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CCCTC结合因子对翼状胬肉中B淋巴细胞瘤-2基因表达的调控及其机制
编辑人员丨6天前
目的:探讨转录因子CCCTC结合因子(CTCF)对翼状胬肉中B淋巴细胞瘤-2基因( Bcl-2)表达的调控及其分子机制。 方法:纳入2017年6月至2019年2月在长沙市第一医院眼科行翼状胬肉切除联合自体角膜缘干细胞移植术治疗的原发性翼状胬肉患者22例,术中收集翼状胬肉组织作为翼状胬肉组;同期纳入因结膜裂伤、眼球破裂伤或眼球穿通伤就诊的眼外伤患者20例,取眼外伤修复手术过程中切取的少量正常结膜组织作为正常结膜组。分别采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测各组样本中CTCF及Bcl-2的表达水平;采用亚硫酸氢盐处理后测序法(BSP)检测各组样本中Bcl-2启动子DNA甲基化水平。分离并培养翼状胬肉成纤维细胞,使用波形蛋白抗体进行免疫组织化学鉴定成纤维细胞。将分离培养的细胞分成2个组,CTCF干扰组转染CTCF干扰质粒,对照组转染对照质粒。采用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测CTCF、Bcl-2表达水平;采用细胞计数试剂盒8检测各组培养12、24和48 h细胞增生活性;采用BSP检测各组样本中Bcl-2启动子DNA甲基化水平。比较各组各指标差异,采用Pearson线性相关分析探讨翼状胬肉组织中Bcl-2 mRNA与CTCF蛋白及 Bcl-2基因启动子甲基化水平的相关性。 结果:翼状胬肉组CTCF mRNA及蛋白相对表达水平分别为7.23±3.34和0.92±0.21,明显高于正常结膜组的1.10±0.44和0.28±0.07,差异均有统计学意义( t=-8.136、-13.025,均 P<0.01)。翼状胬肉组Bcl-2 mRNA及蛋白相对表达水平分别为10.27±4.64和0.95±0.27,高于正常结膜组的1.10±0.41和0.32±0.14,差异均有统计学意义( t=-8.789、-10.782,均 P<0.01)。翼状胬肉组CTCF蛋白相对表达量与Bcl-2 mRNA相对表达量呈显著正相关( r=0.746, P<0.01)。翼状胬肉组Bcl-2启动子区DNA甲基化水平为0.65±0.09,低于正常结膜组的0.83±0.06,差异有统计学意义( t=7.408, P<0.01)。翼状胬肉组Bcl-2启动子DNA甲基化水平与Bcl-2 mRNA相对表达量呈显著负相关( r=-0.635, P<0.01)。CTCF干扰组CTCF及Bcl-2 mRNA相对表达水平为0.37±0.03和0.53±0.06,明显低于对照组的1.02±0.06和0.99±0.07,差异均有统计学意义( t=20.035、9.029,均 P<0.01);CTCF干扰组CTCF及Bcl-2蛋白相对表达水平为0.23±0.06和0.56±0.07,低于对照组的0.52±0.05和0.92±0.12,差异均有统计学意义( t=6.914、4.719,均 P<0.01)。CTCF干扰组转染后12、24和48 h细胞活力分别为0.10±0.01、0.17±0.01和0.38±0.04,低于对应时间点对照组的0.12±0.01、0.29±0.01和0.85±0.06,差异均有统计学意义( t=3.718、18.350、15.621,均 P<0.01)。CTCF干扰组Bcl-2启动子DNA甲基化水平为0.75±0.04,明显高于对照组的0.61±0.03,差异有统计学意义( t=-4.472, P<0.05)。 结论:翼状胬肉中CTCF高表达,其可能通过下调启动子DNA甲基化水平介导Bcl-2异常表达。
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编辑人员丨6天前
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口腔黏膜上皮培养与眼表移植的研究进展
编辑人员丨6天前
人角膜上皮细胞由角膜缘干细胞不断补充,从而维持眼表稳态及正常视觉功能。热化学烧伤、Stevens-Johnson综合征等眼表损伤或疾病可导致角膜缘干细胞缺损,严重影响患者视力。当双眼角膜缘干细胞缺损时可考虑非角膜缘性自体上皮组织移植。口腔黏膜上皮细胞是眼表重建的重要种子细胞来源,体外培养构建的细胞片已在临床应用中取得良好效果。本文围绕载体、培养条件及技术等影响口腔黏膜上皮片培养的各种因素,以及细胞片应用于临床眼表移植的优缺点,对利用口腔黏膜上皮治疗角膜缘干细胞缺损的研究进展进行综述,以期为安全有效地重建眼表上皮提供研究方向。
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编辑人员丨6天前
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翼状胬肉术后应用角膜绷带镜的疗效观察
编辑人员丨6天前
目的:观察翼状胬肉术后佩戴角膜绷带镜(CBL)的效果。方法:前瞻性随机对照研究。纳入浙江普陀医院2020年6月至2022年6月行翼状胬肉切除术的80例(80只眼)患者,按随机数字表法分为两组,术后佩戴CBL者为试验组,未佩戴者为对照组,每组各40例(40只眼)。两组患者均行翼状胬肉切除联合自体角膜缘干细胞移植术,术后以妥布霉素地塞米松滴眼液滴眼。分别于术后1 d、3 d及1周采用视觉模拟评分(VAS)评估所有患者疼痛程度,记录两组术后角膜愈合情况、两组角膜创面充血消退时间和角膜创面上皮覆盖时间。对比两组角膜表面规则指数(SRI)、角膜表面不对称指数(SAI)、角膜散光、眼部舒适度、胬肉复发情况和和并发症情况。结果:试验组术后3 d及1周的VAS评分[(3.27±0.87)、(1.39±0.43)分]均低于对照组[(4.18±0.63)和(2.52±0.57)分]( t=5.36、10.01,均 P<0.001)。试验组术后3 d及1周的角膜愈合评分[(2.36±0.27)、(1.08±0.11)分]均低于对照组[(3.18±0.34)、(1.96±0.23)分]( t=11.95、21.83,均 P<0.001)。试验组角膜创面充血消退时间和角膜创面上皮覆盖时间[(4.12±0.74)d、(4.15±0.81)d]均短于对照组[(5.33±0.65)、(5.45±0.86)d]( t=7.77、6.96,均 P<0.05)。术后试验组角膜SRI、SAI和角膜散光值[(0.85±0.15)、(0.43±0.12)和(0.53±0.16)D]均低于对照组[(1.16±0.19)、(0.81±0.15)和(1.04±0.13)D]( t=8.10、12.51、15.65,均 P<0.05)。试验组术后的畏光、异物感、流泪、眼痛、眼痒和分泌物症状评分[(2.13±0.14)、(2.21±0.23)、(1.86±0.13)、(1.89±0.26)、(1.94±0.31)、(1.83±0.22)和(1.45±0.26)分]均低于对照组[(3.06±0.15)、(2.35±0.24)、(2.19±0.27)、(2.18±0.24)、(2.23±0.46)、(2.42±0.31)和(1.56±0.28)分]( t=28.67、2.66、6.97、5.18、3.31、9.82;均 P<0.05)。试验组复发率为5.00%(2/40),对照组复发率为25.00%(10/40),试验组低于对照组( χ2=6.28, P<0.001)。 结论:翼状胬肉术后应用CBL可减轻术后疼痛,促进角膜愈合,改善患者术后不适感,并降低复发率。
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编辑人员丨6天前
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亲属活体角膜缘移植治疗严重角膜缘干细胞缺乏的临床效果
编辑人员丨6天前
目的:观察亲属活体角膜缘移植治疗严重角膜缘干细胞缺乏的临床效果。方法:回顾性自身对照研究。纳入同济大学附属同济医院眼科2015年1月至2017年3月因热及化学烧伤造成的严重角膜缘干细胞缺乏13例(17眼),获取适量其直系血亲或亲兄弟姐妹的角膜缘组织移植至受眼,术后随访22~26(24.12±1.31)个月。结果:17眼中14眼(82.35%)手术成功。末次随访视力(logMAR,BCVA)为0.7(0.6,1.1),优于术前视力1.8(1.6,2.0)( Z=-3.636, P<0.001),末次随访眼表评分为3(2,4)分,优于术前6(5.5,11.5)分( Z=-3.638, P<0.001)。供眼及受眼均未出现严重的眼部并发症。 结论:亲属活体角膜缘移植治疗严重角膜缘干细胞缺乏安全、有效。
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编辑人员丨6天前
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慢性移植物抗宿主病致重症眼表损伤3例
编辑人员丨6天前
例1,患者,男,48岁,因左眼反复发红、磨痛、视力下降2个月及热泪溢出感4 d于2017年1月13日在山东第一医科大学附属青岛眼科医院就诊。患者1年前因骨髓异常增生综合征在外院接受异体骨髓干细胞移植术,术后早期出现脾脏排斥反应,应用抗排斥药物后病情稳定,半年前停药。眼科检查:右眼视力0.1,矫正视力0.2,眼压17 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),球结膜充血,角膜上皮粗糙,晶状体密度增高,其余未见明显异常;左眼视力0.05,不能矫正,眼压T-1,球结膜明显充血,角膜中央穿孔,白色分泌物附着,角膜基质水肿,KP(-),前房浅,前房闪辉(+),瞳孔欠圆,晶状体密度增高,位置前移,眼内窥不入(图1)。左眼溪流试验(+),角膜刮片未见微生物生长。Schirmer Ⅱ试验:右眼3 mm/5 min,左眼4 mm/5 min。诊断:左眼角膜穿孔;双眼干眼(继发性);慢性移植物抗宿主病(chronic graft-versus-host disease,cGVHD),入院后使用抗细菌和抗炎滴眼液及人工泪液点眼。2017年1月14日行左眼穿透角膜移植术(penetrating keratoplasty,PKP),术后佩戴角膜绷带镜。病变角膜细菌培养示克氏库克菌生长,药物敏感性试验示对左氧氟沙星、加替沙星、氧氟沙星、夫西地酸敏感。术后全身应用氢化可的松注射液150 mg静脉滴注,左眼局部应用质量分数0.5%左氧氟沙星滴眼液、妥布霉素地塞米松滴眼液和眼膏、体积分数20%自体血清、质量分数0.3%玻璃酸钠滴眼液,角膜上皮修复后加用他克莫司滴眼液抑制排斥反应;右眼用0.1%氟米龙滴眼液代替妥布霉素地塞米松滴眼液和眼膏,其他药物同左眼。出院眼科检查:右眼视力0.3,矫正视力0.6,球结膜轻度充血,角膜上皮略粗糙。左眼视力0.05,不能矫正,球结膜轻度充血,角膜植片轻度水肿,角膜上皮完整(图1)。术后1个月左眼角膜植片上皮缺损,调整局部用药后未修复,2017年3月2日再次入院。左眼视力0.04,不能矫正,球结膜轻度充血,角膜植片中央轻度混浊,上皮缺损4 mm×3 mm。Schirmer Ⅱ试验:右眼5 mm/5 min,左眼1 mm/5 min。角膜刮片无微生物生长。激光扫描共焦显微镜检查示病灶区大量炎性细胞浸润。诊断:左眼角膜植片溃疡;左眼PKP术后;双眼干眼(继发性);cGVHD,局部用药同右眼出院前,症状无明显缓解,2017年3月3日行双眼下泪点栓塞,角膜仍无明显修复。2017年3月6日行左眼睑缘粘连术,上下睑缘中内、中外1/3做睑缘创面永久性缝合,病情稳定后出院,1周后拆除皮肤缝线,角膜上皮愈合。
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编辑人员丨6天前
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翼状胬肉术后应用绷带式接触镜的临床观察
编辑人员丨6天前
目的:观察翼状胬肉切除联合自体角膜缘干细胞移植术后应用绷带式接触镜的临床效果。方法:回顾性病例研究。濮阳市眼科医院2017年11月至2018年10月行翼状胬肉切除术联合自体角膜缘干细胞移植术者96例(96眼),所有患者分为两组:观察组,术后应用绷带式接触镜组;对照组,术后常规抗炎治疗不用绷带式接触镜组,每组各48例(48眼)。术后随访6个月。结果:术后1天和7天角膜刺激症状评分比较,观察组低于对照组( t=-2.520,-2.989; P=0.024,0.010)。角膜上皮愈合时间两组比较,观察组短于对照组( t=-2.593, P=0.021)。术后不同时间点泪膜破裂时间比较,观察组长于对照组( P<0.05);术后观察组翼状胬肉复发率为0,对照组为2.08%( χ2=1.011, P=0.753)。 结论:应用绷带式接触镜在翼状胬肉术后可缓解角膜刺激症状,有利于眼表修复、稳定泪膜。
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编辑人员丨6天前
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羊膜联合角膜缘干细胞移植治疗眼表疾病的临床效果
编辑人员丨6天前
目的:分析羊膜联合角膜缘干细胞移植治疗眼表疾病的效果。方法:前瞻性随机对照研究。将南阳南石医院于2019年3月至2021年3月眼表疾病82例(82眼)随机分为两组:对照组41例行自体角膜缘干细胞移植,观察组41例在此基础上联合应用羊膜移植。比较两组临床疗效,术前、术后3个月角膜厚度、新生血管面积、泪液分泌试验结果、术后角膜上皮修复用时、视力提升率、术后复发率和手术满意度。结果:观察组治疗总有效率(40/41,97.56%)高于对照组(33/41,80.49%)( χ2=4.49, P=0.034);观察组术后患眼新生血管面积(25.17±6.84)mm 2小于对照组(31.25±5.44)mm 2、泪液分泌试验(10.31±1.08)mm长于对照组(8.64±1.33)mm( t=4.46、6.24,均 P<0.001);观察组患者角膜上皮修复用时(3.17±0.64)d短于对照组(3.81±0.71)d( t=4.29, P<0.001),观察组视力提升率(41/41,100.00%)高于对照组(35/41,85.37%)( χ2=4.49, P=0.021),两组术后1年复发率比较差异无统计学意义( χ2=1.99, P=0.158);观察组对治疗效果满意程度(39/41,95.12%)显著高于对照组(32/41,78.05%)( χ2=5.15, P=0.023)。 结论:眼表疾病应用羊膜联合角膜缘干细胞移植效果良好。
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编辑人员丨6天前
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角膜缘干细胞移植术的研究进展
编辑人员丨6天前
角膜缘干细胞缺乏(LSCD)是角膜缘干细胞数量减少或功能下降导致的角膜上皮细胞稳态失衡,以角膜上皮结膜化为特点的眼表疾病。保守治疗无效的重度LSCD患者常需行角膜缘干细胞移植术(LSCT)进一步治疗。本文就近年来开展的自体角膜缘移植(CLAU)、简化角膜缘上皮移植(SLET)、异体角膜缘移植、体外培养角膜缘干细胞移植(CLET)、体外培养口腔黏膜上皮细胞移植(COMET)5种手术治疗LSCD的研究进展进行综述,为临床提供数据基础。 (中华眼科杂志,2020,56:956-960)
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编辑人员丨6天前
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翼状胬肉切除术后角膜溃疡46例临床分析
编辑人员丨6天前
目的::分析翼状胬肉切除术后角膜溃疡的临床特征,探讨其治疗方案。方法::回顾性系列病例研究。收集2004年1月至2020年12月就诊于山东省眼科医院的继发于翼状胬肉切除术后的角膜溃疡患者46例(46眼)。仔细追溯患者术前全身及局部病史,翼状胬肉切除的手术方式及术后处理等,记录角膜溃疡病变的大小、位置、深浅,角膜缘干细胞是否受损,有无睑球粘连,有无巩膜缺血及熔解,有无病原学感染等。观察患者角膜溃疡的治疗方法及愈后情况。数据采用Wilcoxon秩和检验、卡方检验等非参数检验进行分析。结果::26例行单纯翼状胬肉切除术,17例翼状胬肉切除术中行联合自体干细胞移植术,仅1例术中联合使用抗代谢药物。病原学检测显示无菌性角膜溃疡26例(57%),感染性角膜溃疡20例(43%)。溃疡中心多位于原胬肉附着处,32例累及角巩膜缘,10例合并严重巩膜缺血、坏死。36例患者行穿透性角膜移植和(或)板层角膜移植手术治疗;7例接受包括羊膜移植术、结膜瓣遮盖术、角膜病灶切除术在内的非角膜移植手术治疗;3例患者单纯药物治疗后痊愈。其中非感染性角膜溃疡20例术中联合自体干细胞移植术,感染性角膜溃疡11例将附近结膜移行覆盖。溃疡愈合后最佳矫正视力较治疗前明显提高( Z=-5.901, P<0.001)。 结论::继发于翼状胬肉切除术后的角膜溃疡多发生于胬肉附着处,常伴有睑球粘连、巩膜缺血坏死。彻底清除局部病灶,恢复角膜的完整性及改善角膜缘干细胞功能是治疗角膜溃疡的关键。
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编辑人员丨6天前
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翼状胬肉手术中干细胞移植与应用丝裂霉素C的效果对比
编辑人员丨6天前
目的:对比自体角膜缘干细胞移植与术中应用丝裂霉素C两种手术方式治疗翼状胬肉的效果。方法:前瞻性临床研究。分析郑州人民医院2014年6月至2017年1月共247例单眼、双眼和复发型三类翼状胬肉患者的临床资料。患者随机分为干细胞移植组和丝裂霉素组(MMC组)。术后随访1年观察其手术效果。结果:本研究包括单眼159例,双眼40例,复发者48例。单眼翼状胬肉患者中干细胞组和丝裂霉素组复发率分别为11.25%和20.25%( χ2=2.431, P=0.119);双眼者中两组复发率分别为19.05%和15.79%( χ2=0.000, P=1.000);复发者中两组复发率分别为12.50%和45.83%,丝裂霉素组高于干细胞组( χ2=4.941, P=0.026)。三类翼状胬肉患者中丝裂霉素组间复发型患者复发率高于单眼患者( χ2=6.227, P=0.013)。 结论:复发性翼状胬肉患者干细胞移植术复发率低于术中应用丝裂霉素C者,而在单眼和双眼两类患者中两种手术方式未见显著差别。
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编辑人员丨6天前
