目的 探讨环状人网状蛋白4(CircRTN4)调节miR-582-5p/神经纤毛蛋白1(NRP1)轴对结直肠癌(CRC)细胞恶性生物学行为的影响.方法 选取2019年1月至2023年1月河南科技大学第一附属医院收治的CRC患者50例,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白质免疫印迹法分别检测患者的癌组织、癌旁组织、人正常结肠黏膜上皮细胞和CRC细胞中CircRTN4、miR-582-5p mRNA及NRP1的蛋白表达;将SW480细胞分别转染si-RTN4、miR-582-5p inhibitor及相应对照,qRT-PCR检测转染效率;通过平板克隆实验、Transwell小室和流式细胞仪等研究CircRTN4对CRC细胞的影响;蛋白质免疫印迹法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)及NRP1蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验检测miR-582-5p与RTN4和NRP1的作用;构建肺癌裸鼠模型,分析敲低RTN4对肿瘤质量、体积及移植瘤中miR-582-5p、NRP1、Ki-67蛋白表达的影响.结果 在CRC组织和细胞系中,RTN4、NRP1表达升高,miR-582-5p表达降低(P<0.05);敲低RTN4,降低SW480细胞迁移、增殖与侵袭,下调PCNA、Bcl-2、MMP-2、NRP1表达,促进miR-582-5p、Bax表达及细胞凋亡(P<0.05);miR-582-5p作为RTN4靶点,下调miR-582-5p可减弱RTN4敲低对SW480细胞恶性行为的抑制作用(P<0.05);体内实验显示,抑制RTN4可降低移植瘤质量和体积,降低Ki-67、NRP1表达水平,升高miR-582-5p表达(P<0.05).结论 在CRC组织和细胞系中,CircRTN4高表达,敲低CircRTN4可能通过调节miR-582-5p/NRP1轴抑制CRC细胞的恶性行为.

目的:构建同时表达神经纤毛蛋白质1(NRP-1)和存活素(Survivin)双基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达质粒，通过体内外实验，观察其对鼻咽癌细胞CNE-2Z生长增殖的影响。方法:构建同时表达NRP-1和Survivin双基因的质粒(Plasmid-1)，并构建单独表达NRP-1和Survivin基因质粒(分别为Plasmid-2、Plasmid-3)。转染入鼻咽癌CNE-2Z细胞株，于荧光显微镜观察质粒转染及表达情况；以噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力；定量聚合酶链反应(PCR)及免疫印迹法(Western blot)在mRNA水平和蛋白水平上检测目的基因抑制作用。建立稳定转染裸鼠移植瘤模型，体内裸鼠成瘤实验观察质粒对肿瘤的抑制效果。原位缺口末端标记法(TUNEL)法检测移植瘤细胞凋亡率。多组间比较采用单因素方差分析。结果:通过测序证实重组shRNA真核表达载体构建成功。各重组质粒表达载体成功转染CNE-2Z细胞，可见大量的癌细胞表达绿色荧光。MTT显示细胞增殖受到抑制，且双基因干扰质粒对细胞增殖的抑制作用明显强于单基因干扰质粒，差异有统计学意义(0.209±0.021比0.392±0.013、0.384±0.014， F＝354.121， P<0.05)。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)证实双基因联合沉默组和单基因沉默组均能有效抑制目的基因mRNA表达，双基因组NRP-1 mRNA(0.20±0.06)表达明显低于NRP-1单基因组(0.27±0.05)，差异有统计学意义( F＝198.437， P<0.05)；双基因组Survivin mRNA表达(0.13±0.02)明显低于Survivin单基因组(0.17±0.01)，差异有统计学意义( F＝245.647， P<0.05)。Western blot检测结果双基因组对NRP-1和Survivin蛋白的表达抑制率分别为67.41%和79.24%，与单基因组比较均有统计学意义( F＝129.354、216.411， P<0.05)。体内抑瘤实验证实，与NRP-1单基因干扰组[(0.628±0.013) cm 3]、Survivin单基因干扰组[(0.601±0.301) cm 3]比较，双基因干扰组[(0.205±0.002) cm 3]瘤体积生长明显受到抑制，差异有统计学意义( F＝49.214， P<0.05)，抑瘤率为81.71%。TUNEL实验表明双基因干扰组凋亡指数[(49.84±1.98)%]，显著高于NRP-1单基因组[(21.53±2.01)%， P<0.05]和Survivin单基因组[(19.91±2.11)%]，差异有统计学意义( F＝254.130， P<0.05)。 结论:同时表达两个不同基因的shRNA质粒载体转染鼻咽癌细胞后，可同时敲降NRP-1和survivin基因表达，与单个基因沉默比较，可以更好的促进细胞凋亡，抑制细胞生长增殖。

2019新型冠状病毒(2019 novel coronavirus，2019-nCoV)的主要靶器官是肺，严重者发生急性呼吸窘迫综合征而危及生命。2019-nCoV的人类病毒受体主要为血管紧张素转换酶2(ACE2)，其他已报道的受体还有CD147蛋白、酪氨酸蛋白激酶受体UFO、神经纤毛蛋白1、肾损伤因子1等。2019-nCoV可通过与ACE2结合，下调ACE2表达，导致血管紧张素水平增高，通过下游信号引起肺损伤。2019-nCoV还可引起炎症因子风暴、凝血功能紊乱、触发肺上皮细胞凋亡等机制导致肺损伤。儿童感染2019-nCoV后临床症状较轻，系由于儿童的固有免疫应答优势而适应性免疫应答水平低下所致。防治肺损伤的根本措施在于抑制2019-nCoV病毒的增殖和复制，但目前尚没有找到抗病毒的特效药物。重组人可溶性ACE2蛋白、针对S蛋白的中和抗体、抑制血管紧张素2、拮抗炎症因子、干细胞输注等措施可能有助于减轻肺损伤。

目的:探讨调节性T细胞（Treg）的分化对放射性肺损伤的影响及其作用机制。方法:建立Treg抑制小鼠模型，按随机数字表法将C57BL/6小鼠分成4组：空白对照组、单纯照射组、照射+免疫球蛋白G（IgG）组和照射+CD25组，每组12只，除空白对照组外其余3组小鼠给予单次20 Gy X射线全胸照射，照射+IgG组和照射+CD25组小鼠每周腹腔注射IgG抗体和CD25抗体。分别于照射后第4周和第8周各处死小鼠6只，采用流式细胞术检测小鼠肺组织内CD25 +Foxp3 +Treg（Foxp3：叉头样转录因子3）的百分比以鉴定模型是否建立成功；采用Western blot法检测单纯照射组小鼠肺组织内神经纤毛蛋白1（NRP1）的表达；采用免疫荧光法检测每组小鼠肺组织内CD25 +NRP1 +Treg的百分比；拍照并观察每组小鼠皮肤的损伤情况，采用苏木精-伊红染色法检测小鼠肺组织的病理学改变；采用酶联免疫吸附测定法检测每组小鼠肺组织内转化生长因子β1（TGF-β1）、白细胞介素（IL）-17A、干扰素γ（IFN-γ）、IL-2和IL-4的水平变化。两组间比较采用独立样本 t检验。 结果:流式细胞术检测结果显示，照射后第4周和第8周，单纯照射组小鼠肺组织内CD25 +Foxp3 +Treg百分比[（1.73±0.04）%、（2.13±0.15）%]均较空白对照组[（1.14±0.02）%、（1.70±0.06）%]明显升高，差异均有统计学意义（ t=-26.680、-4.545， P=0.000、0.010），抑制Treg后，第4周和第8周时照射+CD25组小鼠肺组织内CD25 +Foxp3 +Treg百分比[（0.72±0.14）%、（0.27±0.02）%]均较单纯照射组明显降低，差异均有统计学意义（ t=5.296、37.538，均 P=0.000）。Western blot结果显示，照射后第4周和第8周，单纯照射组小鼠肺组织内NRP1蛋白表达水平均较空白对照组升高，差异均有统计学意义（ t=-7.341、-9.127，均 P=0.000）。免疫荧光法检测结果显示，照射后第4周和第8周，单纯照射组小鼠肺组织内CD25 +NRP1 +Treg的百分比均较空白对照组升高，而照射+CD25组CD25 +NRP1 +Treg百分比均较单纯照射组降低，且差异均有统计学意义（ t=8.926、14.457， P=0.001、0.000）。观察小鼠皮肤损伤程度后发现，照射后第4周和第8周，单纯照射组小鼠皮肤损伤严重，而照射+CD25组小鼠照射后第4周时皮肤基本完好，第8周时出现脱毛脱皮。病理学结果显示，照射后第4周和第8周，与空白对照组相比，单纯照射组小鼠的肺组织结构破坏，肺泡壁增厚，细胞外基质增多，而照射+CD25组小鼠的肺组织结构完整，肺泡壁纤细。酶联免疫吸附测定结果显示，与空白对照组相比，照射后第4周，单纯照射组小鼠肺组织内IL-17A和IL-4的水平均升高，差异均有统计学意义（ t=-8.492、-15.796， P=0.001、0.000），照射后第8周，TGF-β1和IL-17A水平升高，差异均有统计学意义（ t=-11.072、-7.167， P=0.000、0.002），IL-2水平在第4周和第8周时均降低，IFN-γ水平在第4周时升高，差异有统计学意义（ t=-27.393， P=0.000），第8周时下降；与单纯照射组相比，照射+CD25组小鼠TGF-β1和IL-17A水平在第4周和第8周时均降低（ t=6.037、4.524、5.496、4.772，均 P=0.000），IFN-γ水平升高（ t=-7.006、-12.565， P=0.002、0.000），差异均有统计学意义，而IL-2和IL-4水平在第4周时均降低，第8周时均明显升高，差异均有统计学意义（ t=2.866、-9.090、8.833、-7.191，均 P=0.000）。 结论:放射性肺损伤小鼠的肺组织中出现Treg分化，并增强分泌TGF-β1促炎因子，同时干扰辅助T细胞（Th1、Th2型）细胞因子的平衡来促进放射性肺损伤的发生。

女，43岁，5个月前无明显诱因于左前臂掌侧出现约鸡蛋大小的肿物，半个月前劳作后肿物明显增大，休息后无缓解。临床检查：左手拇指呈三节指畸形、大鱼际肌肉萎缩，左前臂掌桡侧可见局部椭圆形隆起，表面皮肤正常(图1A)，触之质韧，界限清晰，无触痛，无波动感及活动度，Allen试验(－)，Tinel征(－)，余无特殊异常。超声：肌层内可见大小约6.8 cm×2.6 cm×3.2 cm的无回声光团，内部可见密集点状回声聚集成堆，边界尚清，形态尚规则，周围可见少许血流信号(图2A)。磁共振平扫：左腕桡侧皮下肌肉内可见团块状长T 1长T 2信号，大小约19 mm×31 mm×52 mm(图2B，2C)。腕骨形态和信号正常，关节间隙无特殊，关节囊内无积液。术前诊断：左前臂腱鞘囊肿。臂丛神经阻滞麻醉下行囊肿切除术，上臂气囊止血带控制下，沿囊肿中央取长约10 cm纵行切口，术中可见肌层内一椭圆形、质韧的单囊巨大囊性肿物，表面有薄纤维囊包围(图1B)，沿囊肿壁仔细分离，未探及明显蒂部，完整切除囊肿后，切开囊壁见棕褐色液体流出(图1C)，囊壁厚约0.1 cm。术后病理报告：光镜下可见标本为纤维囊壁样组织，部分囊壁表面被覆纤毛柱状上皮，部分被覆扁平上皮，囊壁内见多量炎性细胞及组织细胞浸润，纤维组织增生，伴有鳞状上皮化生(图3)；免疫组化染色(图4)：上皮膜抗原(EMA)(+)、细胞角蛋白(CK8/18)(+)、S-100(+)、癌胚抗原(CEA)、雌激素受体(ER)(－)、孕激素受体(PR)(－)、PAX-8(－)、肾母细胞瘤基因-1(WT1)(－)。最终诊断：左前臂皮肤纤毛囊肿。术后随访3个月，无局部复发。

目的:探讨神经纤毛蛋白-1（NRP-1）在调节性T细胞（Treg）上的表达与其配体信号素3A（Sema3A）、转化生长因子β 1（TGF-β 1）以及1型辅助T细胞（Th 1）和2型辅助T细胞（Th 2）之间平衡的关系。 方法:纳入2014年3月至2015年5月就诊的62例ITP患者（新诊断ITP 33例、慢性ITP 29例），以同期30名健康体检者作为正常对照组。流式细胞术检测Treg细胞NRP-1表达，酶联免疫吸附法（ELISA）检测血浆Sema3A、TGF-β 1、IFN-γ和IL-4水平，实时聚合酶链式反应（RT-PCR）检测外周血NRP-1、Sema3A、TGF-β 1 mRNA表达水平。分别采用单因素方差和独立样本 t检验进行三组间和两组间比较，用Spearman相关系数评估NRP-1、Sema3A、TGF-β 1 mRNA表达的相关性。 结果:与慢性ITP组和正常对照组比较，新诊断ITP组Treg细胞NRP-1表达降低[分别为（0.15±0.03）%、（0.33±0.15）%、（0.46±0.06）%， P<0.01]，血浆Sema3A水平升高[分别为（8.10±1.32）μg/L、（7.41±1.30）μg/L、（2.88±0.82）μg/L， P<0.01]，血浆TGF-β 1水平降低[分别为（16.50±3.36）μg/L、（35.17±10.26）μg/L、（41.00±10.02）μg/L， P<0.01]，血浆IFN-γ水平升高[分别为（17.21±2.80）ng/L、（10.23±1.59）ng/L、（8.18±3.27）ng/L， P<0.01]，Th 1/Th 2（IFN-γ/IL-4）比值升高（分别为1.29±0.30、0.72±0.16、0.61±0.27， P<0.01）。新诊断ITP、慢性ITP组NRP-1、Sema3A mRNA的表达均低于正常对照组（ P<0.01）。新诊断ITP组NRP-1 mRNA表达与Sema3A、TGF-β 1 mRNA表达均呈正相关。 结论:NRP-1可能参与ITP的发病机制。

目的:探讨嗅癌（olfactory carcinoma）的临床病理学特征、诊断及鉴别诊断。方法:收集中国科学技术大学附属第一医院（安徽省立医院）临床病理中心2016年1月至2022年8月初诊为嗅神经母细胞瘤（olfactory neuroblastoma，ONB）或不能确定诊断的鼻腔鼻窦肿瘤共21例，其中3例复诊为嗅癌，并以其余18例肿瘤作为观察对照。结果:21例病例中3例嗅癌患者，男性2例，女性1例，发病年龄35~74岁，平均年龄57岁。镜下见瘤细胞以实性、巢状或分叶状生长方式为主，周围常见丰富的纤维血管性间质。肿瘤内可见菊形团或假菊形团结构，局部见明显的神经纤维性基质成分。部分癌巢周围细胞呈栅栏状排列。瘤细胞主要呈短梭形或椭圆形，界限不清，胞质少至中等，细胞核染色质较细腻，1个至数个小核仁，核分裂象易见。3例嗅癌均见呈轻度异型腺体，部分腺腔内见纤毛。肿瘤至少弥漫性表达1种上皮性标志物，且同时表达神经内分泌标志物。瘤细胞部分表达p40及p63，癌巢周围的支持细胞不同程度表达S-100蛋白。肿瘤细胞不表达NUT、CD99和结蛋白，SMARCA4（BRG1）和SMARCB1（INI-1）未见表达缺失。Ki-67阳性指数20%~80%。随访16~18个月，均未出现死亡，1例患者16个月后复发。结论:嗅癌属于罕见的伴神经上皮分化的鼻腔鼻窦肿瘤，其组织学形态多样，诊断时需密切结合形态及免疫组织化学标记结果。

目的:探讨神经纤毛蛋白1(NRP-1)和血管内皮生长因子(VEGF)在多形性胶质母细胞瘤(GBM)复发和耐药性中的机制。方法:体外培养人源性GBM1A和GBM22细胞株，通过感染慢病毒shRNA的方式沉默VEGF或NRP-1。根据感染慢病毒shRNA的种类，将两种细胞株分别分为shCont组(感染无义序列shRNA)、shNRP-1组(感染NRP-1慢病毒shRNA)及shVEGF组(感染VEGF慢病毒shRNA)。采用实时荧光定量聚合酶联链式反应(qRT-PCR)和蛋白质免疫印迹法检测肿瘤细胞株在沉默NRP-1或VEGF基因后干细胞标志物[包括：性别决定区Y盒2(Sox2)、表皮生长因子受体(EGFR)、N-钙黏附素(N-cadherin)、CD133、细胞间质上皮转换因子(c-Met)]的基因和蛋白表达情况。采用细胞划痕实验、Transwell小室测定法、神经球形成实验及MTT法检测肿瘤细胞的迁移能力、侵袭能力、神经球形成能力及细胞代谢活性。采用细胞生长抑制实验检测肿瘤细胞株在沉默VEGF或NRP-1后对替莫唑胺(TMZ)、紫杉醇(PTX)和卡博替尼(XL-184)的敏感性。向GBM1A和GBM22细胞株中的shCont组和shNRP-1组分别加入10 μg重组VEGF，分为shCont组、shCont+VEGF组、shNRP-1组、shNRP-1+VEGF组，判断NRP-1与VEGF之间的相互作用。结果:GBM1A细胞株中，shVEGF组和shNRP-1组Sox2、EGFR、N-cadherin，CD133及c-Met的mRNA含量均较shCont组下降(均 P<0.05)。GBM1A细胞株中，shNRP-1组和shVEGF组EGFR、CD133、N-Cadherin的蛋白质相对表达量、24 h和48 h时的细胞划痕愈合率及发生细胞迁移的比例均较shCont组低(均 P<0.05)，但shNRP-1组和shVEGF组间的差异均无统计学意义(均 P>0.05)；GBM22细胞株得到相似的结果。在GBM1A细胞株和GBM22细胞株中，3组细胞活力的差异均无统计学意义(均 P>0.05)。根据绘制的剂量-生长曲线，GBM1A细胞株中，shNRP-1组和shVEGF组TMZ、PTX、XL-184的半抑制浓度(IC 50)均低于shCont组(均 P<0.05)；在GBM22细胞株得到相似的结果(均 P<0.05)。GBM1A细胞株中，shCont组和shCont+VEGF组形成神经球的数量均高于shNRP-1组和shNRP-1+VEGF组(均 P<0.05)，其中shCont+VEGF组高于shCont组( P<0.05)，而shNRP-1组和shNRP-1+VEGF组间的差异无统计学意义( P>0.05)；GBM22细胞株得到相似的结果。 结论:沉默VEGF或NRP-1基因在不影响GBM本身活力的情况下可有效抑制其干细胞性，降低其迁移能力及侵袭力，并恢复其对化疗药物的敏感性；VEGF介导的细胞迁移可能依赖NRP-1发挥作用。

目的:探讨神经纤毛以及类似透拉蛋白2(NETO2)对胆囊癌细胞增殖、迁移、周期和凋亡的影响及分子机制。方法:通过实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)和免疫印迹法分别检测胆囊癌细胞系GBC-SD、ZJU-0430、NOZ中NETO2的mRNA及蛋白表达水平，利用质粒转染法构建NETO2过表达及敲减的稳转细胞株。通过细胞计数法(CCK-8)、克隆形成实验、细胞迁移实验、流式细胞术和免疫印迹法检测NETO2对胆囊癌细胞增殖、克隆形成能力、迁移、周期进程、凋亡和上皮间质转化(EMT)的影响，以及磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B (PI3K/Akt)信号通路的变化。结果:成功构建NETO2基因过表达的胆囊癌GBC-SD及ZJU-0430细胞，NETO2基因敲减的NOZ细胞。在ZJU-0430、GBC-SD细胞过表达NETO2后，胆囊癌细胞的增殖及迁移能力提高；可促进细胞从G0/G1期向S期进展，并抑制细胞凋亡；细胞克隆数分别由(78.5±9.2)、(217.0±6.4)增加为(213.5±10.3)、(296.3±9.3)( t＝10.98、6.51， P＝0.008、0.023)；迁移细胞数分别由(100倍视野)(198.6±8.4)个、(233.3±11.0)个增加为(382.7±12.4)个、(379.0±7.3)个( t＝16.98、16.85，均 P<0.001)；细胞总凋亡率由(29.7±0.9)%、(35.6±1.1)%降低为(19.2±0.5)%、(29.1±0.4)%( t＝9.74、9.05，均 P<0.001)；EMT相关蛋白如N-钙粘蛋白、波形蛋白、锌指转录因子Snail、Slug表达上调，而E-钙粘蛋白表达下调；PI3K/Akt通路磷酸化蛋白p-PI3K及p-Akt表达上调，上述变化差异均具有统计学意义(均 P<0.05)。而敲减NETO2表达则导致相反的变化。 结论:NETO2通过调控PI3K/Akt信号通路影响EMT进程，从而促进胆囊癌细胞的增殖和迁移，促进癌细胞周期进程并抑制癌细胞凋亡。

目的:探讨硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)、神经纤毛蛋白-1(NRP1)对脓毒症患者发生急性肾损伤(AKI)的预测价值.方法:选取2019 年4 月—2021 年4 月在本院住院的 160 例脓毒症患者为研究对象,以患者 7d内是否发生AKI将患者分为AKI组56 例和非AKI组104 例,再对AKI患者进行分组,分为AKI Ⅰ期、AKI Ⅱ期、AKI Ⅲ期.酶联免疫吸附法血清TXNIP、NRP1 水平;多因素Logistic回归分析脓毒症患者发生AKI的可能影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线评估血清TXNIP、NRP1 水平检测对脓毒症患者发生AKI的预测价值.结果:AKI组SOFA评分、Scr水平、APACHEⅡ评分及PCT水平均显著高于非AKI组,eGFR水平显著低于非AKI组(P<0.05).AKI组TXNIP水平显著高于非AKI组,且随AKI分期增加而显著增加(P<0.05);NRP1 水平显著低于非AKI组,且随AKI分期增加而显著降低(P<0.05).AKI患者血清TXNIP水平与SOFA评分、Scr、APACHE Ⅱ评分均呈正相关(r=0.342、0.361、0.335,P<0.05),与eGFR呈负相关(r=-0.495,P<0.05);血清NRP1 水平与SOFA评分、Scr、APACHEⅡ评分均呈负相关(r=-0.310、-0.327、-0.306,P<0.05),与eGFR呈正相关(r=0.561,P<0.05).Logistic回归分析显示,高水平TXNIP、Scr、SOFA评分是脓毒症患者并发AKI的危险因素(P<0.05),高水平NRP1 是脓毒症患者并发 AKI的保护因素(P<0.05).ROC 曲线显示,TXNIP、NRP1 预测 AKI 的 AUC 为0.737、0.720,二者联合预测AKI的AUC为0.929,显著高于二者单独预测(Z联合VSTXNIP=4.642、P=0.004;Z联合VSNRP1=4.929、P=0.025),其敏感度、特异度分别为90.79%、85.29%.结论:脓毒症并发AKI患者血清中TXNIP高表达,NRP1 低表达,与AKI严重程度有关,且二者联合对脓毒症并发AKI具有一定的预测价值.