目的:研究双醋瑞因对眼表常见病原菌的体外抑菌作用。方法:采集于河南省立眼科医院就诊的眼表感染患者中分离培养的革兰阳性球菌和杆菌、革兰阴性杆菌、丝状真菌及念珠菌。采用K-B琼脂纸片扩散法测定双醋瑞因对病原菌的体外抑菌活性，采用微量液基稀释法进行最低抑菌浓度(MIC)定量测定。以左氧氟沙星和伏立康唑分别为抗细菌药物和抗真菌药物对照。结果:双醋瑞因对眼表分离的42株革兰阳性球菌和10株革兰阳性杆菌均有明显抑菌活性，双醋瑞因与左氧氟沙星对表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、中间葡萄球菌和革兰阳性棒状杆菌抑菌圈直径比较，差异无统计学意义(均P>0.05)。双醋瑞因对眼表分离的23株革兰阴性杆菌，10株丝状真菌和3株念珠菌均无抑制作用。双醋瑞因对表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、中间葡萄球菌及其他葡萄球菌的MIC范围为1～32 μg/ml，MIC 90分别为16、8、16、32 μg/ml。 结论:双醋瑞因对眼表分离的革兰阳性葡萄球菌和棒状杆菌具有体外抑菌活性，对致病革兰阴性杆菌和真菌无抑菌活性。

目的:研究宁夏地区不同年龄人群幽门螺杆菌( H. pylori)感染者对常用抗菌药物的耐药性。 方法:选择2021年7至12月就诊于宁夏回族自治区人民医院、宁夏中西医结合医院、固原市原州区人民医院、吴忠市人民医院、石嘴山市第二人民医院、中卫市人民医院、银川市第一人民医院消化内科 H. pylori专病门诊，既往无 H. pylori治疗史，经 14C尿素呼气试验证实为 H. pylori感染，且行胃镜检查的患者1 040例。在胃镜下留取胃黏膜标本行 H. pylori体外培养，获得的 H. pylori菌株行 H. pylori耐药表型检测。药敏试验采用Kirby-Bauer纸片琼脂扩散法。记录患者既往抗生素使用情况，分析≤44、45~59、≥60岁组患者 H. pylori的原发耐药特征。统计学方法采用卡方检验。 结果:对1 040例 H. pylori感染者的胃黏膜标本行 H. pylori体外培养，共获得538株 H. pylori菌株，培养阳性率为51.7%，187例患者可提供既往抗生素使用史。对甲硝唑、克拉霉素、左氧氟沙星的原发耐药率高，耐药率分别为95.5%(514/538)、44.6%(240/538)、45.4%(244/538)，未发现对阿莫西林、呋喃唑酮、四环素耐药；双重耐药率为36.4%(196/538)，以甲硝唑+克拉霉素、甲硝唑+左氧氟沙星耐药株为主，耐药率分别为17.8%(96/538)、18.2%(98/538)；三重耐药率为25.5%(137/538)，均为甲硝唑+克拉霉素+左氧氟沙星耐药株。既往使用过喹诺酮类、大环内酯类药物的 H. pylori感染者对左氧氟沙星、克拉霉素的原发耐药率分别达到了60.9%(28/46)和63.4%(83/131)，高于未使用过相应药物患者的耐药率[41.8%(59/141)和39.3%(22/56)]，差异均有统计学意义( χ2＝5.05、9.23， P＝0.023、0.002)。≤44、45~59、≥60岁组患者的甲硝唑耐药率分别为94.2%(163/173)、95.5%(231/242)、97.6%(120/123)，差异无统计学意义( P>0.05)。≤44、45~59、≥60岁组患者的左氧氟沙星耐药率分别为34.7%(60/173)、48.3%(117/242)、54.5%(67/123)，差异有统计学意义( χ2＝12.95， P＝0.002)；其中≤44岁组患者左氧氟沙星耐药率低于45~59、≥60岁组患者，差异均有统计学意义( χ2＝7.70、11.49， P＝0.006、0.001)。≤44、45~59、≥60岁组患者的克拉霉素耐药率分别为36.4%(63/173)、50.4%(122/242)、44.7%(55/123)，差异有统计学意义( χ2＝8.00, P＝0.018)；≤44岁组患者的克拉霉素耐药率低于45~59岁组患者，差异有统计学意义( χ2＝8.00， P＝0.005)。≤44岁、45~59和≥60岁组患者克拉霉素+左氧氟沙星双重耐药率分别为49.7%(86/173)、70.2%(170/242)、45.5%(56/123)，差异有统计学意义( χ2＝27.63， P<0.001)；其中45~59岁组患者的克拉霉素+左氧氟沙星双重耐药率高于≤44和≥60岁组患者，差异均有统计学意义( χ2＝18.00、21.13，均 P<0.001)。 结论:宁夏地区不同年龄人群 H. pylori感染者对甲硝唑、左氧氟沙星、克拉霉素的原发耐药率高，推荐进行以耐药性检测为指导的个体化根除治疗。

目的:研究并评估适合临床实验室开展的食源性腹泻弯曲菌检测方法及抗菌药物敏感性试验。方法:分为预实验和大样本验证。（1）预实验：收集2017年9月至2018年1月就诊于北京地区某三甲医院食源性腹泻患者粪便标本400份。采用双孔滤膜培养法及改良头孢哌酮-木炭-脱氧胆酸盐（CCD）琼脂培养法在微需氧环境中培养48 h，挑选可疑菌落进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）鉴定，同时进行实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）检测空肠弯曲菌及结肠弯曲菌。（2）大样本验证：收集2018年4月至2019年3月就诊于北京不同地区不同级别3家医院肠道门诊食源性腹泻患者粪便标本2 062份，进行qPCR检测及培养。阳性菌株按照美国临床与实验室标准化协会及美国国家肠道细菌耐药监测中心推荐的纸片扩散法及琼脂稀释法进行药物敏感性试验并进行结果判读。采用卡方检验比较3种检测方法的检测结果及2种抗菌药物敏感性试验的一致性。结果:预实验中qPCR、双孔滤膜培养法及改良CCD琼脂培养法检测弯曲菌（空肠弯曲菌/结肠弯曲菌）的检出率分别是9.0%（36/400）、5.0%（20/400）和3.5%（14/400），差异有统计学意义（χ2=11.772， P<0.01）且qPCR阴性，培养法均为阴性。大样本验证中，qPCR的检出率为8.1%（168/2 062），其中空肠弯曲菌7.0%（144/2 062），结肠弯曲菌1.2%（24/2 062）。qPCR阳性标本进行双孔滤膜培养法培养，阳性率为61.9%（104/168），其中空肠弯曲菌为58.3%（84/144），结肠弯曲菌为83.3%（20/24），与预实验检出率差异无统计学意义（ P>0.1）。空肠弯曲菌和结肠弯曲菌对环丙沙星耐药率分别为94.0%（94/100）和100.0%（24/24），对红霉素耐药率分别为6.0%（6/100）和33.3%（8/24），两种抗菌药物敏感性试验方法一致性较好（Kappa值>0.75）。 结论:qPCR快速、灵敏、操作简单，适合临床实验室常规开展。双孔滤膜培养法检出率显著高于改良CCD琼脂培养法，弯曲菌对喹诺酮类药物显示出极高的耐药率，已不适用于北京地区弯曲菌食源性腹泻的治疗，应选择大环内酯类抗菌药物。

以白头叶猴粪便为材料分离到一株不形成芽孢、可产黄色色素的细菌,革兰氏染色为阴性,接触酶阳性,经形态学观察和分子生物学鉴定为Sphingobacterium daejeonense NS6-1.NS6-1 不能水解淀粉,但能降解肝素,肝素酶酶活为46.60 U/mL,当添加100 mmol/L的Ca2+为辅助剂时肝素酶活性可达107.29 U/mL.通过K-B纸片琼脂扩散法检测菌株对几种常规药物的敏感性,发现NS6-1对卡那霉素和庆大霉素耐药,对利福平、四环素、多黏菌素B、氧氟沙星、头孢哌酮和万古霉素敏感.基于Illumina Hiseq 4000 平台对NS6-1 进行全基因组序列测定,结果显示其基因组大小为 4381042 bp,GC含量为 37.21%,预测到的蛋白质编码基因数为 3852 个.功能基因注释结果显示,基因组中含 1 个编码肝素酶Ⅱ/Ⅲ基因,1 个氨基糖苷类抗生素耐药功能基因以及 1 个与芳香烃化合物降解相关的邻苯二酚 1,2-双加氧酶基因.利用antiSMASH预测到 6 个次级代谢产物生物合成基因簇,其中,2 个为类胡萝卜素合成基因簇,1 个为高分子表面活性剂emulsan合成基因簇.综上,NS6-1 具有肝素类物质降解能力以及潜在的石油降解能力和类胡萝卜素合成能力.以上结果为该菌的后续研究及实际应用奠定了理论基础.

目的:通过3D定位建立琼脂压迫动物模型模拟三叉神经痛(trigeminal neuralgia,TN),利用影像学扫描进行模型验证,并通过采集不同模型的行为学、影像学及病理学等相关数据,对模型进行分析,以便于进一步探索TN的发病机制.方法:用von Frey测痛纤维丝筛选出痛阈值在8～15 g的雄性SD(Sprague Dawley,SD)大鼠32只,采用随机数字法分为实验组(16只)和对照组(16只),建立三叉神经根部琼脂压迫模型,术后1～7周通过von Frey测痛纤维丝测定大鼠机械疼痛阈值,术后4周、8周、12周进行灰质体积的基于体素形态学分析(voxel based management,VBM),采集术后8周和12周的三叉神经颅内段(intracranial segment,ICS)和眶下段神经(infraorbital nerve,ION)利用透射电镜(transmission electron microscope,TEM)进行超微结构分析.结果:机械疼痛阈值测定结果显示琼脂实验组术后机械刺激阈值出现降低,可持续至术后42天,对照组在术后14天内有轻度机械刺激阈值降低.TEM结果显示实验组于术后8周和12周三叉神经ICS和ION的电镜结果均观察到明显脱髓鞘改变,且术后12周较术后8周更严重.灰质体积VBM分析显示实验组大鼠术后4周脑灰质体积未出现明显变化;8周时左侧旁下托、左侧齿状回、左侧胼胝体压部、右侧顶叶联合皮质、下丘脑、右侧基底前脑、右侧纹状体及双侧初级躯体感觉皮质灰质体积显著变小;12周时上述变化范围明显扩大,甚至蔓延到双侧脑区;另外新观察到导水管周围灰质、左侧内嗅皮质、双侧扣带回及双侧海马的灰质体积显著变小;全脑分析显示各脑区无灰质体积增加.结论:琼脂压迫模型能产生稳定且较长持续时间疼痛,可作为继发性TN的可靠模型用于对TN发病机制、治疗等的进一步研究.ICS段神经损伤可经神经扩散或通过神经周围传导从而累及三叉神经ION段.短期内(8～12周)随时间延长,TN神经脱髓鞘损伤呈加重趋势.琼脂压迫模型的头颅VBM分析与TN病人较为符合.

目的 分离鉴定牛粪中的链霉菌,观察其抗菌活性.方法 采用稀释涂布法从牛粪中分离菌株,通过固定琼脂块法以金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌为指示菌筛选抗菌活性较强的菌株,并对菌种进行生理生化鉴定及16S rDNA序列测定;采用纸片扩散法测定活性菌株发酵液抗菌活性,菌株发酵液抗菌活性物质进行水饱和正丁醇萃取,并通过Molish反应、双缩脲反应及茚三酮反应进行抗菌活性物质定性鉴别.结果 从牛粪中分离出8株菌株,并筛选出1株抗菌活性较强菌株B5-2,鉴定为链霉菌.活性菌株发酵液对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、费氏柠檬酸杆菌、阴沟肠杆菌、肺炎克雷伯菌、产气肠杆菌均具有较强抑菌作用.抑菌结果显示,菌株B5-2抑菌活性物质均为水溶性物质.Molish反应、双缩脲反应及茚三酮反应结果显示,菌株B5-2的抑菌活性物质均初步鉴定为糖类和蛋白质类.结论 筛选分离的链霉菌对临床致病菌有较强的抑制作用.

患者男,44岁.反复发热近20个月,多发皮下结节9个月,肺、骨、淋巴结等多处病变.患者皮下结节穿刺物多次沙氏琼脂培养呈双相性,菌落25℃为菌丝相、37℃为酵母相,菌株经形态学特征及PCR扩增rDNA基因测序鉴定为马尔尼菲蓝状菌.采用ROSCO琼脂扩散法对该菌株酵母相进行体外药敏试验,对两性霉素B、伊曲康唑、氟康唑及伏立康唑均敏感.患者给予静滴伊曲康唑和两性霉素B治疗效果理想.诊断为播散性马尔尼菲蓝状菌病.

[背景]茄子青枯病是一种毁灭性的土传病害,生产上化学农药无法对其有效防治.拮抗放线菌具有环保、无残留的优点,并已在植物多种病害上成功应用,这为茄子青枯病的生物防治提供了思路.[目的]从健康茄子根际分离获得对茄子青枯菌有显著拮抗作用的放线菌菌株.[方法]采用稀释涂布法分离放线菌;采用双层琼脂法、琼脂扩散法和平板对峙法筛选拮抗菌株;对目标菌株XL-6的形态、培养特征、生理生化特征及16S rRNA基因序列进行综合分析;通过单因素试验和正交设计试验优化目标菌株培养基组分及发酵条件.[结果]筛选得到一株对青枯菌有强抑制作用的放线菌菌株XL-6,它对其他3种病原菌均具有一定的抑制作用.菌株XL-6的形态和培养特征、生理生化特征与娄彻氏链霉菌相符,而且16S rRNA基因序列分析表明该菌株与娄彻氏链霉菌亲缘关系较近.该菌株最优发酵配方和培养条件分别为:玉米粉30.0 g/L、酵母粉5.0 g/L、K2HPO4 2.0 g/L、MgCl2 2.0 g/L和NaC1 1.0 g/L;初始pH 7.0、培养基装瓶量70 mL/250 mL、摇床转速180 r/min、接种量6％,在28℃条件下培养6d.[结论]菌株XL-6经鉴定为娄彻氏链霉菌,优化其发酵条件后对青枯菌具有更强的拮抗效果.

目的 狨猴血清中纯化IgG抗体,制备兔抗狨猴抗血清,并纯化抗血清中IgG,HRP(辣根过氧化物酶)标记兔抗狨猴IgG.方法 HiTrapTMProtein G亲和层析纯化狨猴和兔抗狨猴血清IgG,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行纯度鉴定,免疫琼脂双扩散法(double immunodiffusion assay)测定制备的兔抗狨猴抗血清效价,改良"简易过碘酸钠标记法"制备兔抗狨猴IgG-HRP标记抗体,酶联免疫吸附测定法( ELISA)及蛋白免疫印迹法(Western blotting)对兔抗狨猴IgG-HRP标记抗体进行工作浓度测定及特异性鉴定.结果 狨猴和兔抗狨猴血清纯化IgG纯度分别大于95% 、97% ;兔抗狨猴IgG抗血清的效价为1∶64. ELISA和Western blotting鉴定了兔抗狨猴IgG-HRP酶标抗体参考工作浓度为1∶256 000、1∶15 000,特异性明显.结论 制备狨猴IgG-HRP标记抗体并初步鉴定,包括ELISA及Western blotting的特异性及使用浓度,为狨猴病原体免疫学检测体系及分子免疫学检测体系储备了资源.

背景:目前,苯扎氯铵已被用于牙科修复材料中,能增强材料的抗菌性并作用持久.然而,目前尚缺乏苯扎氯铵与牙髓牙周感染相关细菌作用的研究.目的:研究苯扎氯铵对口腔主要致病菌的体外抑菌效果.方法:采用琼脂扩散法比较0.1%苯扎氯铵、体积分数3%双氧水、生理盐水与5.25%次氯酸钠对牙龈卟啉单胞菌、中间普氏菌、伴放线放线杆菌、变形链球菌、粪肠球菌的体外抑菌效果,采用试管稀释法测定苯扎氯铵对上述细菌的最低抑菌浓度.结果与结论:①对牙龈卟啉单胞菌与中间普氏菌,0.1%苯扎氯铵表现出了较强的抑菌效果,抑菌效果弱于5.25%次氯酸钠(P ＜ 0.05);对牙龈卟啉单胞菌,0.1%苯扎氯铵的抑菌效果与体积分数3%双氧水无差异(P ＞0.05);对中间普氏菌,0.1%苯扎氯铵的抑菌效果优于体积分数3%双氧水(P ＜ 0.05);对伴放线放线杆菌和变形链球菌,0.1%苯扎氯铵的抑菌效果均优于体积分数 3%双氧水(P ＜ 0.05),与 5.25%次氯酸钠无差异(P ＞ 0.05);对粪肠球菌,0.1%苯扎氯铵的抑菌效果优于体积分数3%双氧水(P ＜ 0.05),弱于5.25%次氯酸钠(P ＜ 0.05);体积分数3%双氧水对粪肠球菌不产生抑菌环;②0.1%苯扎氯铵对牙龈卟啉单胞菌、中间普氏菌、伴放线放线杆菌、变形链球菌、粪肠球菌的最低抑菌浓度分别为16,2,4,2,4 mg/L;③结果表明,0.1%苯扎氯铵对牙龈卟啉单胞菌、中间普氏菌、伴放线放线杆菌、变形链球菌、粪肠球菌具有较强的抑菌效果.