目的 建立同时测定尿中反-反式黏糠酸和苯巯基尿酸的在线固相萃取-液相色谱-质谱测定方法.方法 尿样离心后上机,经在线固相萃取HLB柱(20 mm×3.9 mm×15 μm)净化、富集,经C18柱(150 mm×4.6 mm×5 μm)分析,线性离子阱质谱检测.结果 反-反式黏糠酸和苯巯基尿酸的线性范围为0.0～15.0 mg/L、0.0～500.0 μg/L,相关系数为0.999 8、0.999 9,检出限为3.5、0.1 μg/L,样品加标回收率为103.3％～108.8％,相对标准偏差为2.8％～8.4％.结论 该方法样品前处理只需离心,操作简便快捷、结果准确、重现性好、灵敏高,适用于大批量的苯职业接触人群生物监测指标的检测.

目的 改进高效液相色谱法测定尿液中苯巯基尿酸的方法.方法 尿样经过离心后,取上清液,加入水涡旋15 s,硫酸溶液(50％)涡旋30 s并需在10 min内加入氢氧化钾(7.8 mol/L)溶液涡旋30 s.以氯仿和异丙醇(V/V=5∶1)混合液进行液-液提取,提取液经氮气吹干后,甲醇定容注入液相色谱仪,经EC-C18反相色谱柱(150 mm×4.6 mm,4μm)分离,采用紫外检测器(VWD)检测,以保留时间定性,峰面积定量.结果 本法苯巯基尿酸在200.0μg/L～1000.0μg/L浓度内呈线性,相关系数为0.999 4,以3倍噪音值计算方法检出限为2.0μg/L.在200.0μμg/L～1000.0μg/L内添加低、中、高3个浓度水平,样品加标回收率为95.67％～97.74％;批内精密度为0.41％ ～ 1.56％ (n =6),批间精密度为0.44％ ～2.52％ (n =6).结论 本法简单实用,分析时间短,灵敏度高,定性定量准确,可以满足尿样中苯巯基尿酸的检测要求.

目的 建立分散液-液微萃取-高效液相色谱测定尿液中苯巯基尿酸的方法.方法 采用5 ml尿样,用盐酸调节pH值为1,快速加入200μl三氯甲烷(萃取剂)和800μl异丙醇(分散剂)的混合溶剂,混匀后室温静置5 min,再以12 000 r/min离心5 min,分离出下层有机相,50℃经氮气吹干,残渣用甲醇溶解,经C1s柱(C18柱:250 mm×4.6 mm,4 μm)分离,采用高效液相色谱-紫外检测器检测,以保留时间定性,峰面积定量.结果 本法苯巯基尿酸在0.050 mg/L～1.0 mg/L浓度时呈线性,相关系数为0.999 3,以3倍噪音值估算方法检出限为0.003 mg/L.在0.050 mg/L～1.0 mg/L时添加低、中、高3个浓度水平,样品加标回收率为96.9％～104.9％;批内精密度为2.50％ ～5.74％(n=6),批间精密度为3.52％ ～7.86％(n=6).结论 本法简单实用,有机试剂用量少,灵敏度高,可以满足尿样中苯巯基尿酸检测的要求.

目的 建立腐植酸改性磁性纳米材料分散固相萃取结合高效液相色谱测定尿中苯巯基尿酸(S-phenylmercapturic acid,SPMA)的前处理方法.方法 5 ml尿样用盐酸调节pH为1.0,采用腐植酸改性磁性纳米材料(Fe3O4@HA)进行分散固相萃取,EC-C18色谱柱分离,高效液相色谱分析,紫外检测器检测,以保留时间定性,峰面积和外标法定量.结果 苯巯基尿酸(SPMA)线性范围为0.04～1.00 mg/L,相关系数为0.999 7,以3倍信噪比估算方法检出限为0.012 mg/L,加标回收率为94.2％～ 102.4％,批内、批间精密度分别为2.9％～6.7％、3.1％～7.5％.结论 本方法前处理过程简便快捷,灵敏度和准确度较高,可用于职业接触苯人群尿中苯巯基尿酸的测定.

目的 建立葡萄糖包裹的Fe3O4磁性纳米材料分散固相微萃取结合高效液相色谱测定尿液中苯巯基尿酸的方法.方法 本实验先采用化学共沉淀法制备Fe3O4磁核,再用水热法合成葡萄糖包裹Fe3O4磁核的复合材料.对制得Fe3O4@GLU磁性纳米材料利用红外光谱技术进行表征.对SPMA的分散固相微萃取条件进行了优化,分别考察了吸附时间、吸附剂用量、样品溶液p H值、洗脱剂和洗脱时间.取5 ml尿样,用盐酸调节pH值＜2.0,利用磁性纳米材料进行分散固相微萃取,经C18柱 (C18柱:250 mm×4.6 mm,4μm) 分离,采用紫外检测器检测,以保留时间定性,峰面积定量.结果 本法在0.050 mg/L～1.0 mg/L浓度范围内呈线性,相关系数为0.999 7,方法检出限为0.003 mg/L.样品加标回收率为96.1％～104.7％;批内精密度为2.36％～3.95％ (n=6),批间精密度为7.60％～8.42％ (n=6).结论 本法简单实用,有机试剂用量少,灵敏度高,可以满足尿样中苯巯基尿酸检测的要求.

目的 建立硅藻土改性磁性纳米材料分散固相萃取-高效液相色谱测定尿中苯巯基尿酸.方法 尿样经过离心后,取5.0ml上清液,用盐酸调节pH值为1.0,经硅藻土改性磁性纳米材料进行分散固相萃取后,分离出有机相,残渣用甲醇溶解并定容后注入高效液相色谱仪,经EC-C18反相色谱柱(150 mm ×4.6 mm,4 μm)分离,紫外检测器检测,以保留时间定性,峰面积外标法定量.结果 本法中苯巯基尿酸在0.050 mg/L～1.0 mg/L内线性关系良好,相关系数为0.9997,以3倍噪音值计算方法检出限为0.028 mg/L,在0.050 mg/L～1.0 mg/L内添加低、中、高3个浓度水平,样品加标回收率为94.9％～108.0％,批内精密度和批间精密度分别为4.6％～9.8％(n=6)与4.3％～8.9％(n=6).结论 本方法简便快捷,分析时间短,灵敏度高,可用于职业接触苯人群尿中苯巯基尿酸的检测.

目的 建立尿中苯、甲苯及二甲苯的生物标志物苯巯基尿酸(S-PMA)、反-反式粘糠酸(t,t-MA)、8-羟基-2-脱氧鸟苷(8-OHdG)、马尿酸(HA)、2-甲基马尿酸(2-MHA)、3-甲基马尿酸(3-MHA)及4-甲基马尿酸(4-MHA)的超高效液相色谱-三重四极杆质谱检测方法 .方法 尿样采用甲醇沉淀蛋白法,经稀释后进样,通过HSS T3色谱柱对待测化合物进行分离;经电喷雾电离源离子化,采用多反应监测模式进行检测;待测化合物通过外标法进行定量.结果 该方法 线性良好,r＞0.999;方法 的检出限和定量限分别为0.01～500和0.02～1 000 ng/ml(以尿样稀释倍数计);平均加标回收率为85.8％～109.9％;批内和批间精密度分别为0.2％～4.5％和0.6％～9.5％;在4℃和-20℃条件下均可保存至少14d.结论 该方法 简便经济,灵敏度高,准确度、精密度和稳定性均可满足日常测试要求,适用于职业接触苯、甲苯及二甲苯人群尿中S-PMA、t,t-MA、8-OHdG、HA、2-MHA、3-MHA及4-MHA的测定.

[背景]苯是公认的致癌物.随着生产工艺的发展和劳动防护设施的改善,许多作业场所的空气苯浓度已经远低于职业接触限值,但研究发现,低水平苯接触依然会对职业人群健康造成影响.[目的]研究低浓度苯职业接触工人尿液中苯巯基尿酸(S-PMA)与8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的分布特征.[方法]采用横断面调查方法,以206名扬州某涉苯汽车制造工厂2018-2019年间参加职业健康检查的职工作为研究对象;其中120名汽车喷漆车间作业工人作为接触组,86名非车间工作的文职管理人员作为对照组.收集研究对象的职业接触与健康检查资料及外周血和尿液样本.对血液样本进行血常规检查;通过高分辨四级杆飞行时间质谱仪检测尿中S-PMA含量,并以尿肌酐校正后的S-PMA测量值作为内暴露指标;采用比色法检测血清中脂质过氧化物丙二醛(MDA)、尿液中8-OHdG水平.校正性别、年龄、体重指数、吸烟及饮酒情况后,分析苯接触对工人外周血象和氧化损伤的影响,并分析S-PMA与8-OHdG的相关性.以8-OHdG水平作为应变量,S-PMA水平及可能影响8-OHdG水平的因素为自变量,进行多元线性逐步回归分析.[结果]该厂产苯环节主要发生在调漆、喷漆过程中.虽各接苯岗位苯接触浓度没有超过职业接触限值,但接触组工人尿液中S-PMA的中位数为12.21 μg·g-1(以Cr计,后同),高于对照组(4.80 μg·g-1,P＜ 0.001);接触组MDA、8-OHdG的中位数分别为11.19 μmol·L-1、169.18 ng·g-1,均高于对照组(MDA、8-OHdG的中位数分别为9.08 μmol·L-1、91.43 ng·g-1,P＜0.001);接触组红细胞异常率为10.0％,高于对照组(2.3％,P＜0.05).调整吸烟因素后,在吸烟与不吸烟人群中,接触组S-PMA和8-OHdG水平均高于对照组(P＜0.05);仅在不吸烟人群中,接触组MDA水平高于对照组(P＜0.05);血常规指标异常率在吸烟与不吸烟人群中差异无统计学意义.Spearman相关分析结果显示,8-OHdG与S-PMA呈正相关(r=-0.488,P＜0.05);多元回归分析显示尿液中S-PMA的检出水平与8-OHdG水平呈正向关联,其b(95％CI)为9.942(9.337～10.547), P＜0.001.[结论]职业低浓度苯接触情况下,工人尿中苯接触内暴露标志物S-PMA水平仍升高,而S-PMA与DNA损伤标志物8-OHdG呈正相关,作业工人体内氧化损伤增加.即使在低浓度下,苯接触仍有较高的健康风险.

目的 建立固相萃取-高效液相色谱串联质谱(high performance liquid chromatographic tandem mass spectrometric,HPLC-MS/MS)同时测定尿液中8种芳香化合物代谢物(苯巯基尿酸、甲基马尿酸、N-乙酰基-S-苯基-L-半胱氨酸、苯乙醛酸、苯乙醇酸、对氨基酚、对硝基酚和1-羟基芘)的方法.方法 取1 mL尿液,加入20μLβ-葡萄糖醛酸酶和1 mL乙酸铵缓冲溶液,在37℃孵箱中酶解20 h.酶解后混匀,取适量酶解液注入PrimeHLB固相萃取柱净化,4 mL乙腈洗脱,洗脱液氮吹至干,用0.20 mL甲醇复溶后进样HPLC-MS/MS系统分析.高效液相色谱分离采用反相C18色谱柱(2.1 mm×150 mm,3.5μm),流动相A为含体积分数0.1％甲酸的水,流动相B为甲醇,采用梯度洗脱,流速为0.2 mL/min.质谱采用正、负离子交替扫描方式,多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)模式检测,内标标准曲线法定量.结果 8种代谢物在1～100 ng/mL范围内线性良好,相关系数均大于0.995,测定的精密度(relative standard deviation,RSD)在0.05％～9.95％之间,8种代谢物的检出限在0.041～0.12 ng/mL范围内.将所建立的方法用于尿样分析,加标回收率为80.1％～114.0％.结论 所建立的方法灵敏、快速、准确,适用于普通人群和职业人群的芳香化合物生物监测评估.