目的:观察前列腺癌（PCa）患者CD8 + T细胞中Notch受体的表达，分析Notch信号通路对PCa患者CD8 + T细胞功能的影响。 方法:收集2017年11月至2018年6月在山西省人民医院就诊的PCa患者45例、无菌性前列腺炎患者41例和健康对照者30名。分选外周血CD8 +T细胞，反转录实时定量PCR法检测CD8 + T细胞中Notch1~4 mRNA相对表达量。使用Notch信号通路抑制剂γ-分泌素抑制剂（GSI）刺激CD8 + T细胞，反转录实时定量PCR法检测穿孔素、颗粒酶B和FasL mRNA相对表达量变化，流式细胞术检测抗程序性死亡分子（PD）-1和CTLA-4阳性细胞比例变化。建立CD8 + T细胞与PCa细胞系LAPC4细胞的直接接触和间接接触培养体系，通过检测靶细胞的死亡比例和细胞因子分泌评估抑制Notch信号通路对CD8 +T细胞的杀伤功能的影响。组间比较采用单因素方差分析、LSD- t检验或配对 t检验。 结果:PCa患者CD8 +T细胞中Notch1~4 mRNA相对表达量（5.22±1.04、2.79±0.91、9.74±3.38、1.63±0.82）显著高于健康对照者（0.87±0.17、1.03±0.17、1.24±0.21、1.26±0.08）和无菌性前列腺炎患者（0.87±0.15、1.05±0.14、1.27±0.19、1.26±0.16）（均 P<0.05）。PCa患者CD8 +T细胞存在功能衰竭，主要表现为穿孔素、颗粒酶B和FasL mRNA相对表达量降低（均 P<0.000 1），PD-1：19.3%±5.4%和CTLA-4：11.7%±3.9%阳性细胞比例升高，直接接触共培养体系中PCa患者CD8 +T细胞诱导LAPC4细胞死亡比例下降（28.8%±6.4%比37.2%±2.6%， P=0.015），γ干扰素（IFN）-γ分泌水平降低[（61.7±10.6）ng/L比（88.6±20.2）ng/L， P=0.003 2]。使用GSI抑制Notch信号通路可增强PCa患者CD8 +T细胞中穿孔素、颗粒酶B和FasL mRNA相对表达量（均 P<0.01），PD-1 +CD8 +T细胞和CTLA-4 +CD8 +T细胞的比例降低。抑制Notch信号通路可增强直接接触共培养体系中PCa患者CD8 +T细胞诱导LAPC4细胞死亡比例（34.3%±7.2%， P=0.000 2），IFN-γ分泌水平亦升高[（88.4±33.6）ng/L， P=0.008 3]。 结论:PCa患者Notch受体表达升高诱导CD8 +T细胞功能衰竭。

颗粒酶存在于细胞毒性颗粒中，是高度同源的丝氨酸蛋白酶家族，由自然杀伤细胞、细胞毒性淋巴细胞合成并释放，在穿孔素的参与下介导多种程序性死亡方式，是免疫细胞发挥抗肿瘤作用的重要介质。文章对颗粒酶介导肿瘤细胞死亡、颗粒酶与各种细胞凋亡方式的关系进行综述，以期为肿瘤治疗提供新的理论依据和治疗策略。

目的:评价自噬在氢气减轻脓毒症小鼠心肌损伤中的作用。方法:清洁级健康雄性C57BL/6J小鼠192只，6~8周，体质量20~25 g，采用随机数字表法分为6组( n＝32)：假手术组(Sham组)、假手术+氢气组(Sham+H 2组)、脓毒症组(S组)、脓毒症+氢气组(S+H 2组)、脓毒症+巴佛洛霉素组(S+BafA1组)和脓毒症+氢气+巴佛洛霉素组(S+H 2+BafA1组)。采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制备脓毒症模型。Sham+H 2组、S+H 2组及S+H 2+BafA1组于CLP后1和6 h吸入2%氢气1 h。S+BafA1组和S+H 2+BafA1组于CLP后1 h腹腔注射巴佛洛霉素A1 1 mg/kg。每组随机取20只小鼠，记录CLP后7 d的生存情况。于CLP后24 h处死小鼠，光镜下观察心肌组织病理学改变，进行病理学评分，ELISA法检测血清cTnI浓度，采用Western blot法检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)和P62表达水平，计算LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值。 结果:与Sham组比较，S组生存率降低，血清cTnI浓度和心肌组织病理学评分升高，心肌组织P62表达上调( P<0.05)，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值差异无统计学意义( P>0.05)，Sham+H 2组上述指标差异无统计学意义( P>0.05)；与S组比较，S+H 2组生存率升高，血清cTnI浓度和心肌组织病理学评分降低，心肌组织LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高，P62表达下调，S+BafA1组心肌组织LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值降低，P62表达上调( P<0.05)；与S+H 2组比较，S+H 2+BafA1组生存率降低，血清cTnI浓度和心肌组织病理学评分升高，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值降低，P62表达上调( P<0.05)。 结论:氢气减轻脓毒症小鼠心肌损伤的机制可能与促进自噬有关。

目的:探讨心肌梗死继发室间隔穿孔外科术后病死率及死亡相关因素。方法:回顾性分析2005年1月至2018年12月在首都医科大学附属北京安贞医院心脏外科接受手术的全部51例心肌梗死继发室间隔穿孔患者的资料。男性34例，女性17例，年龄（63±8）岁（范围：44~82岁）。患者发生室间隔穿孔至手术的时间为（44±39）d（范围：3~187 d）。采用 t检验和χ 2检验对术后死亡的相关因素进行单因素分析，多因素分析采用Logistic回归。 结果:8例患者在术后住院期间死亡，43例存活，术后30 d病死率为15.7%（8/51）。3例患者在室间隔穿孔1周内接受手术，其中死亡2例；推迟至4周后手术，院内病死率为6.5%（2/31）。单因素分析结果显示，术前肾功能不全、术前肌酐水平、心功能Ⅳ级、三尖瓣重度关闭不全、术后血液滤过治疗、术后第1天肌酐水平、手术距室间隔穿孔时间>4周与心肌梗死继发室间隔穿孔外科术后死亡相关。多因素分析结果显示，高龄（ OR=1.32，95 %CI：1.05~1.75， P=0.033）、心功能（纽约心脏病协会分级）Ⅳ级（ OR=2.25，95 %CI：1.62~2.82， P=0.003）、三尖瓣重度关闭不全（ OR=1.82，95 %CI：1.31~2.43， P=0.001）、术前肾功能不全（ OR=1.78，95 %CI：1.26~2.32， P=0.015）、手术距室间隔穿孔时间<1周（ OR=2.50，95 %CI：1.52~2.98， P=0.012）是心肌梗死继发室间隔穿孔外科术后死亡的独立相关因素。 结论:外科手术是处理心肌梗死继发室间隔穿孔的有效手段，患者高龄、心功能Ⅳ级、术前肾功能不全、三尖瓣重度关闭不全、手术距室间隔穿孔时间<1周是患者发生外科手术后死亡的独立相关因素。

近年来,嵌合抗原受体T(chimeric antigen receptor T,CAR-T)细胞免疫疗法在血液恶性肿瘤的治疗中取得了重要进展,但在实体瘤方面的应用并不理想.本文对CAR-T细胞的结构、杀伤功能进行了介绍,包括非经典免疫突触的形成、分泌细胞因子、分泌穿孔素和颗粒酶、Fas-FasL(factor associated suicide-Fas ligand)途径以及组成CAR结构成分的改变等杀伤肿瘤的主要机制,比较三种CAR细胞的特点,结合CAR-T细胞治疗实体瘤的挑战,对CAR-T细胞在肿瘤免疫治疗领域未来的研究方向进行了分析.

目的:探讨内镜黏膜下剥离术(endoscopic submucosal dissection，ESD)治疗结直肠侧向发育型肿瘤(laterally spreading tumor，LST)手术时长的影响因素。方法:回顾性纳入于2013年6月—2019年3月在北京市消化疾病中心行ESD治疗的结直肠LST患者。对ESD手术时间延长(≥60 min)的影响因素先进行单因素分析，对于其中有统计学差异的因素再纳入多因素Logistic回归分析独立危险因素。结果:纳入了201位患者，年龄(65.05±10.44)岁，其中男性占53.73%。患者有病变213处，病变长径(2.52±1.67)cm。病变整块切除率、完整切除率和治愈性切除率分别为93.90%、84.04%和79.81%。术中穿孔率、迟发穿孔率和迟发出血率分别为1.88%、0.94%和1.41%。单因素分析显示，病变直径≥3 cm( OR＝13.48， P<0.001)、结节混合型( OR＝25.28， P＝0.002)、颗粒均一型( OR＝9.00， P＝0.045)、位于直乙部位( OR＝3.08， P＝0.002)以及抬举征阴性( OR＝3.40， P＝0.012)与ESD手术时间延长相关。多因素Logistic回归分析表明，直径≥3 cm( OR＝9.29， P<0.001)、结节混合型( OR＝8.80， P＝0.043)和抬举征阴性( OR＝3.43， P＝0.043)是手术时间延长的独立危险因素。ESD手术时间延长，病变的完整切除率(69.56%比88.55%， P＝0.003)和治愈性切除率(63.64%比85.50%， P＝0.002)显著降低，发生癌变的风险显著升高(86.96%比51.91%， P<0.001)。 结论:当LST直径≥3 cm、结节混合型或抬举征阴性时，ESD的手术时间延长。手术时间越长，ESD的切除效率越低，病变发生癌变的风险越高。

目的:探讨他克莫司在治疗重型再生障碍性贫血（SAA）中的免疫调节作用。方法:选取2015年6月至2018年1月天津医科大学总医院血液科确诊的初治SAA患者，应用免疫磁珠分选SAA患者外周血CD8 +T细胞，MTT法检测其增殖能力。应用全身照射（TBI）及供者淋巴细胞输注（DLI）方法制备SAA小鼠模型，其中未接受预处理的正常对照组10只；仅接受TBI组10只；接受TBI及DLI组15只。应用流式细胞术检测CD8 +T细胞内穿孔素、颗粒酶的表达及SAA小鼠模型中外周循环CD4 +/CD8 +细胞比例。应用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测体外培养CD8 +T细胞培养基上清中干扰素γ（IFN-γ）水平。构建SAA小鼠模型研究各组用药后血象恢复情况及生存时间。 结果:共纳入初治SAA患者16例，其中男10例、女6例，年龄22~49岁（中位年龄35岁）。在IL-2浓度20.0、200.0和2 000.0 U/ml刺激时他克莫司可抑制CD8 +T细胞增殖（ P<0.05）。应用他克莫司组SAA患者CD8 +T细胞内穿孔素表达低于空白对照组和IL-2组［（2.25±0.76）%、（6.70±0.82）%比（9.10±1.90）%，均 P<0.05）］。应用他克莫司组CD8 +T细胞IFN-γ水平低于空白对照组（ P<0.05）。给SAA小鼠用药10 d后，他克莫司组SAA小鼠外周血血红蛋白（Hb）、白细胞（WBC）、血小板（PLT）计数均高于SAA组（均 P<0.05）。他克莫司组SAA小鼠CD8 +T细胞内穿孔素表达低于SAA组［（18.39±6.65）比（29.99±9.83）， P<0.05）］。SAA组小鼠中位生存时间为18.6 d，90 d存活率为0；他克莫司组SAA小鼠中位生存时间为44.6 d，90 d存活率为80%。他克莫司组SAA小鼠生存时间长于SAA组（ P<0.05）。 结论:他克莫司对SAA患者免疫状态的调节与环孢素A类似，对CD8 +T细胞有免疫抑制作用。

目的:探讨真菌性角膜炎（FK）的临床特征及诊断和治疗方法。方法:回顾性系列病例研究。收集2006年1月至2016年10月于山东省眼科研究所青岛眼科医院就诊的1 414例（1 414只眼）真菌性角膜炎患者的资料，对其人口学特征、致病诱因、发病时间、实验室检查方法和结果、临床特征及治疗方案进行分析。结果:1 414例FK患者中，男性877例（62.0%），女性537例（38.0%）；年龄（53.71±11.72）岁，40~60者874例（61.8%）。1 174例（83.0%）患者来自山东省，其余主要来自长江以北各省。患者职业以农民（1 211例，占85.6%）为主，发病时间以秋冬季为主。从发病到于我院就诊的时间为1~74 d，942例（67.1%）患者在症状出现后8~30 d于我院就诊。角膜损伤为主要危险因素，其中以植物外伤最为多见（367例，26.4%）。1 365只患眼通过氢氧化钾湿片直接镜检法查出菌丝，诊断阳性率为96.5%，1 270只患眼通过共焦显微镜查出菌丝，诊断阳性率为89.8%。973只患眼（68.8%）的角膜溃疡灶刮取物和（或）术后的病变角膜组织培养出真菌，其中以镰刀菌属最多见595例（61.1%），其次为链格孢霉菌属184例（18.9%）、曲霉菌属119例（12.2%）。603例（42.7%）为浅中基质浸润者，614例（43.4%）为深基质浸润者，197例（13.9%）为全层浸润。角膜溃疡灶直径以4~6 mm最为多见725例（51.6%），其次为<4 mm 372例（26.4%）、>6 mm 302例（22.0%）。498例（35.2%）合并前房积脓，34例（2.4%）合并角膜穿孔，58例（4.1%）合并眼内炎。1 198例（84.8%）患者接受手术治疗，其中包括416例（29.4%）行穿透性角膜移植术，408例（98.1%）治愈；199例（14.1%）行板层角膜移植术，193例（97.0%）治愈；532例（37.6%）角膜溃疡清创术，494例（92.8%）治愈。215例（15.2%）患者接受了单纯药物治疗，147例（68.4%）治愈。56例（3.9%）最终失去眼球，包括54例眼内容物摘除术和2例眼球摘除术。结论:FK的发病人群多为在农村居住的中老年群体。镰刀菌仍是山东地区最主要的FK病原体。角膜刮片氢氧化钾涂片直接镜检法可早期、快速诊断FK。对浅中基质浸润的患者，角膜溃疡清创术是一种便捷有效的治疗手段。对深基质浸润的患者，角膜移植术是最有效的治疗手段。 （中华眼科杂志，2020，56：286-293）

目的:探讨结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔的影响因素及处理策略。方法:采用回顾性病例对照研究方法。收集2011年1月至2021年3月遵义医科大学附属医院收治的358例行结肠镜检查治疗患者的临床资料；男216例，女142例；年龄为（59±14）岁。患者均行结肠镜检查或治疗。观察指标：（1）结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔情况。（2）结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔的影响因素分析。（3）结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔预测模型的构建。（4）结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔的处理。正态分布的计量资料以 x±s表示。偏态分布的计量资料以 M（ Q1， Q3）表示，组间比较采用Wilcoxon秩和检验。计数资料以绝对数表示，组间比较采用 χ2检验。多因素分析采用二元Logistic回归模型。采用受试者工作特征（ROC）曲线评价预测模型的灵敏度和特异度。 结果:（1）结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔情况。358例患者中，18例发生结直肠穿孔，其中男6例，女12例；年龄为61（49，69）岁。18例结直肠穿孔患者中，结肠穿孔12例，其中乙状结肠及直肠乙状结肠交界处穿孔10例、横结肠穿孔1例、降结肠穿孔1例；直肠穿孔6例。诊断性穿孔11例，治疗性穿孔7例。（2）结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔的影响因素分析。单因素分析结果显示：性别、年龄、结直肠溃疡、结直肠憩室、结直肠肿瘤、腹腔手术史、结肠镜类别、操作医师职称为影响结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔的相关因素（ χ2 =5.77， Z=-3.24， χ2 =37.99、97.34、37.99、10.31、8.07、6.73， P<0.05）。多因素分析结果显示：结直肠憩室、腹腔手术史是影响结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔的独立危险因素（优势比=287.79，6.74，95%可信区间为23.14~3 579.11，1.19~38.27， P<0.05）。治疗性结肠镜是影响结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔的独立保护因素（优势比=0.11，95%可信区间为0.23~0.52， P<0.05）。（3）结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔预测模型的构建。以结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔为因变量，结直肠憩室、腹腔手术史、治疗性结肠镜为自变量构建结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔的Logistic回归预测模型。ROC结果显示：该预测模型的灵敏度为0.56，特异度为1.00，曲线下面积为0.78（95%可信区间为0.63~0.92， P<0.05）。（4）结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔的处理。18例结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔患者中，15例立即行腹腔镜穿孔修补术，2例行内镜下缝合术，1例行保守治疗；均治愈出院，无因结直肠穿孔死亡患者。 结论:结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔部位易发于乙状结肠及直肠乙状结肠交界处。结直肠憩室、腹腔手术史是影响结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔的独立危险因素。治疗性结肠镜是影响结肠镜检查治疗发生结直肠穿孔的独立保护因素。结直肠穿孔患者行腹腔镜结直肠穿孔修补术疗效较好。

目的:观察慢性心衰患者中T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域蛋白-3（TIM-3）的表达及其对T细胞的调控作用。方法:收集2018年1至10月在郑州大学第一附属医院心血管内科住院治疗的慢性心衰患者86例（心衰组）和在郑州大学第一附属医院接受查体的健康对照32名（健康对照组），分离外周血单个核细胞，流式细胞术检测CD4 +T细胞和CD8 +T细胞中TIM-3的表达。分选CD4 + T细胞和CD8 +T细胞，使用抗TIM-3抗体刺激培养。酶联免疫吸附试验检测CD4 +T细胞培养上清中干扰素-γ（IFN-γ）、白细胞介素（IL）-4、IL-10、IL-35、IL-17、IL-22水平和CD8 +T细胞培养上清中肿瘤坏死因子（TNF-α）和IFN-γ水平，实时定量PCR法检测CD4 +T细胞中转录因子T-bet、GATA-3、FoxP3、RORγt和CD8 +T细胞中穿孔素、颗粒酶B mRNA相对表达量。组间比较采用 t检验或配对 t检验进行。 结果:心衰组TIM-3 +CD4 +T细胞比例高于健康对照组（3.47%±1.06%比0.92%±0.27%， P<0.001），心衰组TIM-3 +CD8 +T细胞比例亦高于健康对照组（6.12%±1.91%比1.77%±0.63%， P<0.001）。慢性心衰患者存在CD4 +T细胞和CD8 +T细胞功能不全，表现为心衰组CD4 +T细胞分泌IFN-γ、IL-17和IL-22水平低于健康对照组，分泌IL-10和IL-35水平高于健康对照组（均 P<0.05）。心衰组CD4 +T细胞中T-bet和RORγt mRNA相对表达量低于健康对照组（均 P<0.01），FoxP3 mRNA相对表达量高于健康对照组（1.93±0.88比0.97±0.28， P=0.031）。心衰组CD8 +T细胞分泌TNF-α和IFN-γ水平低于健康对照组（均 P<0.05），穿孔素和颗粒酶B mRNA相对表达量亦低于健康对照组（均 P<0.05）。抗TIM-3抗体刺激慢性心衰患者纯化的CD4 +T细胞，分泌IFN-γ、IL-17和IL-22水平高于无抗TIM-3抗体刺激（均 P<0.05），分泌IL-35水平则低于无抗TIM-3抗体刺激[（61±13）ng/ml比（72±17）ng/ml， P=0.029]。抗TIM-3抗体刺激后CD4 +T细胞中T-bet和RORγt mRNA相对表达量高于无TIM-3抗体刺激（均 P<0.05）。抗TIM-3抗体刺激慢性心衰患者纯化的CD8 +T细胞后，分泌TNF-α和IFN-γ水平高于无抗TIM-3抗体刺激（均 P<0.01），穿孔素和颗粒酶B mRNA相对表达量亦高于无抗TIM-3抗体刺激（均 P<0.05）。 结论:慢性心衰患者中T细胞表面TIM-3升高表达，TIM-3可能参与了慢性心衰患者T细胞功能不全的调控。