目的:探讨奥曲肽联合乌司他丁在老年重型急性胰腺炎(SAP)患者治疗中的临床应用价值。方法:选取2016年5月至2019年2月浙江省中西医结合医院消化科收治的124例老年SAP患者，分为联合组和对照组，每组各62例。联合组给予奥曲肽联合乌司他丁治疗，对照组仅采用奥曲肽进行治疗。全自动生化分析及酶联免疫法监测治疗前及治疗后1、3、5、7、14 d血清白细胞计数、C-反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和淀粉酶水平；分析两组治疗后7 d的疼痛等级评分、急性生理与慢性健康评分(APACHEⅡ)和疗效评价；对比两组患者的进食时间和住院时间，记录治疗过程中相关并发症情况；随访两组患者1年内并发症发生及胰腺炎再复发情况。结果:治疗前两组患者血清白细胞计数、CRP、血清淀粉酶、IL-6、TNF-α水平比较，差异均无统计学意义(均 P>0.05)；治疗后3 d两组患者白细胞计数、CRP和TNF-α水平差异有统计学意义( t＝3.735、2.851、-2.147， P＝0.036、0.029、0.043)，血清淀粉酶、IL-6水平差异无统计学意义(均 P>0.05)；治疗后7 d两组患者上述各指标结果差异均有统计学意义( t＝3.624、2.918、-2.166、2.684、-2.593， P＝0.023、0.011、<0.001、0.015、<0.001)；治疗后14 d血清淀粉酶、IL-6、TNF-α水平差异有统计学意义( t＝-3.515、4.627、-3.189，均 P<0.001)，白细胞计数、CRP水平比较差异无统计学意义(均 P>0.05)。治疗后7 d两组患者VAS、APACHE-Ⅱ评分比较差异有统计学意义( t＝-2.346、-3.245， P＝0.021、0.002)。治疗后7 d，联合组治疗显效率为79.0%(49/62)，对照组为61.3%(38/62)，差异有统计学意义( χ2＝4.661， P＝0.031)。联合组患者平均进食时间为(6.72±1.87)d、平均住院时间为(11.23±2.98)d，对照组为(7.65±1.69)d、(13.85±3.42)d，组间差异有统计学意义( t＝-2.868、-4.565，均 P<0.05)。治疗过程中，联合组患者感染性胰腺坏死、消化道反应和器官衰竭的发生率分别为11.3%(7/62)、43.5%(27/62)、1.6%(1/62)，与对照组25.8%(16/62)、21.0%(13/62)、11.3%(7/62)比较差异有统计学意义( χ2＝4.324、7.233、4.810， P＝0.038、0.007、0.028)。联合组平均无并发症时间为(10.25±3.26)个月、无复发时间为(10.69±2.51)个月，对照组分别为(8.72±3.73)个月、(9.62±2.92)个月，差异有统计学意义(Log Rank χ2＝7.463、4.589， P＝0.006、0.032)。 结论:奥曲肽联合乌司他丁可有效缓解老年SAP患者局部症状和临床进展，降低并发症风险和疾病复发率，促进患者早期康复。

组织激肽释放酶(tissue kallikrein-related peptidase,KLK)家族是丝氨酸蛋白酶家族中一种具有胰蛋白酶或胰凝乳蛋白酶性质的蛋白水解酶亚群,有15个家族蛋白,分别为KLK1～KLK15.近年来,越来越多的研究表明,KLK家族可通过切割病毒和细菌关键蛋白、激活多种宿主受体、调控激肽系统等方式参与机体的多种生理活动,影响着病毒、细菌和真菌中多种病原微生物感染的进程,作用机制复杂且广泛.本文通过对近年来KLK家族蛋白在微生物感染中的作用和机制进行综述,以更好地探究KLK在微生物感染中的重要作用,特别是为其在结核分枝杆菌感染中的研究提供思路,也为KLK家族蛋白作为抗结核治疗靶点提供理论基础.

生殖系统微循环障碍影响精子质量,改善微循环已经被作为男性不育的基础性治疗方法写入中华医学会男科学分会《中国男科疾病诊断与治疗指南(2016版)》[1].胰激肽原酶(pancreatic kininogenase)属蛋白水解酶类,具有扩张小血管和毛细血管、增加毛细血管血流量等作用,可改善微循环和器官代谢,其代表药物怡开被广泛应用于改善糖尿病等疾病导致的微循环障碍.在国内、外的男科领域,胰激肽原酶也被用于男性不育的治疗,但目前仍存在超说明书用药、使用疗程存在争议和用药剂量不规范等问题.为规范胰激肽原酶在男性不育治疗中的应用,中华医学会男科学分会组织专家制定本共识,以指导药物临床应用.本共识包括:胰激肽原酶-激肽系统概述、胰激肽原酶在生殖系统中作用、胰激肽原酶在男性不育临床应用和临床使用方法等内容.

[目的]明确贝莱斯芽孢杆菌 (Bacillus velezensis) L-1对梨灰霉和青霉病菌的抑制作用, 明确菌株L-1无菌发酵液拮抗活性的稳定性及可能的拮抗机制.[方法]通过离体测定、活体测定和病原菌菌丝形态观察, 评价菌株L-1对梨灰霉和青霉病菌的拮抗活性.以梨灰霉病菌为供试病原菌, 利用牛津杯法测定菌株L-1无菌发酵液拮抗活性的稳定性.利用Pacbio RSII三代测序技术测定L-1的全基因序列, 将全基因序列与基因蛋白质序列数据库进行BLAST比对分析, 预测菌株L-1可能产生的次生代谢产物及潜在的作用机制.[结果]菌株L-1对梨灰霉和青霉病菌的活体抑制率分别为92.88％和77.47％, 能引起病原菌菌丝膨大、畸形.菌株L-1在含10％Na Cl的培养液中仍能正常生长, 其无菌发酵液耐高温、酸、碱、紫外照射和蛋白酶降解, 对病原菌具有稳定的拮抗活性.全基因序列分析结果显示菌株L-1有112个基因参与了多种碳源的代谢, 可以利用多种碳源进行生长;含有参与亚精胺、海藻糖等与菌株抗逆性相关化合物合成的基因;次生代谢产物预测结果显示:L-1含有合成surfactin、fengycin、bacillibactin、bacillaene、macolactin、difficidin、bacilysin等多种肽聚糖和聚酮糖类抗性化合物的基因簇, 以及能够降解病原菌细胞壁的β-1, 3-葡聚糖酶和几丁质酶相关的基因;此外菌株L-1含有生成乙偶姻等能够诱导植物抗性的基因.[结论]菌株L-1能有效拮抗多种梨果采后病害, 抗逆性强, 拮抗活性稳定, 预测菌株L-1能够通过产生多种拮抗活性化合物和细胞壁水解酶类以及诱导植物抗性实现防病效果, 具有很大的应用潜力.

目的 探讨血清基质金属蛋白酶?8(MMP?8)/基质金属蛋白酶抑制剂?1(TIMP?1)与急性冠状动脉综合征(ACS)心功能及其预后的相关性.方法 选取行冠状动脉造影检查者160例,其中105例确诊ACS患者作为ACS组,其余55例健康者作为对照组.比较两组血清MMP?8、TIMP?1及左室射血分数(LVEF).ACS组行常规治疗,PCI术后7 d再次检测血清MMP?8、TIMP?1、MMP?8/TIMP?1及LVEF,出院后随访≥1年,统计ACS组支架血栓发生率和生存率.分析ACS患者血清MMP?8/TIMP?1与LVEF、支架血栓发生率及1年生存率的关系及其预后的价值.结果 与对照组比较,ACS组MMP?8、TIMP?1及MMP?8/TIMP?1水平升高,LVEF降低(P <0.05).与术前比较,ACS组术后7 d MMP?8、TIMP?1及MMP?8/TIMP?1降低,LVEF升高(P <0.05).ACS组随访1年支架血栓发生率和生存率分别为8.57%和85.71%.与存活患者比较,ACS组死亡患者围手术期MMP?8/TIMP?1升高,LVEF降低(P <0.05).与无支架血栓患者比较,有支架血栓患者术期血清MMP?8/TIMP?1水平升高,LVEF降低(P <0.05).ACS患者血清MMP?8/TIMP?1水平与LVEF和1年生存率均呈负相关(P <0.05),与其支架血栓发生率则呈正相关(P <0.05).结论 血清MMP?8/TIMP?1水平与ACS患者LVEF、支架血栓和生存预后均密切相关,可作为其病情和预后评估的参考指标.

目的:摸索人源瞬时受体电位M2型通道(TRPM2)羧基端Nudix水解酶9(NUDT9)同源结构域(NUDT9-H)的蛋白提取和纯化方法.方法:异丙基硫代半乳糖苷诱导表达的Rosetta(DE3)大肠埃希菌菌株经超声破碎和离心后,将收集到的上清液与GST磁珠结合并用还原型谷胱甘肽洗脱以抽提GST-NUDT9-H融合蛋白,浓缩离心后再经分子排阻色谱层析纯化,最后经凝血酶酶切并与GST磁珠结合即得NUDT9-H蛋白.结果:含有0.5％的十二烷基-β-D-麦芽糖苷(DDM)裂解溶液体系和0.025％的DDM分子排阻层析色谱溶液体系能够提高GST-NUDT9-H融合蛋白的稳定性,再按每2 mg融合蛋白加入1U凝血酶切割24 h,即获得高纯度NUDT9-H蛋白.结论:NUDT9-H蛋白稳定性较差,提取和纯化体系中需添加DDM以稳定其构象从而提高目的蛋白的产量和纯度.

蛋白水解靶向嵌合体(PROTAC)是一种靶向蛋白降解技术,可将许多"不可成药"的疾病相关蛋白作为靶点,具有良好的靶向性和高效的降解性,在恶性肿瘤治疗领域显示出较好的前景.PROTAC包含三个部分,两端分别是E3泛素连接酶招募元件和靶蛋白结合配体,中间由一个连接两端配体的连接体组成,通过劫持E3泛素连接酶活性将靶蛋白泛素化降解.近年来PROTAC已从第一代肽基PROTAC发展到靶向激素受体、溴结构域和超末端结构域(BET)蛋白家族、蛋白激酶等的第二代小分子基PROTAC,为靶向治疗恶性肿瘤提供可能.目前已有两种PROTAC药物通过Ⅰ期临床试验.第三代光控式PROTAC解决了非肿瘤特异性的难题,降低了毒性,在未来可被应用于局部疾病的治疗.

基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)家族为钙依赖的含锌内肽酶,可靶向切割细胞膜蛋白及细胞外基质(extracellular Matrix,ECM)蛋白.MMPs作为水解ECM的关键酶类,能分解卵泡膜细胞、颗粒细胞及卵泡液中的纤维蛋白、胶原蛋白等重要物质,参与卵巢生殖细胞形成与分化、激素合成与分泌、卵泡腔的形成与扩张、排卵、黄体形成及闭锁等生理过程.MMPs异常表达则可能诱导卵巢疾病的发生发展,损害女性生殖健康,因此进一步了解MMPs对卵巢局部的生理作用及其分子机制将有助于为妇科疾病及生殖相关疾病的诊断、治疗、风险及预后评估提供参考价值.