山莨菪、洋金花等含莨菪烷类小分子的中药在我国应用已有2 000 余年的历史.莨菪烷类药物属M胆碱受体拮抗剂,是一类可改善微循环障碍的临床常用治疗性药物.本文综述了莨菪烷类药物的药理作用、药代动力学、毒理及临床应用于微循环障碍的研究进展,以期为深入解析莨菪烷类药物与微循环障碍性疾病的关系以及莨菪烷类药物的临床应用提供依据.

天仙子是茄科植物莨菪Hyoscyamus niger L.干燥成熟的种子,为毒性中药,具有解痉、平喘、镇痛、安神之功效.据报道,天仙子中有一百多种化学成分,主要包括生物碱类、苯丙素类、木脂素酰胺类、甾体类、黄酮类、挥发油、脂肪酸、酚酸等.现代研究表明,天仙子提取物具有解痉、抗中枢神经退行、保护心血管、抗炎、镇痛、抗菌等多种药理活性,莨菪烷类生物碱是天仙子解痉和镇痛作用的主要活性成分,也是其产生毒性的主要原因.本文对天仙子的化学成分及药理作用进行系统综述,以期为其进一步开发利用提供借鉴.

为探寻阿纳其根的生物活性成分,对其抗肿瘤活性部位化学成分进行了研究.结果表明,主要抗肿瘤活性部位为二氯甲烷部位和乙酸乙酯部位.从阿纳其根的二氯甲烷部位和乙酸乙酯部位共分离得到10个单体成分,其中,包括7个N-烷基酰胺类生物碱、1个香豆素和2个黄酮苷.分别为十四-2E,4E,8E-三烯酸-4-羟基苯乙胺(1)、十-2E,4E-二烯酸异丁基胺(2)、十一-2E,4E-二烯-8,10二炔酸苯乙胺(3)、十四-2E,4E-二烯酸-4-羟基苯乙胺(4)、十四-2E,4E-二烯-8,10-二炔-异丁基胺(5)、十-2E,4E-二烯酸苯乙胺(6)、十二-2E,4E-二烯酸苯乙胺(7)、异莨菪亭(8)、槲皮素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(9)、异鼠李素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(10).活性部位分离得到的化合物1为1个新的化合物,化合物2～4,化合物8～10为首次从该植物中分离得到.

某些藏药植物药中的活性成分同时也是毒性成分,需要在使用中确切了解其作用机制及代谢途径.毒性较大的藏药植物药,其内源性毒性成分主要为生物碱,如乌头类、甲基牛扁碱等二萜生物碱、莨菪烷类生物碱、马钱子碱、士的宁、罂粟碱和苦马豆素等.藏药植物药中具有代表性的内源性生物碱类毒性成分多存在于根、种子和果实中,多因其剧毒或高毒化学物本质,表现出神经毒性和心脏毒性.一般经去烷基、羟基化和水解等Ⅰ相代谢过程及与葡萄糖醛酸、磺酸结合等Ⅱ相代谢过程,产生多种高极性和毒性减弱的代谢产物,排出体外.多种生物碱的中毒剂量与治疗剂量相近,藏药典籍中常采用炒制、奶制、青稞酒制和诃子配伍等减毒后入药.本文针对包括乌头类二萜双酯、莨菪烷和马钱子碱等在内的5类12种生物碱,着重评述其代谢转化、减毒和安全性评价特点,以期为制定藏药植物药内源性毒性成分限量、临床用药和减毒治疗提供全面参考.

目的 提高药用植物颠茄Atropa belladonna有效成分的产量,为颠茄在实际生产中提供经济高效的处理方法,为相关药用植物次生代谢的机制研究提供基础性参考.方法 通过向培养基中添加4种不同诱导子,包括茉莉酸甲酯(MJ)、硝酸银(AgNO3)、水杨酸(SA)、酵母提取物(YE),研究诱导子对颠茄毛状根有效成分的积累及代谢途径中的关键酶基因1,牛丁二氨-氮-甲基转移酶(putrescine N-methyl transferase,pmt)基因、托品酮还原酶-Ⅰ(tropinone reductase-Ⅰ,trⅠ)基因和莨菪碱6-β-羟化酶(hyoscyamine-6-β-hydroxylase,h6h)基因表达的影响.实验将0.5 g新鲜颠茄毛状根接种于盛有B5液体培养基的三角瓶中,暗培养12d后,将培养基更换为含有诱导子的4种新培养基,相同条件下再培养2d后采集毛状根样品,测定每瓶毛状根的鲜质量、干质量、部分生理指标、托品烷类生物碱的量及3种关键酶基因的表达量.结果 MJ抑制了颠茄毛状根的生长及托品烷类生物碱的产生,pmt、trⅠ基因的表达量与对照组相比也有所下降;AgNO3虽然抑制了毛状根的生长,但却显著提高了托品烷类生物碱的含量,同时pmt、trⅠ、h6h基因的表达量均升高;SA对颠茄毛状根的生长影响不显著,但使东莨菪碱的含量提高;YE对颠茄毛状根的生长及托品烷类生物碱的含量均有促进作用,pmt、trⅠ、h6h基因的表达量也相应升高.结论 AgNO3是提高颠茄毛状根中托品烷类生物碱含量的最佳诱导子,YE在促进颠茄毛状根生长的同时也可促进其次生代谢.推断诱导子通过调控某种或某几种关键酶基因的表达来影响生物碱的代谢合成,为生产中提高颠茄毛状根药用成分含量提供了可参考的方法.

目的:建立同时测定莨菪浸膏片中阿托品、东莨菪碱、山莨菪碱含量的一测多评法.方法:采用Phenomenex C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇(A)-0.05％磷酸水溶液(B),梯度洗脱,流速为1.0 mL· min-1,柱温为30℃,检测波长为218 nm.以硫酸阿托品为内参物,计算阿托品、东莨菪碱、山莨菪碱的相对校正因子,采用一测多评法和外标法分别测定3个生物碱含量,并比较两者测定结果的差异.结果:经方法学验证,分离度、精密度、重复性、稳定性良好,4批莨菪浸膏片中阿托品、东莨菪碱、山莨菪碱质量浓度分别在分别在22.00～66.01、9.48～28.45、6.32～18.97 μg· mL-1范围内线性关系良好.阿托品、东莨菪碱、山莨菪碱的相对校正因子分别为0.855 1、0.950 3、0.760 5,各相对校正因子重现性良好.一测多评法测得批号为1509559、151004、151005、151006的样品中阿托品含量分别为15.788、26.008、26.254、26.518μg·片-1,东莨菪碱含量分别为7.765、1.117、1.121、1.009 μg·片-1,山莨菪碱含量分别为0.605、0.823、0.654、0.482 μg·片-1,其结果与外标法测定结果基本一致.结论:本法可用于莨菪浸膏片中莨菪烷类生物碱的质量控制.

曼陀罗是茄科曼陀罗属一年生草本植物,其主要成分是莨菪烷类生物碱,有良好的药用价值.但是应用不当会引起中毒.我科近期收治2例以意识障碍为首发症状的曼陀罗中毒患者,对于临床鉴别诊断有意义,现将病例报告如下.

目的 建立莨菪浸膏片的HPLC特征指纹图谱,并对其中阿托品、山莨菪碱、东莨菪碱、樟柳碱4种莨菪烷类生物碱进行定量分析.方法 采用GL Sciences Inc C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以甲醇-0.05％磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱;检测波长218 nm;体积流量1.0 mL/min;柱温30 ℃,利用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2004A版)"和SPSS 19.0建立莨菪浸膏片指纹图谱,并进行相似度评价及定量分析.结果 标记共有峰14个,S1～S4以及S11与对照指纹图谱的相似度大于0.98,其他均大于0.995,表明12批莨菪浸膏片相似度良好.聚类分析结果显示,S1～S6聚为一类,其余样品聚为一类.定量分析结果显示不同批次的莨菪浸膏片中均含有阿托品、东莨菪碱、山莨菪碱,但含量存在一定差异.结论 该方法较好地反映了莨菪浸膏片中的生物碱组成信息,且操作简单,重复性好,为莨菪浸膏片的质量评价提供了更加全面、科学的数据.

以颠茄毛状根为试验材料,向培养基中添加酵母提取物(yeast extract,YE),测定颠茄毛状根氮代谢关键酶的活性,各形态氮的含量,次生代谢前体物质含量,次生代谢途径中关键酶基因相对表达量以及主要托品烷类生物碱(tropane alka-loids,TAs)莨菪碱和东莨菪碱的产量,初步探究YE诱导合成颠茄毛状根次生代谢产物的机制.结果表明:较对照组而言,氮代谢关键酶硝酸还原酶(NR)和谷氨酰胺合成酶(GS)活性显著升高,谷氨酸脱氢酶(GDH) 活性变化不显著.硝态氮,铵态氮含量显著下降,而可溶性蛋白,游离氨基酸,总氮含量均显著升高.此外,YE处理颠茄毛状根提高了次生代谢途径中的前体氨基酸(鸟氨酸和精氨酸) 的含量以及代谢前体腐胺的含量,3个关键酶基因1,4-丁二氨-氮-甲基转移酶基因(putrescine N-methyl transferase,pmt) 、托品酮还原酶-Ⅰ基因(tropinone reductase-Ⅰ,trI)和莨菪碱6-β-羟化酶基因(hyoscyamine 6-β-hydrox-ylase,h6h)的相对表达量也呈现不同幅度的上升,最终导致莨菪碱和东莨菪碱产量的增多,在处理16 d后分别是对照组的3. 09,1. 85倍.这说明YE诱导氮代谢关键酶活性升高使氮代谢加速,为次生代谢中含氮化合物的合成提供更多原料,同时通过调控次生代谢途径中关键酶基因的表达,使莨菪碱和东莨菪碱产量提高.

莨菪碱和东莨菪碱是颠茄中重要的托品烷类生物碱次生代谢产物,具有多方面药理价值.该研究采用土培法种植颠茄实生苗,设置不同浓度茉莉酸甲酯(MeJA)处理,分析不同浓度MeJA对颠茄莨菪碱和东莨菪碱的含量、生物碱合成的上游物质以及关键酶基因表达量的影响.结果表明,MeJA浓度为200 μmol·L-时更有利于颠茄生物碱的积累;对腐胺(Put)及其合成的关键酶活性的测定发现,Put的含量与其合成的关键酶活性的变化基本一致,都随MeJA浓度升高先增加后降低,Put含量在MeJA浓度为200 μmol·L-1时达到最高;对PMT,TRⅠ,H6H表达量的检测发现,200 μmol· L-MeJA处理下叶片和根部TRⅠ,H6H基因均有较高的表达水平,PMT基因表达量无明显变化趋势.以上结果说明,MeJA对颠茄莨菪碱和东莨菪碱合成的调控主要依靠影响关键酶基因的表达量发挥效用,适宜浓度茉莉酸甲酯提高了颠茄叶片TR Ⅰ和根部TR Ⅰ与H6H表达量,从而促进莨菪碱的合成和莨菪碱向东莨菪碱的转化,提高颠茄体内莨菪碱和东莨菪碱的积累.