为研究钢渣混合基质对大花绣球扦插生根的影响,创制可部分替代常规扦插基质、实现固体废弃物高效利用的新型基质,本试验以常规扦插基质(泥炭+珍珠岩)为对照(CK),研究在其中添加体积分数为10％(T1)、20％(T2)、30％(T3)和40％(T4)钢渣的条件下,混合基质的理化性质及其对大花绣球'红粉佳人'生根的影响.结果表明:钢渣混合基质的pH值、电导率和容重均显著高于CK,T2处理通气孔隙度高于其他处理,但总孔隙度和持水孔隙度无显著差异;扦插苗地上部分生长表现为:各处理鲜重和干重均大于CK,茎粗除T4处理外均大于CK,株高除T4处理外与CK相比无显著差异,叶片叶绿素含量均显著低于CK;扦插苗根系生长表现为:根长为T2＞CK＞T1＞T3＞T4,根表面积和根体积均为T2＞T1＞CK＞T4＞T3,根尖数为T2＞CK＞T1＞T4＞T3,各处理平均根直径和根系活力均显著高于CK,且以T2处理最高;扦插苗叶片可溶性糖含量为T2＞T4＞T3＞CK＞T1.根系生长发育指标权重排序为:根系活力＞平均根直径＞根体积＞根表面积＞根尖数＞根长;冗余分析发现,基质pH值、电导率、通气孔隙度和持水孔隙度是影响插穗根系生长发育的关键因子.综上,添加体积分数为10％～40％钢渣的混合基质均能够用于大花绣球扦插育苗,其中以20％(T2)的效果最好,可显著改善插穗成活率、生长状况和根系发育.本研究证实了钢渣作为花卉新型育苗基质部分替代泥炭、珍珠岩等常规不可再生基质的可行性,既可降低农业生产成本,又能实现工业固废的高值化利用.

绣球茜(Dunnia sinensis)是我国广东特有的、国家二级珍稀濒危植物,有明显脉纹的白色变态花萼裂片,具有良好的观赏价值,但目前尚未有其基因组信息.为研究绣球茜花萼发育的分子调控机制,挖掘相关的功能基因,对其萼片、果实、叶片及花瓣进行RNA-seq和差异基因表达分析,以期筛选萼片特异表达基因或信号途径.结果表明,与叶片相比,萼片差异表达的基因有3 972个,主要富集于代谢途径、次生代谢生物合成、光合作用、苯丙类生物合成等途径.与花瓣相比,萼片差异表达的基因有9 680 个(上调3 616 个,下调6 024个,FC>2),主要富集于植物激素、苯丙类生物合成、植物与病原互作、次生代谢生物合成等途径.与果实相比,萼片差异表达的基因有4 655个(上调1 827个,下调2 828个,FC>2),富集的途径和参与调控途径近似于花瓣的转录组.聚类分析表明,参与萼片发育且特异高表达的转录因子主要有3类:ERFs、MYBs和WRKYs,其中MYB家族的DsTMYB3 可能参与萼片的颜色调控.组织的高表达基因分析表明,UBI11 启动子在各组织中广泛表达,而CSLG2启动子等特异在花萼高表达,这些基因的启动子将作为遗传工具驱动目的基因组成型表达或特异表达于花萼.通过分析绣球茜花萼和其他组织的差异表达基因,获得了可能参与萼片颜色调节的相关转录因子和启动子,这将为绣球茜的遗传转化和功能研究提供基础.

肾间质纤维化(RIF)是慢性肾病的主要病理表现结果,由于其发生机制复杂,临床上尚无特效治疗措施.磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的异常激活及其下游靶基因的活化是RIF发生进展的关键诱因.中药具有药效确切、毒副作用小等特点,可多靶点、多途径协同调控RIF的发生进展.本文以PI3K/Akt信号通路为核心,对中药在RIF治疗中的作用靶点及调控机制进行归纳,发现多种中药有效成分(如青藤碱、芒果苷、圆锥绣球提取物等)以及复方(如复肾功方、气邦益肾方等)可通过该通路抑制成纤维细胞增殖、改善炎症反应与氧化应激、维持线粒体稳态、减缓铁死亡发生等,从而延缓RIF的发生进展.

综合运用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、Sephadex LH-20 凝胶柱色谱以及制备型高效液相色谱等技术对唇形科绣球防风属植物绣球防风Leucas ciliata的化学成分进行研究,得到 17 个酚酸类化合物.根据化合物的理化性质和波谱数据,及通过与文献对比,分别鉴定为 4-hydroxyphenethyl ethyl succinate(1)、4-hydroxyphenethyl methyl succinate(2)、2-(4-hydroxyphenyl)ethyl acetate(3)、对羟基苯乙基茴香酸酯(4)、决明顺反二聚苯丙素(5)、对香豆酸(6)、3,4-二羟基苯丙酸甲酯(7)、咖啡酸(8)、反式对羟基肉桂酸乙酯(9)、对羟基苯乙酸甲酯(10)、对羟基苯乙醇(11)、丁香酸(12)、香草醛(13)、原儿茶酸(14)、水杨酸(15)、对羟基苯甲醛(16)和diorcinol(17).其中化合物 1 为新化合物,化合物2～10、12、14、16～17为首次从绣球防风属中分离得到,所有化合物均首次从绣球防风中分离得到.通过检测脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7 细胞中一氧化氮(NO)的产生评价化合物1～17的抗炎作用,结果表明化合物5、7、9表现出显著的抗炎活性,IC50 为(10.14±0.36)～(21.17±0.11)μmol·L-1.

绣球(Hydrangea macrophylla)是以花序为主要观赏部位的园林植物,多用作切花装饰和景观营造,在亚洲、美洲、欧洲广泛栽培.为探究AP3 基因在绣球花萼形成过程中的功能,加快重瓣绣球新品种培育进程,该研究以绣球'杜丽'为材料,克隆其MADS-box B类基因HmAP3,并结合生物信息学方法预测基因功能;根据HmAP3 序列信息,筛选出高特异性编辑靶点并构建CRISPR/Cas9 基因编辑载体,通过农杆菌转化法将载体整合到绣球基因组中.结果表明:(1)克隆到1 段HmAP3 基因的cDNA序列,其序列全长546 bp,共编码 181 个氨基酸,测序结果表明其氨基酸序列与参考序列一致性为 100%,与拟南芥AtAP3 相似度为58.8%.(2)不同属植物AP3 氨基酸序列差异较大,在同属不同物种中,AP3 蛋白主要结构较为保守,仅在少数基序上存在差异.(3)在HmAP3 中共鉴定到 2 个高特异性靶点,并成功构建 2 个单靶点CRISPR/Cas9基因编辑载体.(4)该研究共获得 5 株基因组内含有Cas9 序列的抗性芽,但其靶点均未突变,在抗性芽中没有检测到Cas9 表达.该研究探讨了AP3 基因在重瓣绣球育种中的价值,对绣球的CRISPR/Cas9 基因编辑技术进行了初探,为绣球优良品种繁育工作奠定了基础.

研究组分别于2009、2015、2021 年在银厂沟谢家店滑坡体对设置的 9 个样地开展植物群落样方调查工作,然后采用Shannon生态位宽度指数和Pianka生态位重叠指数分析了滑坡体植物群落优势种的生态位特征和变化.结果表明:(1)2009-2021 年间,滑坡体优势种中阳生物种总生态位宽度从 10.156 减少到 4.893,而中生阴生物种总生态位宽度从 10.229 增加到 21.123,腊莲绣球等喜肥物种生态位宽度也逐渐增大.(2)群落优势种生态位宽度和生态位重叠平均值之间存在着显著线性正相关关系,生态位宽度较大的物种拟合效果较好,生态位宽度较小的物种则较分散.(3)群落各层次优势种总生态位宽度、平均生态位宽度和平均生态位重叠值总体上不断增大,草本层则在 2021 年出现了平均生态位重叠值的下降.本研究揭示了滑坡体在 13 年的演替过程中植物群落优势种的生态位特征与变化,为滑坡体植被恢复的相关研究以及水土保持工作提供参考与借鉴.

[目的]分析广叶绣球菌(Sparassis latifolia)在不同木质纤维素诱导条件下基因表达差异,为广叶绣球菌木质纤维素降解关键基因和分子机制研究提供参考.[方法]以松木、杉木、甘蔗渣和天然堆积发酵后的杉木和发酵后的甘蔗渣为碳源,在液体培养条件下培养诱导广叶绣球菌,对其转录组进行测序研究,并对不同木质纤维素诱导样本进行加权基因共表达网络分析(weighted gene co-expression network analysis,WGCNA).[结果]杉木培养与松木培养比较组差异表达基因最少(20个),蔗渣培养与松木培养比较组差异表达基因最多(486个).基因本体(gene ontology,GO)富集分析结果表明,差异表达基因主要涉及氧化还原酶活性、单加氧酶活性和铁离子结合活性等,京都基因和基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析结果表明,差异表达基因主要涉及戊糖和葡萄糖醛酸转换、甲烷代谢和乙醛酸盐和二羧酸盐代谢等通路.发酵甘蔗渣为碳源培养时,纤维素和半纤维素降解相关的糖苷水解酶基因表达量总体上较高,而未发酵的松木、杉木和甘蔗渣为碳源培养时木质素降解或修饰相关的碳水化合物辅助酶基因表达量总体上较高.利用WGCNA共鉴定出10个共表达模块,其中green模块与未发酵蔗渣诱导显著正相关,blue模块与发酵甘蔗渣诱导显著正相关,magenta和turquoise模块与发酵杉木诱导显著正相关.GO富集分析结果表明,turquoise模块内基因显著富集到尿素跨膜转运子活性、甲基转移酶活性和单加酶活性等,blue模块基因显著富集到水解酶活性和β-甘露糖苷酶活性.KEGG通路富集分析结果表明,blue模块内基因显著富集的通路有半乳糖代谢、果糖和甘露糖代谢、苯丙氨酸代谢、精氨酸和脯氨酸代谢等.通过构建互作网络图挖掘到12个核心基因,其可能参与了基质降解及相关基因的表达调控.[结论]不同木质纤维素类型显著影响了广叶绣球菌木质纤维素降解基因的差异表达轮廓,这种差异反映了广叶绣球菌对不同木质纤维素特异的降解策略.

研究广叶绣球菌多糖(polysaccharides,SLPs)对小鼠CD8+T细胞活化、增殖分化以及效应阶段的影响,探索广叶绣球菌多糖对CD8+T细胞的免疫应答调控机制.通过腹腔注射环磷酰胺溶液(80 mg/kg)构建免疫低下小鼠模型,灌胃广叶绣球菌多糖(低、中和高剂量分别为 100、200 和400 mg/kg),连续饲养20 d后处死,取脾脏和胸腺.血细胞分析仪测定血常规;MTT检测脾T淋巴细胞的扩增能力;流式细胞术分析脾脏CD8+T细胞表面CD28、CTLA-4 和PD1 以及树突状细胞表面MHCⅠ、CD80 和PD-L1 的表达量;ELISA测定外周血中TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-10、穿孔素及颗粒酶 B 的含量;RT-PCR 测定脾脏 Psmb9、Psmd9、TAP1、TAP2、IFN-γ、IL-2、JAK1、JAK2、STAT1、STAT3、SOCS-3 和 Blimp-1 的 mRNA 表达量;Western blot 测定 pJAK2/JAK2、pSTAT3/STAT3 和 Blimp-1 的蛋白表达量.试验表明广叶绣球菌多糖高剂量组脾脏指数显著升高,外周血中红细胞、白细胞、淋巴细胞、单核细胞和血小板的含量显著升高(P＜0.05 或P＜0.01);多糖中、高剂量组脾 T 淋巴细胞的扩增能力显著增强(P＜0.05);中、高剂量组 CD8+T 细胞含量显著降低,CD8+T细胞表面PD-1分子含量显著降低,树突状细胞表面PD-L1分子含量显著降低、MHCⅠ细胞含量显著升高(P＜0.05或P＜0.01);多糖高剂量组TNF-α、IFN-γ、IL-2、穿孔素和颗粒酶B的含量显著升高(P＜0.05 或 P＜0.01),IL-10 的含量显著降低(P＜0.05);中、高剂量组 Psmb9、Pmsd9、TAP1、TAP2和Blimp-1的mRNA含量显著升高(P＜0.05或P＜0.01),JAK1、JAK2、STAT1和STAT3的mRNA和蛋白表达量显著降低(P＜0.05或P＜0.01).多糖中高剂量组Blimp-1蛋白表达量显著升高(P＜0.05),多糖组与阳性对照组趋势一致.因此,认为广叶绣球菌多糖能够调节MHCⅠ类抗原加工呈递分子,并通过JAK2/STAT3信号通路促进CD8+T细胞的活化、增殖分化和效应杀伤过程,从而调控CD8+T细胞的免疫应答,起到改善小鼠免疫低下的作用.

[背景]栽培基质的利用是广叶绣球菌(Sparassis latifolia)栽培中重要的生理过程,但栽培过程中基质代谢物的变化尚不清楚.[目的]通过不同生长阶段栽培基质中差异代谢物分析挖掘关键代谢物,为广叶绣球菌基质利用机理研究提供理论参考.[方法]利用UHPLC-MS/MS技术分析广叶绣球菌菌丝(Myc)、原基(Pri)和子实体(FB)生长阶段栽培基质中代谢产物的变化,通过不同数据库进行代谢物注释并进行KEGG通路富集分析.利用LC-MS/MS技术检测不同发育阶段绣球菌中植物类激素含量.[结果]三个不同栽培阶段基质中共鉴定出代谢产物 1 360 个.不同比较组(Pri vs.Myc、FB vs.Myc和FB vs.Pri)间共有的差异代谢产物 179 个,含量最高的 50 个代谢物主要包括氨基酸、脂质、吡喃酸、吡喃酮和植物类激素等物质.其中氨基酸含量在Myc、Pri和FB阶段基质中逐渐降低,而吡喃酸和吡喃酮类化合物含量逐渐升高.植物类激素中的赤霉素在Pri和FB阶段基质中含量较高,茉莉酸在Myc阶段基质中含量较高.对不同发育阶段绣球菌植物类激素进行检测,发现赤霉素GA7 仅在原基中检测到,12-氧代植物二烯酸在子实体中含量显著升高.不同比较组所有的差异代谢物KEGG分析显示嘌呤代谢、鞘脂信号通路和甘油磷脂代谢等通路显著富集.[结论]氨基酸是Myc阶段基质中重要的代谢物,吡喃酸、吡喃酮和植物类激素可能与Pri和FB阶段基质利用过程中的生理生化调控有关.

目的 观察壮药绣球经筋解结疗法治疗腰背肌筋膜炎的疗效及对疼痛介质及炎症因子的影响..方法 选取71例腰背肌筋膜炎患者并随机分为观察组36例与对照组35例.对照组使用常规穴位拍打,观察组使用壮药绣球拍打器对腰背部筋结点进行解结治疗.比较两组疼痛视觉模拟量表(VAS)评分、Oswestry功能障碍指数(ODI)评分、改良Barthel指数(MBI)评分、一氧化氮(NO)、前列腺素E2(PEG2)、5-羟色胺(5-HT)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)及临床疗效.结果 治疗后,观察组VAS、ODI评分较对照组降低(P＜0.05),MBI评分较对照组增高(P＜0.05).观察组血清NO、PEG2、5-HT水平较对照组降低(P＜0.05).观察组血清TNF-α、IL-6、IL-1 β水平较对照组降低(P＜0.05).观察组临床疗效明显优于对照组(P＜0.05).结论 壮药绣球经筋解结疗法治疗腰背肌筋膜炎效果显著,可减轻患者疼痛症状,改善功能障碍和日常生活能力,抑制疼痛介质及炎症因子分泌是其主要作用机制.