树突状细胞(dendritic cells，DCs)是异质性固有免疫细胞，具有强大的抗原提呈能力。目前发现DCs可以调节机体对环境抗原及自身抗原的适应性免疫反应，但在一定的微环境下，DCs还可以分化为耐受性DCs(tolerogenic DCs，tolDCs)，诱导免疫耐受。文章就耐受性DCs的产生机制与哮喘治疗进行综述，为DCs应用于治疗哮喘及其他自身免疫性疾病的研究提供新思路。

目的:探讨奥美沙坦对大鼠树突细胞（dendritic cells，DCs）抗原递呈功能的影响。方法:取雌性Lewis大鼠髓源DCs，加入奥美沙坦（终浓度10 μmol/L）和等体积的DMSO，分别记为奥美沙坦修饰的DCs（olmesartan modified dendritic cells，OLM-DCs）和未经奥美沙坦修饰的DCs（control DCs，Con-DCs）。使用流式细胞仪分别测定DCs表面CD80、CD86和MHC Ⅱ平均荧光强度（mean fluorescence intensity, MFI）及DCs中IL-10和TGF-β的表达。OLM-DCs和Con-DCs分别与卵白蛋白（OVA）致敏的淋巴结CD4 + T细胞共培养，流式细胞仪检测T淋巴细胞增殖，ELISA检测细胞培养上清液中IFN-γ、IL-10水平。 结果:奥美沙坦抑制了DCs表面MHC Ⅱ分子的表达，促进了IL-10的产生。与Con-DCs组比较，OLM-DCs抑制了T淋巴细胞增殖反应和IFN-γ的产生。结论:在体外，奥美沙坦能够诱导产生耐受性DCs，后者能够抑制T淋巴细胞增殖、抑制Th1细胞因子的水平。

树突状细胞(dendritic cells，DCs)是最重要的专职抗原呈递细胞，在哮喘的发生、发展和疾病进程中具有十分重要的作用。DCs是一群异质性细胞，其中耐受性DCs(tolerogenic DCs，tolDCs)可以介导免疫耐受。因此，诱导形成肺tolDCs可能成为哮喘治疗方法之一。文章概述了DCs及tolDCs的表型和功能，探讨tolDCs与哮喘治疗的关系，以期为哮喘治疗提供新思路。

目的:探讨RMT1-10体外诱导耐受性树突状细胞(Tol-DCs)对小鼠高危角膜移植排斥反应的抑制作用及其机制。方法:选取SPF级雄性BALB/c小鼠100只和C57BL/6小鼠50只，获取C57BL/6小鼠骨髓来源的未成熟树突状细胞(imDCs)，按照诱导干预不同分为imDCs组(不干预)、成熟树突状细胞(mDCs)组(加入脂多糖)、RMT1-10组(加入RMT1-10和脂多糖)和IgG同型对照组(加入IgG同型抗体和脂多糖)，培养7 d后采用流式细胞术检测各组DCs表型CD11c、CD80、CD86、主要组织相容性复合物(MHC)-Ⅱ、T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域分子(Tim)-4和CD103表达水平；采用酶联免疫吸附法测定细胞培养液上清液中白细胞介素10(IL-10)和转化生长因子β(TGF-β)质量浓度。建立混合淋巴细胞培养体系，采用细胞计数试剂盒8法检测各组DCs刺激CD4 + T细胞增生的刺激指数(SI)。以角膜基质缝线法诱导BALB/c小鼠角膜新生血管，以4个象限新生血管均匀长入角膜中周区的小鼠作为受体。将80只受体小鼠采用随机数字表法随机分为imDCs组、mDCs组、RMT1-10组和IgG同型对照组，每组20只，各组分别于尾静脉注射相应DCs(1×10 6个/100 μl)。注射后7 d，以C57BL/6小鼠为供体行穿透角膜移植术。术后1个月，每日裂隙灯显微镜下观察受体小鼠角膜植片排斥体征，包括角膜混浊、水肿及新生血管。术后21 d，每组抽取5只受体小鼠，耳廓皮下注射20 μl(1×10 6个细胞)正常C57BL/6小鼠脾脏细胞，24 h后测量耳廓肿胀度评价迟发型超敏反应(DTH)。 结果:RMT1-10组DCs中CD80、CD86、MHC-Ⅱ和Tim-4阳性细胞占CD11c阳性细胞百分比均明显低于mDCs组，差异均有统计学意义(均 P<0.001)；RMT1-10组Tim-4阳性细胞百分比明显低于imDCs组，CD103阳性细胞百分比明显高于其他3个组，差异均有统计学意义(均 P<0.001)。RMT1-10组细胞培养上清液中IL-10和TGF-β质量浓度明显高于其他组，差异均有统计学意义(均 P<0.001)。各组DCs对CD4 + T细胞增生的SI总体比较，差异均有统计学意义( F分组＝1 833.00， P<0.001； F比例＝230.40， P<0.001)。在每一细胞比例内，imDCs组SI均明显低于mDCs组，RMT1-10组SI均明显低于imDCs组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。各组角膜植片生存曲线总体差异有统计学意义( χ2＝77.69， P<0.001)，其中RMT1-10组角膜植片存活数量明显多于imDCs组，imDCs组角膜植片存活数量明显多于mDCs组，差异均有统计学意义( χ2＝9.74、31.02，均 P<0.01)。阳性对照组、mDCs组、IgG同型对照组、imDCs组、RMT1-10组和阴性对照组小鼠耳廓肿胀度分别为(503.6±17.2)、(475.7±17.6)、(456.2±18.8)、(225.2±39.4)、(118.1±12.6)和(106.4±7.4)μm，总体比较差异有统计学意义( F＝377.10， P<0.001)，其中mDCs组小鼠耳廓肿胀度略低于阳性对照组，imDCs组小鼠耳廓肿胀度明显低于IgG同型对照组，明显高于RMT1-10组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:RMT1-10可抑制小鼠高危角膜移植排斥反应，其作用机制可能为体外诱导imDCs转化为Tol-DCs并上调TGF-β和IL-10表达，经过继转移后促进受体抗原特异性免疫耐受，进而间接延长角膜植片存活时间。

目的 探索可溶性CD83(sCD83)发挥免疫抑制活性的分子机制.方法 分离6～8周龄C57B/6小鼠骨髓祖细胞培养骨髓衍生树突细胞(DCs)和脾脏内CD4+T细胞.分别向细胞培养物中加入10μl PBS处理(Control组)或10μl 10μg/ml的可溶性CD83处理(sCD83组).流式细胞术测定DCs中的非成熟DCs(imDCs)和CD4+T细胞中的CD4+CD25+FOXP3+T细胞,即调节性T(Treg)细胞的细胞计数所占百分比.Western blot测定imDCs胞内吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)的表达水平及Treg细胞内磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、蛋白激酶B(Akt)、细胞核和细胞质核因子-κB亚基RelB和程序性细胞死亡蛋白-1(PD-1)的表达水平.ELISA测定DCs培养上清液中犬尿酸的水平以及imDCs和CD4+T细胞共培养系统中白细胞介素(IL)-10、转化生长因子-β(TGF-β)和IL-12的水平.结果 与Control组相比,sCD83组表达表面标志物CD40、CD83、CD86、Ⅱ类主要组织相容性复合物(MHC Ⅱ)的DCs细胞计数所占百分比降低(P<0.05);DCs培养上清液中犬尿酸的水平上升(P<0.05).与Control组相比,sCD83组Treg细胞计数所占百分比升高(P<0.05);胞内PTEN和细胞质RelB的表达增强(P<0.05),而p-Akt、细胞核RelB和PD-1的表达降低(P<0.05);Akt的表达水平差异无统计学意义.在imDCs与CD4+T细胞共培养物上清液中,与Control组相比,sCD83组IL-10和TGF-β 的水平升高(P<0.05),IL-12的水平降低(P<0.05).结论 sCD83能够抑制CD4+T细胞核内RelB的水平调节相关细胞因子的分泌,影响DCs和Treg细胞的细胞间通讯,促进耐受性imDCs和Treg细胞的增殖.

变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)是临床上的多发病和常见病,其发病率逐年升高.近年来,随着分子生物学的不断发展,越来越多的研究认为AR的发病机制可能和肠道菌群有关.因此,肠道菌群和AR之间的关系逐渐成为过敏性疾病的研究热点,而益生菌在AR中所发挥的治疗作用也备受关注.研究表明 Thl7/Treg 细胞、树突状细胞(dendritic cells,DCs)及 Toll 样受体(Toll-like receptors,TLRs)参与 AR 的发病.本文综述益生菌对Th17/Treg细胞的免疫调节作用、促进耐受性的DCs活性以及TLRs对DCs和Th17/Treg细胞的刺激作用的相关研究,探讨AR的调节机制,并阐明益生菌可能是治疗AR的潜在新方法,为AR的肠道微生态研究提供一定的理论依据.

健康肠道由共生菌群、上皮层和肠道相关淋巴组织(GALT)构成.GALT具有识别并处理相关的病原体的能力,而对共生菌和饮食抗原具有低反应性.现有证据表明,树突状细胞(den-dritic cells,DC)在处理这种异常的情况并且维持肠道复杂的稳态时起到了决定性的作用.在肠道上皮细胞(IECs)和共生菌群的影响下,肠道DC具有独特的功能,它在稳定状态下可以对Th2细胞、调节性T细胞和IgA进行精密的调节.感染时,它们参与效应淋巴细胞的诱导,但它们在炎症性肠病(IBD)时也会引发致病反应.这关系到机体对共生菌免疫耐受性的维持,以及抵御病原体时保护性免疫应答的产生.这篇综述概括了肠道共生菌群、上皮层和GALT在黏膜稳态、炎症状态和现阶段我们理解的DC在参与肠道稳态调节中的作用.

目的 研究树突状细胞(DCs)在睾丸原发性淋巴瘤(PLT)患者睾丸组织中的免疫表型及其分子机制.方法 采用免疫组织化学染色法(IHC)检测10例正常人及7例睾丸原发性淋巴瘤患者睾丸组织中CD11c、DC-SIGN、CD1a、BDCA-2、CD83、HLA-DR、IDO表达水平,并进行体视学分析与统计.结果 正常睾丸及睾丸原发性淋巴瘤患者睾丸组织中均有CD11c、DC-SIGN、CD1a、BDCA-2、HLA-DR、IDO阳性细胞表达;其中CD1a、BDCA-2、HLA-DR、IDO阳性细胞表达分布于睾丸间质区域;CD11c及DC-SIGN在睾丸间质区域及生精细胞中均可见阳性表达;睾丸原发性淋巴瘤患者睾丸组织中CD11c、DC-SIGN、CD1a、HLA-DR、IDO表达水平较正常睾丸显著增高,且差异有统计学意义(P＜0.05);正常睾丸及睾丸原发性淋巴瘤患者睾丸组织中均未见CD83阳性细胞表达.结论 睾丸原发性淋巴瘤患者睾丸组织中CD11c+髓样DCs (mDCs),DC-SIGN+间质型DCs,CD1a+ DCs、HLA-DR、IDO表达水平显著增高,提示睾丸原发性淋巴瘤患者睾丸组织中表现为耐受性DCs,并在睾丸免疫环境失稳态及肿瘤细胞免疫豁免过程中起重要作用.

目的 探讨雷帕霉素(RAPA)诱导过继性输注的耐受性树突状细胞(DCs)对急性移植物抗宿主病(aGVHD)的治疗效果.方法 分离15只BALB/C雄性小鼠(MHC为H-2Kd)的骨髓细胞及脾细胞,输注入经8.5Gy辐射处理(TBI照射)的30只雄性C57BL/6J小鼠(MHC为H-2Kb)中建立aGVHD模型(BALB/C→C57BL/6J);为验证aGVHD造模是否成功,将C57BL/6J小鼠分为MHC不合移植组、MHC相合移植组及单纯TBI照射组(10只/组),3组小鼠经8.5 Gy TBI照射后分别输入BALB/C来源骨髓细胞及脾细胞、C57BL/6J来源骨髓细胞及脾细胞及同等体积PBS对照,采用流式细胞术检测供鼠植入比例并观察受鼠存活情况.体外培养受鼠骨髓来源DCs,加入RAPA以诱导耐受性DCs(RAPA-tDCs),加入PBS作为对照DCs(PBS-DCs).将aGVHD模型鼠随机分为3组(10只/组),分别是RAPA-tDCs实验组(静脉输注RAPA-tDCs 4 ×106/只)、PBS-DCs对照组(静脉输注PBS-DCs 4 ×106/只)及PBS对照组(静脉输注PBS);采用活体荧光成像观察DCs在aGVHD小鼠体内的迁移、分布情况;同时监测3组小鼠的平均体重波动并统计生存率,评价RAPA-tDCs对小鼠aGVHD的抑制效果.结果 流式细胞术检测:与PBS-DCs组小鼠比较,RAPA-tDCs组小鼠DCs表面的CD40、CD80、CD86和MHCII表达丰度明显受到抑制(P＜0.05);2组小鼠DCs表面趋化因子受体CCR1平均荧光强度(MFI)为14.5±1.4vs.10.0±2.1,表面趋化因子受体CCR5为12.7±2.3 vs 7.2±1.2(P＜0.05),表面趋化因子受体CCR7为7.8±1.3vs.6.2±2.5(P＞0.05).活体成像分析:RAPA处理不影响DCs在体迁移能力,RAPA-tDCs仍可归巢至淋巴结、脾脏等淋巴组织或器官.PBS-DCs组和RAPA-tDCs组aGVHD小鼠在移植后19d体重(g)下降-2.4±1.5 vs-1.9±1.2(P＜0.05),生存期(d)延长10.1±5.5 vs 16.6±6.7(P＜0.05),但各组小鼠最终均全部死亡,整体生存率无差异.结论 RAPA可通过抑制小鼠DCs表面共刺激分子的表达诱导DCs耐受,过继性RAPA-tDCs仍具备一定的T细胞富集区归巢能力;过继性输注RAPA-tDCs可一定程度缓解小鼠aGVHD,延长小鼠生存期,但对其整体存活率无明显改善.

目的 探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)中miR-155表达水平改变后,通过诱导树突状细胞(DC)实现对免疫调节能力的影响.方法 实验分为control组、miR-155 agomir NC组、miR-155 agomir组、miR-155 antagomir NC组和miR-155 antagomir组,通过脂质体转染特异性调控BMSC中miR-155表达量后诱导DC 48 h,检测该诱导过程对DC的成熟度和迁移能力的影响;经诱导的DC与T细胞共培养72 h后检测T细胞增殖能力.多组间分析采用One-way ANOVA进行统计学分析,两组间采用t检验进行统计学分析.结果 流式柱形直观图可见miR-155 angomir组T细胞增殖能力低于其他组.提高miR-155表达水平后,MSCs诱导的DC细胞成熟的表面标志CD40表达量由100％下降至85％(t=33.71,P＜0.05);CD86表达水平由100％下降至75％(t=57.00,P＜0.05).miR-155 agomir组的BMSCs诱导的DC的迁移能力较其对照组减弱(t=7.35,P＜0.05).提高BMSCs中miR-155表达水平后,其诱导的DC的NF-κβ信号通路蛋白表达下降(t=23.32,P＜0.05);AKT信号通路蛋白表达量下降(t=22.21,P＜ 0.05).结论 BMSCs高表达miR-155后,可以通过抑制NF-κβ和AKT途径诱导耐受性DC的产生,通过诱导DC减少T细胞的增殖从而对免疫调节进行影响.