目的:探讨在体外环境下不同浓度的抑肽酶及氨甲环酸对纤维蛋白凝胶溶解速度的影响，以获得稳定性良好的纤维蛋白凝胶，以便更好地应用于临床。方法:制作不同特性的纤维蛋白凝胶：抑肽酶浓度按15 000、20 000、25 000 kIU/ml，分为A、B、C组；氨甲环酸浓度按10、30、50 g/L，分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组；设立无抑制剂的对照组；以抑肽酶25 000 kIU/ml＋氨甲环酸50 g/L制作抗纤溶剂联合的纤维蛋白凝胶，标记为U组。将各组纤维蛋白凝胶置于37 ℃恒温水槽中，每隔24小时测量溶解的体积。结果:在同一浓度纤维蛋白原中，抑肽酶、氨甲环酸均可延缓纤维蛋白凝胶的溶解速度( F抑肽酶组＝502.379， F氨甲环酸组＝632.235， P值均<0.05)。将各组每日剩余体积进行组间多重比较，对照组与A组、B组、C组比较，A组与B组、C组比较，差异均有统计学意义( P值均<0.05)；B组与C组比较，差异无统计学意义；对照组与Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组比较，Ⅰ组与Ⅱ组、Ⅲ组比较，Ⅱ组与Ⅲ组比较，差异均有统计学意义( P值均<0.05)。与单用抑肽酶或氨甲环酸相比，联合抑肽酶＋氨甲环酸可明显延缓凝胶溶解速度( F值分别为366.417、262.533， P值均<0.05)。 结论:高浓度的抑肽酶、氨甲环酸均可增强纤维蛋白凝胶的稳定性。在同一浓度纤维蛋白原中，抑肽酶<20 000 kIU/ml，酶浓度的增加可延缓溶解速度；而抑肽酶>25 000 kIU/ml，凝胶溶解速度无明显变化；氨甲环酸浓度增加可延缓凝胶的溶解速度；联合抑肽酶＋氨甲环酸延缓纤维蛋白凝胶溶解的作用优于单用抑肽酶或氨甲环酸。

牙髓坏死可导致牙齿脆性增加，易折裂，并阻碍年轻恒牙牙根持续发育。因此牙髓再生治疗具有重要的临床意义。由于牙髓组织具有复杂、多变的解剖结构且包含神经、血管等多种组织成分，牙髓再生面临诸多挑战。回顾近年来应用组织工程方法探索牙髓组织构建与移植的基础研究和临床应用研究文献，重点讨论适宜支架材料的选择与牙髓组织构建方法。文中述及用于构建牙髓组织的支架材料包括海藻酸钠、壳聚糖、透明质酸，胶原蛋白、明胶、纤维蛋白、丝素蛋白、多肽和自组装多肽、聚乳酸、聚乙醇酸及其共聚物等，简要介绍了其功能特点以及添加生物基质提取物、生长因子等组成的功能修饰或不同功能互补性材料组成的功能改进。结合临床可操作性要求，进一步讨论了由亲水性复合材料或经亲水基团修饰材料制备可注射水凝胶支架材料的组成设计和功能特点，以期为今后牙髓再生研究探索提供一定的借鉴。

目的:制备改良型富血小板纤维蛋白（A-PRF）/壳聚糖温敏水凝胶（以下简称复合水凝胶）并探讨复合水凝胶对糖尿病大鼠全层皮肤缺损创面愈合的作用。方法:该研究为实验研究。成功制备具有多孔网状结构及温敏特性的含质量浓度为10、15、20、50、100 g/L A-PRF的复合水凝胶。取6~8周龄雄性SD大鼠，通过腹腔注射链脲佐菌素成功制造糖尿病大鼠模型，并在每只大鼠背部制造4个全层皮肤缺损创面（最终36只大鼠成功造模）。将每只大鼠3个创面分别作为空白组（不进行药物干预）、阳性对照组（滴加重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子凝胶）、壳聚糖水凝胶组（滴加壳聚糖水凝胶溶液）。取其中30只大鼠，将每只大鼠剩余的1个创面共30个创面分为10、15、20、50、100 g/L复合水凝胶组，每组6个创面，分别滴加含10、15、20、50、100 g/L A-PRF的复合水凝胶溶液；取剩余6只大鼠，于每只大鼠剩余的1个创面滴加含100 g/L A-PRF的复合水凝胶溶液。伤后14 d，取其中1个创面滴加含100 g/L A-PRF的复合水凝胶溶液的6只大鼠，行苏木精-伊红（HE）染色，观察大鼠心、肝、脾、肺和肾等炎症、出血或坏死情况；伤后10 d，取其中1个创面滴加含15 g/L A-PRF的复合水凝胶溶液的6只大鼠，采用激光血流成像系统观测4组创面血流灌注量（样本数为6）。伤后7、14 d，计算8组创面愈合率。伤后14 d，取8组创面组织，分别行HE、Masson染色，观察新生上皮形成和胶原生成情况；采用免疫组织化学法检测CD31、血管内皮生长因子A（VEGFA）的阳性表达情况并计算阳性面积百分比；采用蛋白质印迹法检测CD31、VEGFA的蛋白表达；采用实时荧光定量反转录PCR法检测CD31、VEGFA的mRNA表达（样本数均为4）。结果:伤后14 d，6只大鼠心、肝、脾、肺、肾中均未观察到明显的炎症、出血或坏死。伤后10 d，15 g/L复合水凝胶组创面血流灌注量明显多于空白组、阳性对照组、壳聚糖水凝胶组（ P值均<0.05）。伤后7、14 d，空白组创面愈合率分别为（26.0±8.9）%、（75.0±1.8）%，均分别明显低于阳性对照组、壳聚糖水凝胶组及10、15、20、50、100 g/L 复合水凝胶组的（45.8±3.2）%、（49.8±3.7）%、（51.2±2.9）%、（68.5±2.4）%、（68.8±1.5）%、（72.7±2.1）%、（75.0±3.7）%及（79.1±1.9）%、（77.2±1.7）%、（82.3±1.3）%、（89.6±1.9）%、（89.8±1.3）%、（87.3±1.1）%、（87.9±1.3）%（ P<0.05）；阳性对照组、壳聚糖水凝组、10 g/L 复合水凝胶组创面愈合率均明显低于15、20、50、100 g/L 复合水凝胶组（ P<0.05）。伤后14 d，15、20、50、100 g/L 复合水凝胶组创面上皮化程度较其他4组创面更高、新生微血管情况更好，胶原数量更多且排列更整齐。伤后14 d，阳性对照组创面CD31、VEGFA及壳聚糖水凝胶组创面VEGFA阳性面积百分比均明显高于空白组（ P<0.05），10 g/L 复合水凝胶组创面VEGFA阳性面积百分比明显高于空白组、壳聚糖水凝胶组、阳性对照组（ P值均<0.05），15、20、50、100 g/L 复合水凝胶组创面CD31、VEGFA阳性面积百分比均明显高于空白组、阳性对照组、壳聚糖水凝胶组、10 g/L 复合水凝胶组（ P<0.05）。伤后14 d，壳聚糖水凝胶组、阳性对照组、10 g/L 复合水凝胶组创面组织中CD31、VEGFA蛋白和mRNA表达均明显高于空白组（ P<0.05），10 g/L复合水凝胶组创面组织中VEGFA蛋白表达明显高于阳性对照组（ P<0.05）和CD31、VEGFA mRNA表达均明显高于阳性对照组、壳聚糖水凝胶组（ P<0.05），15、20、50、100 g/L复合水凝胶组创面组织中CD31、VEGFA蛋白和mRNA表达均明显高于空白组、阳性对照组、壳聚糖水凝胶组、10 g/L 复合水凝胶组（ P<0.05），壳聚糖水凝胶组创面组织中CD31、VEGFA的mRNA表达均明显低于阳性对照组（ P<0.05）。 结论:复合水凝胶生物安全性高，可改善创面血流灌注，有效促进创面组织中血管和胶原生成，从而促进糖尿病大鼠全层皮肤缺损创面愈合；15 g/L为复合水凝胶中A-PRF的较优使用质量浓度。

目的:探讨基质血管成分凝胶(SVF-GEL)辅助脂肪移植的效果。方法:60只BALB/c裸鼠分为4组，每组15只，分别为NS组、PRP组、PRF组、SVF-GEL组，将AG复合物注射于各组裸鼠背部皮下组织，观察术后1、2、4、8、12周AG复合物的大体形态、体积，免疫荧光切片观察细胞并行微血管密度计数(MVD)，各组间脂肪移植保存率及MVD进行分析。组间两两比较采用最小显著性差异法检验。结果:术后1周仅SVF-GEL组见少许小血管簇生成；2～4周各组小血管簇形成逐渐增多，SVF-GEL组较密集。脂肪体积保存率：SVF-GEL组移植后1、2、4周体积保存率(%)分别为65.54±8.81、74.80±3.58、62.46±3.71，与其余3组比较差异有统计学意义( P<0.05)，第8、12周时为54.38±9.14、52.67±8.34，仍优于NS组(35.75±5.21、32.88±7.48， P<0.05)。MVD：各组MVD逐渐增高并于4周时达峰值，8周时下降。术后4周，SVF-GEL组移植的MVD(CD31＋细胞/视野)达32.60±10.83，脂肪组织血管化程度明显高于其余3组( P<0.05)；8周时，SVF-GEL组(54.38±9.14)明显高于NS组(35.75±5.21， P<0.05)。免疫荧光染色：移植后各时间点SVF-GEL组存活区、再生区细胞数量及形态均优于NS组，且后者坏死区域较大。 结论:SVF-GEL辅助脂肪颗粒移植可促进移植物初期血管化及成脂化，提高移植脂肪最终存活率。

目的:通过离体猪肾模型初步探讨使用猪源纤维蛋白粘合剂辅助清除肾结石碎片的可行性。方法:在离体猪肾结石模型（含100 mg干燥的、≤ 1 mm人结石组分的猪肾6个，含100 mg干燥的、≤3 mm人结石组分的猪肾6个）中检验输尿管软镜配合12/14Fr输尿管导引鞘。实验组使用网篮-粘合剂取石（≤1 mm结石， n=3；≤3 mm结石， n=3）；对照组仅使用网篮取石（≤1 mm结石， n=3；≤3 mm结石， n=3），对比两组的取石效果、结石清除率和操作时长等。收集健康人尿液，将猪源纤维蛋白粘合剂形成的凝胶放入其中，观察其特性。 结果:猪源纤维蛋白粘合剂能在生理盐水和尿液中形成凝胶并黏附包裹结石碎片。≤1 mm结石者实验组与对照组的操作时长分别为（14.0±4.2）和（29.0±0.7）min，（ P<0.05），结石清除率分别为（90.9±1.4）%和（48.4±15.7）%（ P<0.05）；≤3 mm结石者实验组与对照组的操作时长分别为（12.8±4.0）和（30.0±0）min（ P<0.05），结石清除率分别为（91.1±5.0）%和（20.7±8.0）%，（ P<0.05）。凝胶在健康人尿液和生理盐水中37 ℃静置24 h自行溶解。 结论:浓度适宜的猪源纤维蛋白粘合剂可用于辅助软镜碎石术中清除小结石碎片。

目的:采用自身对照研究评价富血小板纤维蛋白临床治疗慢性伤口的效果。方法:以无抗凝剂的无菌真空试管采集患者自体静脉血10 ml或20 ml，放入离心机内以3 000 r/min速度进行对角离心12 min；取出试管中间凝胶状初级产物，挤压成膜。平摊于伤口上，用透明膜进行固定，1周后揭除透明膜清创换药，记录伤口性状、面积或体积，10 d为1个治疗周期。选择以此方法治疗的慢性伤口患者12例，比较治疗前后伤口床征评分、伤口面积、治疗时间及治疗费用等指标变化。统计数据采用Wilcoxon符号秩检验。结果:12例慢性伤口患者伤口床征评分治疗前为(3.25±1.91)分，治疗后为(14.17±1.90)分( Z＝3.086， P<0.01)，创面平均面积治疗前为(16.84±13.27) cm 2，治疗后创面平均面积缩小至(3.01±3.84) cm 2( Z＝-3.059， P<0.01)，平均缩小(81.84±19)%，治疗前已治疗时间为(67.25±30.54) d；治疗后患者伤口痊愈或接近痊愈的时间为(23.33±11.51) d( Z＝-2.981， P<0.01)，治疗前平均花费为(4 525.83±3 224.72)元，显著高于富血小板纤维蛋白治疗期间的平均费用[(1 110.83±367.61)元， Z＝-3.059， P<0.01]，差异均有统计学意义( P<0.01)。 结论:富血小板纤维蛋白对于促进慢性伤口愈合有显著效果，具有很高的实用推广价值。

理想的支架材料可对组织器官病损进行形态、结构和功能进行重建，因此在组织工程领域受到广泛关注。天然生物材料理论和技术的迅速发展，使其逐渐成为再生医学领域的研究热点。天然生物材料具有高仿生性和良好的生物相容性，且来源广泛，非常适合用作组织工程的支架材料。按成分和原料来源大致分为蛋白质类生物材料（胶原、明胶、丝素和纤维蛋白）、糖类生物材料（纤维素、几丁质/壳聚糖、海藻酸盐和琼脂糖）、糖胺聚糖类（透明质酸、硫酸软骨素）和脱细胞基质移植物（羊膜、小肠黏膜下层、肌腱）。不同的支架材料具有独特的天然结构和理化性质。蛋白质类生物材料多通过聚合形成网状结构影响细胞迁移分化，且有一定的机械性能，可单独制成支架或配合其他合成材料使用；糖类生物材料因高比表面积可负载大量液体，但其机械性能较差，因此常被以凝胶形式控释细胞和生长因子配合其他材料应用在肌腱组织工程中；糖胺聚糖类生物材料具有抗炎、黏弹润滑以及高水合特性，多配合合成材料增加其生物相容性和亲水性。相比天然高分子材料，脱细胞基质不但具有更相仿的细胞外结构和营养成分，而且具有一定的机械性能，可对组织器官病损进行更好的形态、结构和功能重建，因此在组织工程中越来越被受到重视。不同材料的巧妙组合，使肌腱修复展现出更好的效果，也使天然生物材料具有更广阔的临床前景和应用价值。

目的:探讨体外培养构筑卡波西样血管内皮瘤(KHE)血管生成三维模型的效果及可行性。方法:选择2019年4月在河南省人民医院血管瘤科接受手术治疗的1例4个月龄男性KHE患儿，将术中切除的瘤体组织作为实验样本。将处理后的瘤体新鲜标本种植于双层夹心法构筑的纤维凝胶培养体系中，完成KHE血管生成三维模型的建立。潮湿恒温孵育，隔日换液，每日观察生长情况。待模型生长稳定后，取生长情况较好的模型制成冰冻切片行HE染色及免疫组织化学实验验证。结果:构筑的模型孵育2~4 d萌生出新生的血管芽，12~16 d血管生长情况趋于稳定，新生血管交错成网状，可观察到明显的管腔样结构，大部分模型于26~30 d后开始凋亡，个别模型直至孵育第54天仍未凋亡。经形态学观察、HE染色、免疫组织化学实验鉴定，证实新生的血管网由KHE血管内皮细胞组成。结论:纤维蛋白凝胶培养体系能够完成KHE三维血管生成模型的培养，具有培养时间短、存活时间长、操作简便、实验成本低、易于干涉的特点。

丝素蛋白是一种天然纤维蛋白，具有生物相容性好、降解性能和力学性能可调、宿主炎症反应小、成本低、易制备等特性，是创面修复的理想基质材料。丝素蛋白可单独使用，也可将其同其他材料复合，制备成支架、水凝胶、膜、功能贴片和微针等不同材料，满足不同创面修复需求，调控创面修复过程，在皮肤组织工程中的应用研究急剧增加。同其他天然材料相比，丝素蛋白通过改善不同时期的细胞增殖、迁移和分化行为来促进组织再生和创面修复，表现出不同维度的独特优势。综合近年来丝素蛋白创面修复材料研究的进展，该文重点阐述丝素蛋白及其复合材料在创面修复中的作用机制和应用前景。

患者，男性，64岁。2022年3月因左侧额顶部头皮、上睑出现水疱样皮疹，未过正中线，伴有剧烈疼痛，疼痛的性质为烧灼样、刀割样且撕裂样，症状逐渐加重并伴有眼痛、结膜充血及视力下降，眼睑皮肤逐渐发生坏死脱落，眼睑无法闭合，就诊于外院，诊断为带状疱疹病毒感染、病毒性结角膜炎，给予静脉注射抗病毒、抗生素治疗(具体药品名不详)，治疗后头面部皮损逐渐好转，疼痛有所缓解。2个月后，因眼部病情呈渐进性加重趋势，并伴有瞳孔变白，给予睑缘缝合后缝线脱落，遂于2022年5月于吉林大学第一医院眼科就诊。主诉左眼痛、结膜充血伴视力下降2个月余。既往有高血压、心功能不全、脑血栓病史10余年，口齿不清。入院查体，痛苦面容，左侧额面部有不规则皮肤瘢痕形成，色素脱失，病损区痛觉和触觉消失。见图1。左眼视力为光感，左眼眼压12 mmHg(1 mmHg＝0.133 kPa)，上睑组织全层缺损，残余皮肤瘢痕挛缩，结膜角膜暴露，上睑睑结膜黏连外翻，结膜充血，角膜灰白色混浊，中央偏下方角膜菲薄，可见微穿孔，前房消失，虹膜前粘连，余眼内结构窥不见。经实验室检查，红细胞4.02×109个/L(参考值4.3×109～5.8×109个/L)，血红蛋白117 g/L(参考值130～175 g/L)，红细胞比容0.369 L/L(参考值0.4～0.5 L/L)，红细胞分布宽度14.3%(参考值11%～14%)，纤维蛋白原5.08 g/L(参考值1.8～4.0 g/L)，尿红细胞计数32.2个/μL(参考值0～23个/μL)，血白蛋白37 g/L(参考值40～55 g/L)，低密度脂蛋白胆固醇3.69 mmol/L(参考值2.06～3.1 mmol/L)。心电图提示陈旧性前壁心肌梗死。经心脏彩色超声检查，显示心脏射血分数53%，左心房和左心室增大，室壁节段性运动异常，左室收缩功能正常但处于边缘区，左室舒张功能减低，主动脉瓣及二尖瓣环钙化，二尖瓣轻度反流。临床诊断为左眼睑缺损，左眼瘢痕性睑外翻，左眼睑闭合不全，左眼角膜溃疡穿孔，左侧周围性面神经麻痹，带状疱疹病毒感染，心功能不全，陈旧性心肌梗塞。鉴于患者病情较重，眼睑缺损导致结膜及角膜组织暴露，角膜溃疡穿孔面临失明风险，因此恢复眼睑完整并保障眼球完整和视力为主要治疗原则，故笔者相继采用三次手术治疗。于2022年5月择期行第一次手术，术中充分分离瘢痕黏连，解除瘢痕牵拉，见睑板全部缺失，眼睑皮肤缺损至眉下，眼睑后层应用下睑带蒂睑板结膜瓣重建术，眼睑前层应用鼻部Z型皮瓣和面部舌形带蒂肌皮瓣重建术，鼻部皮瓣大小1.5 cm×1 cm，颞侧面部皮瓣大小4.5 cm×2 cm。见图2。术后眼睑呈闭合状态。见图3。9个月余后行第二次手术，即睑板结膜瓣断蒂术。见图4。楔形切除部分睑板瘢痕，重新褥式缝合，充分松解瘢痕组织，可见上睑皮肤缺损约4 cm×2 cm，取右眼上睑游离皮瓣移植到左眼上睑。术后给予复方倍他米松注射液(上海先灵葆雅制药有限公司生产)7 mg，1次/月，行瘢痕内注射，共3次。局部给予小牛血去蛋白提取物眼用凝胶(沈阳兴齐股份有限公司生产)，3次/d；氯替泼诺混悬滴眼液(博士伦公司生产)，3次/d；玻璃酸钠滴眼液(德国URSAPHARM Arzneimittel GmbH生产)，点眼，4次/d。于2023年5月行第三次手术，即角膜移植术。见图5和图6。全身麻醉下行左眼穿透性异体角膜移植术，术中见虹膜与角膜后粘连，晶状体灰白色混浊脱位，黏连于角膜白斑后方，因此联合晶状体囊内摘除术，复位虹膜。术后加用他克莫司滴眼液(日本千寿制药株式会社生产)、左氧氟沙星滴眼液(日本参天株式会社生产)，点眼，4次/d。术后2个月复诊。见图7和图8。患者左眼最佳矫正视力0.05，左眼眼压18 mmHg，眼睑闭合良好，睑缘充血肥厚，结膜略充血，角膜植片透明，缝线在位，前房正常，瞳孔圆，直径4 mm，对光反射弱，玻璃体及眼底正常。停用氯替泼诺混悬滴眼液(博士伦公司生产)，继续应用他克莫司滴眼液、玻璃酸钠滴眼液及小牛血去蛋白提取物眼用凝胶点眼，随访至今，患者病情稳定。