目的 对五加皮Acanthopanacis Cortex的二萜类化学成分及抗炎活性进行研究.方法 通过MCI树脂柱、硅胶柱、薄层色谱、半制备HPLC等方法对五加皮药材中化学成分进行提取分离,采用核磁共振波谱、质谱、红外光谱等方法,对单体化合物的结构进行鉴定.采用Griess法测试脂多糖诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7细胞释放炎症因子模型,对化合物进行抗炎活性评价.结果 从五加皮70％乙醇提取物中分离得到13个二萜类化合物,包括7个对映海松烷型二萜7β-羟基-8(14),15-二烯-19-异海松烷酸(1)、7-酮基-8(14),15-二烯-19-异海松烷酸(2)、7β-甲氧基-8(14),15-二烯-19-异海松烷酸(3)、6,8(14),15-三烯-19-异海松羧酸(4)、14-酮基-8,15-二烯-19-异海松羧酸(7)、14-羟基-16-乙烯基-8,11,13-三烯-17-异海松羧酸(8)、7α-羟基-8(14),15-二烯-19-异海松烷酸(11);以及6个对映贝壳杉烷型二萜16α,17-二羟基-19-异贝壳杉烷羧酸(5)、17-羟基-19-异贝壳杉烷羧酸(6)、异贝壳杉烯酸(9)、17-醛基-19-异贝壳杉烯酸(10)、17-醛基-15-烯-19-异贝壳杉烷酸(12)和17-羟基-15-烯-19-异贝壳杉烷酸(13).其中化合物8为新化合物,命名为细柱五加酸G1;3和4为首次从细柱五加植物中分离得到.体外抗炎活性研究表明,13个化合物均具有一定的抗炎活性,其中化合物1～3、7的活性较好.海松烷型二萜类化合物抗炎活性较贝壳杉烷型二萜强,海松烷型二萜类化合物7位取代活性强弱顺序为β-OH＞β-OCH3＞△6双键＞C=O＞α-OH.结论 五加皮分离鉴定的化合物及其活性研究为五加皮专属性质控方法建立、药用资源合理开发和利用提供了依据.

目的 探索中国传统中药细柱五加叶水提取物降血糖和抗氧化作用.方法 采用MTT法测定细柱五加叶水提取物细胞毒活性;运用体外酶学试验,以阿卡波糖和熊果酸作为阳性对照,测定其α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶、基因重组人蛋白酪氨酸磷酸酶PTP1b的抑制活性评估其降血糖活性;以抗坏血酸为阳性对照,运用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DP-PH)自由基,2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除法来研究其体外抗氧化活性.结果 细柱五加叶水提取物无细胞毒性,其体外酶抑制活性α-葡萄糖苷酶[IC50(138.50±1.21)μg·mL-1],α-淀粉酶[IC50(914.90±0.35)μg·mL-1]和 PTP1B[IC50(106.60±0.33)μg·mL-1].DPPH 和 ABTS 自由基清除活性的1C50值分别为(72.96±0.72)μg·mL-1和(74.86±0.33)μg·mL-1.结论 细柱五加叶水提物具有降糖和抗氧化作用.

目的:提取分离短梗五加多糖组分,并体外评价其生物活性.方法:水提醇沉法提取短梗五加粗多糖(ASP),离子交换色谱柱(DEAE-52)分离,苯酚-硫酸法、间羟基联笨法、考马斯亮蓝法测定其总糖、糖醛酸、蛋白质含量,高效液相色谱法(HPLC)分析单糖组成.噻唑蓝比色法(MTT)检测淋巴细胞的增殖,中性红比色法检测巨噬细胞的吞噬,硝酸还原酶法(Griess)和酶联免疫法(ELISA)检测一氧化氮(NO)释放和肿瘤坏死因子α(TNF-α)分泌,以评价其免疫调节作用;采用心肌细胞(H9c2)缺氧复氧(H/R)损伤模型,评估其对H9c2细胞H/R损伤的保护作用及机制.结果:ASP经分离得到中性多糖(ASP-Ⅰ,由甘露糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成,摩尔比为1∶6.63∶2.72∶0.88)和酸性多糖(ASP-Ⅱ,由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成,摩尔比为1∶2.28∶4.30∶1.18∶2.82∶2.81).ASP-Ⅰ和ASP-Ⅱ的总糖、糖醛酸、蛋白质含量分数分别为87.61％,0,0.82％和72.33％,19.71％,0.36％.与空白对照组、刀豆蛋白(ConA)组、脂多糖(LPS)组相比,短梗五加多糖50μg/mL～200μg/mL各组可单独及协同ConA、LPS促进淋巴细胞的增殖.与空白对照组相比,短梗五加多糖50μg/mL～200μg/mL各组可促进淋巴细胞的增殖、增强巨噬细胞的吞噬,促进NO的释放和TNF-α的分泌.与模型对照组相比,短梗五加多糖50μg/mL～100μg/mL各组可抑制H9c2细胞H/R损伤模型中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸磷酸激酶(CK)活力、丙二醛(MDA)含量、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase 3)蛋白表达的升高,促进超氧化物歧化酶(SOD)活力升高;上调微小RNA451(micro RNA451)表达,下调高迁移率族蛋白Bl(HMGB1)表达.结论:短梗五加多糖具有免疫调节及保护H9c2细胞H/R损伤的作用,H9c2细胞H/R损伤与micro RNA 451/HMBG1表达有关.

[目的]从刺五加果实中提取出刺五加果多糖(Acanthopanax senticosus fructose,ASPF),并研究其对RAW264.7细胞的免疫调控作用.[方法]通过热水浸提法对刺五加果实中的多糖进行提取并用Sevage法脱蛋白,通过DEAE-52层析柱分离得到刺五加果多糖ASPF.采用乳酸脱氢酶法检测ASPF对细胞产生的毒性.CCK-8法检测巨噬细胞RAW264.7的增殖率和吞噬率,ELISA试剂盒检测该细胞分泌IL-6、IL-1β的分泌率并用Griess法测定细胞分泌NO的量.[结果]粗多糖的提取率为8.35％,ASPF在超过800 μg/mL时会对RAW264.7细胞产生细胞毒性.ASPF在100 μg/mL～800 μg/mL时能显著地促进RAW264.7细胞的增殖和吞噬,与药物浓度呈正相关,且ASPF在800 μg/mL时对细胞的增殖率和吞噬率的提高效果最佳;ASPF能促进RAW264.7细胞分泌IL-6、IL-1β和NO,呈现剂量依赖性,且在ASPF浓度为800 μg/mL时促进效果最佳.[结论]刺五加果多糖(ASPF)能对RAW264.7细胞的生长和吞噬起到促进作用,并且有提高该细胞分泌IL-6、IL-1β和NO的能力.