目的 探讨口服营养补充(ONS)对急性淋巴细胞白血病(ALL)儿童诱导化疗期间血液系统并发症及感染的影响.方法 2022年1月—2022年12月年龄＜16岁ALL儿童36例符合入组条件且完成诱导治疗,按1∶1比例随机分为干预组和对照组各18例.对照组给予低脂饮食(膳食脂肪供能≤每日总能量的20％),干预组给予低脂饮食及高中链甘油三酯、高蛋白、高热卡的短肽型ONS 20mL/(kg.d),食用时间为诱导化疗VDLD阶段.比较两组诱导化疗期间血液系统并发症、输血制品和感染的发生情况.结果 干预组与对照组比较,中性粒细胞缺乏持续时间更短(12.50±9.38d 和 19.11±10.06d,P=0.049)、恢复时间更早(25.39±4.5d 和 30.06±3.80d,P=0.002);血小板最低值水平较高(P=0.048),Ⅳ度血小板减少的出现时间更晚(P=0.009)、持续时间更短(P=0.024)和恢复时间更早(P=0.012),输血小板的例数和次数均低于对照组(P＜0.05);发热天数、抗菌药的使用、总体感染均倾向于较少,但差异未显出统计学意义(P＞0.05).结论 ALL儿童在诱导化疗期间使用短肽型ONS有助于提高血液系统对化疗的耐受性.终期研究结果将会得出更确切的结论.

为鉴定新的参与黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)天然免疫信号通路调控的分子及作用机制,应用果蝇的Gal4/UAS系统敲低54个蛋白质激酶编码基因,分别利用革兰氏阳性菌(Enterococcus faecalis,E.faecalis)或革兰氏阴性菌(Erwinia carototovovora carototovovora 15,Ecc15)感染基因敲低果蝇,筛选参与果蝇天然免疫反应的蛋白质激酶.结果 显示,全身性敲低蛋白质激酶Pitslre的果蝇感染E.faecalis或Ecc15后,生存率降低,半致死时间LT50分别降低为对照组的66.7％和28.6％.相应的,Pitslre功能缺失导致革兰氏阳性菌和阴性菌分别感染后,Toll及IMD通路下游抗菌肽Drosomycin和Diptercin表达水平明显下降.在脂肪体和血淋巴细胞中特异性敲低Pitslre基因,导致革兰氏阳性菌及阴性菌感染后的果蝇半致死时间LT50分别缩短75％和90％,细菌载量分别升高约10倍.在果蝇S2细胞中,敲低Pitslre基因,导致细胞的抗菌肽Drosomycin、Attacin和Diptercin表达水平分别降低约50％.此外,通过免疫共沉淀实验检测Pitslre与预测存在相互作用的蛋白质TSC1、Rcd5和pbl之间的相互作用.综上所述,蛋白质激酶Pitslre参与果蝇天然免疫反应,在正向调控果蝇天然免疫Toll和IMD通路中发挥重要作用.

本研究对分别经过低浓度(5 mg/L)和高浓度(10 mg/L)恩诺沙星抗菌药物24 h短期浸泡处理后的东星斑(Plectropomusleopardus)抗氧化酶活力、抗氧化物质水平及消化酶活力进行了检测.实验结果表明:10 mg/L恩诺沙星浸泡处理会显著影响东星斑抗氧化酶(超氧化物歧化酶SOD;过氧化氢酶CAT;过氧化物酶POD;溶菌酶LZM;谷胱甘肽过氧化物酶GSH-Px)正常活力的表达,并显著抑制抗氧化物质丙二醛(MDA)的表达;而5 mg/L恩诺沙星浸泡处理则不会.5 mg/L和10 mg/L恩诺沙星短期浸泡处理都不会对东星斑的消化酶(胃蛋白酶;脂肪酶;淀粉酶)的正常表达活性产生显著影响.因此,以低浓度恩诺沙星抗菌药物对东星斑进行短期浸泡处理以进行细菌性疾病的预防及治疗的方式不会对其本身酶活生理造成不可逆损伤,其中5mg/L的浓度可作为该抗菌药物的安全浸泡浓度进行使用.

昆虫肠道共生放线菌作为一种特境放线菌,因与土壤中的放线菌生存环境的不同,研究其种类和抗菌活性具有重要意义.将金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)这两种致病菌作为指示细菌,对分离自美洲大蠊Periplaneta americana肠道的159株内生放线菌使用牛津杯法实验,分别对其进行体外抑菌活性筛选,随后利用16S rRNA PCR、BLAST同源性对比和构建系统发育树相结合的方法对菌株进行分子生物学鉴定,对关键酶基因非核糖体多肽合成酶(Nonribosomal peptide synthetase,NRPS)基因、多聚酮合酶(Polyketone synthase,PKS)基因和卤化酶基因FADH2进行初步筛选.结果表明49株放线菌能够不同程度的抑制金黄色葡萄球菌和MRSA,有11株放线菌对两种致病菌均具有不同程度的抑制作用.49株放线菌中链霉菌属有36株(73.47％),属于优势菌属;其余的13株放线菌分别属于戈登氏菌属、微杆菌属、短状杆菌属、分枝杆菌属、无色杆菌属和小单孢菌属.琼脂糖凝胶电泳结果显示,11株放线菌中有6株放线菌均检测到关键酶基因PKS I、NRPS和卤化酶基因FADH2.本研究表明美洲大蠊肠道中含有具有抗菌活性的放线菌资源.

目的:探讨抗菌肽LL-37对糖尿病心肌病(DCM)大鼠心肌损伤的影响,并阐明其可能的作用机制.方法:将48只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、低剂量LL-37组(0.5 mg·kg-1)和高剂量LL-37组(2.0 mg·kg-1),每组12只.除正常对照组外,其他各组大鼠均通过高脂饲料喂养联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)构建DCM模型.模型构建成功后,低和高剂量LL-37组大鼠给予抗菌肽LL-37干预,每天1次,连续6周,而正常对照组和模型组大鼠腹腔注射等体积生理盐水.监测各组大鼠体质量和空腹血糖(FBG)水平,检测各组大鼠血清总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)水平,心脏超声检测各组大鼠心功能,HE染色观察各组大鼠心肌组织病理形态表现,TUNEL染色检测各组大鼠心肌细胞凋亡率,ELISA法检测各组大鼠心肌组织中炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,Western blotting法检测各组大鼠心肌组织中Toll样受体4(TLR4)、核因子κB p65(NF-κB p65)和NF-κB抑制因子α(IκBα)等蛋白表达水平.结果:与正常对照组比较,模型组大鼠心肌损伤严重,左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(LVFS)和体质量明显降低(P<0.05),左心室舒张末期内径(LVEDd)、左心室收缩末期内径(LVEDs)、FBG、TC、TG和心肌细胞凋亡率明显升高(P<0.05),心肌组织中IL-1β、IL-6和TNF-α水平及TLR4、NF-κB p65蛋白表达水平均明显升高(P<0.05),而IκBα蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与模型组和低剂量LL-37组比较,高剂量LL-37组大鼠心肌损伤明显改善,LVEF、LVFS和体质量明显升高(P<0.05),LVEDd、LVEDs、FBG、TC、TG和心肌细胞凋亡率明显降低(P<0.05),心肌组织中IL-1β、IL-6和TNF-α水平及TLR4、NF-κB p65蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),IκBα蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,低剂量LL-37组大鼠以上各指标差异无统计学意义(P>0.05).结论:抗菌肽LL-37可改善DCM大鼠心功能,抑制心肌组织炎症和细胞凋亡,对DCM大鼠心肌损伤具有一定保护作用,并能抑制TLR4/NF-κB信号通路.

目的 针对念珠性阴道炎研究不易诱导耐药菌产生的抗菌药物.方法 本文合成了两类阳离子两亲性化合物:短脂肽(SSLP)和氨基酸基阳离子表面活性剂(AACS),并以经典阳离子表面活性剂(CCS)为对照,从抑菌活性、诱导耐药菌产生、溶血率、对哺乳动物细胞毒性等四个方面进行研究,然后通过稳定性和多次阴道刺激性实验确定针对念珠性阴道炎最有效的候选药物.结果 SSLP和CCS都有良好的杀菌活性,但是对于人阴道上皮细胞株VK2/E6E7具有较高的细胞毒性,而SSLP不易诱导细菌产生耐药性,所以外用杀菌消毒如器械消毒时,SSLP是CCS的理想替代品.AACS中的Nα-月桂酰基精氨酸乙酯(C12-R-OEt)对于白色念珠菌敏感,不易诱导耐药菌的产生,安全性高,在接近阴道环境pH 4的水溶液中稳定,对阴道黏膜无刺激性.结论C12-R-OEt是最有潜力的念珠性阴道炎外用候选药物.

目的 探讨家蝇抗真菌肽-1A(MAF-1A)衍生肽的设计及其抗白色念珠菌(C.albicans)活性.方法 采用序列截短及氨基酸残基替换法设计4条MAF-1A衍生肽,生物信息学分析其理化特性;取对数生长期C.albicans ATCC10231制备成浓度为(0.5～2.5)×106 cfu/L的菌液,采用微量稀释法检测4条衍生肽对C.albicans的抗菌活性,另设MAF-1 A组(25～1600 mg/L MAF-1 A处理)、氟康唑(FLC)对照组(0.25～64.00 mg/L FLC处理);采集健康人全血,离心取血细胞制作重悬红细胞,与不同终浓度(25～400 mg/L)活性衍生肽混匀,分为MAF-1A组、MAF-1A22S3组、MAF-1A20S3组、MAF-1A18S5组、MAF-1A16S5组、阳性对照(0.1％Triton X-l00处理)及阴性对照组[磷酸盐缓冲溶液(PBS)处理],采用体外溶血实验检测各组红细胞的溶血率;制备(1.0～5.0)×109 cfu/L菌液,与不同终浓度[1、2、4×最小抑菌浓度(MIC)]活性衍生肽稀释液混合,设MAF-1 A组(1、2、4×MIC MAF-1 A处理)和FLC(1、2、4×MIC FLC处理)对照组,分别于0、4、8、12、16、20及24 h取混合菌液100μL于沙氏葡萄糖琼脂培养基(SDA)平板上37℃培养,记录菌落数,绘制时间-杀菌曲线检测MAF-1A、MAF-1A22S3及FLC对C.albicans的杀菌动力学;制备1.0×109 cfu/L C.albicans菌液,加不同终浓度(1、2、4×MIC)的活性衍生肽稀释液,设MAF-1A(1×MIC MAF-1A处理)、FLC(1×MIC FLC处理)对照组和阴性对照组(PBS处理),采用扫描电镜观察各组C.albicans的形态学改变.结果 4条衍生肽对C.albicans均具有抗菌活性,MIC和MFC值均较模板肽MAF-1A降低,其中MAF-1A22S3的抗菌活性增加最为明显;衍生肽MAF-1A22S3、MAF-1A20S3溶血活性低于模板MAF-1A,其中MAF-1A22S3的溶血性最低(6×MIC范围内溶血率＜5％);MAF-1A22S3对C.albicans具有较强的杀菌作用、且呈浓度依赖性,同浓度时杀菌效率强于模板肽MAF-1A和FLC对照组;衍生肽MAF-1A22S3作用后C.albicans细胞表面出现明显的凹陷、裂痕、胞质外溢、细胞皱缩及裂解死亡等病理改变,且细胞损伤程度与衍生肽浓度呈正相关.结论 衍生肽MAF-1A22S3体外抗真菌效果明显,且体外溶血性低,其机制可能与破坏菌细胞的完整性有关.