槐米[1](Flos Sophorae Immaturus)为豆科植物槐树(Sophora japonica)的干燥花及花蕾,是药食同源的一种药材,其中芦丁和槲皮素是主要药用成分,具有清热,凉血,止血的功效,主要用于降低人体血脂和胆固醇,治疗高血压、心血管疾病等多种疾病[2].本研究将纳豆菌和槐米共同发酵,通过单因素实验、正交试验获得最佳发酵条件提高芦丁、槲皮素及总黄酮的含量,利用槐米发酵液进行体外抗氧化、抗血栓研究.

目的 探讨10批不同发酵时间的纳豆芽孢杆菌纯种发酵淡豆豉提取物的高效液相色谱 (HPLC) 图谱中主要色谱峰与促大鼠成骨细胞增殖活性的相关性,为表征纯种发酵淡豆豉抗骨质疏松作用物质基础和优化单一菌种发酵淡豆豉工艺提供依据.方法 HPLC建立纯种发酵不同时间淡豆豉的乙醇提取物指纹图谱 (纳豆芽孢杆菌纯种发酵6、12、18 h、1～7 d:H6、H12、H18、D1～D7) ;噻唑蓝 (MTT) 法测定各提取物的促大鼠颅骨成骨细胞增殖活性,并通过高效液相色谱-质谱联用 (HPLCMS) 技术对色谱峰进行确认;灰色关联度分析法研究其谱效关系.结果 纯种发酵不同时间的淡豆豉乙醇提取物在质量浓度100μg·L-1时均具有较明显的促成骨细胞增殖作用,发酵4 d时活性最强,其促成骨细胞增殖率可达43.6％.谱效关系分析表明,与药效关联度较高的是黄豆黄素、染料木苷、黄豆黄苷和大豆苷.结论 关联度分析结果中黄豆黄素,染料木苷,大豆苷与课题组前期体外活性实验结论相互佐证,证实了本实验中谱效关系分析的科学性.与前期研究结果相比,纯种发酵淡豆豉与自然发酵淡豆豉的促成骨细胞增殖活性成分基本一致.

考察了纳豆菌接种量、料液比、发酵温度及发酵时间对纳豆菌发酵豆粕产生的纳豆多糖得率的影响,进行了响应面设计实验,得出最佳发酵工艺参数;探究了纳豆多糖的抗氧化活性,并与维生素C进行比较.实验结果表明:接种量为0.6％,料液比为1∶3,发酵温度40℃,发酵时间48 h,在此工艺条件下水溶性纳豆多糖得率最高为4.371％.纳豆多糖浓度为1.5 mg/mL时,对羟基自由基的清除率是50.07％,对超氧阴离子自由基的清除率达95.79％,对DPPH自由基的清除率为16.35％.

目的:探讨黄豆、黑豆混合后发酵与发酵后混合大豆异黄酮含量的差异及最佳配比.方法:以枯草芽孢杆菌菌种,黑豆与黄豆按3:1、2:1、1:1、1:2、1:3比例混合后发酵及发酵后混合制备样本,以色谱柱Symmetry?-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)、流动相为甲醇-0.5％ 乙酸梯度洗脱、检测波长254 nm、流速1.0 mL/min、柱温40℃ 、进样量10μL为条件测定样品大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素含量.结果:大豆苷、染料木苷、大豆苷染料木苷总量含量在1:3时混合后发酵样品高于发酵后混合样品;大豆苷元含量在3:1、2:1、1:1、1:3时混合后发酵样品高于发酵后混合样品;染料木素含量在3:1、2:1、1:3时混合后发酵样品高于发酵后混合样品;大豆苷元染料木素总量含量在3:1、2:1、1:1、1:3时混合后发酵样品高于发酵后混合样品.结论:黄豆、黑豆混合后发酵优于发酵后混合,并以1:3配比时为最优.

旨在获得纳豆芽孢杆菌和暹罗芽孢杆菌种间融合高产Surfactin的新菌株.以纳豆芽孢杆菌和暹罗芽孢杆菌为亲本菌株,通过制备纳豆芽孢杆菌和暹罗芽孢杆菌的原生质体,采用PEG介导的双亲灭活标记法融合原生质体,拟融合子通过PCR鉴定、CPC-BTB法高通量筛选、HPLC复筛以及融合菌株的稳定性验证获得高产Surfactin的新菌株.研究结果表明纳豆芽孢杆菌和暹罗芽孢杆菌的原生质体制备最佳酶解浓度分别为0.25 mg/mL和0.2 mg/mL,最佳酶解时间分别为25 min和20 min,其原生质体得率分别为83.1％ 和84.3％.两者的原生质体融合条件为:纳豆芽孢杆菌紫外灭活80 min,暹罗芽孢杆菌85℃热灭活40 min,融合体系为50％ 的PEG6000在38℃下融合时间15 min.获得了遗传稳定的融合菌株F8,该菌株Surfactin产量相对于纳豆芽杆菌提高了33.3％,暹罗芽孢杆菌提高了60％.

心脑血管疾病已经严重威胁人类健康,其发病率和死亡率均居各种疾病之首.纳豆激酶作为一种理想的预防和治疗血栓的天然功能食品被广泛关注,因此研究纳豆激酶的规模化生产对于推进溶栓类功能食品的开发具有重要意义.在前期发酵豆乳工艺优化的基础上,对因素顺序及因素水平稍作调整,以全豆豆乳为发酵基质,以纳豆激酶为功能评价指标,发酵后出渣率及终点pH为参考指标,通过单因素及正交试验确定最佳发酵工艺.结果表明,发酵豆乳的最佳工艺条件为:发酵时间30 h,装液量5％,初始pH5.5,接菌量1.5％.在此发酵条件下,酶活可高达660184.14 IU/mL,是优化前(79434.68 IU/mL)的8.31倍,是前期最佳工艺下纳豆激酶表达量(429869.34 IU/mL)的1.54倍.与前期全豆豆乳最佳工艺条件相比,通过调整初始pH和接菌量的先后顺序,可以在更低接菌量(前期研究,最佳接菌量为1.75％)的基础上,显著增加纳豆激酶表达量.通过本实验研究既节约了成本也提升了纳豆激酶的表达量,对纳豆激酶的规模化生产具有重要意义.

心血管疾病(CVD)目前是人类面临的重大健康问题之一,也是全球人口死亡的首要原因.近年来,国内外研究发现维生素K2对于防治许多心血管疾病发挥着重要作用.维生素K2主要由人体肠道微生物代谢产生,人类也可以通过细菌发酵类食品如纳豆和奶酪等获得,这反映出细菌与人共生关系的重要性.大量临床试验和基础医学实验表明,维生素K2参与羧化维生素K依赖蛋白(VKDPs),具有防治骨质疏松症、改善血管钙化、减少炎性因子释放和提高胰岛素敏感性等功能.本综述主要分析维生素K2在心血管疾病的研究进展和前景.

纳豆是日本传统食品,纳豆激酶是纳豆芽孢杆菌分泌表达的一种具有纤溶活性的碱性丝氨酸蛋白酶.综合分析纳豆激酶已发表的基础及临床研究文献,结果显示纳豆激酶在抗血小板、抗凝、降压及降脂等方面具有一定作用.结合相关文献研究结果和专家讨论意见,提出纳豆激酶在血管病危险人群中的应用建议,以期对临床医生指导公众使用纳豆激酶时提供参考意见.

根据《生物应用技术》课程的特点,设计操作性较强的“纳豆芽孢杆菌发酵纳豆制品”实验,旨在让学生通过实践教学深入了解无菌操作技术、培养基制作、种子液制备、发酵条件控制等基础知识的同时,激发中职学生的学习兴趣,培养专业技能,提高职业能力.

以枯草芽孢杆菌为试验菌株,研究不同Ca2+源、Mg2+源对固态发酵产纳豆激酶的影响.通过添加不同Ca2+源、Mg2+源的方式发酵制备纳豆,采用纤维蛋白平板法测定纳豆激酶活力,稀释涂布平板计数法测定纳豆中的活菌数,通过纳豆的颜色、香气、滋味和组织形态4个指标进行感官评价,分析不同的离子源对固态发酵产纳豆激酶的影响,筛选最佳的Ca2+源、Mg2+源制备纳豆.结果表明:在3种不同Ca2+源中,CaCl2为最佳Ca2+源,添加量为0.04％(质量分数),制备的纳豆激酶活力最高,达到7786 IU/g,比空白组酶活力提高了57％,菌体量为5.4×107 CFU/g;3种不同Mg2+中,MgSO4为Mg2+源、添加量为0.72％(质量分数),制备的纳豆激酶活力最高,达到10591 IU/g,相比空白组提高了71％,菌体量达到7.8×107 CFU/g.