目的:探讨硫氯酚与庆大霉素联用对粪肠球菌的抗菌活性。方法:11株粪肠球菌临床菌株于2018年1月至2019年12月收集自中南大学湘雅三医院住院患者，通过微量肉汤稀释法检测硫氯酚及庆大霉素对粪肠球菌的抗菌活性；通过微量棋盘稀释法检测硫氯酚与庆大霉素的联用效果；最后，选取亚抑菌浓度的硫氯酚及与庆大霉素分别单独及联合处理48 h后观察其持续抗菌效果。多组间计量资料比较采用单因素方差分析，多组中两两比较采用Tukey或Dunnett检验。结果:硫氯酚对粪肠球菌的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度分别为2~4 mg/L和4~8 mg/L。硫氯酚与庆大霉素联用具有协同抑菌作用，其协同抑菌指数为0.313~0.375。硫氯酚与庆大霉素联用48 h能持续抑制粪肠球菌的增殖（ P<0.01）。硫氯酚能协同庆大霉素抑制粪肠球菌生物膜的形成及分散24 h已形成的生物膜（ P<0.05）。 结论:硫氯酚与庆大霉素联用对粪肠球菌具有协同抑制作用，且抑菌效果可持续48 h以上。

目的:探讨亚甲基蓝介导的光动力疗法（PDT）联合小檗碱对牙龈卟啉单胞菌（P.g）的体外抑制作用。方法:培养P.g至对数期中后期，将不同质量浓度亚甲基蓝加入P.g菌悬液中，作用5 min，激光（波长660 nm，功率140 mW/cm 2）照射2 min，寻找亚甲基蓝结合激光体外抑制P.g的最佳浓度；观察亚甲基蓝介导的PDT体外抑制P.g的效果以及小檗碱对P.g生长曲线的影响；探讨亚甲基蓝介导的PDT与小檗碱先后联合应用对P.g的抑制作用；扫描电子显微镜观察亚甲基蓝介导的PDT及小檗碱对P.g形态的影响；紫外分光光度仪测量各成分吸收峰。 结果:在660 nm激光激发下，亚甲基蓝质量浓度为24.414 1 μg/ml时，抑菌效果最好。与对照组比较，亚甲基蓝组和PDT组差异均有统计学意义（均 P<0.001）。0.05 mg/ml小檗碱对P.g浮游细菌具有抑制作用。与对照组比较，0.05 mg/ml小檗碱组菌落数降低，其差异有统计学意义（ P<0.01）；0.05 mg/ml小檗碱+光照组与对照组比较差异无统计学意义（ P>0.05）。当PDT与小檗碱联用时对P.g有协同抑制作用，且先PDT后小檗碱组较先小檗碱后PDT组菌落数降低，其差异均有统计学意义（均 P<0.01）。P.g经亚甲基蓝介导的PDT处理后，细菌细胞壁皱缩成团，经小檗碱处理后，细菌表面变得光滑且菌体长度较对照组增长。 结论:亚甲基蓝介导的PDT对P.g有抑制作用，当与小檗碱联用时，对P.g有协同抑制作用，且联合应用中先PDT后小檗碱作用时抑菌效果更好。

目的:探讨Halicin对金黄色葡萄球菌的抗菌作用。方法:采用微量肉汤稀释法检测Halicin对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度；通过摇菌培养和稀释菌落计数法检测Halicin对金黄色葡萄球菌的时间-杀菌曲线；通过微量棋盘稀释法检测Halicin与常用抗菌药物的联合抗菌作用；通过结晶紫染色法测定Halicin对金黄色葡萄球菌生物膜的抑制和清除作用；通过红细胞溶血试验初步检测Halicin对红细胞的毒性；最后，通过小鼠皮肤脓肿模型，取脓肿周围皮肤组织研磨稀释菌落计数。采用 t检验比较Halicin的体内抗菌效果。 结果:Halicin对金黄色葡萄球菌具有抑菌作用，其最低抑菌浓度为2~4 mg/L。Halicin 16 mg/L处理8 h后，金黄色葡萄球菌平均菌落数下降5.5×10 6 CFU/ml（ t=73， P<0.05），且呈现浓度依赖性。Halicin和氨苄西林联用时，表现为协同抗菌作用，其分级抑菌浓度指数为0.5。Halicin的浓度为4倍最低抑菌浓度时，可以有效抑制金黄色葡萄球菌生物膜形成，使其生物膜总量（ A570）从（2.89±0.09）减少到（1.35±0.17）（ t=11.12， P<0.05），但对已形成的生物膜无显著清除效果。Halicin对红细胞几乎无溶血活性，即使当Halicin的浓度为128 mg/L，其溶血率仍低于10%。体内实验表明，20 mg/kg Halicin可使细菌数量下降3.0×10 7 CFU/ml。 结论:Halicin对金黄色葡萄球具有较强的抑菌作用且无明显的溶血毒性。

目的:研究金银花活性成分异绿原酸及联合伏立康唑＋头孢他啶对早期铜绿假单胞菌-烟曲霉菌混合生物被膜的体外协同抑菌作用。方法:体外构建早期24 h静止铜绿假单胞菌-烟曲霉混合生物被膜模型并建立不同浓度(250、500、1 000 μg/ml)的异绿原酸组及联合抗生素组(1 μg/ml伏立康唑＋16 μg/ml头孢他啶)分别作用24 h，扫描电镜(SEM)观察生物被膜形态学改变；结晶紫染色法定量生物被膜；XTT减低法测混合生物被膜内烟曲霉及铜绿假单胞菌的总代谢活性。结果:电镜观察证实异绿原酸可破坏早期混合生物被膜结构使胞外基质减少；且异绿原酸联合抗生素组较单纯抗生素联合组对混合菌体的抑制作用更加明显，使载体上生物被膜的量明显降低。结晶紫染色法提示：250、500、1 000 μg/ml异绿原酸组总被膜定量与250、500、1 000 μg/ml异绿原酸联合伏立康唑＋头孢他啶组、伏立康唑＋头孢他啶组、空白对照组及组间两两比较，差异均有统计学意义( P<0.05)。XTT比色法提示：对于早期混合生物被膜，异绿原酸联合抗生素组与空白组、异绿原酸组相比，联合用药组的代谢活性明显减低(抑制率达50%)。 结论:异绿原酸在体外不能杀死铜绿假单胞菌-烟曲霉混合生物被膜内菌体，但对早期铜绿假单胞菌-烟曲霉混合生物被膜具有破坏作用，使得异绿原酸联合伏立康唑＋头孢他啶对早期混合生物被膜的破坏作用明显强于伏立康唑联合头孢他啶组，且均呈浓度依赖性。

目的:测定临床分离的镰刀菌对抗真菌药物的敏感性，并研究免疫抑制剂他克莫司联合抗真菌药物使用的抗菌效果。方法:以美国临床实验室标准化委员会(CLSI)M27-Ed4及M38-A3方法测定氟康唑、伏立康唑、那他霉素和两性霉素B对24株临床分离致病镰刀菌的最低抑菌浓度(MIC)，并采用棋盘法测定他克莫司分别联合4种抗真菌药物对镰刀菌的抗真菌作用。结果:氟康唑、伏立康唑、那他霉素和两性霉素B对镰刀菌(24株)MIC范围分别是64～256 μg/ml、1～8 μg/ml、2～8 μg/ml和1～8 μg/ml。氟康唑与他莫克司对12.5%菌株(3/24)有协同效应，对所有菌株无拮抗效应；伏立康唑与他莫克司对4.2%菌株(1/24)有协同效应，对所有菌株无拮抗效应；那他霉素与他莫克司对16.7%菌株(4/24)有协同效应，对所有菌株无拮抗效应；两性霉素B与他莫克司对29.2%菌株(7/24)有协同效应，对所有菌株无拮抗效应。结论:镰刀菌在体外对那他霉素敏感，对两性霉素B及伏立康唑部分敏感，与他克莫司联合应用时，均对少部分镰刀菌有联合效应，无拮抗效应。

目的 通过微生物适用性试验,建立罗红霉素胶囊的微生物限度检查方法.方法 按照2020年版《中国药典(四部)》通则1100生物检查法要求,采用平皿法、薄膜过滤法并使用中和剂稀释等方法开展回收试验,进行微生物计数检查、控制菌检查方法研究.结果 采用中和剂稀释联合分膜的薄膜过滤法,可有效去除罗红霉的抑菌作用,回收率达到要求.结论 所建立的检查方法符合药典要求,可作为罗红霉素胶囊的微生物限度检查方法.

目的 观察小檗碱及其联合 3 种抗生素(庆大霉素、左氧氟沙星、阿米卡星)对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的抑菌效果.方法 采用微量肉汤稀释法测定小檗碱、庆大霉素、左氧氟沙星、阿米卡星对 26 株临床分离的MRSA的MIC值;棋盘法测定小檗碱联合庆大霉素、左氧氟沙星、阿米卡星对MRSA的MIC值,观察小檗碱对MRSA的抑菌效果;时间杀伤曲线研究小檗碱联合抗生素对MRSA的抑菌动力学.结果 26 株MRSA对苯唑西林耐药,5 株对庆大霉素耐药,17 株对左氧氟沙星耐药,6 株对阿米卡星耐药,22 株对克林霉素耐药,19 株对环丙沙星耐药,21 株对红霉素耐药,18 株对莫西沙星耐药,1 株对复方新诺明耐药,17 株对四环素耐药,26 株均对利福平、利奈唑胺、万古霉素均敏感.小檗碱对USA300 的MIC值为 128 μg/mL,对 26 株MRSA的MIC范围为 32～256 μg/mL.小檗碱与庆大霉素联合后,4 株(80%)呈相加作用;小檗碱与左氧氟沙星联合后,3 株(17.64%)呈相加作用;小檗碱与阿米卡星联合后,4 株(66.67%)呈协同作用,1 株(16.67%)呈相加作用.64 μg/mL小檗碱联合16 μg/mL庆大霉素抑菌效果最好;64 μg/mL 小檗碱联合 64、32 μg/mL 左氧氟沙星抑菌效果最好;32 μg/mL 小檗碱联合4 μg/mL阿米卡星对MRSA02 有较好的抑菌效果.结论 小檗碱对MRSA有较理想的抑菌效果;小檗碱联合庆大霉素、阿米卡星对MRSA均有明显的抑菌作用.

目的 探讨灵菌红素对创面分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的抑菌效果和作用机制.方法 选取2021年至2022年嘉兴市第一医院分离培养的64株创面组织感染MRSA菌株,采用微量肉汤稀释法测定单用灵菌红素及与左氧氟沙星联合作用时的最低抑菌浓度(MIC),计算部分抑菌指数评价联合抑菌效果;并通过透射电镜观察灵菌红素对MRSA菌株的抑菌作用.结果 灵菌红素对MRSA菌株的50％MIC为0.5 mg/L,90％MIC为1.0 mg/L;与左氧氟沙星联用时1株(1.54％)结果为协同作用,30株(46.15％)结果为相加作用;透射电镜观察到灵菌红素对MRSA菌株细胞膜结构完整性破坏作用明显.结论 灵菌红素通过破坏细菌胞膜达到对MRSA菌株的抑菌作用,与左氧氟沙星联合使用时具有一定的协同或相加作用.

目的 研究血链球菌cpnp培养上清液抑制铜绿假单胞菌生长和生物膜形成、破坏成熟生物膜的作用,以及其联合抗生素的抑菌作用,为利用呼吸道共生菌制剂干预铜绿假单胞菌呼吸道定植,减少呼吸道感染提供依据.方法 采用牛津杯法测定血链球菌cpnp对铜绿假单胞菌生长的抑制作用.使用96孔板法测定血链球菌cpnp培养上清液联合头孢他啶对铜绿假单胞菌生长的抑制作用.体外建立铜绿假单胞菌生物膜模型,利用结晶紫半定量法、刚果红染色法、RT-qPCR法测定血链球菌cpnp培养上清液对生物膜形成的抑制作用;利用结晶紫半定量法、MTT法测定血链球菌cpnp培养上清液对成熟生物膜的破坏作用;采用光镜和电镜观察生物膜的形态.结果 血链球菌cpnp培养上清液对铜绿假单胞菌生长有抑制作用,与头孢他啶联用时表现出协同作用(P＜0.001).血链球菌cpnp培养上清液可减少铜绿假单胞菌生物膜形成量(P＜0.001)、胞外多糖产量(P＜0.001)及降低胞外多糖基因表达水平(P＜0.050).血链球菌cpnp培养上清液可减少成熟生物膜总量(P＜0.001)和降低生物膜代谢活性(P＜0.001).结论 血链球菌cpnp上清液和其联用抗生素能拮抗铜绿假单胞菌生长,并且上清液对其生物膜有良好的抑制和破坏作用.

细菌通过群体感应(QS)分泌信号分子和细胞外聚合物(EPS),使细菌聚集和黏附到生物和非生物表面,在一定条件下形成抗性强、危害性大的生物被膜.目前,生物被膜在医疗、食品和农业等领域中的危害日益严重.尤其是一些致病菌不仅对人类健康构成威胁,甚至会造成较大的社会经济损失.一些传统消毒、杀菌方法难以将其彻底清除,且存在二次污染风险.生物被膜在不同介质表面的强黏附性是其难以被清除的主要原因之一.因此,采用高活性的溶液进行浸泡、清洗是去除生物被膜的有效策略.低温等离子体活化水中的活性氧(ROS)和活性氮(RNS)能破坏细菌的细胞壁、肽聚糖结构,有效抑制微生物黏附和聚集.低温等离子体活化水作为一种高效消毒抑菌溶液,被广泛应用于生物医学、食品去污和种子萌发领域.但低温等离子体活化水中活性物质易消散,难以长期贮藏,导致其抑菌性能减弱.近年来,通过向低温等离子体活化水中添加不同介质或联合其他技术制备的低温等离子体活化溶液,有效延长了活性物质的衰退,使其逐渐成为消毒、抑菌研究的新方向.本文综述了低温等离子体活化水和低温等离子体活化溶液的杀菌作用机理及其对生物被膜的清除效果,重点介绍了生物被膜的形成过程.旨在为环境、医疗及食品行业的生物被膜清除和控制提供理论参考.