目的 探究胆总管结石合并胆道感染患者的胆汁病原菌分布和耐药性.方法 选取中国十九冶集团职工医院2019年6月至2023年1月收治的胆道感染的胆总管结石患者105例.根据结石的情况将患者分为初发组和复发组.收集受试者的一般资料,包括性别、年龄、临床表现、实验室检查结果及影像学检查结果等.使用VITEK 2 Compact全自动菌种分析仪分离鉴定胆汁中的菌株.使用纸片琼脂扩散法进行药物敏感试验.观察受试者的抗生素使用史,胆汁菌株培养的阳性率、分布情况,胆汁中细菌的耐药情况等.结果 结石初发组55例,复发组50例.与复发组相比,初发组的抗生素使用率更高(P＜0.05).初发组和复发组的胆汁培养阳性率分别为83.6％(46/55)和94.0％(47/50),差异有统计学意义(x2=-3.923,P=0.001).复发组革兰阴性菌为84.0％(36/50),大肠埃希菌为30.0％(15/50)高于初发组的63.6％(13/55)和23.6％(13/55),差异有统计学意义(P＜0.05).其他病原菌分布初发组和复发组差异无统计学意义(P＞0.05).与初发组相比,病原菌耐药率在复发组中明显增高,耐药性明显增强有大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌(P＜0.05).结论 初发和复发胆总管结石合并胆道感染患者的病原菌分布相似,但复发组的病原菌耐药性高于初发组,临床医生用药应根据患者结石复发情况、耐药实验慎重选择抗生素.

目的:通过对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌（CRKP）的碳青霉烯酶表型的筛查及耐药基因检测，明确青岛市区该细菌耐药基因的分布及构成，为临床上合理应用抗菌药物治疗提供依据。方法:收集2016年10月至2019年9月青岛市区5家三甲医院临床分离出的非重复CRKP共54株，采用琼脂稀释法或纸片扩散法（K-B法）进行常用抗菌药物的药敏试验；应用改良Hodge试验进行碳青霉烯酶表型筛查；采用聚合酶链反应（PCR）扩增 blaKPC-2、 blaNDM-1、 blaOXA-48、 blaIMP、 blaVIM目的基因，扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳。 结果:药敏试验显示，CRKP对阿米卡星耐药率最低（35.2%），其次为复方新诺明（53.7%）、庆大霉素（55.6%）、左氧氟沙星（75.9%）、亚胺培南/西司他丁（88.9%），哌拉西林/他唑巴坦、美罗培南、头孢噻肟、头孢哌酮/舒巴坦钠的耐药率均高于90%。改良Hodge试验阳性菌株有43株（阳性率为79.63%），阴性菌株为11株。PCR耐药基因检测共检出带有碳青霉烯酶耐药基因的菌株40株，目的耐药基因检出率为74.07%。其中35株携带KPC-2基因，7株携带OXA-48基因，4株携带NDM-1基因，1株携带IMP基因，其中携带有OXA-48基因的菌株均同时携带KPC-2基因，未检测出携带VIM基因的菌株，剩余14株未检测出目标碳青霉烯酶基因。结论:青岛市区5家医院CRKP携带的产碳青霉烯酶基因主要为KPC-2，其次为OXA-48及NDM-1。

目的:评估纸片扩散法在淋球菌药物敏感性检测中的准确性。方法:选取2021年在广西14个地市的37家医疗机构收集的584株淋球菌临床分离株，分别使用琼脂稀释法与纸片扩散法进行大观霉素、头孢曲松和头孢克肟的药物敏感性测定，计算纸片扩散法与琼脂稀释法的一致性。结果:大观霉素、头孢曲松和头孢克肟纸片扩散法的分类一致率分别为87.64%、83.45%和80.31%，配对 χ 2检验结果表明两种方法检测的药物敏感性结果存在显著性统计学差异（ χ 2=65.000、52.128和95.870， P均<0.001）。 结论:某些厂家的纸片扩散法可能不是临床实践中筛选淋球菌耐药菌株的合适选择，未来需要更多高准确性的纸片以实现纸片扩散法在淋球菌耐药筛查中的应用，或在使用前对不同厂家生产的纸片扩散法进行评估，选择与琼脂稀释法一致性较好的进行测试。

目的:测定11种抗菌药物对鼠疫耶尔森菌（简称鼠疫菌）的最低抑菌浓度（minimum inhibitory concentration，MIC），建立鼠疫菌MIC测定方法，掌握常用抗生素对鼠疫菌的抑菌范围，为鼠疫的临床治疗提供基线数据。方法:根据美国临床和实验室标准协会（Clinical Labor Standard Institution，CLSI）药敏试验方法中的琼脂稀释法，分别测定氧氟沙星、环丙沙星、复方新诺明（甲氧苄啶-磺胺甲恶唑）、硫酸卡那霉素、硫酸链霉素、头孢曲松钠、氨苄青霉素钠、氯霉素、盐酸壮观霉素、头孢呋辛钠、盐酸四环素共11种抗菌药物对118株鼠疫菌的MIC，并计算MIC 50、MIC 90（能抑制50%、90%细菌生长的最低药物浓度）。以纸片扩散法的检测结果作为对照观察两者的一致性。118株鼠疫菌分离自青海省鼠疫自然疫源地，由青海省地方病预防控制所保存。 结果:检测的118株鼠疫菌，未发现具有单个或多个抗菌药物抗性的菌株，与纸片扩散法结果一致，并获得11种抗菌药物对118株菌的MIC 50、MIC 90。 结论:成功建立了鼠疫菌MIC测定方法，该方法能高通量测定抗菌药物对鼠疫菌的MIC，评价鼠疫菌对抗生素的敏感性，是一种高效、经济、实用的实验手段。

目的:研究双醋瑞因对眼表常见病原菌的体外抑菌作用。方法:采集于河南省立眼科医院就诊的眼表感染患者中分离培养的革兰阳性球菌和杆菌、革兰阴性杆菌、丝状真菌及念珠菌。采用K-B琼脂纸片扩散法测定双醋瑞因对病原菌的体外抑菌活性，采用微量液基稀释法进行最低抑菌浓度(MIC)定量测定。以左氧氟沙星和伏立康唑分别为抗细菌药物和抗真菌药物对照。结果:双醋瑞因对眼表分离的42株革兰阳性球菌和10株革兰阳性杆菌均有明显抑菌活性，双醋瑞因与左氧氟沙星对表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、中间葡萄球菌和革兰阳性棒状杆菌抑菌圈直径比较，差异无统计学意义(均P>0.05)。双醋瑞因对眼表分离的23株革兰阴性杆菌，10株丝状真菌和3株念珠菌均无抑制作用。双醋瑞因对表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、中间葡萄球菌及其他葡萄球菌的MIC范围为1～32 μg/ml，MIC 90分别为16、8、16、32 μg/ml。 结论:双醋瑞因对眼表分离的革兰阳性葡萄球菌和棒状杆菌具有体外抑菌活性，对致病革兰阴性杆菌和真菌无抑菌活性。

目的:制备重组流感病毒血凝素(hemagglutinin, HA)三聚体蛋白疫苗并进行相关表征分析，研究重组HA三聚体在小鼠模型中的免疫原性。方法:构建稳定表达HA三聚体蛋白的CHO细胞株，通过Western blot、单向免疫扩散试验、蛋白质粒径检测和N-糖基化位点分析对重组蛋白进行定性及定量分析。根据剂量、佐剂等处理条件的不同将BALB/c小鼠分为11个组，并进行一致的免疫程序。初次免疫后56 d检测血清中和抗体效价，以评价免疫原性。结果:构建的CHO细胞株能够分泌表达HA三聚体。HA三聚体具备生物学活性能够在单向琼脂免疫扩散试验中形成沉淀环，蛋白质粒径大小约为18.79 nm，具有10个N-糖基化位点，包括高甘露糖型、复合糖型和杂合糖型；HA三聚体重组蛋白疫苗在2次免疫小鼠后，3.75 μg剂量配伍RFH01佐剂与对照组单价疫苗原液15 μg引起的中和抗体效价差异无统计学意义( P＝0.431 2， U＝36)，配伍佐剂组免疫后血清抗体效价均高于未加佐剂组，其中15 μg HA三聚体+RFH01组效价最高，为1 280。 结论:成功制备了流感病毒重组HA三聚体蛋白，其与RFH01佐剂配伍能够诱导BALB/c小鼠产生针对流感病毒的体液免疫应答，为流感病毒重组亚单位疫苗的研发提供了参考。

目的:分析住院患儿的痰分泌物培养中流感嗜血杆菌的感染情况及耐药性。方法:选取泰安市妇幼保健院2017年1月至2020年1月因呼吸道感染收治的住院患儿1 124例送检的合格痰标本，通过平板筛选分离出流感嗜血杆菌，采用Kirby-Bauer琼脂扩散法进行药物敏感试验，通过Cefinase纸片检测检出菌株的β-内酰胺酶产生情况。结果:1 124例住院患儿中感染流感嗜血杆菌143例，其中≤6个月的儿童80例，占比高达55.94%，高于其他年龄段的儿童，检出率差异有统计学意义（χ 2=84.810， P<0.05），夏季时流感嗜血杆菌的检出率为42.00%，高于其他三个季节，进行药敏试验结果发现筛选出的143例流感嗜血杆菌对复方磺胺甲噁唑、氨苄西林及头孢呋辛耐药率较高（均>60%），而对左氧氟沙星、环丙沙星、美罗培南等药物最为敏感（均<5%），且检测出β-内酰胺酶阳性率36.36%。 结论:住院患儿流感嗜血杆菌感染，其对氨苄西林、头孢呋辛、复方磺胺甲噁唑具有较强的耐药性，并且β-内酰胺酶阳性是造成耐药性的主要原因。

目的:研究宁夏地区不同年龄人群幽门螺杆菌( H. pylori)感染者对常用抗菌药物的耐药性。 方法:选择2021年7至12月就诊于宁夏回族自治区人民医院、宁夏中西医结合医院、固原市原州区人民医院、吴忠市人民医院、石嘴山市第二人民医院、中卫市人民医院、银川市第一人民医院消化内科 H. pylori专病门诊，既往无 H. pylori治疗史，经 14C尿素呼气试验证实为 H. pylori感染，且行胃镜检查的患者1 040例。在胃镜下留取胃黏膜标本行 H. pylori体外培养，获得的 H. pylori菌株行 H. pylori耐药表型检测。药敏试验采用Kirby-Bauer纸片琼脂扩散法。记录患者既往抗生素使用情况，分析≤44、45~59、≥60岁组患者 H. pylori的原发耐药特征。统计学方法采用卡方检验。 结果:对1 040例 H. pylori感染者的胃黏膜标本行 H. pylori体外培养，共获得538株 H. pylori菌株，培养阳性率为51.7%，187例患者可提供既往抗生素使用史。对甲硝唑、克拉霉素、左氧氟沙星的原发耐药率高，耐药率分别为95.5%(514/538)、44.6%(240/538)、45.4%(244/538)，未发现对阿莫西林、呋喃唑酮、四环素耐药；双重耐药率为36.4%(196/538)，以甲硝唑+克拉霉素、甲硝唑+左氧氟沙星耐药株为主，耐药率分别为17.8%(96/538)、18.2%(98/538)；三重耐药率为25.5%(137/538)，均为甲硝唑+克拉霉素+左氧氟沙星耐药株。既往使用过喹诺酮类、大环内酯类药物的 H. pylori感染者对左氧氟沙星、克拉霉素的原发耐药率分别达到了60.9%(28/46)和63.4%(83/131)，高于未使用过相应药物患者的耐药率[41.8%(59/141)和39.3%(22/56)]，差异均有统计学意义( χ2＝5.05、9.23， P＝0.023、0.002)。≤44、45~59、≥60岁组患者的甲硝唑耐药率分别为94.2%(163/173)、95.5%(231/242)、97.6%(120/123)，差异无统计学意义( P>0.05)。≤44、45~59、≥60岁组患者的左氧氟沙星耐药率分别为34.7%(60/173)、48.3%(117/242)、54.5%(67/123)，差异有统计学意义( χ2＝12.95， P＝0.002)；其中≤44岁组患者左氧氟沙星耐药率低于45~59、≥60岁组患者，差异均有统计学意义( χ2＝7.70、11.49， P＝0.006、0.001)。≤44、45~59、≥60岁组患者的克拉霉素耐药率分别为36.4%(63/173)、50.4%(122/242)、44.7%(55/123)，差异有统计学意义( χ2＝8.00, P＝0.018)；≤44岁组患者的克拉霉素耐药率低于45~59岁组患者，差异有统计学意义( χ2＝8.00， P＝0.005)。≤44岁、45~59和≥60岁组患者克拉霉素+左氧氟沙星双重耐药率分别为49.7%(86/173)、70.2%(170/242)、45.5%(56/123)，差异有统计学意义( χ2＝27.63， P<0.001)；其中45~59岁组患者的克拉霉素+左氧氟沙星双重耐药率高于≤44和≥60岁组患者，差异均有统计学意义( χ2＝18.00、21.13，均 P<0.001)。 结论:宁夏地区不同年龄人群 H. pylori感染者对甲硝唑、左氧氟沙星、克拉霉素的原发耐药率高，推荐进行以耐药性检测为指导的个体化根除治疗。

患者 男性，60岁，因“体检发现上腹部肿块、甲胎蛋白阳性1个月余”于1975年8月25日收入我院。患者就诊前1个月因黑便于当地医院就诊，体检时医师触到上腹部包块，血甲胎蛋白阳性，考虑肝癌可能。患者曾有十二指肠溃疡出血史。无肝炎史及肝癌家族史。入院体检：皮肤巩膜无黄染，未见肝掌及蜘蛛痣，未触及左锁骨上肿大淋巴结。腹部平坦、无压痛。中上腹部可及质硬肿块、边界清楚、表面光滑、无压痛，肝脏上缘在剑突后方、下缘达剑突下5横指、随呼吸上下移动。左肋缘下未触及脾脏。腹水征阴性。实验室检查：碱性磷酸酶15 U/L，γ-谷氨酰转移酶 34.4 U/L，甲胎蛋白琼脂扩散法（+）、对流法（+）、放射免疫法>1 500 μg/L（正常值<20 μg/L）。肝脏核素扫描：肝脏左叶占位性病变。体征、实验室检查结果及影像学检查结果符合肝癌表现。入院诊断：上腹部肿块，原发性肝癌可能。

目的:研究并评估适合临床实验室开展的食源性腹泻弯曲菌检测方法及抗菌药物敏感性试验。方法:分为预实验和大样本验证。（1）预实验：收集2017年9月至2018年1月就诊于北京地区某三甲医院食源性腹泻患者粪便标本400份。采用双孔滤膜培养法及改良头孢哌酮-木炭-脱氧胆酸盐（CCD）琼脂培养法在微需氧环境中培养48 h，挑选可疑菌落进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）鉴定，同时进行实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）检测空肠弯曲菌及结肠弯曲菌。（2）大样本验证：收集2018年4月至2019年3月就诊于北京不同地区不同级别3家医院肠道门诊食源性腹泻患者粪便标本2 062份，进行qPCR检测及培养。阳性菌株按照美国临床与实验室标准化协会及美国国家肠道细菌耐药监测中心推荐的纸片扩散法及琼脂稀释法进行药物敏感性试验并进行结果判读。采用卡方检验比较3种检测方法的检测结果及2种抗菌药物敏感性试验的一致性。结果:预实验中qPCR、双孔滤膜培养法及改良CCD琼脂培养法检测弯曲菌（空肠弯曲菌/结肠弯曲菌）的检出率分别是9.0%（36/400）、5.0%（20/400）和3.5%（14/400），差异有统计学意义（χ2=11.772， P<0.01）且qPCR阴性，培养法均为阴性。大样本验证中，qPCR的检出率为8.1%（168/2 062），其中空肠弯曲菌7.0%（144/2 062），结肠弯曲菌1.2%（24/2 062）。qPCR阳性标本进行双孔滤膜培养法培养，阳性率为61.9%（104/168），其中空肠弯曲菌为58.3%（84/144），结肠弯曲菌为83.3%（20/24），与预实验检出率差异无统计学意义（ P>0.1）。空肠弯曲菌和结肠弯曲菌对环丙沙星耐药率分别为94.0%（94/100）和100.0%（24/24），对红霉素耐药率分别为6.0%（6/100）和33.3%（8/24），两种抗菌药物敏感性试验方法一致性较好（Kappa值>0.75）。 结论:qPCR快速、灵敏、操作简单，适合临床实验室常规开展。双孔滤膜培养法检出率显著高于改良CCD琼脂培养法，弯曲菌对喹诺酮类药物显示出极高的耐药率，已不适用于北京地区弯曲菌食源性腹泻的治疗，应选择大环内酯类抗菌药物。