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3,5,2',4'-四羟基查尔酮对大鼠尿酸及PC12细胞嘌呤代谢酶的影响
编辑人员丨2023/8/6
目的 研究3,5,2',4'-四羟基查尔酮(P40)对高尿酸血症大鼠尿酸的影响及对PC12细胞嘌呤代谢关键酶的影响.方法 灌胃给予SD大鼠P40 (2.0、4.0和8.0 mg/kg)5次,末次给药前1h腹腔注射氧嗪酸钾(250mg/kg)诱导成高尿酸血症动物模型,注射后2h取血,用磷钨酸法测定血尿酸水平及肝尿酸含量.给予PC12细胞系列浓度的P40和阳性对照药别嘌醇后培养48 h,收集细胞提取总RNA,采用逆转录聚合酶链(RT-PCR)的方法,检测嘌呤代谢关键酶HGPRT、PRPS和PRPPAT mRNA的表达水平.结果 给予P40 2.0、4.0 mg/kg均能显著降低高尿酸血症大鼠的血尿酸水平,和模型组相比,差异有统计学意义(P<0.01),但对肝尿酸含量没有影响.给予P401×10-8,1×10-7, 1×10-6 mol/L处理PC12细胞48 h后,对HGPRT、PRPS和PRPPAT基因的mRNA表达没有明显影响,与对照组相比差异无统计学意义(P<0.01).结论 在本实验条件下,P40能降低氧嗪酸钾诱导的高尿酸血症大鼠的血尿酸水平,对PC12细胞的HGPRT、PRPS和PRPPAT基因的mRNA表达无影响.
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编辑人员丨2023/8/6
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芒果苷对高尿酸血症小鼠血尿酸及嘌呤代谢相关酶表达的影响
编辑人员丨2023/8/6
目的:研究芒果苷对氧嗪酸钾诱导的高尿酸血症小鼠血尿酸的影响以及对磷酸核糖焦磷酸合成酶(PRPS),磷酸核糖焦磷酸酰胺转移酶(PRPPAT)和次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT) mRNA表达水平的影响.方法:雄性昆明种小鼠60只,随机分为正常组、高尿酸血症模型组、芒果苷1.5,3.0,6.0 mg·kg-1组、别嘌醇组(1.0 mg·kg-1),每组10只.按10 mL·kg-1每天灌胃给药2次,连续10次,给药后1h再灌胃给予氧嗪酸钾(500.0 mg· kg-1)诱导形成高尿酸血症小鼠.磷钨酸法测血清尿酸水平,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测小鼠肝脏PRPS,PRPPAT和脑组织中HGPRT mRNA的表达水平.结果:灌胃给予氧嗪酸钾后,与正常组比较,模型组小鼠血尿酸水平显著升高(P<0.05);给予芒果苷和别嘌醇后,与模型组比较,芒果苷各剂量(1.5,3.0,6.0 mg·kg-1)和别嘌醇(1.0 mg·kg-1)均能显著降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平(P<0.05,P<0.01);与正常组和模型组比较,芒果苷各剂量组小鼠肝脏PRPS和PRPPAT mRNA的表达没有显著性差异,小鼠脑组织中HGPRT mRNA表达水平也没有显著性差异.结论:在本实验条件下,芒果苷的降尿酸作用与嘌呤代谢相关酶PRPS,PRPPAT和HGPRT mRNA的表达无关.
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编辑人员丨2023/8/6
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基于CRISPR/Cas9技术对刚地弓形虫假定蛋白TGGT1_310420的研究
编辑人员丨2023/8/6
目的 鉴定刚地弓形虫假定蛋白TGGT1_310420在速殖子阶段的功能及其蛋白N端序列的亚细胞定位作用. 方法 在线设计针对TGGT1 310420的sgRNA,通过定点突变弓形虫CRISPR/Cas9载体pSAG1::CAS9-GFP-U6::sgUPRT上的sgRNA序列获得针对TGGT1_310420的CRISPR/Cas9载体.利用CRISPR/Cas9编辑技术将含有荧光蛋白mCherry和弓形虫次黄嘌呤-黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HXGPRT)的PCR片段mCherry-Ty_HXGPRT插入至TGGT1_310420内源基因编码N端前20个氨基酸残基之后.通过PCR鉴定片段是否正确插入;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹分析检测融合蛋白的表达情况.间接免疫荧光分析和共聚焦显微镜观察融合蛋白亚细胞定位;空斑实验检测基因缺失株虫体表型的变化. 结果 PCR和测序结果显示,成功构建了针对TGGT1_310420的CRISPR/Cas9载体,mCherry-Ty_HXGPRT序列定点插入至靶点位置.蛋白质印迹分析结果显示,mCherry融合蛋白的相对分子质量(Mr)约为36 000;间接免疫荧光实验表明mCherry融合蛋白与弓形虫滑行相关蛋白45(TgGAP45)共定位于虫体的表膜.空斑实验检测结果显示,TrGGT1 _310420的缺失并未引起虫体出现可测的表型变化. 结论 TGGT1_310420编码蛋白前20个氨基酸残基序列具有定位到弓形虫表膜的功能,TGGT1_310420在弓形虫速殖子阶段为非必需基因.
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编辑人员丨2023/8/6
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奥柳氮钠对高尿酸血症小鼠嘌呤及尿酸代谢关键酶ADA的影响
编辑人员丨2023/8/5
目的 研究奥柳氮钠对氧嗪酸钾诱导的高尿酸血症小鼠嘌呤及尿酸代谢关键酶的影响.方法 昆明种小鼠60只,随机分为6组,分别为正常组、模型组、奥柳氮钠组(3、6、12 mg·kg-1)及阳性药非布索坦组(1 mg·kg-1).除非布索坦为灌胃给药外,其余各组分别腹腔给予相应剂量的药物或溶媒,每天2次,共5次.末次给药前1h腹腔注射氧嗪酸钾(500 mg·kg-1)造模.末次给药1h后取小鼠血液、肝脏及脑组织,检测小鼠血清尿酸、血清或组织中腺苷脱氨酶(ADA)、次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)、磷酸核糖焦磷酸合酶(PRPS)及磷酸核糖焦磷酸酰胺转移酶(PRPPAT)的蛋白或mRNA水平.同时检测奥柳氮钠体外对尿酸氧化酶的抑制作用.结果 奥柳氮钠可显著改善高尿酸血症小鼠的血尿酸水平,奥柳氮钠对高尿酸血症小鼠肝脏PRPPAT、PRPS及脑HGPRT的蛋白及mRNA水平无显著影响,奥柳氮钠可显著降低高尿酸血症小鼠的血清ADA水平,奥柳氮钠体外对尿酸氧化酶活性无显著影响.结论 奥柳氮钠对ADA的抑制作用可能是其治疗高尿酸血症的重要机理.
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编辑人员丨2023/8/5
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结直肠癌组织中PPAT的水平及临床意义
编辑人员丨2023/8/5
目的 探讨结直肠癌组织中磷酸核糖焦磷酸酰胺转移酶(PPAT)的水平及临床意义.方法 基于TIMER、GEPIA和UALCAN数据库分析PPAT在结直肠癌组织和正常组织之间的表达差异,采用实时定量PCR检测 105 对结直肠癌组织和癌旁组织的PPAT水平及其与结直肠癌临床病理特征和预后的关系,TIMER数据库探讨PPAT在结直肠癌中的表达与免疫浸润水平的相关性.结果 TIMER、GEPIA和UALCAN数据库分析结果均发现,结直肠癌的PPAT水平高于正常组织,差异有统计学意义(P<0.05);利用qPCR验证发现,癌组织的PPAT水平为5.287±1.996,高于癌旁组织的1.392±0.751,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线显示组织PPAT水平诊断结直肠癌的曲线下面积分别为 0.958(95%CI:0.932~0.985),以2.931 为参考值时对应的约登指数最大,灵敏度分别为 86.67%,特异度为 97.14%.组织PPAT水平与性别、年龄、家族史、部位和T分期无关(P>0.05),而与分化程度、淋巴结转移、肿瘤大小和TNM分期有关(P<0.05).PPAT低水平者的中位总生存期为50.0 个月,优于高水平者的45.5 个月(HR=4.123,95%CI:1.952~6.245,P<0.001),经多因素分析显示PPAT水平升高是结直肠癌患者预后不良的独立危险因素(HR=3.245,95%CI:1.754~5.012,P=0.013).结肠癌中PPAT水平与B细胞、CD8+T细胞、巨噬细胞、中性粒细胞和树突状细胞的浸润呈显著正相关(P<0.05),而与CD4+T细胞的浸润无关(P>0.05);直肠癌中PPAT水平与CD8+T细胞、中性粒细胞的浸润呈显著正相关(P<0.05),而与B细胞、CD4+T细胞、巨噬细胞和树突状细胞的浸润无关(P>0.05).结论 PPAT可能是结直肠癌的一种潜在的新的预后标志物,PPAT过度表达可能参与CRC的能量代谢和免疫浸润调节.
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编辑人员丨2023/8/5
