目的:探讨胆管阻塞患者经皮肝穿胆管引流术(PTCD)治疗后的肝损伤、炎症和胆汁淤积的预后影响因素及其护理策略。方法:2016年8月至2019年2月回顾性调查了盐城市第一人民医院住院接受PTCD手术治疗胆道梗阻的患者167例。共采用186次经皮引流术，患者平均年龄为63.6岁。手术前后取患者血液，用全自动生化分析仪测量血清中总胆红素(TBIL)、白蛋白(ALB)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)等肝功能因子，放射免疫法检测炎症因子C-反应蛋白(CRP)，以GGT/ ALP比值作为判断胆汁淤积指标。所有数据均进行统计分析，并比较不同年龄和性别胆管阻塞患者的肝损伤分级、出血量、炎症因子及患者病例率，并以多因素Logistic回归分析处理上述因素与经皮肝穿胆管引流术治疗患者预后的影响因素，并提出护理策略。结果:167例接受PTCD手术治疗胆道梗阻的患者共发生54例并发症，发生率为32.33%，其中包括4例死亡病例，发生率为2.40%；并发症性别比较差异无统计学意义( P>0.05)；不同年龄、肝损伤分级、出血量、炎症因子及患者病例率比较，差异均有统计学意义(均 P<0.05)，术中最常见的并发症是肝损伤(3.20%)，长期并发症是胆汁淤积(2.7%)。肝损伤分级、出血量、炎症因子及患者病例率是PTCD治疗患者预后的影响因素。 结论:胆管阻塞患者PTCD治疗预后的影响因素较多，可根据影响因素进行针对性干预。

目的:探讨肝组织细胞外囊泡（LT-EV）促进间充质干细胞成骨分化并治疗小鼠颌骨缺损的生物学过程，以期为临床颌骨缺损治疗提供一种可行的治疗方式。方法:使用酶解法和差速离心法提取小鼠LT-EV，使用扫描电镜、蛋白质印迹法和纳米粒子跟踪分析仪鉴定和表征LT-EV，并通过蛋白质组学、京都基因和基因组数据库通路分析进一步探索LT-EV的生物学功能。使用流式细胞术检测LT-EV血浆浓度，计算LT-EV的血浆半衰期。使用小动物活体成像系统检测小鼠注射LT-EV 24 h后的生物学分布。通过简单随机抽样法将6只C57BL/6小鼠分为对照组和LT-EV组（每组3只），所有小鼠行颌骨缺损手术，每7天行尾静脉注射（对照组注射磷酸盐缓冲液，LT-EV组注射LT-EV），术后28 d使用显微CT检测小鼠颌骨愈合程度，通过HE染色分析LT-EV的多器官生物安全性，使用免疫荧光染色检测颌骨缺损区域成骨标志蛋白表达量。采用LT-EV处理成骨分化诱导的人颌骨间充质干细胞（hJBMSC）（取自第四军医大学口腔医院创伤与正颌外科提供的正颌手术患者手术切除的正常颌骨骨片），并比较hJBMSC组与对照组（磷酸盐缓冲液处理）细胞成骨分化能力差异，通过碱性磷酸酶（ALP）染色和实时荧光定量PCR验证LT-EV的体外促成骨分化作用。结果:LT-EV产量较高，蛋白组学与京都基因和基因组数据库通路分析显示，LT-EV含有调节细胞生物功能的系列蛋白质。尾静脉注射的LT-EV可到达小鼠颌骨缺损区域，并促进颌骨缺损的再生修复［LT-EV组和对照组骨体积分数分别为（36.06±4.20）%和（18.58±5.61）%； t=4.32， P=0.013］，且具有良好的生物安全性。LT-EV在体外可以促进hJBMSC成骨分化，相比对照组，hJBMSC组成骨分化后ALP染色和成骨基因表达水平均显著增强（ P<0.05）。 结论:LT-EV产量大、易获取、生物安全性高并具备优良的促成骨作用，有望成为颅颌面骨骼缺损再生的无细胞疗法新策略。

目的:探讨负载银和重组人碱性成纤维细胞生长因子（rh-bFGF）的甲基丙烯酸酐化明胶（GelMA）水凝胶对兔深Ⅱ度烧伤创面的影响。方法:采用实验研究方法。制备含不同浓度甲基丙烯酸酐（MA）的低浓度MA明胶（GelMA）材料、中浓度GelMA材料和高浓度GelMA材料，加入光引发剂后分别制得低浓度GelMA水凝胶、中浓度GelMA水凝胶和高浓度GelMA水凝胶。采用核磁共振波谱仪检测前述3种浓度GelMA材料的氢核磁共振谱并根据波谱图计算其取代度，采用场发射扫描电子显微镜（FESEM）检测前述3种浓度GelMA水凝胶的三维微观结构及孔径，样本数均为9。根据前述筛选出的MA浓度合成含10种浓度银的GelMA（含银GelMA）溶液，将每种浓度的含银GelMA溶液均分为3份，加入光引发剂后分别暴露于紫外光下持续20、25、35 s，制得相应的含银GelMA水凝胶。采用胶原酶降解法测定不同光交联时间含银GelMA水凝胶降解12、24、36、48 h的降解剩余率及彻底降解所需时长，样本数为5。测定前述筛选出光交联时间下含10种浓度银GelMA水凝胶对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径反映其抑菌能力，样本数均为5。以与含最低浓度银（即不含银）GelMA水凝胶抑菌圈直径相比有统计学意义的含银GelMA水凝胶为有抑菌活性。选取具有抑菌活性的且载药浓度最低的含银GelMA水凝胶，采用FESEM检测其三维微观结构及孔径，采用能谱仪检测其内部银元素的存在情况，样本数均为9。将冻干单纯GelMA水凝胶和冻干含银GelMA水凝胶分别浸没于磷酸盐缓冲液中24 h，通过称重法计算并比较2种水凝胶的溶胀率，样本数为5。根据预实验及前述实验结果，制备含银和rh-bFGF的GelMA水凝胶（简称复合水凝胶）。大体观察复合水凝胶的外观，并采用FESEM检测其三维微观结构与孔径。取30只4~6个月龄、雌雄各半日本大耳兔，在其背部制作深Ⅱ度烧伤创面。以兔头侧为基准，将脊柱左侧创面作为复合水凝胶治疗组，右侧作为纱布对照组，2组创面分别作相应处理。观察伤后3、7、14、21、28 d创面愈合情况；记录伤后7、14、21、28 d创面愈合面积并计算其愈合率，样本数为30。对数据行重复测量方差分析、单因素方差分析、独立样本 t检验。 结果:低浓度GelMA材料、中浓度GelMA材料及高浓度GelMA材料的取代度，差异明显（ F=1 628.00， P<0.01）。低浓度GelMA水凝胶存在疏松、不规则三维空间网状结构，孔径为（60±17）μm；中浓度GelMA水凝胶的三维空间网络、孔径大小均较均匀规则，孔径为（45±13）μm；高浓度GelMA水凝胶的三维空间网状结构致密、层次混乱，孔径为（25±15）μm。3种GelMA水凝胶孔径大小差异有统计学意义（ F=12.20， P<0.01），选取（MA）中浓度为后续材料制作浓度。相同光交联时间下的含不同浓度银GelMA水凝胶的降解性基本一致；20、25、35 s光交联时间下含银GelMA水凝胶降解12 h的降解剩余率分别为（74.2±1.7）%、（85.3±0.9）%、（93.2±1.2）%，降解24 h的降解剩余率分别为（58.3±2.1）%、（65.2±1.8）%、（81.4±2.6）%，降解36 h的降解剩余率分别为（22.4±1.9）%、（45.2±1.7）%、（68.1±1.4）%，降解48 h的降解剩余率分别为（8.2±1.7）%、（32.4±1.3）%、（54.3±2.2）%；20、25、30 s光交联时间下含银GelMA水凝胶彻底降解所需时间分别为（50.2±2.4）、（62.4±1.4）、（72.2±3.2）h，差异有统计学意义（ F=182.40， P<0.01），选取25 s作为后续光交联时间。低浓度至高浓度的10种含银GelMA水凝胶对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径依次为（2.6±0.4）、（2.5±0.4）、（3.2±0.4）、（12.1±0.7）、（14.8±0.7）、（15.1±0.5）、（16.2±0.6）、（16.7±0.5）、（16.7±0.4）、（16.7±0.6）mm，基本呈浓度依赖性升高趋势，总体比较差异有统计学意义（ F=428.70， P<0.01），与含最低浓度银GelMA水凝胶相比，其他有抑菌活性的含低浓度至高浓度银GelMA水凝胶的抑菌圈直径均明显增大（ t值分别为26.35、33.84、43.65、42.17、49.24、55.74、43.72， P<0.01）。对金黄色葡萄球菌抑菌圈直径为（12.1±0.7）mm的含银GelMA水凝胶具有抑菌活性且载药浓度最低，选取该含银浓度为后续材料制作浓度。含银GelMA水凝胶的微观形貌为规律的趋于平行线性的条索状结构，孔径为（45±13）μm，且含有银元素。浸没24 h，含银GelMA水凝胶的溶胀率与单纯GelMA水凝胶相近（ P>0.05）。复合水凝胶呈无色清亮透明状；其三维结构为规则、均匀的网格状，内部存在细丝网状结构，孔径为（40±21）μm。伤后3 d，复合水凝胶组兔创面可见大量坏死组织及渗出物；纱布对照组兔创面可见散在结痂，亦可见少量坏死组织及渗出物。伤后7 d，复合水凝胶组兔创面已明显缩小，纱布对照组兔出现创面存在与纱布粘连情况。伤后14 d，复合水凝胶组兔创面红润、可见肉芽组织生长；纱布对照组兔创面基底呈苍白色、血运差。伤后21 d，复合水凝胶组兔创面完全愈合，纱布对照组兔创面出现愈合趋势。伤后28 d，复合水凝胶组兔创面部位可见新生毛发，纱布对照组兔仍残存椭圆形创面。伤后7、14、21、28 d，复合水凝胶组兔创面愈合率均明显大于纱布对照组（ t值分别为2.24、4.43、7.67、7.69， P<0.05或 P<0.01）。 结论:中浓度GelMA水凝胶在溶胀性、可降解性方面具有良好的理化特性，筛选出的含银GelMA水凝胶具有抑菌活性且载药浓度最低，制得的复合水凝胶可明显缩短兔深Ⅱ度烧伤创面愈合时间。

目的:观察碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）处理对脂肪间充质干细胞(ADSCs)治疗肝硬化大鼠疗效的影响。方法:采用四氯化碳腹腔注射10周诱导建立大鼠肝硬化模型。30只SD大鼠随机分为3组（ n = 10），对照组：尾静脉注射磷酸盐缓冲液（PBS） 0.5 ml；单纯ADSCs移植组（ADSCs组）：尾静脉移植1×10 6个ADSCs；bFGF处理的ADSCs治疗组[ADSCs（bFGF）组]：尾静脉移植1×10 6个bFGF处理的ADSCs。移植后1周检测肝功能、病理改变和细胞因子变化并监测移植细胞体内存活转化情况。统计学方法采用独立样本 t检验和方差分析。 结果:bFGF处理可明显促进ADSCs的增殖、分化以及过表达肝细胞生长因子（HGF）[ADSCs：（2137.16±261.52）pg/ml比ADSCs（bFGF）：（4 776.23±532.44）pg/ml， P < 0.05)，bFGF处理的ADSCs治疗组在促进肝功能恢复方面差异有统计学意义[丙氨酸转移酶（ALT）：ADSCs （190.8±34.98）U/L比ADSCs（bFGF）：（117.8±35.81）U/L;天冬氨酸转移酶（AST）：ADSCs （295.2±33.71）U/L比ADSCs（bFGF）：（183.8±41.29）U/L， P值均< 0.05]，PBS组和单纯ADSCs组以及单纯ADSCs组和ADSCs（bFGF）组组间血清白蛋白水平差异无统计学意义，而相比于PBS组，ADSCs（bFGF）组血清白蛋白水平明显升高（ P < 0.05），改善肝再生和减轻肝损伤方面较PBS对照组和单纯ADSCs移植组差异有统计学意义（ P < 0.05）；Masson trichrome染色显示bFGF处理的ADSCs治疗组肝纤维化面积百分比为6.78%±0.56%，明显高于PBS对照组和单纯ADSCs移植组（7.96%±0.64%）（ P < 0.05)；蛋白质印迹法分析显示bFGF处理的ADSCs治疗组肝组织HGF蛋白表达明显上调，而α-平滑肌肌动蛋白表达明显下调，与单纯ADSCs移植组存在明显差异，双重荧光染色法显示bFGF处理的ADSCs治疗组肝组织中干细胞植入数要高于单纯ADSCs移植组。体外细胞实验证实bFGF可明显促进ADSCs过表达HGF。 结论:bFGF处理的ADSCs移植可明显改善肝硬化大鼠的肝功能和纤维化。疗效优于ADSCs单独移植治疗。

目的:探讨兔角膜表层切削术后早期应用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对角膜上皮下雾状混浊(haze)的作用及其机制。方法:选取60只健康普通级新西兰大白兔，均行右眼准分子激光角膜切削术(PRK)，术后采用随机数字表法将实验眼分为PRK＋生理盐水组、PRK＋bFGF组和单纯PRK组，每组20眼，术后分别给予生理盐水和bFGF点眼，每日3次，每次1滴，单纯PRK组未行任何处理，药物连续应用至动物处死，另取8只兔为空白对照组。各手术组分别于术后7 d和28 d各取10只兔，空白对照组取4只兔，通过眼前节照相、眼前节光相干断层扫描成像(AS-OCT)记录角膜上皮愈合及haze情况，并行Fantes分级；采用苏木素-伊红染色法观察兔角膜组织病理学变化；采用免疫组织化学法检测兔角膜组织中转化生长因子-β 1(TGF-β 1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达。 结果:各手术组角膜上皮愈合时间比较差异无统计学意义( F＝0.57， P＝0.57)。各组兔眼术后不同时间点haze分级总体比较差异均有统计学意义( F组别＝41.736， P<0.01； F时间＝129.445， P<0.01)；术后28 d，PRK＋bFGF组haze分级明显高于PRK＋生理盐水组和单纯PRK组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。AS-OCT显示，空白对照组角膜上皮表面反射条带连续、光滑，上皮细胞与基质层排列紧密；术后7 d各组角膜上皮表面反射条带连续、光滑，与浅基质层连接欠紧密，浅基质层反射增强，组织病理学检查发现术区角膜上皮细胞和基质层细胞增生，基质层胶原纤维排列紊乱，其中以PRK＋bFGF组最明显；术后28 d，上述表现明显增强。免疫组织化学染色结果显示，空白对照组角膜组织中仅见少量MMP-2表达；术后7 d各手术组角膜组织中TGF-β 1、α-SMA、MMP-2均呈阳性表达，PRK＋bFGF组角膜组织中阳性染色最强；术后28 d，TGF-β 1、α-SMA和MMP-2的表达较术后7 d明显增加，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:表层切削术后早期应用bFGF可促进haze形成，其主要机制与bFGF促进角膜上皮细胞增生，影响浅基质层胶原排列，导致haze相关因子TGF-β 1、α-SMA和MMP-2表达增加有关。

目的:研究前列地尔对快速上浮脱险致减压病大鼠心肺系统的影响。方法:80只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组、前列地尔预防1组、前列地尔预防2组和前列地尔预防3组，每组20只。3个前列地尔预防组大鼠在进舱前15 min通过尾静脉分别注射前列地尔溶液（5、10、20 μg/kg）；对照组大鼠在进舱前15 min注射等体积生理盐水。4组大鼠进舱后，采用压缩空气以指数速率2 T/7加压至1.5 MPa，停留4.5 min后以3 m/s速度减压出舱。出舱后即刻观察大鼠的行为学表现并统计存活率；30 min后采用5%戊巴比妥溶液腹腔注射麻醉大鼠，摘取右下肺组织进行肺干湿重比检测；另取心脏和肺脏组织，4%中性甲醛溶液固定，经过脱水、包埋、切片和染色等处理后于显微镜下观察其病理改变。经下腔静脉收集静脉血用于血清生化指标［谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）和碱性磷酸酶（ALP）］和血浆D-二聚体的检测。 结果:前列地尔预防3组大鼠存活率（70%）显著高于对照组（40%），差异有统计学意义（ P<0.05）；前列地尔预防3组大鼠肺组织干湿重比与对照组相比差异显著（ P<0.01）。对照组大鼠肺泡结构大面积破坏融合，肺泡腔内可见红细胞渗出，心肌纤维水肿、变性，断裂明显；前列地尔预防组大鼠肺泡壁增厚程度和心肌纤维水肿程度显著减轻。此外，前列地尔预防组大鼠血清ALT、AST、ALP水平以及血浆D-二聚体含量明显降低（ P<0.05）。 结论:前列地尔通过减轻大鼠心肺组织的损伤和炎症反应，达到预防快速上浮脱险所致减压病的目的。

目的:探讨镭-223在骨转移去势抵抗性前列腺癌(mCRPC)中的疗效及安全性。方法:回顾性分析2021年2月至2022年5月复旦大学附属肿瘤医院采用镭-223治疗的48例mCRPC患者的临床资料。平均年龄70.5(49~90)岁，中位前列腺特异性抗原(PSA) 44.70(0.15~1 864.00)ng/ml，中位血清碱性磷酸酶(ALP)162(43~1 589)U/L。患者均有骨痛症状，均存在骨转移且不伴内脏转移(骨转移数量>1处，分期ⅣB期)。自诊断mCRPC至开始使用镭-223的中位时间为10(3~47)个月。9、18、11例患者既往分别接受一线、二线、三线针对mCRPC的药物治疗，10例曾接受至少四线治疗。38例(79.1%)、31例(64.5%)、30例(62.5%)、7例(14.6%)患者既往分别使用过阿比特龙、恩扎卢胺、多西他赛、奥拉帕利。48例均行镭-223治疗(55 kBq/kg，每4周注射1次，计划使用6周期)。分析PSA较基线水平下降>30%的比率、ALP较基线水平下降>30%的比率、症状减轻率、中位总体生存期(OS)等疗效指标，以及治疗相关不良反应情况、中途停止治疗的原因等。结果:本研究48例中位随访时间8(1~16)个月，11例完成6个疗程治疗，中位治疗4(1~6)个疗程。27例(56.2%)使用镭-223的同时使用骨保护药物(双磷酸盐/地舒单抗)。10例(20.8%)治疗期间PSA下降>30%，25例(52.1%)ALP下降>30%。23例(47.9%)骨痛症状减轻。9例既往仅接受一线针对mCRPC治疗者中，6例(66%)骨痛症状减轻，4例(44%)PSA下降>30%。18例既往接受二线治疗者中，11例(61%)骨痛症状减轻，4例(22%)PSA下降>30%。21例既往接受三线及以上治疗者中，6例(28.5%)骨痛症状减轻，2例(9.5%)PSA下降>30%。48例中位OS未达到，使用Kaplan-Meier法预估中位OS为12.5个月。最常见的血液学不良反应为血小板下降(15例，31.2%；其中3级6例，4级0例)，其次为白细胞下降(11例，22.9%；其中3级4例，4级1例)和贫血(8例，16.7%；其中3级3例，4级0例)。非血液学不良反应包括：发热1例(2.1%)，便秘4例(8.3%)，恶心呕吐10例(20.8%)，腹泻7例(14.6%)，头晕1例(2.1%)和乏力11例(22.9%)。因无法耐受不良反应导致治疗终止7例(中位治疗2个疗程)，因疾病进展/死亡导致治疗终止14例(中位治疗2个疗程)，因其他原因自主终止治疗5例(中位治疗1个疗程)。结论:对于既往接受一线或二线治疗的mCRPC患者，镭-223在症状控制方面表现良好。因血液学不良反应发生率较高，治疗过程中应密切关注血常规变化，及时对症处理，以提高患者对药物的耐受能力。

目的:研究嗜酸性粒细胞信号蛋白4D（SEMA4D）在嗜酸性慢性鼻-鼻窦炎（ECRS）小鼠中的病理作用及意义。方法:动物实验：使用曲霉蛋白酶与卵白蛋白创建ECRS小鼠模型，配置抗SEMA4D抗体治疗液。将ECRS小鼠模型分为治疗组与对照组，治疗组小鼠接受腹膜注射抗SEMA4D抗体治疗，对照组注射等量生理盐水溶液。治疗一个月后，收集小鼠鼻腔灌洗液（NLF），检测NLF内嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及炎性因子水平。细胞实验：分别使用人IgG-Fc及重组SEMA4D（rSEMA4D）处理人鼻上皮细胞（HNEpC）与人脐静脉细胞（HUVEC），采用体外血管渗透性测定试剂盒测定上皮细胞渗透性，使用RhoA G-LISA活化检测试剂盒测定HNEpC中活性RhoA，白细胞经内皮迁移试验检测嗜酸性粒细胞跨内皮迁移率。结果:ECRS小鼠血清可溶性SEMA4D及基质金属蛋白酶-9（MMP-9）水平显著高于正常小鼠（ t=9.253,13.053，均 P<0.05）。抗SEMA4D抗体处理的ECRS小鼠NLF中嗜碱性粒细胞及嗜酸性粒细胞水平均显著低于对照组小鼠（ t=14.621,18.721，均 P<0.05），且炎性因子IL-4及IL-6水平显著低于对照组小鼠（ t=19.261,9.766，均 P<0.05）。渗透性试验表明，经rSEMA4D处理过的HNEpC,通透性均较对照细胞显著上升（ P<0.05），嗜酸性粒细胞经内皮迁移率迁移率也显著升高（ P<0.05）。rSEMA4D处理后，RohA活性均显著上升（ P<0.05）。 结论:SEMA4D可能通过提高人鼻上皮细胞内RohA活性，增强内皮细胞通透性，促进嗜酸性粒细胞浸润鼻息肉，参与ECRS的发生及发展，而动物实验表明，抗SEMA4D抗体在改善ECRS小鼠模型NLF中嗜酸性粒细胞浸润及炎症反应中具有明显的效果。

目的:探讨松脂醇二葡萄糖苷（pinores inoldiglucoside，PDG）对小鼠骨质疏松的改善作用及可能的作用机制。方法:采用摘除双侧卵巢的方法构建骨质疏松小鼠模型，将构建成功的50只小鼠按照随机数字表法分为模型组（model，MOD）（等量生理盐水灌胃）、阳性对照组（positive control，PC）（以0.2 mg/kg雌二醇灌胃）、PDG-低剂量组（L）（5 mg/kg PDG灌胃）、PDG-高剂量组（H）（10 mg/kg PDG灌胃）和PDG-H+ML385组（肌肉注射30 mg/kg ML385后，10 mg/kg PDG灌胃），每组10只；另选10只卵巢不做任何处理的小鼠作为假手术组（Sham）（等量生理盐水灌胃）。给药干预3周后采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测小鼠血清碱性磷酸酶（ALP）、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平，双能X线检测骨密度，实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和免疫印迹法（Western blot）分别检测核因子相关因子2（Nrf2）、氧化酶血红素加氧酶1（HO-1）、醌氧化还原酶1（NQO1）mRNA和蛋白表达水平。结果:假手术组、模型组、阳性对照、PDG-低剂量、PDG-高剂量和PDG-高剂量+ML385组小鼠血清ALP水平分别为（25.88±3.42）、（47.42±5.32）、（36.20±3.37）、（38.95±3.24）、（29.66±2.64），（39.57±2.06）U/dl；血清TRAP水平分别为（2.18±0.40）、（4.69±0.83）、（3.58±0.38）、（3.67±0.48）、（2.93±0.26）、（3.81±0.49）U/L；骨密度（153.04±12.96）、（86.25±6.71）、（126.53±8.99）、（119.77±8.84）、（139.18±15.94）、（92.09±4.17）mg/cm 2；Nrf2 mRNA表达水平分别为（1.00±0.00）、（0.35±0.04）、（0.67±0.05）、（0.54±0.03）、（0.82±0.08）、（0.48±0.04）；HO-1mRNA表达水平分别为1.00±0.00，0.25±0.03，0.56±0.03，0.47±0.03，0.71±0.04，0.37±0.04；NQO1mRNA表达水平分别为1.00±0.00，0.38±0.02，0.63±0.03，0.58±0.04，0.79±0.05，0.44±0.03；Nrf2蛋白表达水平分别为0.98±0.08、0.26±0.04、0.52±0.06、0.46±0.03、0.86±0.07、0.45±0.05；HO-1蛋白表达水平为0.39±0.02、0.09±0.01、0.15±0.03、0.17±0.03、0.26±0.03、0.12±0.02；NQO1蛋白表达水平分别为0.53±0.03、0.21±0.02、0.38±0.04、0.29±0.02、0.55±0.03、0.24±0.04；血清IL-6水平分别为（104.25±11.35）、（515.38±74.48）、（351.78±65.12）、（364.73±36.64）、（246.18±17.52）、（408.93±32.56）pg/ml；血清TNF-α水平分别为（33.79±3.55）、（170.11±19.24）、（76.09±8.99）、（84.95±6.12）、（66.98±3.73）、（119.04±9.75）pg/ml；血清SOD水平分别为（258.47±19.25）、（72.15±8.12）、（187.60±14.63）、（152.61±12.36）、（204.22±19.65）、（138.01±13.62）U/ml；血清MDA水平分别为（2.02±0.27）、（4.75±0.73）、（3.19±0.46）、（3.72±0.49）、（2.91±0.42）、（4.10±0.25）μmol/L。模型组与假手术组比较，阳性对照组、PDG-低剂量组、PDG-高剂量组、PDG-高剂量组+ML385组与模型组比较及PDG-高剂量+ML385组与PDG-高剂量组比较，差异均有统计学意义（均 P<0.05）。 结论:PDG可通过激活Nrf2通路降低骨组织炎症和氧化应激水平改善骨质疏松状态。

目的:探讨低氧预处理大鼠脂肪源性间充质干细胞(ADSC)条件培养基对全层皮肤缺损大鼠创面愈合的影响。方法:(1)取6周龄雄性SD大鼠1只，颈椎脱臼处死，分离双侧腹股沟脂肪组织，胶原酶消化法提取第3代ADSC，观察细胞形态后用于后续实验。取细胞，采用随机数字表法(分组方法下同)分为成脂诱导组和成骨诱导组，每组各6孔。成脂诱导组培养14 d观察成脂情况，成骨诱导组培养28 d观察成骨情况。(2)取第3代ADSC，分为常氧组和低氧组，常氧组细胞置于氧气体积分数20%的常氧培养箱中培养，低氧组细胞置于氧气体积分数2%的低氧培养箱中培养。常氧组培养3 h，低氧组培养3、6、12、24、48 h，分别取3个样本，进行后续指标检测。实时荧光定量反转录PCR检测低氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)的mRNA表达量。收集2组细胞培养上清液，离心过滤后获得常氧条件培养基(normo-CM)和低氧条件培养基(hypo-CM)，酶联免疫吸附测定法检测条件培养基中VEGF、转化生长因子β(TGF-β)、表皮生长因子(EGF)和胰岛素样生长因子(IGF)含量。(3)取27只6～8周龄雄性SD大鼠，分为磷酸盐缓冲液(PBS)组、normo-CM组和hypo-CM组，每组9只，在其背部制作直径为1 cm的圆形全层皮肤缺损创面并分别滴加50 μL PBS、normo-CM及hypo-CM。伤后0、3、5、7、9、11 d，观察创面大体情况，测量创面面积并计算创面未愈合率。取创面组织，苏木精-伊红染色观察伤后3、9、11 d创面炎症反应及伤后9 d创面再上皮化水平；Masson染色观察伤后11 d创面胶原沉积情况，并分析胶原容积分数(CVF)。对数据行重复测量方差分析、单因素方差分析、 t检验、Bonferroni校正。 结果:(1)细胞融合度低时呈长梭形、贴壁生长、排列紧密。培养14 d，成脂诱导组细胞经油红O染色后被染成红色的脂滴。培养28 d，成骨诱导组细胞经茜素红S染色后可见红色结节。细胞鉴定为ADSC。(2)与常氧组比较，低氧组细胞培养12、24 h HIF-1α mRNA表达量明显升高( t＝5.43、5.11， P<0.05)；培养6、12 h VEGF mRNA表达量明显升高( t＝3.29、2.33， P<0.05或 P<0.01)；bFGF mRNA培养12 h表达量明显升高( t＝12.59， P<0.01)，培养48 h明显降低( t＝9.34， P<0.01)；培养3、12、24 h PPAR-γ mRNA明显降低( t＝5.14、6.56、4.97， P<0.05)。(3)与常氧组相比，低氧组细胞培养3、6、12、24、48 h VEGF含量明显升高( t＝5.74、12.37、14.80、15.70、34.63， P<0.05或 P<0.01)，培养6、12、24、48 h IGF含量明显升高( t＝5.65、8.06、20.12、22.99， P<0.05或 P<0.01)，培养各时间点TGF-β和EGF含量无明显变化。(4)伤后0～11 d，3组大鼠创面均不同程度缩小，未见明显感染、渗出等。伤后11 d，PBS组大鼠创面面积仍较大；normo-CM组大鼠创面面积较PBS组缩小，hypo-CM组大鼠创面已基本愈合。伤后7 d，normo-CM组和hypo-CM组大鼠创面未愈合率明显低于PBS组( t＝10.26、16.03， P<0.05)。伤后9 d，hypo-CM组大鼠创面未愈合率明显低于PBS组和normo-CM组( t＝17.25、6.89， P<0.05或 P<0.01)，normo-CM组大鼠创面未愈合率明显低于PBS组( t＝8.81， P<0.05)。伤后11 d，hypo-CM组大鼠创面未愈合率为(2.4±1.5)%，明显低于PBS组的(20.0±5.0)%和normo-CM组的(7.7±1.7)%， t＝30.15、84.80， P<0.05。(5)伤后3 d，hypo-CM组大鼠创面炎症细胞浸润明显多于其余2组；伤后9 d，normo-CM组和hypo-CM组大鼠创面炎症细胞浸润均少于PBS组；伤后11 d，hypo-CM组大鼠创面炎症细胞浸润明显少于PBS组和normo-CM组。(6)伤后9 d，hypo-CM组大鼠创面"表皮迁移舌"长度长于其他2组，表皮厚度接近正常皮肤。伤后11 d，与PBS组和normo-CM组相比，hypo-CM组大鼠创面中可见大量结构致密、排列整齐、成熟度较高的胶原沉积。PBS组大鼠创面CVF为(22.90±1.25)%，显著低于normo-CM组的(31.96±0.14)%和hypo-CM组的(56.10±1.50)%( t＝12.48、29.43， P<0.05)；normo-CM组大鼠创面CVF显著低于hypo-CM组( t＝27.73， P<0.05)。 结论:低氧处理可显著增强大鼠ADSC的旁分泌作用，低氧预处理的大鼠ADSC条件培养基可通过调控炎症细胞浸润程度、促进创面再上皮化和胶原沉积，加速大鼠全层皮肤缺损创面愈合。