皮肤放射性损伤合并创伤称为"皮肤放创复合伤".因其致伤因素复杂多样(除辐射因素外,还存在创伤、烧伤、冲击伤等多重复合伤),具有创面迁延难愈的疾病特点[1-2].因此,皮肤放创复合伤治疗相关的研究一直是创伤和放射医学领域中的热点问题[3].近来研究发现,维生素B12对皮肤创伤,尤其是放射性损伤具有一定改善作用.前期研究发现,损伤性创面吸收维生素B12后可以促进皮肤中RNA的合成,加速伤口愈合,减轻放射性灼伤所致的红斑[4-5].本团队前期针对皮肤放创复合伤开发了复方维生素B12软膏Ⅱ号(商品名:实尔新),然而对复方维生素B12软膏Ⅱ号刺激性与致敏性方面的研究仍有所欠缺.因此,本实验拟在通过观察豚鼠皮肤重复接触复方维生素B12软膏Ⅱ号后机体免疫系统反应在皮肤上的表现,以明确其对豚鼠皮肤的刺激性和致敏性,并评价其临床安全性.

目的:了解不同亚型禽流感病毒与不同动物来源红细胞的凝集特性，为流感环境样本监测工作选择更适宜的检测用红细胞。方法:选取2009-2016年我国禽流感环境监测中分离到的不同亚型的禽流感毒株，采用红细胞凝集试验，选用5种动物红细胞(鸡、火鸡、豚鼠、马和绵羊)进行检测；应用流式细胞仪检测不同动物红细胞表面唾液酸受体的表达及类型，通过氨基酸序列分析病毒血凝素蛋白受体结合区(receptor binding domain, RBD)的特征。结果:本研究共检测了14种亚型的28株禽流感病毒。结果显示所有毒株均能与火鸡和豚鼠红细胞发生凝集，其余红细胞均出现不能与某些毒株产生凝集的现象；其中1株H9N2(A/环境/安徽/43762/2015)毒株与鸡红细胞不产生凝集反应；1株H1N1(A/环境/山东/76972/2014)和2株H9N2(A/环境/重庆/79449/2014和A/环境/安徽/43762/2015)毒株与马红细胞不产生凝集反应；2株H9N2(A/环境/重庆/79449/2014和A/环境/安徽/43762/2015)和2株H13N8(A/环境/青海湖/166/2012和A/环境/青海湖/13/2012)毒株与绵羊红细胞不产生凝集反应。流式检测结果显示在火鸡、鸡和豚鼠红细胞表面可检测到两种类型唾液酸受体α2，3和α2，6，但两种受体表达比例不同；马和绵羊红细胞表面唾液酸受体只检测到表达α2，3。序列分析提示病毒RBD关键区域的氨基酸替换可能是影响病毒红细胞结合特性的重要因素。结论:在禽流感病毒检测中，火鸡和豚鼠红细胞在红细胞凝集试验中敏感性最好。不同来源的红细胞其受体表达及类型会显著影响不同亚型禽流感病毒的凝集反应，同时RBD关键区域的氨基酸变化也会影响病毒与不同红细胞的结合。

目的:观察蓝光干预对光学离焦性近视豚鼠屈光发育的影响及其作用机制。方法:选取普通级2周龄三色豚鼠48只，采用抛硬币法随机分成蓝光组和白光组，每组各24只。所有豚鼠右眼佩戴－5.00 D镜片建立光学离焦模型，为实验眼；左眼为自身对照，不予遮盖。实验前及实验开始后8周，采用带状光检影镜测量豚鼠屈光度，A型超声测量前房深度、晶状体厚度及眼轴长度，角膜曲率计测量角膜曲率半径。实验开始后8周，采用过量麻醉法处死豚鼠，取右眼眼球并分离视网膜，采用视网膜铺片免疫荧光染色观察豚鼠视网膜S及M视锥细胞密度；采用高效液相色谱分析法检测视网膜视黄酸表达；采用实时荧光定量PCR检测视网膜视黄酸受体(RAR-β)和巩膜中基质金属蛋白酶2(MMP-2)、组织金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)及Ⅰ型胶原的表达；采用苏木精－伊红染色观察巩膜厚度变化。结果:实验开始后8周，蓝光组实验眼较白光组实验眼出现(0.63±0.12)D相对远视，眼轴增长延缓(0.08±0.00)mm；蓝光组对照眼较白光组对照眼出现(0.42±0.09)D相对远视，眼轴增长延缓(0.08±0.00)mm；蓝光组实验眼较蓝光组对照眼近视加深(1.52±0.09)D，眼轴增长(0.06±0.00)mm；白光组实验眼较白光组对照眼近视加深(1.66±0.07)D，眼轴增长(0.13±0.00)mm，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。蓝光组豚鼠视网膜背侧和腹侧M视锥细胞密度小于白光组，背侧和腹侧S视锥细胞密度大于白光组，差异均有统计学意义( t＝32.33、52.23、42.09、25.02，均 P<0.05)。蓝光干预后近视延缓与腹侧S视锥细胞密度增加呈强正相关( r＝0.95， P<0.01)。蓝光组视黄酸含量、RAR-β和MMP-2相对表达量较白光组减少，TIMP-2和Ⅰ型胶原相对表达量较白光组增加，差异均有统计学意义( t＝18.73、7.45、3.72、6.19、9.03，均 P<0.05)。蓝光组巩膜厚度为(125.0±7.8)μm，较白光组的(102.0±6.3)μm明显增厚，差异有统计学意义( t＝26.93， P<0.05)。 结论:蓝光可抑制豚鼠离焦性近视进展；豚鼠屈光度的改变可能通过视网膜视锥细胞密度变化影响视网膜视黄酸及巩膜胶原的表达来实现。

目的:食品与环境中49株豚鼠气单胞菌菌种鉴定、毒力与耐药性检测。方法:VITEK、API 20NE生化鉴定， gyrB、 rpoD系统发育分析；PCR检测 act、 alt、 ast、 lip、 ahp、 aerA、 hlyA、 ompA1、 fla基因；AST-GN16药敏试验。 结果:生化鉴定为豚鼠/嗜水气单胞菌株54株，经系统发育分析豚鼠气单胞菌49株，嗜水气单胞菌4株，中国台湾省气单胞菌1株。毒力基因 alt、 lip、 ompA1、 fla、 act、 aerA、 hlyA检出率依次为100.00%、100.00%、79.59%、14.29%、2.04%、2.04%、2.04%，未检出 ast、 ahp；存在4种毒力基因组合，优势组合为 alt/ lip/ ompA1(32/49)。豚鼠气单胞菌氨苄西林、头孢唑林、头孢西丁、阿莫西林/克拉维酸、头孢曲松、复方新诺明、安曲南耐药率依次为79.59%、14.29%、10.20%、6.12%、4.08%、4.08%、2.04%，哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南、阿米卡星、庆大霉素、左氧氟沙星、替加环素、呋喃妥英均敏感；2株多重耐药菌株。 结论:gyrB、 rpoD可有效鉴定豚鼠/嗜水气单胞菌， rpoD可区分近亲缘关系豚鼠与中国台湾省气单胞菌；所有豚鼠气单胞菌均携带2种以上毒力基因，1株环境源菌携带7种毒力基因；青霉素类普遍耐药，产生β-内酰胺酶是最主要耐药机制；未发现碳青霉烯类、氨基糖苷类、氟喹诺酮类、四环素类、呋喃类耐药菌株；食品和生活饮用水存在多重耐药菌。

目的:探讨不同强度光照对豚鼠屈光发育和形觉剥夺性近视(FDM)的影响。方法:选取健康3周龄三色豚鼠108只，分为FDM豚鼠群54只和正常屈光发育豚鼠群54只，分别采用不透明面罩法制作单眼近视模型和双眼均不遮盖处理。采用随机数表法将FDM豚鼠和正常屈光发育豚鼠分别分为低强度光照组、正常强度光照组和高强度光照组，各组分别在20、300和5 000 lx环境中连续饲养6周，每天12 h光照/12 h黑暗。各组豚鼠每2周进行眼参数生物学测量并进行比较，采用眼科A型超声诊断仪测量豚鼠眼轴长度(AL)，AL定义为角膜顶点到视网膜黄斑区的距离；采用检影法测定各组豚鼠扩瞳后的屈光度。计算各组豚鼠AL和屈光度变化量，变化量定义为光照各时间点测量值与光照前的差值。结果:正常屈光发育豚鼠不同强度光照组AL值组间总体比较差异无统计学意义( F组别＝0.365， P＝0.697)，各组豚鼠AL随着光照时间的延长而显著延长，总体比较差异有统计学意义( F时间＝353.750， P<0.001)。正常屈光发育豚鼠不同强度光照组间屈光度总体比较差异有统计学意义( F组别＝3.576， P＝0.034)，其中高强度光照组豚鼠光照4周屈光度为(+2.75±2.15)D，大于低强度光照组的(+0.41±3.07)D，差异有统计学意义( P<0.01)；FDM豚鼠不同强度光照组AL值和屈光度值总体比较差异均无统计学意义( F组别＝0.105， P＝0.900； F组别＝0.973， P＝0.387)，光照不同时间AL和屈光度总体比较差异均有统计学意义( F时间＝408.302、27.407，均 P<0.001)，其中低强度光照组光照2周FDM眼屈光度为(+2.35±1.95)D，大于光照前的(+1.90±0.97)D，但差异无统计学意义( P>0.05)。正常屈光发育豚鼠高强度光照组AL最短，且变化量最小；FDM豚鼠低强度光照组光照2周屈光度变化量明显小于正常强度光照组，产生短暂性远视漂移。 结论:高强度光照可减缓正常屈光发育豚鼠屈光度向近视漂移；低强度光照有延缓FDM进展的趋势，光照2周屈光度出现短暂性远视漂移。

目的:制备负载小鼠脂肪干细胞的甲壳素/透明质酸/胶原水凝胶并探讨其对大鼠全层皮肤缺损创面愈合的作用。方法:该研究为实验研究。通过酸水解碱的方法提取甲壳素纳米纤维，将提取物与透明质酸和胶原混合制备甲壳素/透明质酸/胶原水凝胶（以下简称水凝胶），另制备负载小鼠脂肪干细胞的水凝胶。将30只雄性12周龄豚鼠按照随机数字表法分为阴性对照组、阳性对照组和水凝胶组（每组10只），分别在豚鼠背部两侧涂抹乙醇、4-氨基苯甲酸乙酯、前述制备的不含细胞的水凝胶进行诱导接触和激发接触，于激发接触后24、48 h观察皮肤水肿和红斑形成情况。将小鼠脂肪干细胞分为行常规培养的正常对照组和用前述制备的不含细胞的水凝胶培养的水凝胶组，培养3 d，采用蛋白质印迹法检测血小板衍生生长因子-D（PDGF-D）、胰岛素样生长因子Ⅰ（IGF-Ⅰ）、转化生长因子β 1（TGF-β 1）的蛋白表达（样本数均为3）。取8只雄性8周龄SD大鼠，在其背部两侧各制备1个圆形全层皮肤缺损创面，分别作为空白对照组（不进行任何处理）和水凝胶组（涂抹前述制备的负载脂肪干细胞的水凝胶）。伤后0（即刻）、2、4、8、10 d，观察创面愈合情况并计算伤后2、4、8、10 d的创面愈合率。取伤后10 d创面组织，行苏木精-伊红染色观察新生组织形成情况，采用酶联免疫吸附测定法检测白细胞介素1α（IL-1α）、IL-6、IL-4和IL-10的浓度，行免疫组织化学染色观察CD16、CD206阳性细胞表达并计算阳性细胞百分比。动物实验样本数均为8。 结果:激发接触后24 h，3组豚鼠皮肤均无水肿形成，仅阳性对照组7只豚鼠皮肤出现轻微红斑。激发接触后48 h，阳性对照组8只豚鼠皮肤出现红斑，4只豚鼠皮肤出现水肿；其余2组豚鼠皮肤无明显红斑或水肿。培养3 d，水凝胶组脂肪干细胞中PDGF-D、IGF-Ⅰ和TGF-β 1的蛋白表达水平均明显高于正常对照组（ t值分别为12.91、11.83、7.92， P<0.05）。伤后0~10 d，2组创面面积均逐渐缩小，水凝胶组创面于伤后10 d基本愈合。伤后4、8、10 d，水凝胶组创面愈合率分别为（38±4）%、（54±5）%、（69±6）%，分别明显高于空白对照组的（21±6）%、（29±7）%、（31±7）%（ t值分别为3.82、3.97、4.05， P值均<0.05）。伤后10 d，与空白对照组比较，水凝胶组创面表皮更加完整，毛囊、血管和其他皮肤附件增多。伤后10 d，水凝胶组创面组织中IL-1α、IL-6浓度均较空白对照组明显降低（ t值分别为8.21、7.99， P<0.05），IL-4、IL-10浓度均较空白对照组明显升高（ t值分别为6.57、9.03， P<0.05）；水凝胶组创面组织中CD16阳性细胞百分比较空白对照组明显降低（ t=8.02， P<0.05），CD206阳性细胞百分比较空白对照组明显升高（ t=7.21， P<0.05）。 结论:负载小鼠脂肪干细胞的水凝胶无致敏性，能促进脂肪干细胞中生长因子分泌，促进大鼠全层皮肤缺损创面组织中巨噬细胞向M2型极化，减轻炎症反应，从而促进创面愈合。

目的：:探究睡眠剥夺（SD）对豚鼠光学离焦性近视（LIM）形成及视网膜近视相关信号因子多巴胺（DA）代谢的影响。方法：:实验研究。2022年3月采用随机数表法将30只21日龄三色豚鼠分为LIM组和LIM+SD组，予以右眼离焦处理，左眼为自身对照，所有实验动物予以14 d正常睡眠环境或每天SD处理20 h。每组进行角膜曲率半径、屈光度和眼轴长度等生物学参数测量。采用高效液相色谱电化学法测定视网膜DA、3，4-二羟基苯乙酸（DOPAC）含量，计算DOPAC/DA比值；通过免疫组织化学染色法及Western blot检测视网膜酪氨酸羟化酶（TH）分布及表达。豚鼠左右眼屈光参数及神经递质含量比较采用配对样本 t检验，LIM组与LIM+SD组间屈光参数及神经递质含量比较采用独立样本 t检验。离焦眼视网膜DA含量分别与眼球屈光度、眼轴长度进行Pearson相关分析。 结果：:LIM组对照眼与LIM+SD组对照眼屈光度、眼轴长度比较差异均无统计学意义（均 P>0.05）；与LIM组离焦眼相比，LIM+SD组离焦眼的近视程度更深、眼轴延长更长（ t=5.63， P<0.001； t=-3.87， P=0.001）。2组豚鼠离焦眼视网膜DA、DOPAC含量均低于自身对照眼（LIM组： t=-8.64， P<0.001； t=-13.03， P<0.001；LIM+SD组： t=-11.72， P<0.001； t=-16.32， P<0.001），其中LIM+SD组离焦眼视网膜DA、DOPAC含量均较LIM组更低（ t=5.35， P<0.001； t=3.80， P=0.002），而DOPAC/DA比值升高且组间差异具有统计学意义（ t=-3.60， P=0.003）。豚鼠离焦眼视网膜DA含量与屈光度、眼轴长度均有相关性（ r=0.93， P<0.001； r=-0.77， P=0.001）。免疫组织化学染色结果显示，TH阳性反应细胞主要分布在视网膜神经纤维层、神经节细胞层、内丛状层和内核层，外丛状层可见少量着色；与自身对照眼相比，豚鼠离焦眼视网膜染色均减弱。Western blot检测显示，离焦眼视网膜TH蛋白表达均明显低于自身对照眼（LIM组： t=-40.25， P<0.001；LIM+SD组： t=-17.64， P<0.001），但LIM组与LIM+SD组离焦眼视网膜TH蛋白表达差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论：:SD对正常屈光发育豚鼠的屈光发育无明显作用，但能促进豚鼠LIM进展，可能通过加快DA代谢而不影响DA合成水平，降低DA含量，促进近视进展。

目的:分析发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)不同基因型和突变体的中和特性。方法:采用VSVΔG-Fluc*G骨架构建SFTSV不同基因型和突变体的假病毒，建立以假病毒为基础的中和抗体检测方法。制备不同基因型DNA疫苗并免疫豚鼠采集血清。对DNA疫苗免疫后血清以及自然感染者的血清进行中和抗体检测，分析其中和特性。结果:成功构建了5个基因型和43株突变体的假病毒。通过条件优化，建立了以假病毒为基础的中和抗体检测方法。利用报告基因表达量的减少，将中和抗体对假病毒的半数感染抑制率所对应的稀释倍数作为中和抗体滴度。以参考株HB29检测，自然感染者的中和抗体滴度在1∶100～1∶43 000之间，不同基因型DNA疫苗免疫后的中和抗体在1∶100～1∶2 500之间。不同基因型和突变体对DNA疫苗免疫的豚鼠血清以及自然感染者血清的中和抗体检测差异无统计学意义。结论:各基因型和突变体的中和特性未发现明显改变，对疫苗毒株的选择具有重要参考价值。

目的:探索一种编程数字化技术和数学几何原理相结合对豚鼠眼球形态学参数进行量化分析的方法。方法:选取22只3周龄清洁级雄性三色豚鼠，采用过量麻醉法处死并取出眼球，采用1 300万像素微距仪的高拍模式进行水平面及矢状面拍照，图片导入pycharm编程软件。应用Python 3.9预先编写好的分析程序，先通过刻度尺获取图片像素与实际距离的换算系数，再对角膜表面进行圆弧拟合及圆锥曲线拟合。圆弧拟合后的结果经换算后计算出豚鼠的角膜曲率半径；通过圆锥曲线通用方程拟合(Ax 2+Bxy+Cy 2+Dx+Ey+F＝0)，得出角膜表面的离心率e值；通过对全角膜及中央区3 mm的拟合，评估角膜的非球面性质。 结果:应用Python编程数字化方法可以完整清晰地展现豚鼠的角膜轮廓。横切面上，数字化拟合中央3 mm、数字化拟合全角膜以及曲率计测量全角膜曲率比较，差异无统计学意义( F＝1.693， P＝0.190)；矢状面上，3种方法测得的角膜曲率比较，差异有统计学意义( F＝3.500， P＝0.030)，其中曲率计测量全角膜的角膜曲率明显大于数字化拟合全角膜，差异有统计学意义( P<0.05)。横切面和矢状面上，3种方法测得的角膜曲率半径比较，差异均无统计学意义( F＝1.817， P＝0.170； F＝2.050， P＝0.133)。离心率测量结果显示，横切面和矢状面数字化拟合中央区3 mm处e值分别为0.55±0.15和0.53±0.17，分别低于数字化拟合全角膜e值的0.66±0.10和0.64±0.14，差异均有统计学意义( t＝－4.860、－5.210，均 P<0.01)。 结论:应用Python编程数字化方法测量豚鼠角膜曲率及离心率切实可行。

目的:探讨不同天数饮用含胃蛋白酶的盐酸（PH＝3）的豚鼠建立反流性食管炎模型的效果，并确定最佳天数的新型建模方法。方法:将40只3～4周龄的SD雄性豚鼠采用随机数字表法分为对照组、14 d模型组、21 d模型组、28 d模型组、35 d模型组，每组各8只。适应性饲养7 d后开始造模，其中对照组予以饮用无菌水，500 ml/d，连续28 d。模型组予以饮用含0.5%胃蛋白酶的0.1 mol/L盐酸（HCl），PH＝3 500ml/d，分别连续14、21、28、35 d。每天观察各组豚鼠的一般状况、体重变化。取材后记录食管组织肉眼状态，行苏木精-伊红（HE）染色组织病理学观察。各组豚鼠食管组织通过实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、闭锁小带蛋白-1（ZO-1）和闭合蛋白（Occludin）的mRNA相对表达量。同时蛋白质印迹法（Western blot）检测ZO-1、Occludin的蛋白表达。两组间比较采用 t检验。 结果:相较于对照组，各模型组的豚鼠活动力下降、体重增长缓慢，部分出现腹泻及皮疹。大体形态观察可见各模型组豚鼠的食管组织不同程度的黏膜充血，未见明显糜烂灶。光镜下可见各模型组食管黏膜出现不同程度早期炎症损伤，28 d模型组和35 d模型组可见明显的食管黏膜增厚、炎性细胞浸润、鳞状上皮细胞过度增生、固有层乳头延长等食管炎的表现。随着造模时间的延长，模型组豚鼠食管组织中炎性因子表达增加、黏膜屏障功能受损。从Western blot结果可见，21d、28、35 d模型组的连接蛋白ZO-1的蛋白表达水平均低于对照组（0.612±0.051比1.000±0.157、0.508±0.068比1.000±0.157、0.514±0.094比1.000±0.157， t＝4.076、4.979、4.597， P<0.05）。14、21、28、35 d模型组的连接蛋白Occludin的蛋白表达水平均低于对照组（0.758±0.120比1.000±0.089、0.725±0.093比1.000±0.089、0.444±0.054比1.000±0.089、0.443±0.099比1.000±0.089， t＝2.802、3.699、9.259、7.239， P<0.05）。从RT-PCR结果可见，28、35 d模型组的连接蛋白ZO-1的mRNA表达水平均低于对照组（0.115±0.066比1.208±0.796、0.130±0.038比1.208±0.796， t＝4.105、4.056， P<0.05）。14、21、28、35 d模型组的连接蛋白Occludin的蛋白表达水平均低于对照组（0.679±0.148比0.978±0.098、0.551±0.227比0.978±0.098、0.242±0.167比0.978±0.098、0.126±0.103比0.978±0.098， t＝4.837、4.884、11.196、16.894， P<0.05）。28、35 d模型组中炎性因子IL-6的mRNA表达水平均高于对照组（10.985±5.300比1.033±0.284、17.192±11.321比1.033±0.284， t＝－5.625、－4.281， P<0.05）。28、35 d模型组中炎性因子TNF-α的mRNA表达水平均高于对照组（7.565±2.729比1.014±0.182、13.190±5.530比1.014±0.182， t＝－5.449、－4.920， P<0.05）。14、21、28、35 d模型组的抗炎因子IL-10的mRNA表达水平均低于对照组（0.486±0.273比1.010±0.150、0.309±0.206比1.010±0.150、0.190±0.171比1.010±0.150、0.215±0.126比1.010±0.150， t＝5.043、8.253、10.822、12.203， P<0.05）。 结论:通过豚鼠自发性饮酸可以成功建立反流性食管炎模型，并且28 d造模时间是最佳的选择，为后续研究奠定基础。