目的:探讨肝癌术后复发患者补救性肝移植（SLT）、再次肝切除（RH）和局部消融（LA）治疗的临床疗效，并分析影响肝癌复发患者预后的危险因素。方法:回顾性收集2005年1月至2018年6月在解放军联勤保障部队第九○○医院145例肝癌复发患者的临床资料，其中SLT组25例，RH组44例，LA组76例。随访并统计3组患者术后1、2和3年总体生存率、无复发生存率和并发症。采用单因素及多因素COX分析影响肝癌复发患者预后的危险因素。结果:当肝癌复发符合米兰标准时，SLT组、RH组和LA组术后1、2、3年总体生存率分别为100.0%、84.0%、72.0%，95.5%、77.3%、65.9%和90.8%、76.3%、63.2%。SLT和RH比较（ P = 0.303）、RH和LA比较（ P = 0.152），总体生存率差异均无统计学意义。SLT和RH比较、RH和LA比较，无复发生存率差异均有统计学意义（均 P = 0.046）。SLT和RH比较、RH和LA比较，并发症发生率差异均无统计学意义（均 P>0.017）。年龄>65岁是影响肝癌复发患者总体生存率的独立危险因素。年龄>65岁及复发时间<24个月是影响肝癌复发患者无复发生存率的独立危险因素。 结论:当肝癌复发符合米兰标准时，SLT是最佳的治疗方案，在肝源紧缺的情况下，RH和LA是复发性肝癌合适的治疗方案。

患者1 女性，43岁，因“右上腹隐痛半个月”于 2021年10月19日收入赣州市肿瘤医院。患者无其他不适症状，既往有乙肝病史，体检未见明显阳性体征。HBV-DNA 6.8×10 3 U/ml，甲胎蛋白17.9 μg/L（正常值范围：0~7 μg/L），CA19-9 37.41 U/mL（正常值范围：0~27 U/ml），其余实验室检查结果正常。CT检查结果提示右肝可见最大径4.8 cm的占位；肝穿刺活检报告为低分化腺癌，胆管细胞癌可能性大。口服恩替卡韦抗病毒治疗。2021年11月10日在全身麻醉下行肝总动脉和肝十二指肠韧带骨骼化清扫、右肝部分切除术。术中见肝十二指肠韧带内有数枚肿大淋巴结，质地中等，肝脏中度硬化，左肝体积较小，右肝可及最大径约5 cm的肿块，边界尚清；先行骨骼化清扫，其中在沿胆总管-肝总管左缘向上清扫至左肝蒂下方区域时出现胆漏，仔细分离后发现局部有一根直径0.3 cm的胆管，其前壁已被剪开，有胆汁溢出，用小圆针的针鼻一端经胆管裂口伸入探查，向右可进入肝总管，将肝总管前壁顶起，向左通向尾状叶（图1A、1B），用6-0 不可吸收线间断缝合胆管前壁裂口（图1C），再完成右肝部分切除术；用带蒂的肝圆韧带浆膜面覆盖胆管修补处，用5-0不可吸收线将肝圆韧带与周围组织缝合固定数针防止移位，放置2根腹腔引流管，将大网膜上提覆盖肝门区域，关腹结束手术。术后行全身支持、护肝、抗病毒等治疗，恢复顺利，无胆瘘等异常情况，病理学检查报告为右肝肉瘤样肝细胞癌，13枚淋巴结均未见转移。术后55 d复查CT，结果显示肝内胆管包括尾状叶胆管无扩张，肝十二指肠韧带、腹膜后可见较多肿大淋巴结；术后87 d出现皮肤、巩膜黄染，复查CT结果显示肝内无复发、转移，尾状叶胆管未见扩张，但两侧肝内胆管及肝总管明显扩张，肝十二指肠韧带、腹膜后淋巴结较前增大，患者放弃胆管穿刺引流等治疗。

肝切除、局部热消融(LTAT)是治疗肝细胞癌最常用的治愈性手段。早期肝细胞癌(肿瘤直径≤3 cm)既是肝切除的最佳适应证，更是LTAT的最优势领域，对于其治疗首选肝切除还是LTAT，一直是一个争论性话题。近二十多年来，随着微创理念的建立、设备的改进、技术的提升和经验的积累，肝切除治疗早期肝细胞癌的微创性、安全性和疗效进一步提升。相比而言，LTAT治疗早期肝细胞癌在质量管理、理念和技术等方面缺乏创新性进步和体系性推进，总体疗效缺乏实质性提升，学术地位受到了挑战。本文从早期肝细胞癌肝切除和LTAT的特点、影响治疗决策的原因、未来治疗模式的展望等方面，简述肝切除和LTAT在早期肝细胞癌综合治疗的学术地位和相互关系，指出在我国现阶段，肝切除和LTAT对于早期肝细胞癌的治疗存在着很大的互补性，两者的关系不是互相竞争，而是互相补充、相辅相成。

目的 探讨肝细胞局部补体对疟原虫红外期发育的影响.方法 分别提取Hepa1-6和HepG2-CD81细胞RNA,逆转PCR扩增C3、C3aR1、C5、C5aR1基因.Hepa1-6细胞和HepG2-CD81细胞悬液分别加入蛋白酶和磷酸酶裂解,2,2-联喹啉-4,4-二甲酸二钠(BCA)法测定蛋白浓度,用蛋白质免疫印迹(Western blotting)测定肝细胞内补体和受体表达情况.将表达红色荧光蛋白(RFP)的约氏疟原虫BY265-RFP株、伯氏疟原虫ANKA株的昆明小鼠供斯氏按蚊吸血,17～19 d后解剖分离斯氏按蚊唾液腺,收集子孢子,在24孔板中按50 000个子孢子/孔加入HepG2-CD81细胞(105个/孔)孵育6、12、24 h;另设置共孵育3 h后加入C5aR拮抗剂(40nnmol/L,每孔500 μ1)的组别.经4％多聚甲醛固定、封闭,非透膜组加入一抗C3a兔抗人IgG抗体(1∶500)或rC5a兔抗人IgG抗体(1∶500)4 ℃孵育过夜,加入绿色Dylight 488荧光标记的山羊抗兔IgG二抗(1∶400)孵育1 h,加入DAPI染色液孵育5 min;透膜组加入一抗UIS4山羊多克隆抗体(1∶500)4 ℃孵育过夜,加入绿色IFKine?荧光标记的驴抗兔IgG二抗(1∶400)孵育1h,加入CD88兔多克隆抗体(1∶400)4 ℃孵育过夜,加入红色Dylight 649荧光标记的山羊抗兔IgG二抗(1∶400)孵育1h,加入DAPI染色液孵育5 min,激光共聚焦显微镜观察补体在纳虫空泡周围的富集情况.取眼镜蛇毒因子(CVF)腹腔注射至C57BU6小鼠,为CVF组;并设置C3-/组(C3全基因敲除C3-/-小鼠)和对照组(C57BU6小鼠).取10 000个约氏疟原虫子孢子感染各组小鼠,取肝脏提取总RNA后逆转录合成cDNA,荧光定量PCR测定疟原虫18S rRNA含量,肝脏虫荷用18S rRNA的相对含量表示.以尾静脉注射方式,用200个约氏疟原虫子孢子感染对照组(C57BU6小鼠)10只、C3aR-/-小鼠10只;1 000个约氏疟原虫子孢子感染对照组(C57BU6小鼠)5只、C5aR全基因敲除C5aR-/-小鼠6只和肝脏C5aR条件性敲除Alb-cre+/+C5aRflox/flox杂交小鼠5只;1 000个伯氏疟原虫子孢子感染对照组(C57BU6小鼠)6只和C5aR-/-小鼠6只,感染后3d开始取尾静脉血,制成薄血膜涂片,吉氏染色后观察,至所有小鼠均出现红内期疟原虫为止.采用Graphpad prism 9.0软件进行统计学分析.正态分布的数据采用t检验比较连续变量,两两差异比较采用单因素方差分析(ANOVA)进行多重比较;非正态分布数据比较采用Mann-Whitney U检验.结果 PCR结果可见,Hepa1-6细胞株内扩增出C3(358 bp)、C5(267 bp)及其受体C3aR(222 bp)、C5aR(388 bp)基因;HepG2-CD81 细胞株内扩增出 C3(202 bp)、C5(220 bp)、C3aR(299 bp)和 C5aR(374 bp)基因.Western blotting 检测结果发现,两种细胞均有 C3、C5、C3aR和C5aR蛋白表达.激光共聚焦显微镜成像可见,细胞核经DAPI染色呈蓝色荧光,约氏疟原虫红外期呈红色自发荧光,非透膜组HepG2-CD81细胞内高表达的C3a和C5a呈绿色荧光,与纳虫空泡分布区域重叠;透膜组C5aR(粉色)与纳虫空泡膜(绿色)重叠;加入C5aR拮抗剂组别的纳虫空泡膜上仍有C5aR表达.约氏疟原虫子孢子感染后,对照组、CVF组、C3-/-组的肝脏虫荷(18S rRNA相对含量)分别为0.954±0.523、0.958±0.231、0.638±0.437,3组间差异均无统计学意义(P＞0.05).约氏疟原虫子孢子感染后,对照组和C3aR-/-小鼠分别在(5.30±0.78)d和(5.30±0.78)d后出现红内期;伯氏疟原虫子孢子感染后,对照组和C5aR-/-小鼠分别在(3.67±0.47)d和(3.83±0.69)d后出现红内期;2组基因敲除小鼠红内期出现时间与对照组相比,差异均无统计学意义(P＞0.05).约氏疟原虫子孢子感染后,对照组、Alb-cre+/+C5aRflox/flox小鼠和C5aR-/-小鼠红内期的出现时间分别为(4.00±0.00)、(4.00±0.00)、(4.17±0.37)d,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 肝细胞局部补体活化对疟原虫红外期发育无显著影响.

目的 分析肝细胞癌(HCC)复发进程中DNA修复调节的作用及机制.方法 串联质量标签(TMT)标记的定量蛋白质组学方法分析HCC 2年内复发和5年预后良好的肝癌组织样本,分析富集在DNA复制、错配修复、碱基切除修复、核苷酸切除修复4条通路的蛋白表达差异,分析在HCC复发进程中起主要作用的调控通路及靶点,预测可能的调控机制.计量资料2组间比较采用成组t检验;多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验.结果 真核生物复制复合体通路MCM2(P=0.018)、MCM3(P=0.047)、MCM4(P=0.014)、MCM5(P=0.008)、MCM6(P=0.006)、MCM7(P=0.007)、PCNA(P=0.019)、RFC4(P=0.002)、RFC5(P<0.001)、LIG1(P=0.042)蛋白表达均显著降低;核苷酸切除修复通路中PCNA(P=0.019)、RFC4(P=0.002)、RFC5(P<0.001)、LIG1(P=0.042)共4个蛋白表达水平均显著减少;碱基切除修复通路PCNA(P=0.019)和LIG1(P=0.042)在HCC复发组中均显著降低;错配修复富集通路中MSH2(P=0.026)、MSH6(P=0.006)、RFC4(P=0.002)、RFC5(P<0.001)、PCNA(P=0.019)、LIG1(P=0.042)共6个蛋白在肝癌复发组织中均显著减少.差异蛋白涉及MCM复合体、DNA聚合酶复合体ε、连接酶LIG1、长补丁碱基剪切修复复合体(long patch BER)、DNA错配修复蛋白复合体的重要组分.对DNA修复调节的重要差异蛋白进行临床样本验证分析,结果表明复发组中除MCM6表现出下降趋势外,MCM5(P=0.008)、MCM7(P=0.007)、RCF4(P=0.002)、RCF5(P<0.001)和MSH6(P=0.006)蛋白相对表达量均显著降低.结论 HCC复发过程中,DNA修复进程中多个复合体蛋白组分存在显著减少或缺失.

目的 观察早期补充外源性肉碱对严重烫伤大鼠肝脏线粒体损伤的影响并探讨其病理机制.方法 取72只成年雌性SD大鼠,按照随机数字表法分为假伤组、烫伤组、烫伤+肉碱组,每组24只.假伤组大鼠背部浸入37℃水浴锅中12s模拟致伤,伤后不补液.烫伤组和烫伤+肉碱组大鼠背部浸入98℃水浴锅中12s造成30％体表总面积(TBSA)Ⅲ度烫伤,伤后立即按照Parkland补液公式经尾静脉注射乳酸钠林格液4 mL·kg-1·％TBSA-1.烫伤+肉碱组大鼠同时于伤后1h开始,经尾静脉注射左旋肉碱溶液300 mg· kg-1·d-1.伤后12、24、48、72 h,各组分别取6只大鼠收集腹主动脉血及肝组织,采用ELISA法检测血清中肉碱、β羟丁酸、鸟氨酸氨基甲酰转移酶(OCT)含量,全自动生化检测分析仪测定血清乳酸脱氢酶(LDH)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)的含量,行大鼠肝脏组织形态学观察.对数据行析因方差分析、SNK检验或Tamhane检验、Bonferroni校正.结果 (1)烫伤组大鼠伤后各时间点血清肉碱含量明显低于假伤组(P＜0.05),烫伤+肉碱组大鼠伤后12、24、48 h血清肉碱含量明显低于假伤组(P＜0.05),伤后72 h烫伤+肉碱组[(28.2±3.0) μg/mL]大鼠血清肉碱含量与假伤组[(29.4±4.0) μg/mL]相近(P＞0.05).烫伤+肉碱组大鼠伤后各时间点血清肉碱含量明显高于烫伤组(P＜0.05).(2)烫伤组与烫伤+肉碱组大鼠伤后各时间点血清β羟丁酸含量明显低于假伤组(P＜0.05),2组大鼠血清β羟丁酸含量均呈现上升趋势,于伤后72 h达峰值,分别为(1.77 +0.30)、(2.93±0.44) mmoL/L.烫伤+肉碱组大鼠伤后各时间点血清β羟丁酸含量明显高于烫伤组(P＜0.05).(3)烫伤组与烫伤+肉碱组大鼠伤后各时间点血清OCT含量明显高于假伤组(P＜0.05),2组大鼠血清OCT含量均呈现降低趋势,于伤后12h达峰值,分别为(186.28±6.77)、(163.38±9.34) ng/mL.烫伤+肉碱组大鼠伤后各时间点血清OCT含量明显低于烫伤组(P＜0.05).(4)烫伤组大鼠伤后各时间点血清LDH含量明显高于假伤组(P＜0.05).烫伤+肉碱组大鼠伤后12、24 h血清LDH含量明显高于假伤组(P＜0.05),于伤后12 h达峰值[(2 226±274) U/L];伤后48、72 h血清LDH含量与假伤组相近(P＞0.05).烫伤+肉碱组大鼠伤后各时间点血清LDH含量明显低于烫伤组(P＜0.05).(5)烫伤组与烫伤+肉碱组大鼠伤后各时间点血清ALT、AST含量明显高于假伤组(P＜0.05).烫伤+肉碱组大鼠伤后48、72 h血清ALT含量低于烫伤组(P＜0.05),伤后48 h血清AST含量低于烫伤组(P＜0.05),其余时间点与烫伤组相近(P＞0.05).烫伤+肉碱组大鼠血清ALT、AST含量均呈现降低趋势,于伤后12h达到峰值,分别为(260±25)、(1 511±145)U/L.(6)伤后各时间点假伤组大鼠肝组织基本正常,烫伤+肉碱组大鼠肝组织损伤程度均较烫伤组大鼠轻.其中,伤后72 h烫伤组大鼠肝组织可见明显胞质疏松、肝组织结构缺失伴弥漫性脂肪变性及大片凝固性坏死;烫伤+肉碱组大鼠肝组织仅可见局部散在的脂肪变性.结论 严重烫伤大鼠早期补充外源性肉碱,可使血清肉碱和β羟丁酸含量更快恢复到正常水平,减轻肝细胞线粒体损伤,维持严重烫伤早期肝细胞的代谢稳定.

目的 探讨超声引导下经皮射频消融治疗尾状叶肝细胞癌的可行性及临床价值.方法 纳入2006年11月至2017年6月于中山大学附属第一医院行超声引导下经皮射频消融的尾状叶肝细胞癌的患者31例.记录消融效果和并发症情况,计算肿瘤局部进展率、患者累积生存率和无瘤生存率.结果 31例患者中,26 m一次完全消融,5例不完全消融,补充射频消融后均达到完全消融,平均消融次数(1.16±0.37)次.术后随访3～65个月,19例死亡,10例存活,2例失访.1年、2年、3年和5年总体累积生存率分别为78.4％、48.5％、12.1％和12.1％.随访期间,9例患者HCC消融后出现肿瘤局部进展,1年、2年和3年局部进展率分别为21.5％、41.6％和41.6％.1年、2年和3年无瘤生存率分别为22.3％、11.2％和11.2％.4例出现消融相关并发症.结论 超声引导下经皮射频消融治疗尾状叶HCC是安全、有效的,消融后应密切随访.

肝缺血再灌注损伤可发生在肝切除术后,其会使术后残余肝脏不能维持足够的功能[1-2].肝缺血再灌注损伤也可以发生在供肝的保存,移植和血容量减少等过程中[3-4].肝缺血再灌注损伤随着在再灌注过程中的血流恢复,肝脏经历了急性炎症反应导致进一步的损伤.库普弗细胞(Kupffer cell)和多形核细胞被激活,血小板浸润灌注的组织,同时由于大量细胞因子产生,补体激活,血小板激活因子以及内皮细胞黏附分子的积聚,一氧化氮(NO)水平局部失衡导致进一步的肝脏结构和功能的障碍,最终产生了自由基和组织抗氧化能力的缺失[5-8].其最终结果是肝细胞和肝血窦内皮细胞的坏死和凋亡.

目的 评估从红树林土壤中分离的真菌PH1008胞外多糖在小鼠阴道白假丝酵母菌感染模型中的抗感染效应,为抗假丝酵母菌感染开发新的治疗药物提供思路.方法 用真菌PH1008胞外多糖干预小鼠阴道白假丝酵母菌感染模型,提取阴道组织进行转录组基因表达水平测定以评估胞外多糖的抗感染效应.结果 增强了肝细胞生长因子、补体1受体等基因的表达水平,且这一上调现象与多个信号传导途径密切相关.结论 真菌PH1008胞外多糖局部干预小鼠阴道后可诱导机体产生抗白假丝酵母菌感染效应,相关机制有待于进一步研究.