运用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱质谱(UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS)技术及超高效液相色谱串联三重四极杆质谱(UPLC-MS/MS)对小柴胡颗粒化学成分及大鼠口服后的入血成分进行鉴定.采用CORTECS UPLC C18+色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.6 μm),乙腈-0.1％甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,在电喷雾离子源正、负离子模式下采集数据后与对照品比较保留时间、精确相对分子质量、二级离子碎片以及参照相关文献进行化学成分鉴别;通过皮下注射干酵母建立大鼠发热模型后,灌胃给予正常组及模型组大鼠小柴胡颗粒,给药后于不同时间点眼眶静脉取血,分离血浆,在多反应监测模式(MRM)下进行扫描鉴定入血成分.从小柴胡颗粒中共初步鉴定出112种化学成分,包括63种黄酮类、31种皂苷类、6种有机酸类、4种苯丙素类、3种氨基酸类以及5种其他类化合物;从血浆中鉴定得到18个入血原型成分.该研究鉴定了小柴胡颗粒化学成分及入血成分,为进一步的药效物质基础及质量控制研究奠定了基础.

目的:建立同位素稀释液相色谱串联质谱法（ID-LC/MS/MS）测定人血浆甲氧基去甲肾上腺素的候选参考方法，并对方法性能进行评价。采用该方法对室间质量评价计划样品进行定值，初步评价血浆甲氧基去甲肾上腺素的检测现状。方法:采用甲氧基去甲肾上腺素同位素标准溶液为内标，重量法进行取样，标准曲线法进行定量；采用蛋白沉淀结合弱阳离子固相萃取进行前处理，采用超高液相色谱耦联三重四极杆质谱仪进行液质联用分析。根据相关EP文件对方法的特异性、基质效应、检测限、定量限、精密度、正确度和不确定度等性能指标进行了评价。采用该方法对2020年国家卫生健康委临床检验中心甲氧基去甲肾上腺素室间质量评价计划样品进行定值，以该定值结果为靶值，生物学变异最佳可允许总误差标准为评价限，对实验室的检测质量进行评价。结果:方法特异性良好，干扰物和基质效应均不影响检测结果。血浆甲氧基去甲肾上腺素测定的检测限及定量限分别为1.08 pg/g和3.54 pg/g，批内变异系数（ CV）和批总 CV分别为0.43%~1.10%、0.61%~1.42%，相对回收率为98.5%~101.9%，4种血浆样品的相对扩展不确定度分别为3.10%、2.34%、2.16%、1.73%。室间质量评价计划结果显示，实验室测定202013和202014样品的及格率分别为80%和85%。 结论:本研究建立了ID-LC/MS/MS测定人血浆甲氧基去甲肾上腺素的候选参考方法，方法准确、精密、简便，有望作为血浆甲氧基去甲肾上腺素测定的参考方法，可应用于室间质量评价计划样本的定值。

目的:通过建立工作场所空气中活性药物成分的现场采集和实验室检测方法，实现对常见9种典型活性药物成分的定性、定量分析。方法:于2021年12月，配制9种分析物混合液，后制成气溶胶状态进行模拟采样。选择玻璃纤维滤膜作为采样介质，以2.00 L/min的速率对模拟现场样进行15min采气收集，并将得到的滤膜样品于25%乙腈/75%甲醇洗脱液中洗脱，以液相色谱-三重四级杆质谱联用仪对洗脱液进行定性、定量分析。结果:本方法可有效采集空气中的活性药物成分，平均采样效率≥98.5%，且各项检测参数良好，线性相关系数 r均>0.999 0；各目标分析物最低定量浓度范围为4.00×10 -5~3.33×10 -2 mg/m 3；平均加标回收率范围为97.6%~102.5%。 结论:本方法可同时对空气中9种活性药物成分进行采集，并能够在后续实验室检测中进行准确定性和定量,符合国家测定方法研制标准。

目的:筛选与大鼠膝骨关节炎相关的差异代谢物及其代谢通路，为深入研究骨关节炎生物标志物提供线索。方法:60只雄性SPF级SD大鼠按体质量（300 ~ 350 g）采用随机数字表法分为模型组和对照组，每组30只。实验周期分别为4、8和12周，每个周期每组10只大鼠。模型组大鼠左侧膝关节采用改良Hulth法行造模手术，5 d后，驱赶大鼠使之活动，每天30 min。实验期间，两组大鼠均饲喂普通固体饲料、自由饮用自来水。实验期满，采集大鼠膝关节和血液样本。采用苏木素-伊红（HE）染色观察膝关节组织病理学变化，超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱仪（UPLC-Q-TOF-MS）检测血清中小分子代谢物，并通过多元统计分析和数据库比对，筛选与骨关节炎相关的差异代谢物及其相关代谢通路。结果:模型组大鼠膝关节软骨变薄，表层粗糙、缺损或剥脱，软骨细胞变性、坏死、缺失，病变随实验周期延长而加重。筛选出11个与骨关节炎相关的血清差异代谢物，分别为硒代半胱氨酸、6-羟褪黑素、γ-谷氨酰半胱氨酸、花生四烯酸、二氢神经鞘氨醇、白三烯A4、白三烯B4、11，12-环氧-二十碳三烯酸（11，12-EpETrE）、溶血磷脂酰胆碱、神经酰胺和N-花生四烯酰甘氨酸。其中，实验4周时筛选出9个，与对照组比较，模型组5个高表达，4个低表达；实验8周时筛选出8个，与对照组比较，模型组2个高表达，6个低表达；实验12周时筛选出8个，与对照组比较，模型组5个高表达，3个低表达。筛选出2条与骨关节炎密切相关的代谢通路，分别为鞘脂代谢通路和花生四烯酸代谢通路，其中，二氢神经鞘氨醇和神经酰胺归属到鞘脂代谢通路，花生四烯酸、白三烯A4和白三烯B4归属到花生四烯酸代谢通路。结论:骨关节炎疾病进程可以影响血清代谢物谱的构成和水平。11个血清差异代谢物涉及鞘脂代谢通路和花生四烯酸代谢通路，与骨关节炎的发生发展相关。

目的:建立一种基于高效液相色谱串联质谱技术的测定大鼠血浆中伐地那非浓度的方法，并评估其可行性。方法:采集正常Sprague-Dawley大鼠血浆样本。采用Phenomenex Synergi Polar-RP 80 A色谱柱（2.0 mm×50 mm，4 μm），柱温30 ℃，流动相A为0.1%甲酸水溶液，流动相B为0.1%甲酸乙腈溶液，流速为0.4 ml/min；质谱采用API 4000Qtrap三重四极杆质谱仪的正离子多反应监测模式监测，伐地那非和内标监测离子质荷比分别为489.3（Q1通道）/151.2（Q3通道）和466.4（Q1通道）/234.2（Q3通道）；西沙必利为内标，检测大鼠血浆中添加的伐地那非浓度。然后评估该方法检测伐地那非浓度的专属性、线性及定量范围、精密度和准确度、基质效应、稳定性。结果:在选定的色谱和质谱条件下，伐地那非和内标的保留时间分别为2.62和2.80 min，峰形良好。该方法在0.2~200 ng/ml浓度范围内线性良好。该方法检测伐地那非的批内精密度（%CV）和准确度（%DEV）分别在1.5%~9.7%和-6.8%~6.6%之间。批间精密度和准确度分别在3.1%~8.4%和-3.7%~4.6%之间。均在要求的范围内。本样品处理方法，伐地那非的提取回收率在88.2%~104.6%之间，符合提取回收率的考察要求。该样品处理方法，伐地那非各质控浓度经内标归一化的基质效应因子（MF）分别为1.04、0.85、1.04，变异系数（%CV）在1.7%~10.7%之间，符合基质效应的考察要求。伐地那非的短期稳定性、长期稳定性、4次冻融循环稳定性的偏差都在±15%以内，变异系数均在5%以内。结论:本研究建立的高效液相色谱串联质谱法特异性好、准确性高，可用于检测大鼠血浆伐地那非浓度。

目的:探讨伴有自杀意念的抑郁症患者犬尿氨酸代谢通路是否存在异常，及与临床症状的动态关系。方法:根据DSM-5诊断标准前瞻性纳入2019年7月至2022年7月于上海市精神卫生中心心境障碍就诊的68例抑郁症患者，其中男28例，女40例，年龄［ M（ Q1， Q3）］为22.0（17.3，47.8）岁。根据贝克自杀意念量表（Beck Scale for Suicide Ideation，BSI）第4、5题认为是否有“弱”或“中等到强烈”的自杀意念将抑郁症患者分为伴自杀意念的抑郁症组（ n=41）和不伴自杀意念的抑郁症组（ n=27）。同时网络招募性别匹配的健康对照者72名，其中男29名，女43名，年龄为25.5（24.0，36.8）岁。使用24项汉密尔顿抑郁量表（Hamilton Depression Rating Scale-24，HAMD 24）、汉密尔顿焦虑量表（Hamilton Anxiety Rating Scale，HAMA）、BSI分别评估抑郁症患者的抑郁症状、焦虑症状及自杀意念；并采集空腹静脉血检测所有受试者的血浆犬尿氨酸代谢物水平。对伴自杀意念的抑郁症患者进行随访，在第2、4周末重复抑郁症状、焦虑症状及自杀意念的评估和外周犬尿氨酸代谢物的检测。使用超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪测定血浆中犬尿氨酸代谢物的水平。对血液学指标对数转化后进行 Z-score标准化，不同代谢物的多重比较使用误报率校正。分析基线犬尿氨酸代谢物与量表分之间的关系；采用线性混合效应模型分析随访过程中犬尿氨酸代谢物与量表分的关系。 结果:抑郁症患者的外周吡啶甲酸（0.39±0.87比-0.23±1.09， t=3.89）、3-羟基犬尿氨酸与犬尿氨酸比值（3-hydroxykynurenine/kynurenine，3-HK/KYN）（0.38±0.85比-0.09±1.01， t=2.98）和3-HK（0.31±0.81比0.14±1.04， t=2.78）低于健康对照（均 P<0.05）。在伴或不伴自杀意念的抑郁症患者之间，犬尿氨酸代谢物之间的差异无统计学意义（均 P>0.05）。在伴有自杀意念的抑郁症患者中，基线HAMD 24、HAMA评分均与血浆3-HK（HAMD 24： r=0.38；HAMA： r=0.39）和3-HK/KYN（HAMD 24： r=0.34；HAMA： r=0.37）水平呈正相关（均 P<0.05）。纳入年龄、性别因素后，对该组患者的随访量表评分与犬尿氨酸代谢物水平建立线性混合效应模型，结果显示HAMA评分在随访过程中对3-HK/KYN的正向影响具有统计学意义（ B=0.04， t=2.46， P<0.05）。 结论:抑郁症患者存在犬尿氨酸代谢通路异常，3-HK及3-HK/KYN与伴有自杀意念的抑郁症患者的抑郁、焦虑水平存在相关关系，其中3-HK/KYN代表的犬尿氨酸-3-单加氧酶的活性与焦虑水平存在动态关联。

目的:建立一种稳定、灵敏的液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）检测人血浆12种神经酰胺方法。方法:收集2021年10月至2022年10月在遵义医科大学及其各附属医院健康体检的438名表观健康人群，建立12种神经酰胺生物参考区间。采用氘代同位素作为内标，使用ACQUITY UPLC BEH C18（2.1 mm×50 mm，1.7 μm）色谱柱进行分离，流动相为水（含0.1%甲酸）和异丙醇：乙腈（1∶1，v/v，含0.1%甲酸），流速0.4 ml/min，梯度洗脱。使用Qlife Lab 9000 Plus三重四极杆质谱建立LC-MS/MS检测12种神经酰胺的方法。并从线性、定量下限、精密度、回收率和稳定性几个方面对该方法进行性能评价。结果:该方法通过了线性、定量下限、回收率、精密度、稳定性的性能评价。12种神经酰胺批内和批间精密度为1.3%~14.3%，正确度通过加标回收实验验证，回收率在91.9%~111.0%，最低定量下限范围为0.001~0.100 μmol/L，标准曲线显示出良好的线性关系（ r>0.990），稳定性实验显示12种神经酰胺在生物基质中及不同条件处理后规定时间内稳定。12种神经酰胺建立了各自相应的生物参考区间，分别为0.103~0.326 μmol/L［Cer（d18∶1/16∶0）］、0.018~0.098 μmol/L［Cer（d18∶1/18∶0）］、0.933~3.919 μmol/L［Cer（d18∶1/24∶0）］、0.243~1.072 μmol/L［Cer（d18∶1/24∶1）］、0.001~0.007 μmol/L［Cer（d18∶1/14∶0）］、0.022~0.095 μmol/L［Cer（d18∶1/20∶0）］、0.185~0.835 μmol/L［Cer（d18∶1/22∶0）］、0.003~0.022 μmol/L［Cer（d18∶0/16∶0）］、0.001~0.016 μmol/L［Cer（d18∶0/18∶0）］、0.017~0.156 μmol/L［Cer（d18∶0/24∶0）］、0.008~0.074 μmol/L［Cer（d18∶0/24∶1）］、0.106~0.721 μmol/L［LacCer（d18∶1/24∶1）］。 结论:本研究建立了可靠的检测人血浆12种神经酰胺的LC-MS/MS检测方法，适合于临床应用。

目的:建立QuEChERS净化后超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用（UPLC-MS/MS）法测定尿液中三氯卡班（TCC）和三氯生（TCS）含量。方法:于2022年5月，将尿液样品经乙腈提取，QuEChERS净化，Waters Acquity UPLC BEH C18柱（100 mm×2.1 mm，1.7 μm）分离，以水-乙腈体系为流动相梯度洗脱，流速为0.3 ml/min，采用电喷雾负离子模式和多反应监测扫描方式检测，内标法定量分析，对建立的方法进行方法学验证。结果:TCC和TCS的线性范围为分别为0.5~100.0 μg/L和1.0~100.0 μg/L，相关系数分别为0.999 7、0.999 1；方法检出限分别为0.17和0.33 μg/L，定量限分别为0.5和1.0 μg/L；在2.0、10.0、80.0 μg/L 3个加标水平下，TCC和TCS的加标回收率分别为100.1%~102.8%和96.7%~108.6%，相对标准偏差分别为4.9%~6.7%和4.1%~8.3%。结论:QuEChERS-UPLC-MS/MS法操作简便、快速、灵敏、重现性好，可用于职业人群TCC和TCS暴露水平的同时快速准确检测。

目的:建立基于超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）多反应监测（MRM）模式的温心方中人参皂苷Rb1、肉桂酸、芍药苷及小檗碱同时定性定量的分析方法，为温心方新药研发提供评价方法。方法:采用Waters ACQUITY UPLC TM HSS T3（2.1 mm×100 mm，1.8 μm）色谱柱，流动相为甲醇-0.03%甲酸水溶液，梯度洗脱，利用三重四极杆在MRM扫描模式下检测，以保留时间及相对丰度比（定性离子对/定量离子对）定性，以定量离子对峰面积进行定量研究。 结果:温心方中4种有效成分均被定性检出且线性关系良好；准确度、精密度、重复性、稳定性良好；回收率为96.24%~104.19%， RSD为1.29%~3.27%。 结论:该方法简便、准确、快速、灵敏，可用于温心方中4种有效成分的定性定量研究。

目的:分析北京市新生儿脐带血中邻苯二甲酸酯代谢物含量与新生儿出生指标的关联。方法:于2015 年2—7月，在北京市海淀区妇幼保健医院招募符合标准的待产孕妇及其新生儿为研究对象，共纳入161对孕妇及新生儿。问卷调查孕妇年龄、吸烟、饮酒等人口学信息，并在分娩后采集脐带血。采用超高效液相色谱-三重四极杆质谱仪测定脐带血邻苯二甲酸酯代谢物含量，并采用多元线性回归模型分析其与新生儿体重、身长和出生体重指数的关联。结果:161名孕妇年龄为 （30.3±3.0）岁；161名婴儿体重为（3 447.2±413.0）kg，身长为（50.2±1.1）cm，出生体重指数为（26.7±2.2）kg/m 3，男婴占51.6%（83名）。脐带血中检出的7种邻苯二甲酸酯代谢物：邻苯二甲酸甲酯、邻苯二甲酸异丁酯、邻苯二甲酸丁酯、邻苯二甲酸单-2-乙基己酯、邻苯二甲酸单（2-乙基-5-氧己基）酯、邻苯二甲酸单（2-乙基-5-羧基戊基）酯和邻苯二甲酸乙酯含量分别为（3.50±0.28）、（2.65±0.47）、（4.31±0.55）、（6.26±0.57）、（1.71±0.13）、（1.10±0.09）、（0.47±0.06）ng/ml。多元线性回归模型分析结果显示，7种邻苯二甲酸酯代谢物含量与新生儿体重、身长和出生体重指数均无关联（ P值均>0.05）。 结论:北京市新生儿脐带血中邻苯二甲酸酯代谢物的含量较低，与新生儿体重、身长和出生体重指数无关联。