人类基因组计划深刻地改变了人类对基因多样性以及疾病基因分子水平的理解.从第一个序列草案到个人基因组测序,都在测序技术的非凡进步下变为可能.随着高通量测序技术的不断迭代更新,其技术也不断地成熟与稳定.高通量测序技术在临床样本病原体鉴定、肿瘤检测、疾病诊断等领域的应用逐渐广泛,从而为精准医疗提供了更加高效的分析检测工具.

目的 基于实时细胞分析(real time cell analysis,RTCA)技术对中药挥发性组分的细胞毒性及抗人腺病毒3型(human adenovirus 3,HAdV-3)的作用进行毒/效整合分析,构建抗病毒药物高通量筛选的新策略.方法 采用RTCA技术动态监测不同接种密度的A549细胞48 h生长曲线及10倍梯度稀释的HAdV-3感染A549细胞生长曲线,获得A549细胞最佳接种密度及HAdV-3最佳稀释浓度用于后续实验.以利巴韦林为阳性对照,基于RTCA技术采用曲线下面积(Area Under the Curve,AUC)方法对5种中药挥发性组分的细胞毒性及抗HAdV-3的作用进行毒/效整合分析,并与传统终点法数据处理进行对比.结果 终点法中艾叶、柴胡、薄荷、荆芥、牛蒡子、酸枣仁和利巴韦林对细胞的保护率分别为0.73％、12.50％、20.99％、44.50％、27.99％、51.50％和 82.70％;AUC 法中艾叶、柴胡、薄荷的选择性指数(Selective In-dex,SI)为负数,分别为-0.57、-0.21和-0.08.荆芥、牛蒡子、酸枣仁和利巴韦林的SI值分别为0.14、0.40、0.72和5.33.以利巴韦林的抗病毒活性为参照,终点法中酸枣仁、牛蒡子和荆芥的抗病毒活性为利巴韦林抗病毒活性的62.27％、33.85％和53.81％;AUC法中酸枣仁、牛蒡子和荆芥的抗病毒活性为利巴韦林抗病毒活性的13.51％、7.50％和2.63％.结论 传统终点法与研究采用的AUC法计算结果有较大的差异.传统的抗病毒活性筛选研究多采用终点法检测受试药物对病毒感染细胞的保护作用,无法反映整个感染周期的变化,缺乏细胞毒的数据也会对结果的判断产生偏差.研究提示基于RTCA技术对中药挥发性组分开展抗HAdV-3的毒/效整合评价,采用AUC方法计算药物的选择性指数作为高通量筛选新策略,能快速、精准地判断受试药物的抗病毒活性,具有准确性高、重复性好的优势.

前列腺癌骨转移是常见病症，近年来诊断和治疗有进展，但争议犹存。南方护骨联盟专家组根据当前的循证医学证据，发布了2023年前列腺癌骨转移专家共识，提炼了七大亮点。一、强调晚期前列腺癌治疗导致的骨质疏松及相关评估和防治：晚期治疗影响骨健康，特别是内分泌治疗和长期使用糖皮质激素或新型抗雄药物。建议对患者行骨质疏松评估和骨折预防。二、多种影像学检查手段优势互补诊断骨转移：X线平片适合诊断骨折和骨质破坏，但敏感性较低；CT对细微骨质变化敏感，特别是骨皮质破坏；MRI对评估转移灶与邻近软组织的关系，脊柱转移瘤和脊髓受压情况敏感且特异；SPECT骨扫描是筛查首选；18F-FDG和18F-NaF PET-CT诊断骨转移优于SPECT，18F/68Ga-PSMA PET/CT则更优。三、骨穿刺活检的应用场景：（1）怀疑骨转移但无骨质破坏的孤立病灶；（2）未进行前列腺原发或转移病灶病理检查的mCRPC患者，需要病理证实以进行化疗或放疗；（3） mCRPC患者行骨转移灶活检以进行病理和基因检测，指导精准治疗。四、强调调整生活方式的重要价值：均衡饮食，保持钙平衡；科学锻炼，维护骨骼健康；良好生活习惯，多晒太阳；注意防跌。五、合理应用骨保护剂：分为mHSPC和mCRPC两个阶段，存在骨质疏松和骨折风险高的mHSPC患者，推荐规律使用地舒单抗（60 mg/6月）、或者唑来膦酸（4～5 mg/年）；存在骨转移的mCRPC，推荐地舒单（120 mg/4周）、或者唑来膦酸（4 mg/3～4周），一般连续使用不超过2年。六、核素诊疗一体化：核素治疗分为α粒子和β射线，目前有锶-89（89Sr）、镭-223（223Ra）和PSMA介导的核素靶向治疗药物。锶-89（89Sr）虽然能止痛，但因骨髓抑制副作用大，不被推荐用于前列腺癌。镭-223（223Ra）不仅能止痛，还能延长生存期，适用于特定条件的mCRPC患者。PSMA介导的177Lu-PSMA-617治疗，可提高中位生存时间4个月。七、局部治疗，非必要，很重要：外放疗能缓解骨痛、提升生活质量，延长生存。手术旨在增强骨骼稳定性，改善神经功能，缓解疼痛，控制局部肿瘤。手术包括脊柱、四肢和骨盆转移瘤手术，需警惕并发症。

胰腺癌是预后最差的肿瘤之一，R0手术切除是患者获得长期生存的唯一方式。为提高R0切除率，美国国立综合癌症网络（NCCN）指南建议对临界可切除及局部进展期患者优先行新辅助化疗。但新辅助化疗后，尤其是临界可切除患者的肿瘤可切除性评估给外科医师带来不小的困难。CT及MRI都存在低估肿瘤可切除性的倾向。建议动态检测CA19-9、评估影像学资料及患者全身一般情况、MDT讨论患者手术能否获益。必要时，依据患者个体情况行PET-CT、二代测序、循环肿瘤DNA检测协助判断。随着影像组学、人工智能（AI）阅片、基因检测、液体活检等临床证据的不断完善，外科医师将对肿瘤可切除性做出更加精准的预判。

结直肠癌是全球第三大常见的恶性肿瘤，早期诊断能够显著改善患者的预后和生存质量，但现有筛查诊断方法仍存在局限性，急需寻找新的替代方法。外泌体作为细胞间通讯的关键介质和信息载体，在肿瘤发生和发展中具有重要作用，可作为诊断生物标志物的潜在来源。近年来，循环外泌体相关生物标志物被广泛研究，这种非侵入性检测方法通过分析外周循环中肿瘤细胞来源的外泌体相关内容物，如核酸、蛋白质、脂质和代谢物等，来反映原发肿瘤的全面信息，简便、精准、实时检测肿瘤进展，有望应用于临床，为结直肠癌的早期筛查和精确诊断提供新的思路。

缺血性卒中(ischemic stroke,IS)是一种多因素、异质性的神经系统疾病,病死率和复发率高,严重威胁人类生命健康.目前IS确诊主要依赖于影像学检查,缺乏有效用于临床实践的生物学标志物,早期预防、诊断和有效治疗仍然是IS诊治面临的主要挑战.随着蛋白质组学、代谢组学及表观遗传学研究的深入,目前已发现多种血清标志物、蛋白质、代谢相关分子、非编码RNA、DNA甲基化分子等具有IS早期诊断和预后评估的潜能.该文旨在总结和分析近年来新发现的IS新型诊疗标志物的研究现状及检测技术进展,以期促进具有临床应用价值的IS新型标志物的应用研究,推动IS的精准诊疗.

前列腺癌多为成骨性转移，因骨穿刺活检有一定难度，且取样量少，目前前列腺癌骨转移灶穿刺活检仍没有得到广泛的应用。是否采用影像引导、活检类型（细针抽吸还是粗针活检）、穿刺针数，后续组织的处理和分析方法，均是影响前列腺癌骨转移灶穿刺活检的成功率的因素。虽然骨穿刺活检病理诊断是确诊前列腺癌骨转移的金标准，但由于骨穿刺是有创性检查，同时由于99mTc-MDP全身骨显像等影像学技术的发展，骨穿刺活检已很少用于前列腺癌骨转移的分期诊断。然而，对于部分前列腺癌患者，骨转移病灶的穿刺活检仍有重要价值：（1）当99mTc-MDP全身骨显像检查揭示出孤立的骨病灶，且患者疑似骨转移，但其他影像学检查未显示明显的骨质破坏迹象时；（2）对于尚未接受过前列腺原发病灶或转移病灶的病理检查，临床诊断为转移性去势抵抗性前列腺癌（metastatic castration resistant prostate cancer，mCRPC），影像学检查示骨转移且无可穿刺的软组织病灶时，进行化疗或者放疗前需有病理证实；（3）对于mCRPC患者，通过骨转移灶的穿刺活检进行病理学和基因检测，以指导下一步精准治疗。前列腺癌在治疗过程中会逐渐出现耐药性，肿瘤细胞不断演化并出现基因特征的改变，如治疗相关前列腺神经内分泌癌的出现。另外，肿瘤原发灶的基因特征与转移灶之间也会存在差异，因而建议对转移灶进行穿刺活检。通过对mCRPC阶段癌细胞的基因特征分析，在精准诊断的基础上，指导精准及个体化治疗，同时也为前列腺癌演进机制的科学研究提供宝贵的组织学材料和基因信息。

目的:分析普雷沃菌(Prevotella)致肺脓肿鉴定诊断和治疗思路。方法:选择我院收治的1例肺脓肿患者，经厌氧培养，采用全自动微生物质谱检测系统Autof ms1000 、16S核糖体DNA (ribosomal DNA, rDNA)基因序列分析、胸腔脓液、宏基因二代测序(metagenomic nextgeneration sequencing, mNGS)明确病原菌，进行文献复习。结果:采用全自动微生物质谱检测系统Autof ms1000鉴定菌株为普雷沃菌，16S rDNA基因序列分析显示解肝素普雷沃菌(NR044633.1) 98.517%, mNGS明确病原菌为普雷沃氏菌属26%，梭杆菌属13%，棒杆菌属7%。予哌拉西林钠舒巴坦钠3 g联合奥硝唑0.5 g/d二次静点抗感染，症状明显好转，无发热，无咳嗽咳痰，复查胸部CT右下肺高密度影基本吸收。结论:普雷沃菌是一种条件致病厌氧菌，多发生在机会性感染，易误诊漏诊，建议尽早进行mNGS明确病原体。经典微生物培养联合宏基因二代测序技术可提高肺部感染性疾病的病原微生物检出率，为精准抗菌治疗提供临床依据。

目的 分析浙江省金华市2020-2022年新报告经异性性传播≥50岁人类免疫缺陷病毒/获得性免疫缺陷综合征(HIV/AIDS)病例性行为和传播网络特点,为艾滋病精准防控提供依据.方法 对2020-2022年新报告的经异性性传播≥50岁HIV/AIDS病例开展流行病学调查,采集调查对象抗病毒治疗前的血液样本,通过核酸提取、聚合酶链式反应(PCR)扩增pol基因,通过Sequencher 5.0软件拼接整理测序结果,BioEdit v7.2.0软件进行序列比对,MEGA 6.0软件构建系统进化树,使用Cytoscape 3.6.0软件构建HIV分子传播网络进行分析.结果 517例经异性性传播病例中,以1年前感染(369例,71.37％)、本地感染(309例,59.77％)为主;经商业异性性行为传播242例(46.81％),经非婚非商业异性性行为传播213例(41.20％),经配偶固定性伴传播62例(11.99％).采集血样410份,成功获得序列369条,共检出14种HIV-1基因亚型,以CRF07 BC(179例,48.51％)、CRF01_AE(98例,26.56％)、CRF08_BC(58例,15.72％)为主.165条序列进入分子传播网络,形成40个簇.影响因素分析结果显示,60岁及以上年龄组[与50～59岁年龄组比较,比值比(OR)=1.70,95％置信区间(CI):1.04～2.79]、阳性者配偶或性伴检测(与临床就诊比较,OR=3.68,95％CI:1.32～10.22)的HIV-1成簇率更高,高中及以上文化程度(与小学及不识字/少识字比较,OR=0.41,95％CI:0.18～0.90)的HIV-1成簇率更低.8个大簇占成簇病例数的49.09％(81/165),C1、C2传播以包含暗娼病例的商业异性性行为为主;C3、C5、C6和C8以未含暗娼的商业异性性行为为主;C4以某男性病例为核心通过非婚非商业异性性行为感染HIV,继而引起婚内和固定性伴间的传播;C7以另一男性病例为核心通过商业异性性行为感染HIV,继而引起4名非婚非商业异性性伴感染.结论 浙江省金华市经异性性传播≥50岁中老年病例商业异性性行为和非婚非商业异性性行为并存,HIV-1亚型多样,成大簇的本地感染比例较高,区域聚集性明显,并存在跨县(市)传播.应加强对重点人群、重点区域、重点场所干预,加强≥50岁人群检测与溯源调查.

动脉粥样硬化作为一种由脂蛋白驱动的慢性炎症性疾病,其核心病理过程在于动脉壁特定区域的斑块形成.历经数十年的悄然累积,斑块的破裂与随之而来的血栓形成,构成了急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)的主要诱因.易损斑块作为这一病理链条中的关键环节,以其不稳定性、高血栓形成倾向及易于突发破裂的特性,成为引发急性心脏事件的罪魁祸首.因此,及早、全面且精准地识别易损斑块是心血管病防控的关键.