目的:观察慢性氟中毒大鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、β-微管蛋白Ⅲ（β-tubulinⅢ）和突触素（synaptophsin）表达水平，探索三复合体突触在慢性氟中毒大鼠中枢神经系统（CNS）损伤机制中的作用，以及硫酸软骨素（CS）的神经保护作用。方法:选择1月龄清洁级SD大鼠雌雄各48只，按体重（90 ~ 120 g）采用随机数字表法分为8组，每组12只，雌雄各半。采用含有不同浓度氟化钠（NaF）的自来水[ < 0.5 mg/L（对照，CN），10.0 mg/L（低剂量染氟，LF），50.0 mg/L（高剂量染氟，HF）]喂养，其中部分大鼠直接喂养185 d（CN、LF、HF组），其余大鼠于喂养180 d后连续5 d腹腔注射生理盐水（NS）或染氟大鼠腹腔注射0.66 mg/kg CS，分别为CN + NS、LF + NS、HF + NS组和LF + CS、HF + CS组。实验结束后采用苏木素-伊红染色于光镜下观察各组大鼠脑组织海马CA4区病理改变，免疫组织化学法检测海马CA4区GFAP、β-tubulinⅢ和synaptophsin的表达及分布，蛋白免疫印迹法检测海马GFAP、β-tubulinⅢ和synaptophsin蛋白表达水平。结果:光镜下LF、HF、LF + NS、HF + NS组雌、雄性大鼠海马CA4区均可见神经元嗜酸性变、丢失和排列层次不整齐，LF + CS、HF + CS组较CN组形态学未见明显改变，而较LF、HF、LF + NS、HF + NS组有明显改善。免疫组织化学法检测结果显示，LF、HF组雌、雄性大鼠GFAP、β-tubulinⅢ、synaptophsin阳性面积率均低于CN组（ P均 < 0.05）；而LF + CS、HF + CS组分别高于LF、HF组（ P均 < 0.05）。蛋白免疫印迹法检测结果显示，LF、HF组雌、雄性大鼠GFAP、β-tubulinⅢ、synaptophsin蛋白表达水平（LF组：0.90 ± 0.09、0.82 ± 0.08，1.43 ± 0.14、0.92 ± 0.02，1.21 ± 0.15、0.87 ± 0.02，HF组：0.58 ± 0.14、0.73 ± 0.03，0.63 ± 0.06、0.67 ± 0.03，0.87 ± 0.04、0.70 ± 0.05）均低于CN组（1.24 ± 0.08、1.09 ± 0.10，2.64 ± 0.30、1.54 ± 0.09，1.72 ± 0.10、1.13 ± 0.06， P均 < 0.05）。 结论:慢性氟中毒引起的CNS损伤可能与三复合体突触以及细胞外基质有关，CS可能在一定程度上降低损伤。

硫酸软骨素钠是一种硫酸化的糖胺聚糖,由D-葡萄糖醛酸和N-乙酰-D-氨基半乳糖的重复双糖单位组成.硫酸软骨素钠的工业生产是以陆地生物或海洋生物软骨组织为原料,经过特定的提取和纯化工艺制得,被认为具有抗骨关节炎及其他多种潜在的生理活性,在保健食品、化妆品、药品等领域具有广阔的应用前景和发展空间.该文对硫酸软骨素钠的传统制备技术、微生物合成工艺的开发情况与问题,以及基于体外细胞、动物模型和临床随机对照试验的抗骨关节炎活性研究现状进行综述,分析了现阶段研究的局限性并提出相应对策,为进一步规范和开发硫酸软骨素钠提供参考.

目的 探讨细胞基质凝胶与细胞微球两种不同培养微环境对干细胞成软骨分化影响,分析软骨分化特点以优化培养微环境.方法 采用透明质酸钠、硫酸软骨素及交联剂按照质量比1∶1∶2均匀混合后制成的细胞外基质凝胶,分别运用小鼠间质干细胞与基质凝胶共培养;离心沉淀形成细胞微球等方法进行成软骨诱导培养.在成软骨分化后1、2、3周行定量PCR检测分化相关基因表达;至终末分化后行组织切片及染色,对比细胞外基质形成及分化相关基因表达趋势,评价干细胞成软骨分化结果.结果 干细胞与基质凝胶均匀混合后形成柱状胶体结构,细胞均匀分散其中;而细胞微球则最终形成具有一定韧性的灰白球状组织.细胞排列紧密且组织表面由纤维组织包裹.定量PCR结果示:启动因子SOX-9在两种培养体系中有表达,差异有统计学显著意义.在基质凝胶中,标志基因Aggrecan表达仅在第2周时至最高,而在细胞微球中持续表达,差异有统计学意义.Col-Ⅱa1在基质凝胶中持续表达;在细胞微球早期分化表达显著,差异有统计学意义;Col-Ⅹa1表达在分化第2、3周时,以基质凝胶中为显著;在分化第1、2周时,以细胞微球分化为显著,差异有统计学意义;基质凝胶有利于Col-Ⅱa1的表达且可持续维持软骨细胞肥大状态;细胞微球则有利于Aggrecan的表达;甲苯胺蓝染色凝胶中细胞外基质较细胞微球含量明显增多.结论 基质凝胶培养有利于促进干细胞成软骨分化及维持分化表型;它具有模拟细胞外基质微环境、维持细胞空间结构并提高细胞生物活性等优势.

目的 探讨川芎清脑颗粒联合硫酸软骨素治疗偏头痛的临床疗效.方法 选取2017年3月—2018年3月在陕西省核工业二一五医院治疗的偏头痛患者76例,根据用药的差别分为对照组(38例)和治疗组(38例).对照组口服硫酸软骨素钠片,0.6 g/次,3次/d;治疗组在对照组基础上口服川芎清脑颗粒,10 g/次,3次/d.两组患者均治疗4周.观察两组患者临床疗效,同时比较治疗前后两组患者临床症状评分、血清学指标和脑血流情况.结果 治疗后,对照组临床有效率为81.58％,显著低于治疗组的97.37％,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05).治疗后,两组头痛发作次数、头痛发作持续时间和头痛发作程度评分均明显降低(P<0.05),且治疗组患者临床症状评分明显低于对照组(P<0.05).治疗后,两组患者血清高敏C反应蛋白(hs-CRP)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)和溶血磷脂酸(LPA)水平均显著降低(P<0.05),且治疗后治疗组这些血清学指标明显低于对照组(P<0.05).治疗后,两组患者大脑前动脉(ACA)、大脑中动脉(MCA)、大脑后动脉(PCA)、基底动脉(BA)、椎动脉(VA)的平均血流速度(Vm)均显著降低(P<0.05),且治疗后治疗组脑血流情况明显优于对照组(P<0.05).结论 川芎清脑颗粒联合硫酸软骨素治疗偏头痛可有效改善患者临床症状,降低血清hs-CRP、MMP-9、VEGF、LPA水平,有利于脑血流速度改善.

目的:研究2015年版《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)收载的鹿源药材中硫酸软骨素的含量差异.方法:采用稀碱-浓盐法提取,硫酸软骨素ABC酶酶解样品中的硫酸软骨素,应用高效液相色谱法对样品中的总硫酸软骨素及硫酸软骨素A、B、C含量进行测定;色谱条件:Hypersil SAX强阴离子硅胶色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以2 mol·L-1的氯化钠溶液(盐酸调pH至3.5)和水(盐酸调pH至3.5)为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1,检测波长232 nm,柱温40℃.结果:梅花鹿鹿茸、鹿角(鹿角脱盘)、鹿角胶(鹿角脱盘胶)、鹿角霜(鹿角脱盘霜)中硫酸软骨素含量分别为2.06、0.46(0.42)、0.93(1.10)、0.22(0.17)g· kg-1;马鹿鹿茸、鹿角(鹿角脱盘)、鹿角胶(鹿角脱盘胶)、鹿角霜(鹿角脱盘霜)中硫酸软骨素含量分别为1.83、0.41(0.34)、0.91(0.87)、0.19(0.15)g· kg-1.结论:《中国药典》收载的鹿源药材中硫酸软骨素的含量差异很大,鹿茸中的最高,鹿角胶、鹿角、鹿角霜中的依次递减.

目的:骨关节炎是临床上的一种常见病和多发病.本研究尝试利用壳聚糖、透明质酸和硫酸软骨素为载体,制备一种携载生长分化因子5(GDF-5)质粒的纳米微球用于骨关节炎的基因治疗.创新点:首次利用壳聚糖、透明质酸、硫酸软骨素三种原料制备可携载GDF-5质粒的三元纳米微球,并将其应用到骨关节炎的治疗中.方法:在55°C下,按不同比例混合壳聚糖、透明质酸钠、硫酸软骨素和GDF-5质粒,利用静电吸附原理制备携载GDF-5质粒的三元纳米微球.分别利用扫描电镜和激光粒度散射仪测试微球的形貌和粒径;利用凝胶电泳检测质粒与微球的结合情况;利用CCK-8检测微球的细胞毒性.将携载GDF-5质粒的微球与软骨细胞共培养,并将脂质体和空载组作为对照组,在预定的时间点通过免疫荧光染色、免疫组化染色以及生化成分分析,观察微球对软骨细胞外基质分泌情况的影响.最后将该纳米微球注射到骨关节炎模型兔体内,通过大体观察、苏木精-伊红(H&E)染色、免疫荧光染色和免疫组化分析该微球对骨关节炎的作用.结论:本研究成功地利用壳聚糖、透明质酸和硫酸软骨素为原料,制备出携载GDF-5质粒的纳米微球.其中GDF-5质粒可以有效地促进软骨细胞外基质的分泌,透明质酸和硫酸软骨素是临床上常见的治疗骨关节炎的药物.微球具有良好的理化性能,其细胞毒性小,转染效率高,在体内外均能有效地促进软骨细胞外基质的分泌,能够在一定程度上延缓骨关节炎的进展.该纳米微球将是一种极具希望的可应用于骨关节炎基因治疗的载体.

目的:目的:评估骨关节炎在我国患病及用药现况,并进行疾病评估.方法:采用流行病学现场调查的研究方法,对2017年4-10月全国40家医院1 066例骨关节炎患者的一般资料、患病情况、用药情况以及关节功能进行评估.数据采用SPSS 19.0软件进行统计学处理,采用t检验、Mann-WhitneyU检验、卡方检验对数据进行分析.结果:本组1 066例患者中,男、女比例为1∶3.6,平均年龄(61.9±11.0)岁,年龄分布于36～94岁.膝骨关节炎、髋骨关节炎、手骨关节炎患病人数分别是873例(81.9％)、150例(14.1％)、387例(36.3％),其中合并两个部位的患者242例(22.7％),3个部位均受累关节炎患者为51例(4.8％).56.6％(603/1 066)患者应用过1种及以上非甾体抗炎药,28.9％ (308/1 066)患者应用1种及以上止痛药物.61.2％ (652/1 066)应用1种及以上改善病情骨关节炎药,包括氨基葡萄糖(400/1 066,37.5％)、硫酸软骨素(21/1 066,2.0％)、双醋瑞因(63/1 066,5.9％)或联合应用2种以上改善病情骨关节炎药(168/1 066,15.8％).92例(8.6％)患者应用止痛药控制症状,未进一步使用抗炎及保护关节药物.232例(21.8％)患者应用关节腔穿刺注射药物,应用玻璃酸钠或糖皮质激素分别为98例(9.2％)和48例(4.5％),而将二者联合应用达86例(8.1％).应用局部外用药物患者占26.5％ (283/1 066),理疗占15.8％(168/1 066).与膝关节受累患者相比,髋关节受累患者的病情明显更加严重,两组患者按照美国西部安大略和麦克马斯特大学(the Western Ontario and McMaster Universities,WOMAC)骨关节炎指数评分评估疼痛(Z=-7.625,P＜0.001)、僵硬感(Z=-6.229,P＜0.001)、关节功能(Z=-6.777,P＜0.001),差异均有统计学意义,并且髋骨关节炎患者更多应用止痛药物(x2=24.838,P＜0.001).结论:我国骨关节炎患者以口服非甾体抗炎药及改善病情骨关节炎药为主要治疗方式,但存在药物使用不规范情况;与膝骨关节炎相比,髋骨关节炎患者病情更为严重,需引起重视,并积极治疗.

硫酸软骨素A钠系由哺乳动物软骨中提取分离、精制而得的一种酸性粘多糖。

目的 建立高效液相-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)法同时测定银怡片(骨碎补、葛根、D-氨基葡萄糖硫酸钾盐等)中氨基葡萄糖、硫酸软骨素的含有量.方法 该药物水提液的分析采用Waters Xbridge Amide色谱柱(酰胺柱,4.6 mm× 150 mm,3.5 μm),以乙腈-50 mmol/L乙酸铵(含0.6％三乙胺)为流动相,等度洗脱(75∶25);体积流量0.8 mL/min;柱温40℃;蒸发光散射检测器,漂移管温度105℃;载气N2,体积流量2.5 mL/min.结果 氨基葡萄糖盐酸盐、硫酸软骨素钠分别在0.172 5～0.689 9 mg/mL (r=0.999 9)、0.168 7～0.674 7 mg/mL (r=0.999 4)范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为95.19％、103.72％,RSD分别为1.14％、2.84％.结论 该方法简便灵敏,重复性好,可用于银怡片的质量控制.