目的:了解陕西省布鲁氏菌病发病情况及分离菌株或核酸的基因型,掌握其流行病学及分子遗传特征,为陕西省人间布鲁氏菌病的精准防控提供科学依据。方法:登录中国疾病预防控制信息系统收集2020年陕西省人间布鲁氏菌病的发病数据,分析流行特征;应用细菌学及PCR方法对分离菌株或核酸进行鉴定,进一步采用多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)方法进行分子分型,利用BioNumerics(Version 7.6)软件对MLVA结果进行分析。结果:2020年陕西省共报告人间布病1 086例,发病率为2.80/10万,涉及86个县(区),流行高峰在3 - 9月(865例),男女性别比为2.68∶ 1.00(791∶ 295),30 ~ 69岁年龄段占79.74%(866例),农民占83.43%(906例)。36株分离菌株生物型鉴定结果显示,4株是羊种变异型,3株是羊种1型,29株是羊种3型。36株分离菌株及7份核酸经BCSP31-PCR均鉴定为布鲁氏菌属,经AMOS-PCR均鉴定为羊种布鲁氏菌。经MLVA-16分型,panel1结果显示有2种基因型:42型(1-5-3-13-2-2-3-2)、63型(1-5-3-13-2-3-3-2),panel2A结果显示均为4-41-8,panel2B结果显示具有高度的多变性;36株分离菌株及7份核酸分为33种基因型,其中27种基因型为单分离株,6种基因型为共享型。结论:陕西省人间布鲁氏菌病防控形势严峻。MLVA-16是一种成熟的基因分型方法,确定了陕西省布鲁氏菌分离株或核酸存在多种基因型,可为人间布鲁氏菌病精准防控、暴发疫情分析及流行病学溯源提供科学依据。

目的:了解云南省人间布鲁氏菌病的流行特征，为制定布鲁氏菌病精准防控策略提供可靠的科学依据。方法:收集中国疾病预防控制中心信息系统中2019年1月至2021年12月云南省人间布鲁氏菌病疫情资料和云南省各州（市）上报的布鲁氏菌病年度监测数据，采用描述性流行病学方法，对布鲁氏菌病的流行概况，三间分布（时间、地区、人群）特征及血清学、病原学监测结果进行分析。结果:2019 - 2021年云南省累计报告布鲁氏菌病病例1 408例，年均发病率为1.00/10万；发病数从2019年的321例增加至2021年的701例，发病率从2019年的0.68/10万增加至2021年的1.50/10万。发病时间主要集中在4 - 9月（857例）。报告发病数居前3位的地区依次为昆明市（483例）、曲靖市（379例）、红河哈尼族彝族自治州（281例），共占总病例数的81.18%（1 143/1 408）。发病年龄主要集中在20 ~ < 70岁，占89.70%（1 263/1 408）；男性958例、女性450例，男女性别比为2.13 ∶ 1.00；职业以农民为主，占84.02%（1 183/1 408）。2019 - 2021年云南省共监测布鲁氏菌病重点人群血清26 280份，血清学检测阳性572份，阳性率为2.18%（572/26 280）。共从全省医院病例血液标本中分离出布鲁氏菌169株，其中羊种3型155株、羊种1型14株。结论:2019 - 2021年云南省人间布鲁氏菌病发病呈上升趋势，以夏秋季高发，发病人群主要为青中年男性农民，应加强高发季节重点人群的疾病监测与健康教育。

目的:分析青海省人间布鲁氏菌病（布病）流行规律与趋势，对2005-2019年布鲁氏菌分离株进行分子分型，为制定青海省布病预防控制策略提供依据。方法:收集中国疾病预防控制信息系统青海省2005-2019年布病报告数据，描述和分析其时间、地区和人群三间分布。采用BCSP31聚合酶链式反应（BCSP31-PCR）、AMOS聚合酶链式反应（AMOS-PCR）和多位点串联重复序列分析（MLVA-16）方法鉴定布鲁氏菌分离株，进行聚类分析。结果:2005-2019年青海省累计报告病例577例，平均发病率为0.07/10万，不同年份差异有统计学意义。一年四季均可发病，集中在每年的3-10月。577例病例分布在6个自治州（市）的31个县（市、区）中，病例数位居前5位的是门源回族自治县（22.88 %，132/577）、天峻县（10.57 %，61/577）、西宁市（10.57 %，61/577）、河南蒙古族自治县（10.51 %，58/577）和海晏县（9.53 %，55/577）。年龄范围8~82岁，男女性别比为1.8∶1（374/203），职业分布以牧民为主（47.83 %，276/577）。从人全血中分离的10株菌株均为羊种Ⅲ型布鲁氏菌，分为5种基因型（2种基因型为单基因型，3种基因型为相同基因型），MLVA-16分型和聚类分析结果显示，同青海省已发表文献的26株羊种Ⅲ型布鲁氏菌的遗传关系较近。 结论:青海省布病疫情呈回升趋势，应加强人群监测和疫情通报，MLVA-16分型呈基因多态性，提示MLVA-16可用于遗传多样性分析和分子流行病学溯源调查，以提高布病监测能力。

目的:观察青海省青藏高原喜马拉雅旱獭分离的布鲁氏菌的多位点可变数目串联重复序列分析（multiple locus variable-number tandem repeat analysis，MLVA）分型，探讨其与既往青海省布鲁氏菌分离菌株间的亲缘关系。方法:2019年3月至2020年10月，采集青海省青藏高原喜马拉雅旱獭全血样本，对虎红平板凝集试验（rose bengal test，RBT）布鲁氏菌抗体阳性样本进行病原体分离培养，采用传统生物学方法和分子生物学方法（BCSP31-PCR和AMOS-PCR方法）进行菌株鉴定。同时，应用MLVA方法对分离菌株进行基因分型，并结合既往青海省不同宿主分离的70株布鲁氏菌的基因型，应用聚类分析方法探讨菌株间的亲缘关系。结果:共采集青藏高原喜马拉雅旱獭全血样本1 466份，从其中64份RBT阳性样本中分离培养出2株布鲁氏菌，分别命名为QH2013054、QH2013062，经传统生物学和分子生物学方法鉴定为羊种布鲁氏菌生物Ⅲ型。MLVA分型结果显示，QH2013054与QH2013062菌株在Bru16位点有差异，为不同的MLVA基因型。聚类分析结果显示，QH2013054菌株与7株菌株具有相同的MLVA基因型，其中6株来自共和县同一个家庭的3名农民和3只羊，1株来自门源回族自治县农民；QH2013062菌株与4株菌株具有相同的MLVA基因型，其中3株来自门源回族自治县的3名农民，1株来自互助土族自治县农民。结论:从青海省青藏高原喜马拉雅旱獭中分离的布鲁氏菌与在本省人、羊中分离的部分布鲁氏菌具有相同的MLVA基因型，推测宿主人、羊、青藏高原喜马拉雅旱獭可能具有共同的传染源。

目的:分析山西省晋中市人间布鲁氏菌病（布病）疫情动态及流行特点，为制定防控措施提供科学依据。方法:收集2013-2020年"中国疾病预防控制信息系统"布病疫情数据和晋中市历年布病防控监测资料，描述性分析晋中市布病流行特征及血清学与病原学监测结果。结果:2013-2020年晋中市累计报告布病病例5 235例，年均发病率为19.60/10万，各年发病率比较差异有统计学意义（χ 2 = 561.09， P < 0.001）。报告病例数最多的地区为平遥县（903例），发病率最高的地区为榆社县（59.78/10万）。历年各月均有发病，季节发病明显，发病高峰为3-7月份，占病例总数的60.50%（3 167/5 235）。人群分布以男性、20~60岁、农民为主，分别占81.07%（4 244/5 235）、85.06%（4 453/5 235）、81.34%（4 258/5 235）。流行病学调查高危职业人群33 522人，血清学检查24 544人，血清学阳性率为4.45%（1 091/24 544）；病原学培养样本263份，检出布鲁氏菌52株，检出率为19.77%，均为羊种3型。 结论:近年来晋中市布病疫情呈散发态势，发病有明显地区差异，职业人群仍为目前防控重点。建议继续开展职业人群监测，做好健康教育和行为干预，及时掌握疫情动态，有效控制布病疫情。

目的:了解四川省人间布鲁氏菌病（简称布病）分离菌株的分型情况。方法:66株菌株分离自2014 - 2020年四川省人间布病确诊病例，分别应用BCSP31-PCR、AMOS-PCR方法对分离菌株进行属、生物型鉴定；选用多位点序列分型（MLST）-9方法对分离菌株进行分型实验，通过在线全球MLST数据库对比序列型（ST）；并通过BioNumerics 7.6软件，使用最小生成树（MST）对新发现和已知ST序列进行聚类分析。结果:2014 - 2020年四川省自人间布病确诊病例分离的66株菌株均为布鲁氏菌属，其中羊种布鲁氏菌65株，牛种布鲁氏菌1株。存在3个已知ST（ST-8、ST-39、ST-2）和1个新发现型别（ST-101）。其中，ST-8为四川省主要ST（90.91%，60/66），另有4株羊种布鲁氏菌为ST-39，1株牛种布鲁氏菌为ST-2。新发现型别ST-101于2019年分离自乐山市，属羊种布鲁氏菌克隆群，与ST-8进化关系紧密。结论:四川省布鲁氏菌主要流行株为羊种布鲁氏菌，主要基因型为ST-8，同时存在少量ST-39、ST-101、ST-2。

目的:建立实时荧光定量PCR方法检测布鲁氏菌基因组内IS711转座酶基因（orfA基因）的拷贝数，并应用于布鲁氏菌种与生物型的鉴定。方法:构建基于Taqman探针法实时荧光定量PCR技术的orfA基因拷贝数的检测体系。设计bcsp31基因和orfA基因的引物和探针，应用实时荧光定量PCR方法同时检测同一菌株相同DNA浓度下的bcsp31基因和orfA基因含量，获得2个基因的循环数（CT值），再根据bcsp31基因和orfA基因CT值的差异，换算出待检测布鲁氏菌菌株基因组内orfA基因的拷贝数。同时，将布鲁氏菌16M菌株DNA进行2倍递减稀释，验证检测体系的稳定性。结果:当16M菌株DNA浓度相差2倍时，实时荧光定量PCR方法同时检测bcsp31基因和orfA基因，测得的CT值差值均值均为1.00，95%置信区间为0.95~1.05，标准差为0.17，变异系数为0.17。应用该检测体系检测30株布鲁氏菌菌株DNA中orfA基因的拷贝数，发现羊种生物1~3型菌株分别有6、9和7个拷贝数；猪种生物2型菌株有10个拷贝数，与其他4个猪种生物型（1、3~5）菌株拷贝数不同；绵羊附睾种菌株有37个拷贝数；8个牛种生物型（1~7、9）菌株拷贝数稳定在5~6个。结论:成功建立了一种检测布鲁氏菌orfA基因拷贝数的实时荧光定量PCR方法，该方法能够鉴定部分布鲁氏菌种与生物型菌株。

目的:掌握江西省羊种布鲁氏菌分子特征，了解分离菌株流行病学间相关性。方法:采用多位点可变数目串联重复序列分析方法（MLVA）对江西省17个县（区）25株人分离羊种布鲁氏菌进行分析。结果:25株羊种布鲁氏菌聚类可分为24个独立基因型，相似度为67.00%~100.00%，辛普森指数在0.000~0.773之间，MLVA8型有3个基因型，60.00%（15/25）为42型，32.00%（8/25）为43型，8.00%（2/25）为63型。MLVA11型有7个基因型，116、125型为主要基因型，两型菌株占56.00%（14/25）。结论:25株人分离羊种布鲁氏菌基因具有高度遗传多样性，菌株基因型繁多，各菌株间无明显流行病学相关性，表明江西省羊种布鲁氏菌传染来源复杂。

目的:了解贵州省布鲁氏菌分离株的多位点序列分型（multi-locus sequence typing，MLST）基因特征。方法:以2017-2021年贵州省布鲁氏菌分离株（保存于贵州省疾病预防控制中心菌毒种库）为研究对象，应用BCSP31-PCR方法进行布鲁氏菌属特异性鉴定，AMOS-PCR方法进行布鲁氏菌种/型鉴定；应用MLST方法进行基因分型，并采用Bionumerics 8.0软件对分型结果进行聚类分析。结果:贵州省分离的32株布鲁氏菌，经BCSP31-PCR方法和AMOS-PCR方法鉴定为羊种布鲁氏菌；经MLST方法分析，可以分为2种ST型（ST8、ST39型），其中ST8型28株（87.5%）、ST39型4株（12.5%）。ST8型菌株分布在省内7个市（州），ST39型菌株仅在黔西南布依族苗族自治州发现。聚类分析结果显示，ST8、ST39型菌株与羊种布鲁氏菌参考株聚在1个群内，且ST39型与ST8型菌株仅在glk基因内存在1个核苷酸位点差异，亲缘关系较近。结论:羊种布鲁氏菌是近年来贵州省布鲁氏菌病疫情的主要病原体，ST8型是贵州省羊种布鲁氏菌的优势MLST基因型。

目的:探讨山东省烟台市1起人间布鲁氏菌病（简称布病）聚集性疫情的潜在传染源。方法:收集2022年山东省烟台市1起人间布病聚集性疫情病例信息，分离培养菌株并提取DNA，采用BCSP31-PCR进行种属鉴定，AMOS-PCR进行种型鉴定。采用多位点可变数目串联重复序列分析（MLVA）-16进行聚类分析，并与公共数据库MLVAbank和2022年山东省布鲁氏菌监测数据进行比对分析。同时，采用全基因组单核苷酸多态性（wgSNP）分型分析2022年山东省已完成全基因组测序的53株布鲁氏菌菌株，构建wgSNP系统发育树。结果:经BCSP31-PCR和AMOS-PCR鉴定，2022年山东省烟台市布病聚集性疫情相关的3株菌株均为羊种布鲁氏菌生物型。MLVA-16分型结果显示，3株分离菌株的MLVA-16分型完全一致，16个串联重复序列位点为1-5-3-13-2-2-3-2-4-41-8-4-4-3-6-5，属于东地中海分支。与MLVAbank进行比对检索，有2株哈萨克斯坦分离菌株的MLVA-16分型与本次结果一致；与2022年山东省布鲁氏菌监测数据比对分析发现，有11株分离菌株的MLVA-16分型与本次结果一致，分别分离自枣庄、临沂、泰安、烟台、潍坊市。wgSNP分型结果显示，11株布鲁氏菌菌株与本次分离菌株的距离小于7个单核苷酸多态性，分别分离自泰安、淄博、临沂、滨州、济南、济宁、烟台和威海市。结论:经2022年山东省烟台市1起人间布病聚集性疫情溯源，临沂、泰安、烟台市分离羊种布鲁氏菌菌株的亲缘关系较近，推测这些地区的羊只具有同源性。