目的:观察长链非编码RNA(lncRNA)特异性核基质结合区结合蛋白1(SATB1)-AS1在前列腺癌中的表达，并分析lncRNA SATB1-AS1与SATB1的相关性。方法:采用荧光原位杂交(FISH)方法检测前列腺癌及其癌旁组织中SATB1-AS1表达。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测4株前列腺癌细胞株(PC3、DU145、22RV1、LNCAP)和人正常前列腺上皮细胞株(RWPE1)中SATB1-AS1表达。应用TCGA数据库及整合基因组浏览器(IGV)软件比对SATB1与SATB1-AS1的相关性。结果:荧光杂交结果显示，SATB1-AS1在定位在细胞核、细胞质。RT-qPCR结果显示在前列腺癌细胞22RV1、LNCAP中SATB1-AS1表达水平明显高于DU145、PC3(4.20±1.25、42.58±8.30和0.50±0.02、1.58±0.33， F＝22.512， P<0.05)。TCGA数据库分析SATB1-AS1与SATB1呈正相关( r＝0.670， P<0.001)；IGV软件比对美国国立生物技术信息中心(NCBI)内发现SATB1启动子序列与SATB1-AS1部分序列完全重合。 结论:SATB1-AS1在前列腺中表达，且可能通过与SATB1基因启动子结合进而调控SATB1基因表达。

目的:探讨微小RNA(miRNA，miR)-200a在前列腺癌组织中的表达及与临床参数的相关性，并在体内研究miR-200a对裸鼠移植瘤生长的影响及机制。方法:应用荧光原位杂交(FISH)技术检测2018年1月至2019年8月在徐州医科大学附属医院接受手术切除的54例经病理证实的前列腺癌的组织标本及前列腺增生组织标本中miR-200a的表达，并分析与病理分级、Gleason评分、前列腺特异抗原(PSA)水平、年龄之间的相关性；建立小鼠皮下移植瘤模型(购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司)，分3组：转染miR-200a高表达质粒的DU145细胞组、转染表达miR-200a＋特异性核基质结合区结合蛋白1(SATB1)的DU145细胞质粒组、未转染的DU145细胞组，取0.2 ml细胞悬液接种于小鼠右后臀部皮下，每隔5 d测量皮下移植瘤体积，绘制裸鼠移植瘤生长曲线，采用 χ2检验及 t检验，分析3组移植瘤体积的统计学差异；免疫组织化学和蛋白质印迹法(Western blot)法检测移植瘤SATB1的表达变化。多样本间比较采用单因素方差分析，组间比较采用 t检验。 结果:miR-200a在前列腺癌组织中的阳性率为27.8%(15/54)，在前列腺增生组织中的阳性率为90.0%(9/10)，差异有统计学意义( χ2＝11.409， P<0.05)，且前列腺癌组织中miR-200a表达强度与前列腺癌的病理分级和临床分期及转移呈负相关，接种细胞后，对照组的移植瘤的SATB1的表达量高于miR-200a高表达组，转染miR-200a高表达质粒组的移植瘤最终体积为(615.39±31.05) mm 3，而未转染的DU145细胞组瘤体体积为(1 489.09±192.54) mm 3，差异有统计学意义( t＝7.759， P<0.05)，说明在体内实验裸鼠皮下成瘤中miR-200a能够显著抑制前列腺癌裸鼠移植瘤的生长，且免疫组织化学实验结果提示miR-200a高表达组和miR-200a＋SATB1共表达组的SATB1表达较未转染组低，表明miR-200a可以抑制SATB1蛋白表达，亦表明SATB1是miR-200a的靶基因。 结论:miR-200a在前列腺癌组织中呈低表达，与前列腺癌的临床进展及转移相关，且miR-200a能够下调SATB1的表达，抑制肿瘤生长。

目的:观察荷载核基质结合区结合蛋白1(SATB1)短发卡RNA(shRNA)的溶瘤腺病毒(ZD55-SATB1)联合多西他赛(DTX)在体外对激素敏感前列腺癌LNcap细胞的影响，并探讨作用机制。方法:将LNcap细胞(购自上海中国科学院细胞库)分为5组进行干预，分别为磷酸盐缓冲液组(PBS)、多西他赛化疗药物组(DTX为2 μg/L)、病毒对照组[ZD55-EGFP为10感染复数(MOI)]、病毒治疗组(ZD55-SATB1为10 MOI)、病毒联合化疗药物组(ZD55-SATB1＋DTX为5 MOI＋1 μg/L)。Transwell检测细胞迁移和侵袭能力变化；脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡；蛋白质印迹法(Western blot)检测SATB1、腺病毒早期区1A基因(E1A)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)与基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-8与bcl-2的表达。采用 t检验。 结果:Transwell迁移结果显示，ZD55-SATB1联合DTX组干预LNcap细胞24 h后的细胞穿膜数为(28.20±3.19)个，与ZD55-SATB1组[(39.60±4.98)个]( t＝4.309， P<0.01)、ZD55-EGFP组[(52.60±6.02)个]( t＝8.001， P<0.01)、DTX组[(65.50±5.12)个]( t＝13.710， P<0.01)、PBS组为(106.60±5.18)个( t＝28.820， P<0.01)比较，病毒与化疗药物治疗组穿膜细胞数显著降低，细胞迁移能力显著降低，差异有统计学意义；Transwell侵袭实验结果：联合组穿透Matrigel胶进入小室下层的细胞数为(23.60±3.58)个，与ZD55-SATB1组[(32.40±5.08)个]( t＝3.088， P<0.05)、ZD55-EGFP组[(39.60±2.70)个]( t＝7.610， P<0.01)、DTX组[(44.60±4.62)个]( t＝7.815， P<0.01)、PBS组为(98.20±4.32)个( t＝28.820， P<0.01)比较，细胞侵袭能力明显降低，差异有统计学意义。TUNEL结果显示，各治疗组细胞凋亡率均高于PBS对照组[(5.92±0.90)%]，但联合组[(34.48±4.25)%]与ZD55-SATB1组[(28.12±2.50)%]( t＝2.582， P<0.05)、ZD55-EGFP组[(23.30±3.03)%]( t＝4.752， P<0.01)、DTX组[(22.35±2.44)%]( t＝4.956， P<0.01)比较，细胞凋亡更加明显，差异有统计学意义。Western blot结果显示，联合组内SATB1蛋白表达下调，E-cadherin表达上调，Vimentin和MMP-2表达下调，Caspase-8和Caspase-3表达上调，bcl-2表达下调更为显著。E1A基因在联合组内正常表达，说明联合使用DTX不影响腺病毒复制增殖。 结论:ZD55-SATB1联合DTX在体外可以有效抑制LNcap细胞的迁移和侵袭能力，并诱导肿瘤细胞凋亡，效果优于单独使用ZD55-SATB1或DTX，其机制可能是通过上调E-cadherin同时下调Vimentin和MMP-2的表达抑制迁移侵袭能力，抑制了上皮-间充质转化(EMT)进程，并通过上调Caspase-8和Caspase-3，下调bcl-2诱导肿瘤凋亡。

目的:观察DD3启动子、E1B55KD缺失双调控并荷载核基质结合区结合蛋白1(SATB1)短发卡RNA(shRNA)的条件增殖腺病毒DD3-ZD55-SATB1对激素依赖性前列腺癌LNcap细胞裸鼠移植瘤的治疗作用。方法:构建BALB/c-nu雄性裸鼠(北京维通利华公司)前列腺癌LNCaP细胞皮下移植瘤模型，当肿瘤体积为100 mm 3系统随机分成3组：空白对照组(PBS组)、病毒对照组(DD3-ZD55组)、病毒治疗组(DD3-ZD55-SATB1组)。测量肿瘤体积，绘制肿瘤时间-体积生长曲线。苏木精-伊红(HE)染色观察肿瘤细胞的生长。免疫组织化学检测肿瘤组织中半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-8和B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)蛋白的表达。原位缺口末端标记法(TUNEL)法检测肿瘤组织内细胞凋亡。采用单因素方差分析进行多组件比较。 结果:成功构建裸鼠LNcap细胞移植瘤模型。病毒治疗组、病毒对照组和空白对照组移植瘤终体积分别为(844.48±91.04)、(1 098.93±60.45)、(1 679.83±125.56) mm 3，治疗组肿瘤体积显著小于对照组，差异有统计学意义( P<0.05)。HE染色结果显示，治疗组和病毒对照组的肿瘤组织中均可见较多的死细胞，细胞裂解成碎片，细胞核固缩碎裂，其正常的组织结构消失，但治疗组更加明显。免疫组织化学法显示，治疗组与对照组比较，Caspase-3、Caspase-8蛋白表达量增多，bcl-2蛋白表达量降低，差异有统计学意义( P<0.05)。TUNEL结果显示，病毒治疗组的肿瘤组织切片荧光下均可见较多红色信号，提示细胞凋亡，与对照组比较，差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:DD3-ZD55-SATB1可以有效抑制激素依赖性前列腺癌LNcap细胞裸鼠移植瘤的生长，并通过Caspase-8介导的内源性凋亡途径诱导肿瘤细胞凋亡。

目的:观察荷载核基质结合区结合蛋白1(SATB1)短发卡RNA(shRNA)溶瘤腺病毒联合多西他赛(DTX)对激素依赖性前列腺癌LNCaP细胞株裸鼠移植瘤的治疗作用。方法:构建裸鼠前列腺癌LNCaP细胞皮下移植瘤模型(裸鼠购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司)，随机分成4组：空白对照组(PBS组)、化疗组(DTX组，20 mg/kg)、病毒治疗组(ZD55-SATB1组，1×10 8 pfu)、病毒联合化疗组(ZD55-SATB1＋DTX组，5×10 7 pfu＋10 mg/kg)。绘制肿瘤时间-体积生长曲线。苏木精-伊红(HE)染色观察肿瘤细胞的生长。免疫组织化学检测肿瘤组织中半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-8、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)和CD31蛋白的表达。脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测肿瘤组织细胞凋亡。采用方差分析(One way-ANOVA)，组间比较采用 t检验。 结果:成功构建裸鼠LNCaP细胞移植瘤模型。病毒联合化疗组、病毒治疗组、化疗组和空白对照组移植瘤终体积分别为(616.23±101.56)、(938.59±102.98) mm 3( t＝3.860， P<0.05)、(1 206.92±202.17) mm 3( t＝4.522， P<0.05)和(2 254.05±188.99) mm 3( t＝13.220， P<0.01)，差异均有统计学意义。HE染色结果显示，病毒联合化疗组、病毒治疗组和化疗组的肿瘤组织中均可见较多的死细胞，细胞裂解成碎片，细胞核固缩碎裂，其正常的组织结构消失，但联合组的肿瘤细胞坏死更明显。免疫组织化学法结果显示化疗组、病毒治疗组、病毒联合化疗组内Caspase-8、Caspase-3、bcl-2和CD31的相对蛋白表达量分别为2.11±0.41、1.67±0.21、0.65±0.06、0.78±0.05( t＝4.136、10.930、5.523、8.162， P<0.05)；2.39±0.33、2.61±0.51、0.56±0.06、0.68±0.04( t＝5.594、4.119、3.242、6.010， P<0.05)；3.42±0.37、3.61±0.23、0.44±0.02、0.50±0.04，联合组与单用药物或病毒组比较，Caspase-8、Caspase-3蛋白表达量增多，bcl-2蛋白表达量降低，差异有统计学意义。联合组移植瘤组织中CD31蛋白的表达量与单用药物或病毒组比较显著降低，说明联合组能有效促进促凋亡蛋白的表达，降低抑凋亡蛋白的表达，且在一定程度上抑制肿瘤组织血管的生成。TUNEL结果显示：化疗组、病毒治疗组、病毒联合化疗组的肿瘤组织切片荧光下均可见较多红色信号，提示细胞凋亡，各组凋亡率分别为(26.17±2.97)%( t＝9.557， P<0.01)、(35.68±3.46)%( t＝3.931， P<0.05)、(44.07±1.30)%，联合组内凋亡细胞更为明显，差异有统计学意义。 结论:溶瘤腺病毒和多西他赛均可抑制前列腺癌LNCaP细胞皮下移植瘤的生长，且联合效果优于单一用药，其可能的机制包括抑制肿瘤细胞生长、诱导凋亡、抑制血管生成。

目的:观察沉默长链非编码RNA(lncRNA)特异性核基质结合区结合蛋白1(SATB1)-AS1对前列腺癌细胞增殖和迁移侵袭能力的影响，探究其机制。方法:采用小干扰RNA(siRNA)沉默前列腺癌细胞株(22RV1、LNCAP)内SATB1-AS1表达。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测细胞的体外增殖能力；平板克隆实验检测单细胞克隆形成能力；TransWell实验检测细胞体外迁移侵袭能力；通过蛋白质印迹法(Western blot)，检测细胞经不同处理后上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白表达情况。两组间比较采用独立样本 t检验，多组间比较采用单因素方差分析(ANOVA)检验。 结果:成功沉默22RV1与LNCAP细胞内SATB1-AS1的表达。CCK-8结果显示，敲低组细胞增殖能力低于相应对照组(0.875±0.021、1.288±0.009和1.237±0.036、1.496±0.041， F＝18.657， P<0.05)。平板克隆结果显示，敲低组细胞的单个细胞克隆形成能力低于相应对照组细胞(45.00±5.21、50.00±3.67和87.00±5.78、108.00±10.61， F＝41.933， P<0.05)。Transwell实验结果显示，相应对照组细胞的迁移、侵袭能力高于敲低组细胞(249.00±33.20、156.00±22.31和138.00±28.15、98.00±10.52， F＝75.720， P<0.05)。 结论:沉默SATB1-AS1抑制前列腺癌细胞增殖、侵袭迁移及克隆能力。

目的:探讨特异性核基质结合区结合蛋白1(SATB1)和微小RNA(microRNA，miR)-495-3P在甲状腺乳头状癌(PTC)侵袭和转移中的作用。方法:2019年9月至2020年4月，福建医科大学附属第二医院甲状腺乳腺外科采集肿瘤标本，将取得的40对PTC组织作为实验组，与之对应40对癌旁正常组织作为对照组。采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测40对PTC组织及癌旁正常组织中SATB1和miR-495-3p的表达水平，用蛋白质印迹法(Western blot)检测16对PTC组织及癌旁正常组织中SATB1蛋白的表达水平。用si-SATB1转染人甲状腺乳头状癌细胞(TPC)-1后，用RT-qPCR、Western blot检测TPC-1中SATB1、miR-495-3p的表达水平，并用Pearson分析法进行相关性分析，转染si-NC的TPC-1为阴性对照组，转染si-SATB1的TPC-1为实验组。分别用细胞计数试剂盒(CCK-8)法、流式细胞计数、Trsnawell法检测敲低SATB1的表达对TPC-1增殖、凋亡、周期、侵袭、迁移能力的影响。两样本比较采用 t检验。 结果:与癌旁正常组织比较，SATB1 mRNA和SATB1蛋白在PTC组织中呈高表达(1.27±0.14比0.86±0.23， t＝8.484， P<0.01；0.94±0.10比0.37±0.15， t＝11.890， P<0.01)，差异有统计学意义，miR-495-3p呈低表达(0.78±0.11比1.37±0.64， t＝5.741， P<0.01)，差异有统计学意义。SATB1和miR-495-3p的异常表达均与PTC淋巴结转移明显相关(1.34±0.14， t＝2.576， P<0.05；0.74±0.07， t＝2.187， P<0.05)。PTC中SATB1和miR-495-3p的表达水平呈负相关( r＝-0.497， P<0.01)。干扰TPC-1中SATB1的表达会导致miR-495-3p的表达水平高于阴性对照组(8.59±0.16比1.01±0.02， t＝81.420， P<0.01)，并且抑制细胞的增殖能力(0.39±0.01、0.52±0.01、0.58±0.03比0.43±0.01、0.60±0.01、0.72±0.01， t＝4.899、9.798、7.668， P<0.01)、促进细胞凋亡[(42.8±2.1)%比(7.6±0.7)%， t＝27.540， P<0.01]、减弱细胞侵袭(75.33±3.51比206.33±5.51， t＝34.730， P<0.01)、迁移(202.00±7.81比528.33±5.03， t＝60.840， P<0.01)能力并发生G 2/M周期阻滞[(36.7±1.2)%比(15.6±0.9)%， t＝24.360， P<0.01]，差异均有统计学意义。 结论:miR-495-3p可能作为1种调节因子和SATB1共同参与了PTC侵袭、转移的过程。

目的 探讨棕色脂肪组织(brown adipose tissue,BAT)中Y盒蛋白 3(Y-box binding protein 3,YBX3)水平对小鼠产热和能量消耗的影响作用机制.方法 将小鼠置于 4℃环境作为冷刺激方法.用慢病毒侵染法构建过表达YBX3 或者抑制YBX3 表达的人血管基质组分细胞系.测量细胞的耗氧率用于评估细胞的线粒体功能.向小鼠BAT注射YBX3 的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)构建抑制小鼠BAT中YBX3 表达的模型.检测小鼠的O2 消耗速率、CO2 释放速率和能量消耗速率用于评估小鼠能量代谢情况.采用qRT-PCR、Western blotting、免疫荧光染色法检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子 1α(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1α,PGC-1α)、解偶联蛋白 1(uncoupling protein 1,UCP1)和YBX3 基因的表达.采用苏木精-伊红法染色检测BAT中脂肪细胞脂滴大小.采用RNA结合蛋白免疫沉淀提取与YBX3 特异性结合的mRNA.采用二代测序方法鉴定 mRNA.采用双荧光素酶报告基因系统检测 YBX3 与目的序列结合的情况.结果 在寒冷刺激下野生型小鼠BAT中YBX3 的表达显著增加(P<0.05).过表达YBX3 的人血管基质组分细胞系诱导为成熟棕色脂肪细胞后可以促进产热基因PGC-1α和UCP1 的表达(P<0.05).抑制YBX3 表达的人血管基质组分细胞系诱导为成熟棕色脂肪细胞后可以抑制PGC-1α和UCP1 的表达(P<0.05)、抑制线粒体氧化磷酸化(P<0.05).与对照组相比,小鼠注射si-Ybx3 之后能量消耗显著降低(P<0.05),在寒冷环境难以维持体温(P<0.05),产热基因表达被显著抑制(P<0.01),BAT中脂肪细胞脂滴大小显著增加(P<0.05).与在 25℃相比,4℃环境刺激下BAT中YBX3 在细胞核中的表达显著增加(P<0.05).YBX3 能够特异性地与PGC-1αmRNA 3'非翻译区特定位点相结合(P<0.05).YBX3 能够特异性地与 PGC-1α 和 UCP1 启动子区域相结合(P<0.05).结论 BAT中YBX3 能够通过调控PGC-1α和UCP1 的表达影响产热和能量代谢.

目的 研究特异性核基质结合区结合蛋白1(SATB1)和核转录因子kappaB p65(NF-κB p65)蛋白的表达,探讨其表达与乳腺癌发生、发展的相关性.方法 应用免疫组织化学染色法检测80例乳腺癌组织样本中的蛋白SATB1和NF-κB p65的表达,分析其相互关系,并探讨其与乳腺癌临床特征之间的关系.结果 80例乳腺癌组织样本中SATB1和NF-κB p65的阳性表达率分别为70.00%和56.25%.SATB1和NF-κB p65的表达与肿瘤大小、组织学分级、ER受体状态和淋巴结转移有关,与年龄和TNM分期无关.SATB1和NF-κB p65在乳腺组织中的表达呈明显正相关.结论 SATB1和NF-κB p65在乳腺癌组织中协同高表达,与乳腺癌患者的临床特征存在密切联系.

目的 探讨特异性核基质结合区结合蛋白-1(SATB1)、细胞核增殖抗原(Ki-67)在膀胱移行细胞癌(BTCC)表达及临床意义.方法 应用免疫组织化学技术检测60例膀胱癌和30例正常膀胱组织中SATB1、Ki-67基因的表达,分析SATB1和Ki-67基因之间及与病理分级、临床分期之间的相关性.结果 60例膀胱癌组织SATB1阳性表达率85.0％ (51/60),而30例膀胱正常组织中无阳性表达,差异有统计学意义(P=0.000);膀胱癌组织中Ki-67阳性表达率为80.0％ (48/60),膀胱正常组织中无阳性表达,差异有统计学意义(P=0.000);SATB1和Ki-67在膀胱癌组织中的表达强度与膀胱癌的病理分级(P=0.001、0.002)、临床分期(P =0.003、0.007)以及淋巴结转移(P=0.001、0.002)呈正相关,同时膀胱癌中SATB1与Ki-67表达呈正相关(r=0.601,P=0.002).结论 SATB1、Ki-67基因的表达与膀胱癌的发生和进展有关,联合检测SATB1、Ki-67基因有助于评价膀胱癌的进展和预后..