目的:探讨肌肽对小鼠卵母细胞体外成熟和胚胎发育的影响。方法:获取小鼠卵丘-卵母细胞复合体（cumulus-oocyte complexes，COC），分别用含10 μmol/L、30 μmol/L、50 μmol/L、100 μmol/L、200 μmol/L肌肽的体外成熟培养液培养18 h，不含肌肽的培养液设为对照组。根据卵母细胞成熟率、卵裂率和囊胚形成率确定作用的最优浓度。通过检测活性氧（reactive oxygen species，ROS）水平、总谷胱甘肽（total glutathione，T-GSH）含量、皮质颗粒分布、线粒体分布和线粒体拷贝数进一步验证肌肽的作用。结果:肌肽浓度为100 μmol/L时，卵母细胞成熟率［69.23%（135/195）］、卵裂率［66.06%（72/109）］和囊胚形成率［48.61%（35/72）］最高，与对照组［44.44%（84/189）、38.67%（29/75）、20.69%（6/29）］相比，差异具有统计学意义（ P<0.001、 P<0.001 、P=0.010），故选定100 μmol/L作为肌肽作用的最优浓度。对照组卵母细胞中的ROS和T-GSH水平为100 μmol/L肌肽组的2.04倍和0.64倍，差异具有统计学意义（均 P<0.001）。100 μmol/L肌肽组的皮质颗粒Ⅲ级的比例显著高于对照组（ P<0.001）。对照组卵母细胞的线粒体均匀分布在胞质中，100 μmol/L肌肽组的线粒体聚集在胞质中央区域，且荧光强度高于对照组（ P=0.040）。100 μmol/L肌肽组的线粒体拷贝数是对照组的1.72倍，差异具有统计学意义（ P<0.001）。 结论:肌肽能够有效改善未成熟卵母细胞的氧化应激，促进小鼠卵母细胞的体外成熟和胚胎发育。

单卵双胎是双胎妊娠中的一种特殊类型。与双卵双胎相比，单卵双胎发生流产、胎儿畸形、胎死宫内、宫内生长受限及早产等风险均明显增加。单卵双胎的发生机制目前尚不明确，目前存在“两个模型”和“一个假说”理论，即“合子分裂模型”“胚胎膜融合模型”和“过度成熟配子”假说。辅助生殖技术与单卵双胎的发生密切相关。辅助生殖技术中的母体年龄、促排卵药物的应用、移植周期类型、胚胎培养时间、透明带操作、培养方式和培养液、遗传等均与单卵双胎的发生有关。本文对于单卵双胎的发生机制及危险因素新进展进行综述，以期为临床工作提供指导。

目的:检测体外培养不同级别早期人胚胎的培养液中氨基酸和肉碱水平，探讨基于质谱的微量分析技术用于评价胚胎体外发育潜能的可行性。方法:从2022年6至12月在临沂市人民医院生殖医学科接受体外受精-胚胎移植治疗的不孕夫妇中，收集女方年龄31.5（26.5，33.25）岁，且获卵数在8~20个的不孕夫妇，从中随机挑选30对不孕夫妇收取其第3天细胞胚的培养液共126份，依据其所对应的胚胎的形态级别分为优（ n=43）、中（ n=49）和差3（ n=34）组。通过液相色谱-质谱联用检测不同培养液中氨基酸和肉碱水平。通过方差分析比较不同组间氨基酸与肉碱水平的差异，通过Pearson相关分析氨基酸与肉碱水平的关联，偏最小二乘法分析氨基酸和肉碱水平与胚胎评估级别的关联。 结果:甲硫氨酸/苯丙氨酸（比值）在优胚、中胚和差胚3组间分别为3.09±1.67、4.00±1.19和4.99±2.04，差异有统计学意义（ F=7.09， P<0.05），优胚与中胚间（ t=-0.91， P<0.05）、优胚与差胚间（ t=-1.91， P<0.05）及中胚与差胚间（ t=-0.99， P<0.05）差异均有统计学意义。不同氨基酸之间，苯丙氨酸与酪氨酸的正相关性最强（ r=0.99， P<0.01）；不同肉碱之间，辛酰肉碱与葵酰肉碱比值（C 8/C 10）与（戊二酰肉碱+3-羟基己酰肉碱）/棕榈酰肉碱比值［（C 5DC+C 6OH）/C 16］的正相关性最强（ r=0.44， P<0.001）；偏最小二乘法拟合模型计算氨基酸/肉碱水平与胚胎级别相关的权重：亮氨酸（异亮氨酸）为2.22，精氨酸为1.99，缬氨酸/苯丙氨酸为1.65，甘氨酸为1.54，酪氨酸为1.21，（戊二酰肉碱+3-羟基己酰肉碱）/辛酰肉碱（C 5DC+C 6OH）/C 8为1.15。 结论:胚胎培养液中亮氨酸、精氨酸、缬氨酸/苯丙氨酸比值、甘氨酸、酪氨酸以及肉碱比值（C 5DC+C 6OH）/C 8与体外培养人早期胚胎级别显著相关。

体外受精-胚胎移植（ in vitro fertilization and embryo transfer，IVF-ET）是将精子和卵子在体外受精结合，并在体外进行胚胎培养发育至卵裂期或囊胚期胚胎，再移植到子宫内的过程。通常把受精卵到着床前囊胚期的发育过程称之为“胚胎着床前发育”。一般认为，人的胚胎着床前发育是靠卵母细胞蓄积的蛋白和mRNA发育至8-细胞期，然后开始激活胚胎自体基因进一步发育到囊胚期。由此可见，IVF技术治疗不孕不育的重要环节之一是着床前胚胎体外培养。体外培养液的成分会直接影响着床前胚胎发育和临床治疗结局。其中，乳酸可能在受精卵早期分裂发育过程中起了相对重要作用。本文对受精卵到囊胚期胚胎着床前体外培养液的发展过程和培养液中的乳酸成分对胚胎着床前发育的影响进行概述。同时，对培养液中乳酸成分来源的乳酸盐原料进行简单的介绍。

目的:探讨培养液提前1 d低氧环境（5%氧气浓度）和高氧环境（20%氧气浓度）平衡对体外受精（ in vitro fertilization，IVF）或卵胞质内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection，ICSI）胚胎发育潜能及妊娠结局的影响。 方法:回顾性队列研究分析了邢台不孕不育专科医院生殖医学中心2018年8月至2019年9月期间行IVF和ICSI患者的881个周期的临床资料。培养液提前1 d配制置于培养箱中平衡，根据培养箱氧气浓度分成低氧平衡组（5%氧气浓度）和高氧平衡组（20%氧气浓度）。比较两种授精方式下不同培养液平衡环境对胚胎发育和妊娠结局的影响。结果:不同授精方式下低氧平衡组和高氧平衡组间的获卵数、受精率、双原核（two pronucleus，2PN）卵裂率及可用胚胎率等差异均无统计学意义（均 P>0.05）。第3日可用胚胎率行IVF患者中组间差异无统计学意义。行ICSI患者中低氧平衡组显著高于高氧平衡组［68.52%（664/969）比64.42%（795/1234）， P=0.043］；不同授精方式下低氧平衡组的囊胚形成率均显著高于高氧平衡组［IVF：44.99%（808/1796）比41.45%（841/2029）， P=0.027；ICSI：42.00%（307/731）比34.95%（317/907）， P=0.004］。低氧平衡组的移植胚胎数目均显著低于高氧平衡组［IVF：（1.87±0.34）枚比（1.96±0.21）枚， P=0.001；ICSI：（1.79±0.41）枚比（1.94±0.23）枚， P=0.002］。种植率、临床妊娠率及活产率组间差异均无统计学意义（均 P>0.05）。logistic回归分析结果显示液体平衡环境与活产率显著相关（ OR=0.238，95% CI=0.139~0.409， P<0.001）。 结论:培养液提前1 d低氧平衡（5%氧气浓度）能够提高IVF和ICSI受精胚胎的发育潜能，显著提高活产率，ICSI效果较IVF明显，但确切结果仍需大样本的随机对照研究进一步证实。

目的:研究EmbryoGlue移植液对冻胚移植临床结局的影响。方法:回顾性队列研究分析2016年1月1日至2020年12月31日期间于海军军医大学第二附属医院生殖医学中心进行冻胚移植患者的共2848个周期，根据移植培养液种类分为两组：G-2组（1605个周期）和EmbryoGlue组（1243个周期），比较两组患者基本情况及临床结局的差异。将两组患者的年龄、不孕因素、不孕年限、内膜准备方案、内膜厚度、移植胚胎数、移植优质胚胎数、移植胚胎阶段进行倾向性评分匹配（propensity score matching，PSM）后，再次比较两组临床结局的差异。结果:PSM前EmbryoGlue组与G-2组比较，患者年龄［（33.46±4.66）岁比（31.92±4.62）岁， P<0.001］、不孕年限［（4.11±2.98）年比（3.36±2.60）年， P<0.001］、内膜厚度［（9.51±1.77）mm比（10.01±1.77）mm， P<0.001］、移植胚胎数（1.52±0.50比1.59±0.49， P=0.001）、移植优质胚胎数（1.28±0.64 比1.47±0.57， P<0.001）差异具有统计学意义。PSM后两组基本情况差异均无统计学意义（ P均>0.05）。EmbryoGlue组和G-2组的生化妊娠率［61.1%（609/996）比61.9%（617/996）， P=0.713］、临床妊娠率［56.5%（563/996）比57.0%（568/996）， P=0.821］、植入率［44.3%（674/1523）比44.4%（691/1555）， P=0.919］、异位妊娠率［1.8%（10/563）比1.8%（10/568）， P=0.984］、流产率［16.9%（95/563）比17.3%（98/568）， P=0.865］差异均无统计学意义。 结论:使用EmbryoGlue作为胚胎移植液的临床结局与G-2相似，尚不能认为EmbryoGlue移植液可以改善冻胚移植的临床结局。

目的:本研究旨在探索铅染毒是否会导致斑马鱼焦虑的发生，并对其机制进行初步探索。方法:于2020年5月，收集受精后4 h（4hpf）的斑马鱼胚胎，以E3培养液作为对照组，不同的铅染毒浓度（6、12、24、48 μmol/L）作为染毒组，染毒时间为140 h。计算144 hpf斑马鱼的胚胎死亡率、胚胎孵化率和幼鱼畸形率；观察144 hpf幼鱼的行为学变化（运动速度、移动距离、活跃度、绝对转角、光照惊恐反应、黑暗逃避反应和趋触性）。并且检测斑马鱼幼鱼头部的活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）水平。用ELISA试剂盒检测与焦虑相关的神经递质5-羟色胺（5-HT）、多巴胺（DA）、去甲肾上腺素（NA）和促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）的表达量。结果:12、24和48 μmol/L铅染毒组斑马鱼胚胎死亡率高于对照组，胚胎孵化率低于对照组，24和48 μmol/L铅染毒组斑马鱼幼鱼畸形率高于对照组（ P<0.01）；24和48 μmol/L铅染毒组幼鱼运动速度、活跃度和趋触性低于对照组，绝对转角高于对照组，48 μmol/L铅染毒组幼鱼移动距离和黑暗逃避反应低于对照组，12、24和48 μmol/L铅染毒组幼鱼的光照惊恐反应低于对照组（ P<0.05）。24和48 μmol/L铅染毒组幼鱼头部ROS水平和MDA浓度高于对照组（ P<0.05）；12、24和48 μmol/L铅染毒组幼鱼头部NA和DA的含量低于对照组，24和48 μmol/L铅染毒组幼鱼头部5-HT和CRH浓度高于对照组（ P<0.05）。 结论:铅对斑马鱼有一定的胚胎发育毒性，且可导致斑马鱼发生焦虑样神经行为、神经递质改变以及氧化应激的发生。

利用滋养外胚层（TE）细胞活检对植入前胚胎进行遗传学筛查已经有20多年的历史，但其在选择整倍体胚胎方面的优势仍然存在争议。近年来，胚胎废弃培养液中游离脱氧核糖核酸（cfDNA）的发现，为获得胚胎的细胞遗传学信息提供了一种潜在的无创替代方法。有研究报道胚胎cfDNA分析与TE、内细胞团（ICM）和整个囊胚（WB）的活检结果高度一致。然而，在cfDNA成为可靠的胚胎基因组信息来源应用于临床之前，仍然面临很多挑战。本文综述了基于培养液中的cfDNA的无创胚胎植入前遗传学检测（niPGT）的产生和现状，并对其局限性和未来前景进行了探讨，为niPGT应用于临床提供参考。

目的:探讨“短时取样法”在非侵入性胚胎植入前遗传学检测（non-invasive preimplantation genetic testing，ni-PGT）中的检测效能。方法:采用前瞻性研究分析方法，对2021年3月至2022年6月期间就诊于湘潭市中心医院生殖中心行胚胎植入前非整倍体遗传学检测（preimplantation genetic testing for aneuploidy，PGT-A）患者的囊胚进行外滋养层细胞（trophectoderm，TE）活检，同时收集囊胚培养液（spent culture medium，SCM）。根据SCM收集方法的不同，分为直接收集法与“短时取样法”，分析比较两种取样方法ni-PGT的检测结果与PGT-A结果的符合率。结果:本研究收集36对夫妇的108个囊胚，均行TE活检及收集SCM，其中直接收集法59例、“短时取样法”49例。直接收集法诊断胚胎倍性的曲线下面积（area under curve，AUC，0.628）小于“短时取样法”（0.785）。结论:“短时取样法”诊断胚胎倍性的效能相较于直接收集法更优。

遗传性耳聋一级预防的手段包括胚胎植入前遗传学检测（PGT）。目前，遗传性耳聋PGT使用全基因组扩增技术扩增滋养外胚层细胞中的遗传物质，通过微阵列比较基因组杂交（aCGH）技术、微阵列单核苷酸多态性（SNP-array）和二代测序技术进行非整倍体的检测，并结合连锁分析确定是否存在致病性耳聋基因突变。近年来随着无创筛查技术的发展，利用胚胎培养液的组学和游离DNA检测来对胚胎的质量、发育潜能及非整倍体的评估方法出现。本文主要对PGT在遗传性耳聋防控领域的技术流程、临床应用和无创筛查等方面进行综述。