目的:探讨黄芪甲苷对人内皮祖细胞(EPC)分泌外泌体及外泌体中微小RNA-126(miRNA-126)表达的影响。方法:取湖南中医药大学第一附属医院妇产科2019年出生的1名足月健康新生儿脐带血，采用密度梯度离心法分离单个核细胞并培养7 d，其间行形态学观察；取第3代细胞，采用CD31免疫磁珠分选法和双荧光染色法鉴定。将鉴定成功的EPC按照随机数字表法分为黄芪甲苷组和磷酸盐缓冲液(PBS)组。黄芪甲苷组细胞加入终质量浓度100 mg/L的黄芪甲苷培养24 h，PBS组细胞加入等体积的PBS培养24 h。培养结束后收集2组细胞培养上清液中的外泌体，采用蛋白质印迹法检测外泌体特征性标志物CD9、CD63和CD81表达，于透射电子显微镜下观察EPC外泌体(EPC-Exo)形态，采用纳米颗粒跟踪分析技术检测EPC-Exo的粒径，采用二辛丁酸法测定EPC-Exo的浓度(样本数为3)，采用反转录PCR法测定EPC-Exo中与血管新生相关miRNA-126-3p和miRNA-126-5p的表达(样本数为3)。对数据行独立样本 t检验。 结果:(1)培养第4天，细胞开始贴壁生长，圆形、梭形、条形等多形态同时出现；继续培养至第7天时，细胞边缘清晰，呈铺路石样排列，中央细胞呈圆形，周边细胞呈梭形。(2)CD31免疫磁珠分选法显示细胞膜染绿色，细胞核染蓝色；双荧光染色法显示细胞呈橙黄色。经以上鉴定，细胞被证实为EPC。(3)培养24 h，2组EPC-Exo的CD9、CD63和CD81表达均呈阳性，证实本实验已成功提取EPC-Exo。(4)培养24 h，2组EPC-Exo均呈圆形膜囊泡，形态无明显差异。(5)培养24 h，黄芪甲苷组中98.7%的EPC-Exo粒径为84.7～143.1 nm，PBS组中98.0%的EPC-Exo粒径为88.7～123.5 nm。(6)培养24 h，黄芪甲苷组EPC-Exo的质量浓度为(310±5)μg/mL，明显高于PBS组的(257±5)μg/mL， t＝13.369， P<0.01。(7)培养24 h，黄芪甲苷组EPC-Exo中miRNA-126-3p( t＝16.062， P<0.01)和miRNA-126-5p( t＝3.252， P<0.05)均明显多于PBS组。 结论:黄芪甲苷可改善人EPC分泌外泌体的功能，且所分泌的外泌体负载miRNA-126。

目的:探讨基于软骨脱细胞外基质微载体体外构建具有功能化和自我更新能力的软骨类器官。方法:取新鲜的猪关节软骨，将部分仅粉碎处理的软骨微粒设置为天然软骨组；利用物理离心化学萃取相结合的脱细胞方法，制备粒径合适的细胞外基质（ECM）微载体，设置为微载体组。通过旋转式生物反应器将人脐带干间充质干细胞（hUCMSCs）和人软骨细胞（hCho）按照3∶1的比例与微载体负载，体外构建软骨类器官，将诱导不同时间的类器官分为诱导0、7、14及21 d组。4′，6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）荧光染色观察、DNA定量评估微载体组和天然软骨组细胞残留情况；番红O、甲苯胺蓝染色观察微载体ECM保留情况，二甲氨基苯甲醛比色法测定微载体组和天然软骨组胶原蛋白含量；二甲基亚甲蓝（DMMB）比色法测定微载体组和天然软骨组糖胺聚糖（GAGs）含量。扫描电镜及能谱分析对微载体进行进一步表征；将添加体积分数10%胎牛血清（FBS）的杜尔伯克改良伊戈尔低糖培养基（DMEM）培养的hUCMSCs作为对照组，将微载体浸提液培养的hUCMSCs作为实验组，两组分别设置培养1、3、5 d共3个时间点的亚组，细胞增殖及毒性检测试剂盒（CCK-8）检测两组生物相容性。活死染色检测诱导0、7、14及21 d组的软骨类器官细胞活性，Ki67荧光染色鉴定诱导14 d软骨类器官的自我更新能力。RT-PCR测定诱导7、14、21 d组的软骨类器官，包括软骨形成相关标记物聚蛋白聚糖（ACAN）、Ⅱ型胶原（COL2A1）、性别决定区Y框蛋白9（SOX9）及软骨肥大、矿化相关标记物Ⅰ型胶原（COL1A1）、Runt相关转录因子2（RUNX2）、骨钙素（OCN）的表达水平；比色法和DMMB法测定诱导0、7、14及21 d组的类器官分泌胶原蛋白和GAGs能力。结果:DAPI荧光染色结果显示，天然软骨组具有大量细胞核，而微载体组则基本无细胞核。微载体组DNA含量为（7.8±1.8）ng/mg，较天然软骨组的（526.7±14.7）ng/mg显著降低（ P<0.01）。番红O、甲苯胺蓝染色可见微载体着色较深且均一，保留大量软骨ECM成分。微载体组胶原蛋白含量为（252.9±1.4）μg/mg，GAGs含量为（173.4±0.8）μg/mg，均显著低于天然软骨组的（311.9±2.2）μg/mg、（241.3±0.7）μg/mg（ P<0.01）。扫描电镜显示，微载体表面有凹凸不平相互交错的胶原纤维网络。能谱分析结果显示，C、O、N元素均匀分布在微载体，表明该微载体成分组成均匀。微载体生物相容性良好，培养1、3 d时，对照组和实验组CCK-8实验结果比较，差异均无统计学意义（ P>0.05）；培养5 d，实验组 A值为0.53±0.02，优于对照组的0.44±0.03（ P<0.05）。诱导0、7、14及21 d组中，hUCMSCs和hCho贴附在微载体表面且细胞活性好，活死比例分别为（70.6±1.1）%、（80.5±0.6）%、（94.5±0.9）%、（90.8±0.5）%（ P<0.01）；诱导14 d时，软骨类器官有大量Ki67阳性细胞。RT-PCR显示，诱导7 d组ACAN、COL2A1、SOX9、COL1A1、RUNX2、OCN表达水平分别为1.00±0.09、1.00±0.24、1.00±0.18、1.00±0.03、1.00±0.06、1.00±0.13；诱导14 d组ACAN、COL2A1、SOX9、COL1A1、RUNX2、OCN表达水平分别为4.16±0.28、5.09±1.25、5.65±1.05、0.47±0.01、1.68±0.02、0.21±0.06；诱导21 d组ACAN、COL2A1、SOX9、COL1A1、RUNX2、OCN表达水平分别为13.42±0.92、3.07±0.21、1.84±1.08、2.72±0.17、2.91±0.18、3.32±1.20。与诱导7 d组比较，诱导14 d组ACAN、COL2A1、SOX9、RUNX2表达水平均升高（ P<0.05），COL1A1表达水平降低（ P<0.05），OCN表达水平差异无统计学意义（ P>0.05）；与诱导7 d组比较，诱导21 d组ACAN、COL1A1、RUNX2表达水平均显著升高（ P<0.01），COL2A1、SOX9、OCN表达水平差异均无统计学意义（ P>0.05）；与诱导14 d组比较，诱导21 d组ACAN、COL1A1、RUNX2、OCN表达水平均升高（ P<0.05或0.01），COL2A1表达水平差异无统计学意义（ P>0.05），SOX9表达水平降低（ P<0.05）。诱导0、7、14及21 d组胶原蛋白含量分别为（219.15±0.48）μg/mg、（264.07±1.58）μg/mg、（270.83±0.84）μg/mg、（280.01±0.48）μg/mg，GAGs含量分别为（171.18±1.09）μg/mg、（184.06±1.37）μg/mg、（241.08±0.84）μg/mg、（201.14±0.17）μg/mg。与诱导0 d组比较，诱导7、14、21 d组胶原蛋白和GAGs含量均显著升高（ P<0.01）。在诱导7、14、21 d组中，诱导7 d组胶原蛋白含量最低（ P<0.01），诱导21 d组胶原蛋白含量最高（ P<0.01）；诱导7 d组GAGs含量最低（ P<0.01），诱导14 d组GAGs含量最高（ P<0.01）。 结论:物理化学方法结合制备的微载体脱细胞成功，其基质保留较多，成分均一且无细胞毒性。基于微载体负载hUCMSCs与hCho体外成功构建软骨类器官，具有细胞活性好、自我更新能力、软骨形成相关基因表达强及分泌胶原蛋白和GAGs等特点，诱导14 d时构建的软骨类器官成软骨活性最佳。

目的:建立一种改良的人脐带间充质干细胞(MSCs)的培养方法，并分析其生物学特性。方法:采用组织块贴壁法原代分离人脐带MSCs，首先在杜尔伯科改良伊格尔(DMEM)高糖培养基培养，接着改用含有间充质干细胞生长添加物的DMEM培养基传代培养；传代两次后，重新换回DMEM培养基进行培养(三联法培养组)。同时以DMEM高糖培养基作为对照组。通过绘制生长曲线，细胞表面标志物检测，成脂分化检测等，对培养获得的人脐带MSCs进行鉴定。两组间比较采用 t检验。 结果:三联法培养组获得人脐带MSCs成功率高，组织块加放无菌盖玻片的细胞爬出时间、原代培养时间和细胞密度明显优于未加无菌盖玻片[(96.16±4.61) h比(139.50±6.26) h，(15.17±2.36) d比(21.47±2.83) d，30.57%比14.27%， t＝9.650、2.960、9.669， P<0.05]，差异均有统计学意义；人脐带MSCs细胞表面高表达CD44(99.05%)和CD29(98.51%)，不表达造血干细胞表型CD45(0.05%)，且具有多向分化潜能。 结论:本方法分离培养的人脐带MSCs，步骤简单、成功率高、成本较低，适用于人脐带MSCs的大规模培养。

腽肭脐为一味传统的补肾壮阳药，通过本草考证、香港及内地市场及生产厂家的调查，南极半岛及南设得兰群岛海域的实地考察，提出以下结论：腽肭脐(海狗肾)在历史上其实是一个比较笼统的概念，主要指源自海狗、海豹类几种海洋动物的外肾。腽肭脐一词，属于古代的外来语，其读音贴近海狗肾来源之一的海象Walrus一词。因为海象的肥耎，汉语中出现了一个音译词"腽肭"。最初宋代的《本草图经》与明代的《本草品汇精要》描述的原动物为海豹类。《本草纲目》(金陵版)所绘者与有鬃毛的海狗(毛皮海狮)的特征比较符合。《补遗雷公炮制便览》及此后本草书中，加入了主观臆想成分，进而以讹传讹。通过在南极周边海域的实地考察，了解到历史上腽肭脐可能源自海狗(毛皮海狮)及海豹类，这与现今药材市场海狗与海豹两大种群基本吻合。经对现今中国内地与香港市场品种实地考察，以海狗肾之名售卖者，包括海狗、海象、海豹类外生殖器。

目的:自制早产儿保暖固定装置，并探讨其临床应用效果。方法:设计早产儿保暖固定装置，并用于临床。选取首都医科大学附属北京儿童医院保定医院新生儿科病房于2022年1月至6月收治的60例早产儿作为对照组，2022年7月至12月收治的60例早产儿作为试验组。对照组早产儿使用阿童木暖箱辐射保暖、约束带或人为约束的方式进行脐静脉置管或中心静脉置管。试验组早产儿使用自行设计的早产儿保暖固定装置于阿童木暖箱中辐射保暖进行置管。记录两组早产儿置管时间、肢体脱出次数、置管参与人数、置管20 min至置管结束时的体温，并计算发生低体温（<36.5 ℃）的频率，比较两组各指标的差异。结果:①早产儿保暖固定装置由保暖睡袋和软垫两部分组成。保暖睡袋包括头部、手臂部、胸腹部和下肢部4个部分，其中胸腹部设计有长方形覆盖布料，掀开便于对早产儿行脐静脉穿刺。长方形软垫上有3组约束带，可分别固定保暖睡袋手臂部、胸腹部、下肢部。置管操作时，用魔术贴将保暖睡袋固定在软垫表面，根据穿刺部位选择暴露皮肤的范围。②试验组与对照组早产儿性别、体质量、孕周对比差异均无统计学意义〔男性：48.3%比46.7%，体质量（kg）：1.86±0.06比1.82±0.06，孕周（周）：31.33±0.31比32.25±0.34，均 P>0.05〕。与对照组比较，试验组置管时间明显缩短（min：21.30±0.43比30.02±0.64， P<0.01），肢体脱出次数明显减少（0次：70.0%比33.3%，1次：26.7%比50.0%， P<0.01），置管参与人数明显减少（人：1.77±0.06比2.37±0.06， P<0.01）。试验组早产儿低体温发生率明显低于对照组〔6.12%（6/98）比26.50%（31/117）， χ2＝15.536， P<0.01〕。 结论:早产儿保暖固定装置使用方便，可有效缩短置管时间，节约人力资源，减少早产儿低体温发生。

目的:探讨人脐带间充质干细胞（hUC-MSCs）分泌的外泌体对损伤后肌腱细胞修复的影响及其机制。方法:组织块贴壁法分离并纯化筛选出能稳定传代培养的hUC-MSCs，倒置荧光显微镜观察细胞形态，通过流式细胞术检测hUC-MSCs的免疫表型。应用诱导培养基诱导hUC-MSCs向成骨细胞、成软骨细胞和脂肪细胞分化并进行鉴定。运用高速离心法提取MSCs的分泌物外泌体（MSCs外泌体），用Western blot技术和电镜检测外泌体，用PKH67染色荧光法检测外泌体膜融合能力。40只Wistar鼠按随机数字表法分为肌腱损伤组和正常组，每组20只。肌腱损伤组：切断跟腱1周后用100 mg/kg戊巴比妥钠处死，取跟腱组织用胰蛋白酶消化得到损伤肌腱细胞。正常组：不做任何处理直接处死，与损伤组并行处理得到正常肌腱细胞。将外泌体与体外培养的肌腱细胞共培养，12，24，48，72 h后通过细胞计数CCK-8检测肌腱细胞增殖情况。hUC-MSCs外泌体处理细胞24 h后，采用Western blot、qPCR、免疫荧光方法检测外泌体对肌腱细胞转化生长因子-β（TGF-β）、骨形态发生蛋白（BMP）、血管内皮生长因子（VEGF）、成纤维细胞生长因子（FGF）和炎性因子白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响。结果:鉴定了hUC-MSCs，并成功分离hUC-MSCs外泌体。分离培养的MSCs呈梭形，丙氨酸氨肽酶（CD13）、整联蛋白β-1（CD29）、ecto-5'-核苷酸酶（CD73）、胸腺细胞表面抗原（CD90）和内皮素（CD105）呈阳性，人类白细胞DR抗原（HLA-DR）、造血祖细胞抗原（CD34）、白细胞共同抗原（CD45）呈阴性。分离出的外泌体经PKH67染色鉴定证实，在电镜下呈直径30~100 nm的圆盘、内部凹陷结构，Western blot检测高表达移动相关蛋白-1（CD9）和溶酶体相关膜蛋白3（CD63）。处理肌腱细胞后，CCK-8检测12，24，48，72 h细胞活性，结果表明肌腱损伤组显著高于正常组（ P < 0.01），qPCR结果表明肌腱损伤组TGF-β（1.850 ± 0.127）、BMP（2.133 ± 0.398）、FGF（1.610 ± 0.223）、VEGF（2.207 ± 0.059）的mRNA表达显著高于正常组TGF-β（1.004 ± 0.105）、BMP（1.007 ± 0.145）、FGF（1.007 ± 0.140）、VEGF（1.001 ± 0.065）（ P < 0.05），而肌腱损伤组IL-1β（0.102 ± 0.009）、TNF-α（0.130 ± 0.013）的表达显著低于正常组IL-1β（1.004 ± 0.113）、TNF-α（1.006 ± 0.134）（ P < 0.01）。Western blot检测结果与qPCR检测趋势一致。 结论:hUC-MSCs分泌的外泌体通过上调生长因子TGF-β、BMP、VEGF、FGF的表达，抑制炎性因子IL-1β、TNF-α的表达，促进肌腱细胞生长，促进肌腱细胞损伤修复。

目的:探讨单孔腹腔镜手术治疗的异位妊娠患者手术切口采用无菌手术膜预真空脐部加压包扎的效果。方法:回顾性研究。选取2019年5月—2021年1月太和县人民医院行单孔腹腔镜手术治疗异位妊娠的患者43例，年龄17~43岁。根据患者术后切口处理方式分为两组，脐部切口采用预真空加压包扎者22例为观察组，采用常规无菌敷贴包扎者21例为对照组。观察两组患者手术时间，采用疼痛数字评分量表(NRS)分别于术后1、12、24 h进行疼痛评分，观察患者首次下床活动时间，术后24 h根据切口敷料浸血面积评估切口渗血程度，以及患者术后1周切口愈合情况。术后定期随访，观察有无脐疝、切口感染等相关并发症。结果:两组患者年龄、BMI、孕次、产次、停经时间、腹腔积血量等基线资料比较，差异均无统计学意义( P值均>0.05)。患者均顺利完成手术。两组患者手术时间比较，差异无统计学意义( P>0.05)。观察组患者术后1、12、24 h疼痛NRS评分分别为(5.4±1.0)、(3.9±1.2)、(2.1±0.9)分，低于对照组的(6.9±1.2)、(5.2±1.4)、(3.6±1.0)分，差异均有统计学意义( t＝4.441、3.262、5.162， P值均<0.01)。观察组术后首次下床时间为(11.0±4.5)h，早于对照组的(15.1±5.0)h；术后24 h切口渗血程度轻于对照组；术后1周切口愈合情况优于对照组：差异均有统计学意义( t＝2.822、 H＝2.671、 H＝6.354, P值均<0.01)。术后42例患者获随访，随访时间7 d~6个月，平均(108±14)d。随访期间两组患者均无脐疝、切口感染等并发症发生。 结论:单孔腹腔镜手术治疗异位妊娠患者，术毕采用无菌手术膜预真空脐部加压包扎，可以缓解术后疼痛，缩短下床活动时间、加速术后康复。

患者1 女性，27岁，主因“左侧眼睑下垂进行性加重3个月伴左上肢麻木1个月”于2017年8月7日入上海市肺科医院。患者为21三体综合征患者。入院体检：先天愚型面容，左侧眼球内陷、左上睑下垂，双瞳孔不等大，左侧缩小，对光反射存在，左上肢感觉减退。实验室检查无明显异常。CT增强扫描示左侧胸顶处占位，大小约7 cm×8 cm，肿瘤占据左侧胸廓出口，与锁骨下动脉紧邻，锁骨下动脉有一细小分支疑似穿过肿瘤上极（图1A）；MRI提示神经源性肿瘤。诊断：霍纳综合征，起源于交感干的神经节细胞瘤可能。该类型肿瘤通常质地较硬且本例瘤体相对较大，从胸腔内处理如果损伤胸顶锁骨下细小分支引起出血，则术野暴露及出血控制会比较困难。该肿瘤为良性肿瘤，经影像科、胸外科、手外科等多学科诊疗团队评估后决定优先处理肿瘤上极，后通过单孔胸腔镜处理肿瘤下半部分。于2017年8月11日行锁骨上切口联合单孔胸腔镜胸顶肿瘤切除术。双腔管插管全身麻醉后，取仰卧位，患侧胸部垫高，头转向健侧，患侧左手臂外展，消毒颈部区域后铺巾，于左侧颈部锁骨上方做一长8 cm切口，自此切口逐步向胸顶游离。首先游离出锁骨下动脉，探查其下为肿瘤顶部，质地较硬；仔细寻找到锁骨下动脉细小分支，见该血管紧贴肿瘤上极，两端分别双线结扎后切断。橡胶带牵拉锁骨下动脉，继续向脊柱侧逐步分离，分离出C 5~T 1神经根，分别予橡胶带牵拉暴露。手指钝性分离肿瘤顶部，向胸腔内压入。此时肿瘤上极与胸顶大血管和臂丛神经根完全分离。无菌纱布覆盖颈部切口后更换为右侧卧位，左手臂悬吊，打开颈部切口覆盖纱布后，再次消毒下颌缘至脐平面皮肤，铺巾，暴露颈部切口和侧胸壁，自腋中线第4肋间做一长4 cm切口，逐层进入胸腔后，置入切口保护套，单孔胸腔镜操作。探查胸顶部，为肿瘤占据，肿瘤无法与远端交感干游离。胸腔内向下牵拉游离肿瘤，同时配合经锁骨上切口予手指钝性向胸腔内游离肿瘤，最后电凝钩仔细操作于胸腔内完整切除肿瘤，自胸部切口取出肿瘤（图1B、1C）。肿瘤切除后，暴露胸顶后进一步探查，见胸廓入口处交感干位于肿瘤起始部，远端随肿瘤切除后局部缺如（视频1）。胸腔内留置胸管1根，自胸部切口引出，颈部切口一期皮内缝合不放置引流。颈部游离操作时间1.5 h，单孔胸腔镜切除肿瘤1.0 h，术中出血量20 ml。术后第1天复查胸部X线片，左肺复张良好引流少，拔除胸管，术后第3天出院。病理学检查证实为节细胞神经瘤。术后1个月随访胸部X线片显示恢复良好（图1D），左上肢麻木感消失，霍纳综合征未改善。由于患者依从性较差，未再通过门诊随访，电话随访情况稳定。

孕妇32岁，孕1产0，孕36周因当地超声提示胎儿腹腔混合回声包块来我院进一步检查。自诉孕33周及之前产前超声未见明显异常。既往体健，无传染病及家族遗传病史，无创DNA低风险。超声显示：胎儿左肾前方测及一囊实混合性肿物6.4 cm×4.9 cm×4.7 cm，边界尚清，上缘至脾、胃，下缘达左肾下极下方约1 cm，形状欠规则，其内中心部以实性低回声为主，并可见散在点片状、簇状、线样强回声及多发小片状无回声区(图1A)，大小约5.1 cm×4.1 cm×3.8 cm，周边为多发不规则无回声区环绕，较大约1.9 cm×1.7 cm×1.5 cm。彩色多普勒血流显像(CDFI)示：肿物周边及内部可见少许点、条状血流信号，慢速血流成像(Slow Flow HD)示肿物周边呈半环状血流，并由周边深入其内呈树枝状及线状丰富血流信号(图1B)，为低速低阻血流频谱，脐动脉收缩期峰值血流速度(PSV)9.01 cm/s，阻力指数(RI)0.48(图1C)。胃泡充盈欠佳且胃后壁与肿物分界不清，胎儿呼吸样运动时胃泡与肿物同步运动，左肾、脾脏、肠管受压变形。超声提示：未成熟畸胎瘤？胃来源可能性大。同期MRI示左肾前方巨大囊实性肿物，信号不均匀，呈长T1、稍长或长T2，大小约6.1 cm×4.9 cm×5.4 cm，边界尚清，其内可见多发流空血管影，囊实性成分分布无明显规律，外周以囊性为主，周围脏器受压，胃泡受压显示不清(图2A)，提示神经母细胞瘤？孕37 +3周复查超声：腹腔肿物明显增大，约7.4 cm×6.3 cm×5.7 cm，胃泡较小且形状欠规则，SlowFlow HD示肿物周边及内部血流丰富，PSV 12.1 cm/s，RI 0.42；39周时肿物达9.3 cm×8.1 cm×7.1 cm，上缘至胃脾，下缘至盆腔，内部以实性成分为主，明显增大，大小约7.2 cm×6.8 cm×5.0 cm，周边为受压环绕的大片状无回声，较大者2.5 cm×1.9 cm×1.8 cm，SlowFlow HD示肿物周边及内部可见来自腹腔干分支的环状及线状丰富血流信号，部分沿线样强回声走行，胃泡小且细长，与肿物分界不清。孕妇于当日顺娩一男婴，体重3 250 g，Apgar评分为10-10-10分，腹部膨隆，腹壁静脉怒张，腹部偏左可触及大小约9.0 cm×9.0 cm×8.0 cm肿物，活动度差。血红蛋白(Hb) 91 g/L(140~200 g/L)，甲胎蛋白(AFP)>1 000 μg/L。出生后1 d CT增强扫描示：病变实性部分呈渐进性强化，动脉期部分病变突入胃腔内且强化较明显(图2B)。提示腹腔偏左囊实性肿物，间叶组织来源可能，消化系统来源不除外。出生后2 d MRI T2-haste示腹腔偏左可见一囊实性巨大肿物，边界欠清，大小10.3 cm×8.6 cm×8.4 cm，部分病变位于胃腔内，肿物信号不均匀，实性部分呈等T2、等T2信号，囊性部分呈长T1、长T2信号，周围脏器受压移位，胃泡大部分显示不清，腹腔内可见片状稍长T1稍长T2信号(图2C)。提示：腹腔偏左囊实性肿物，神经母细胞瘤可能；腹腔积液。因Hb达危急值，遂下病危通知，留置胃管后引流液呈咖色。给予输血、纠酸、抗感染、静脉补液、止血等治疗。患儿病情逐渐平稳，于出生后第6 d行剖腹探查，术中见肿物呈不规则圆形，侵犯胃后壁，局部包膜不完整，紧贴胃后壁切除大部分肿瘤。大体标本：肿物呈不规则圆形，大小约12.0 cm×10.0 cm×9.0 cm，肿瘤穿透胃壁部分大小约3.0 cm×2.0 cm×1.0 cm，包膜不完整，切面半囊半实，包膜下及实性部分内可见大小不等的囊腔，可见淡红色稍黏稠液体流出，部分实性区域灰黄灰褐色，未见明显油脂及毛发(图3A)。镜下所见：可见胚胎时期三胚层组织，另可见不成熟的神经上皮(图3B)(少量神经外胚层小管和菊形团结构)及不成熟软骨组织(图3C)。病理诊断：(胃后壁肿物)未成熟畸胎瘤1级。

目的:基于转录组测序（RNA-Seq）技术探讨猪苓多糖改变人原代巨噬细胞生长形态的可能分子机制。方法:通过提取粗多糖并进行分离和纯化得到猪苓多糖。Ficoll法分离新生儿脐带血来源的外周血单个核细胞（PBMC），并通过CD14磁珠分选及重组人巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）诱导人巨噬细胞，连续5 d观察100 ng/ml猪苓多糖对其生长形态的影响。实验组取巨噬细胞使用猪苓多糖干预48 h，对照组不进行处理，对两组细胞进行转录组测序筛选差异基因；将得到的测序结果进行差异基因表达的GO、KEGG功能注释及信号通路显著性富集分析。结果:诱导巨噬细胞具有贴壁生长及伪足分化能力，贴壁后细胞呈梭形和多角形，伪足较细长。100 ng/ml猪苓多糖处理能显著影响巨噬细胞的生长状态，巨噬细胞伪足逐渐消失且细胞变圆，最终分化褪失。比较两组测序结果发现差异表达基因共13 825个，其中上调基因7028个，下调基因6797个。差异基因的GO功能显著性富集分析显示，差异基因主要集中在细胞外基质（ECM）过程。差异基因的信号通路显著性富集分析结果主要集中在ECM合成与细胞黏附通路。结论:通过RNA-Seq技术证实猪苓多糖影响巨噬细胞的生长状态的分子机制依赖于ECM相关基因及黏附蛋白合成相关基因实现，为进一步研究猪苓多糖对巨噬细胞自身生理功能的调节作用提供依据。