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鼻腔免疫淋病奈瑟球菌疫苗候选蛋白MetQ的免疫保护效果初步评估
编辑人员丨4天前
目的:原核表达淋病奈瑟球菌MetQ蛋白,采用鼻腔免疫途径初步评估MetQ蛋白的免疫保护效果。方法:利用基因重组技术构建pCold TF-metQ- E.coli BL21表达菌株,并进行MetQ蛋白的表达纯化。将6 ~ 8周龄BALB/c雌性小鼠随机分两组,每组6只,MetQ组:MetQ蛋白+霍乱毒素B亚单位(CTB)佐剂等比例混匀后对小鼠进行鼻腔滴注,10 μg/只;磷酸盐缓冲液(PBS)组:鼻腔滴注等比例、等剂量的PBS + CTB佐剂。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测MetQ组末次免疫后3只小鼠的血清及阴道分泌物中的抗体效价。免疫印迹分析MetQ在不同淋病奈瑟球菌中的表达情况。间接ELISA分析MetQ抗血清与全菌抗原的结合能力。评估MetQ抗血清对淋病奈瑟球菌的杀菌活性以及对ME-180细胞的黏附抑制作用。计量资料以 ± s表示,不同处理组间比较采用 t检验。 结果:成功表达去除信号肽的MetQ蛋白。MetQ组小鼠经鼻腔免疫后血清能检测到特异性IgG、IgG1、IgG2a、IgA抗体,抗体滴度分别达1 × 10 7、1 × 10 5、2 × 10 4、1 × 10 2,阴道分泌物能检测到特异性IgG、IgA抗体,抗体滴度分别达1 × 10 3和1 × 10 2。免疫印迹结果显示,MetQ蛋白在8株淋病奈瑟球菌中均有表达。间接ELISA结果显示,MetQ抗血清与淋病奈瑟球菌全菌抗原结合能力为20。血清杀菌力实验结果显示,与无血清对照组(100%)相比,MetQ抗血清的有效杀菌滴度可达1∶320(淋病奈瑟球菌存活率:46.33% ± 6.67%, t = 8.05, P = 0.001),MetQ抗血清稀释1∶160、1∶640时,淋病奈瑟球菌存活率分别为22.01% ± 6.80%( t = 11.47, P <0.001)、84.55% ± 6.99%( t = 2.21, P > 0.05)。黏附抑制实验结果显示,与无血清对照组(100%)相比,MetQ抗血清稀释1∶20、1∶40、1∶80能抑制淋病奈瑟球菌对ME-180细胞的黏附作用(淋病奈瑟球菌黏附率= 17.25%、28.23%、54.51%, t = 48.44、31.88、7.29,均 P<0.05)。 结论:MetQ蛋白在不同淋病奈瑟球菌中均有表达,经鼻腔免疫小鼠后能在血清及阴道分泌物中检测到高效价的特异性抗体。MetQ抗血清与淋病奈瑟球菌有较好的亲和性,并具有较好的血清杀菌活性及抗体黏附抑制作用,是一种有潜力的淋病奈瑟球菌疫苗候选蛋白。
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编辑人员丨4天前
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微生物肥料对猕猴桃高龄果园土壤改良和果实品质的影响
编辑人员丨2023/8/6
猕猴桃种植年限增加导致的连作障碍使土壤微生物结构失调、土壤酶活性及理化指标降低,进而严重降低了猕猴桃品质和产量.在大田试验条件下,本研究以果农传统施肥为对照,探究两种对猕猴桃幼苗有促生作用的微生物肥料JF和KF(通过无菌苗试验验证促生效果)对猕猴桃不同生育时期(发芽期、开花期、果实膨大期、果实成熟期、次年发芽期)土壤微生物结构、土壤酶活性、理化指标以及果实品质的影响.结果表明:两种微生物肥料均能显著提高猕猴桃果园土壤细菌、放线菌与真菌的比值,改善和平衡土壤微生物群落结构;同时显著提高猕猴桃果园土壤酶活性,其中蔗糖酶、脲酶、磷酸酶和多酚氧化酶较对照分别高17.9%~83.5%、7.9% ~ 83.0%、7.3%~45.4%和8.1% ~ 140.3%;增强土壤肥力(速效氮、磷、钾、全氮、全磷、全钾、有机质含量显著提高),降低土壤pH(较对照下降0.29~ 0.34个单位).施用微生物肥料后猕猴桃果实维生素C、可溶性糖、可溶性蛋白等含量升高,可滴定酸含量下降.因此施用两种微生物肥料均能平衡土壤微生物群落结构,增强土壤肥力,提高猕猴桃果实品质.该研究结果可为微生物肥料在高龄猕猴桃果园的应用提供有力的理论依据.
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编辑人员丨2023/8/6
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布氏菌疫苗效力评价小鼠模型的建立
编辑人员丨2023/8/6
目的 建立布氏菌疫苗效力评价小鼠模型,为布氏菌疫苗有效性评价奠定基础.方法 测定感染布氏菌株动物的脾脏细菌数,比较菌株毒力,筛选出布氏菌疫苗效力评价用布氏菌株.通过最小感染剂量的测定为效力评价的感染剂量提供基础数据.检测动物体内布氏菌增殖情况,确定动物解剖时间.将不同剂量的布氏菌活疫苗免疫小鼠,4周后用布氏菌强毒菌株皮下感染,感染4周后将动物解剖测定脾脏细菌数,分析疫苗保护效果.结果 筛选出布氏菌疫苗效力评价感染用布氏菌株,该菌株的皮下最小感染剂量为300 CFU,感染后4周动物脾脏细菌数达到较高且稳定水平.布氏菌活疫苗免疫小鼠后能产生较好的保护效果,免疫剂量与保护力水平之间有较好的量效关系.结论 建立了布氏菌疫苗效力评价小鼠模型,为新型布氏菌疫苗的研制奠定了基础.
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编辑人员丨2023/8/6
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贮存菌苗对支气管哮喘的作用
编辑人员丨2023/8/6
作者在1957~1963年曾应用自身菌苗防治以感染为主要激发因素的支气管哮喘患者得到明显效果;由于自身菌苗操作麻烦,费用又贵,因此自1963~1964年改用呼吸道常见细菌制成贮存菌苗防治以感染为主要激发因素的哮喘患者105例。
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编辑人员丨2023/8/6
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肿瘤坏死因子和传染病
编辑人员丨2023/8/6
人们早就发现细菌感染偶能诱导体内肿瘤自行消退这一奇特现象,怀疑细菌或其产物有抗肿瘤作用。1975年Caswell等给实验性诱生肿瘤的动物注射卡介菌苗(BCG)后又注射内毒素(脂多糖,LPS),在其血清中发现一种活性因子可引起肿瘤出血坏死,故称之为肿瘤坏死因子(tumour necrosis factor,TNF)。TNF分为α和β两种。TNF-α由活化单核巨噬细胞产生,又称恶液质素(cachectin);TNF-β由活化T淋巴细胞产生,旧称淋巴毒素(lymphotoxin)。二者具有许多相似的活性,最主要的活性是特异性地杀伤或制动肿瘤细胞。深入研究发现,TNF的作用十分广泛,在局部暂时性产生对机体有益,在全身持续性产生对机体反而有害。它们是参与免疫反应和炎症反应的重要介质,能调控血管内皮细胞的功能,有致热作用,能诱导其他细胞因子(cytokines)的产生和释放,通过集落刺激因子(colony-stimulatingf actor,CSF)、干扰素(IFN)、白细胞介素-1(IL1)等间接调节免疫活性细胞而增强机体免疫防护能力,抵御病原微生物感染。TNF在许多方面又模拟内毒素的作用,与毒血症、败血性休克、恶液质、组织损伤等有密切关系。新近TNF已得到纯化,基因已被克隆,重组人TNF(rHuTNF)也开始用于一些疾病发病机理及临床治疗的研究。本文着重概述TNF与传染病关系的研究进展。
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编辑人员丨2023/8/6
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文摘——小儿细菌性痢疾菌苗疗法的效力
编辑人员丨2023/8/6
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编辑人员丨2023/8/6
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麻风的菌苗接种――观察和解释
编辑人员丨2023/8/6
近10年间作者开展了一系列有关研究,旨在澄清在观察处于临床分类光谱的麻风病人对麻风杆菌的反应中所产生的一些问题.作者用加热灭活的麻风杆菌和活卡介苗(BCG)混合物给光田反应阴性的接触者、光田反应阴性的未定类麻风病人和细菌阴性的瘤型病人作皮内注射,见到前两种人能诱发免疫学改变――弗氏反应、光田反应和消除细菌能力(CCB)试验皆为阳性,对具较高特异性的麻风菌可溶性抗原提取物在48小时呈阳性反应以及试管淋巴细胞转化试验阳性.
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编辑人员丨2023/8/6
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麻风菌对豚鼠诱发的细胞介导免疫(CMI)
编辑人员丨2023/8/6
由于最近发现可以从犰狳获得大量的人麻风菌以及建立了从麻风组织中提纯细菌的方法,故有可能发展一种麻风菌苗.为了估计这种提纯的细菌是否有用,首先需要证实在能够应用于人体的适当条件下仍然保存诱发实验动物迟发型超敏反应(DH)的能力,并且这种麻风菌的制剂不会使机体被组织成份所致敏.本文研究了提纯麻风菌各种剂量、途径、佐剂、对豚鼠诱发CMI反应的能力及这种反应的特异性.
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编辑人员丨2023/8/6
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059 表面展示技术研究进展
编辑人员丨2023/8/5
表面展示技术(surface display technologe)是近年来发展起来的一种将外源肽或蛋白质与噬菌体或细菌表面特定蛋白质融合并展示于其表面,构建蛋白质或多肽文库,并从中筛选所感兴趣的特异性蛋白质、多肽或抗体的基因工程高新技术。这一技术在抗体的制备、蛋白质间相互作用的研究、活菌苗和生物催化剂发展等方面有其广泛的应用潜力和独特的优点。
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编辑人员丨2023/8/5
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痢疾(T32株)菌苗冰棍剂型的研制及其预防效果观察报告
编辑人员丨2023/8/5
用罗马尼亚引进的T32痢疾杆菌制成的冰棍剂型菌苗,在现场成人与学龄儿童间进行了效果验证。连服5次剂量,总菌数为1.39122×10 11。结果细菌学保护力达100%,临床效果为62.39%,使发病率降低31.70%。同时,该菌苗在不同种痢疾当中有交叉保护作用,它的效果比依链株好、安全。
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编辑人员丨2023/8/5
