·h,AUC0-∞分别为(29784.00±5878.00)和(29790.00±6200.00)ng·mL-1·h.空腹组和餐后组受试制剂和参比制剂主要药代动力学参数的几何均值比值的90％置信区间均落在80.00％ ～125.00％.空腹组和餐后组不良事件发生率分别为20.83％和45.83％.结论 中国受试者在空腹与餐后状态下,单次口服受试和参比磷酸特地唑胺片均具生物等效性,且安全性良好.

目的:注射用磷酸特地唑胺用于特定的敏感细菌引起的成人急性细菌性皮肤和皮肤结构感染,被美国FDA批准磷酸特地唑胺上市,临床研究也进入了临床Ⅱ期,用于严重革兰氏阳性菌感染的治疗.该药尚未在中国上市.未被《中国药典》2015年版收录,亦没有与之相关的质量标准,本文建立了该药品的检验方法,以完善医药市场对药物的质量监管要求.方法:参照中国药典2015年版四部通则试验要求,拟定了质量标准,并对细菌内毒素的检查方法进行了方法学验证.结果:拟定本品的细菌内毒素限值为1.5 EU·mg-1,当采用灵敏度为0.5 EU·mL-1的鲎试剂,样品浓度为含磷酸特地唑胺4 mg·mL-1时,对内毒素与鲎试剂的反应无干扰.结论:当采用两个鲎试剂生产厂家的试剂对样品进行干扰试验,灵敏度为0.5 EU·mL-1,样品浓度为含磷酸特地唑胺4 mg·mL-1时,对内毒素与鲎试剂的反应无干扰.此限值为可靠限值.