目的:研究中枢蓝斑区促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)系统在IBS中的作用，探索影响其改变的分子机制。方法:采用母婴分离联合出生后复合应激构建大鼠IBS模型，后采用脑核团微取样的方法获得大鼠蓝斑区的组织样本。应用实时荧光定量PCR技术检测对照组和IBS组大鼠蓝斑核内细胞癌基因 Fos( c- Fos)，以及 CRH和其相应受体促肾上腺皮质激素释放激素受体( CRHR)1、 CRHR2的mRNA表达；同时检测DNA甲基转移酶( DNMT)1、 DNMT3a和 DNMT3b的mRNA表达；采用蛋白质印迹法检测组蛋白甲基转移酶——ASH2样蛋白(ASH2L)，以及SET核癌基因和MYND域2蛋白(SMYD2)的表达。统计学分析采用 t检验。 结果:IBS组的直肠充气压低于对照组[(69.82±5.47) mmHg比(86.86±5.98) mmHg(1 mmHg＝0.133 kPa)]， c- Fos基因的mRNA水平较对照组升高(2.11±0.44比1.00±0.19)， CRH的mRNA水平较对照组升高(1.99±0.35比1.00±0.13)，SMYD2的蛋白表达水平较对照组上调(1.04±0.21比0.61±0.12)，差异均有统计学意义( t＝6.215、2.321、2.797、4.451， P均<0.05)。IBS组大鼠 CRHR1、 CRHR2、 DNMT1、 DNMT3a、 DNMT3b的mRNA水平以及ASH2L的表达与对照组比较(分别为0.96±0.13比1.00±0.26、1.35±0.63比1.00±0.43、1.40±0.61比1.00±0.19、1.39±0.58比1.00±0.21、1.45±0.71比1.00±0.39和0.80±0.19比1.05±0.26)，差异均无统计学意义( P均>0.05)。 结论:母婴分离联合出生后复合应激通过影响蓝斑核内 Crh基因的转录进而造成CRH系统和去甲肾上腺能系统应激调控网络的激活，导致大鼠内脏敏感性增加。 Crh基因转录异常可能与SMYD2介导的组蛋白H3K36的甲基化有密切关系，而与DNA的甲基化修饰无关。

蓝斑是脑内去甲肾上腺素的主要来源，在诸多神经系统疾病中蓝斑存在明显的退化现象，神经黑色素敏感MRI（NM-MRI）因具有实现蓝斑可视化成像的独特优势而备受关注。近年来，许多研究已经开始将这一成像技术应用于不同神经系统疾病的诊断中，如帕金森病、阿尔茨海默病。本文旨在对NM-MRI中蓝斑可视化成像的原理及蓝斑可视化成像在神经系统疾病领域中的应用进展进行综述。

目的 探讨豚鼠被动皮肤过敏(PCA)试验的最佳条件(致敏阳性物质、时间).方法 采用卵白蛋白(ova,0.4%)和牛血清白蛋白(BSA,1%)为PCA抗原,分别于不同激发时间(4h和 24h)对不同生产厂家(潍坊圣诺实验动物养殖有限公司、青岛康大生物科技有限公司、济南金丰实验动物有限公司,简称圣诺、康大、金丰)的豚鼠进行PCA试验,记录蓝斑直径.结果 在ova被动致敏 4h后,3 个生产厂家的豚鼠产生的蓝斑分界清晰且直径均大于 5.0mm(阳性);在ova被动致敏 24h后,3 个生产厂家的豚鼠产生的蓝斑已混在一起、分界不清,无法测量.在BSA被动致敏 4h后,圣诺和康大生产的豚鼠产生的蓝斑分界清晰且直径均大于 5.0 mm,金丰生产的豚鼠仅含抗体血清(1∶2、1∶4,V/V)的蓝斑直径大于 5.0 mm;在BSA被动致敏 24h后,金丰生产的豚鼠的蓝斑分界清晰且直径大于5.0 mm,圣诺和康大生产的豚鼠产生的蓝斑已混在一起、分界不清,无法测量.结论 豚鼠PCA中首选 0.4%ova溶液作为试验抗原时致敏时间宜为 4h.

目的:探究慢性吗啡依赖及戒断大鼠相关脑区八肽胆囊收缩素(CCK-8)表达的变化.方法:利用Wistar大鼠建立慢性吗啡依赖及戒断模型,分为对照组(control)、吗啡依赖组(MOR)、纳洛酮催促戒断组(NAL).Gellert-Holtzman评分评价吗啡成瘾及戒断程度,采用免疫组织化学和原位杂交技术分别检测相关脑区CCK-8蛋白及CCK mRNA表达的变化.结果:戒断组Gellert-Holtzman评分与对照组和吗啡依赖组比较显著增加;前额叶皮质(PFC)、黑质致密部(SNc)、中脑腹侧被盖区(VTA)CCK-8及CCK mRNA表达依赖组较对组明显升高,戒断后表达下降;杏仁核、蓝斑(LC)吗啡依赖后CCK-8及CCK mRNA表达较对照组显著增高,海马齿状回(PoDG)、杏仁核、LC戒断后较依赖组表达进一步升高;尾壳核(CPU)、伏隔核(NAc)、中脑导水管周围灰质(PAG)未检测到CCK-8及CCK mRNA的表达.结论:CCK-8参与了大鼠吗啡依赖与戒断过程并具有脑区特异性.

目的:通过观察茵栀黄注射液和生脉注射液佐剂组与未联用佐剂组在过敏反应发生时的敏感指标的含量变化,研究此类佐剂提高BN大鼠过敏反应动物模型稳定性和灵敏度的能力.方法:将弗氏完全佐剂与双黄连注射液、生脉注射液联用,对BN大鼠进行致敏和激发,比较联用弗氏佐剂组与未加弗氏佐剂组动物在过敏反应发生率、过敏反应发生程度;激发前后血浆中组胺、类胰蛋白酶、β-氨基己糖苷酶、IgE含量及增长率;被动皮肤过敏试验大鼠皮下是否出现蓝斑以及蓝斑面积大小.结果:(1)联用佐剂组过敏反应的发生率以及过敏反应的发生程度均高于未加佐剂组;(2)茵栀黄注射液组激发前后血浆中组胺、类胰蛋白酶、β-氨基己糖苷酶、IgE的含量与生理盐水组比较无显著性差异;联用佐剂后血浆中IgE、组胺以及β-氨基己糖苷酶的含量均升高,与生理盐水组相比具有显著性的差异,激发前后四种指标的变化率均高于茵栀黄注射液未加佐剂组;生脉注射液组激发前后血浆中四种指标的含量与生理盐水组比较无显著性差异;联用佐剂后血浆中IgE、β-氨基己糖苷酶的含量均升高,与生理盐水组相比具有显著性的差异,激发前后四种指标的变化率均高于生脉注射液未加佐剂组;(3)联用佐剂组的被动皮肤过敏反应的阳性率均高于未加佐剂组.结论:弗氏完全佐剂可提高过敏反应动物模型的敏感性,有利于中药注射剂安全性中过敏反应的再评价.

帕金森病(PD)又称震颤麻痹,是最常见的中枢神经系统慢性退行性疾病之一,在全球60岁以上人群中的发病率为1%[1].主要病理改变为黑质多巴胺能神经元选择性变性缺失及路易小体(Lewy Body)形成.PD的主要症状为静止性震颤、肌张力增高、运动迟缓及非运动症状等.目前PD的诊断主要依赖于临床表现(典型的运动症状)及用药反应.据文献报道,黑质致密部多巴胺神经元缺失50%,纹状体多巴胺递质减少80%时才出现典型的运动症状[2],即在典型运动症状出现前黑质早已发生病理改变.Braak和Del[3]发现,α-突触核蛋白免疫阳性神经元(路易体),最先起源于嗅前区和低位脑干(1期),然后进展至脑干嘴部,接着中缝核和蓝斑受累(2期),中脑黑质受累(3期),中间皮质和丘脑受累(4期),大脑皮层相关区域和额叶前部皮层受累(5期).因此PD患者表现为典型运动症状时,大多数已处于疾病中晚期,用药反应较早期PD患者差且疾病进展速度较快.有研究表明,早期PD患者未出现典型临床症状时进行神经保护治疗可以延缓甚至终止疾病的发展[4],因此寻找一种有效、准确、客观的PD诊断检查方法,有助于PD的治疗及愈后.本文对PD早期诊断的影像学检查方法做一综述.

目的 采用功能磁共振成像技术对特发性快速眼球运动睡眠行为障碍(iRBD)患者快速眼球运动期(REM)睡眠调控核心区进行全脑功能连接,探讨iRBD患者上述脑区是否存在功能连接异常.方法 根据入选标准,纳入2014-2017年于郑州大学人民医院神经内科就诊的iRBD患者20例(iRBD组)、正常对照者21名,采用Hoehn-Yahr分期量表和认知量表对受试者进行运动认知功能评估,并对两组行静息态功能磁共振扫描结果进行比较.结果 iRBD组Hoehn-Yahr分期[0(0,0)期]与正常对照组[0(0,0)期,Z=-1.820,P=0.069]相比差异无统计学意义;听觉词语学习测验(AVLT) N1[(3.80±1.67)分]、AVLT N2[(5.10±1.77)分]、符号数字模式测验[SDMT,22.00(20.25,26.00)分]、Rey-Osterrieth复杂图形测验(ROCFT) [33.00(31.25,34.00)分]低于正常对照组[分别为(4.95±1.28)分,t=2.482,P=0.017;(6.43±1.16)分,t=2.848,P=0.007;33.00(29.50,35.50)分,Z=-3.792,P=0.000;35.00 (33.00,36.00)分,Z=-2.351,P=0.019]且差异有统计学意义;连线测验1 [86.5(70.0,100.0)分]、连线测验2[197.0(180.5,211.5)分]评分高于正常对照组[66.0(49.0,91.5)分,Z=-2.373,P=0.018;112.0(99.5,173.0)分,Z=-3.105,P =0.002]且差异有统计学意义.与正常对照组比较,iRBD组右侧蓝斑下核与双侧扣带回(t=-4.173)、双侧额叶[t=-2.965(左侧)、-3.662(右侧)]功能连接减弱;左侧蓝斑下核与全脑功能连接与正常对照组比较差异无统计学意义;中脑导水管周围灰质(vlPAG)与左侧中央前回和中央后回功能连接增强(t =3.930),与右侧额叶功能连接增强(t=4.141).结论 iRBD的睡眠调控核心区域与扣带回、额顶叶皮质功能连接存在异常,可能引起iRBD患者出现认知及运动功能障碍.

目的:观察玉屏风散对过敏性皮肤病动物模型的影响,探讨其治疗过敏性皮肤病的作用机制.方法:被动致敏大鼠模型31只,随机分为模型组7只、醋酸泼尼松组7只、玉屏风散低剂量组7只、玉屏风散高剂量组7只,另有3只作为血清来源,分别灌服生理盐水(10 mL·kg-1)、醋酸泼尼松片水溶液(2.5 mg· kg-1)及玉屏风颗粒水溶液(低剂量组1.35g·kg-1、高剂量组4.05 g·kg-1).3d后,采用抗原攻击并鼠尾静脉注入伊文思蓝,测定体表渗出的蓝斑直径,并测定脾脏指数.结果:连续灌胃给药3d后,与模型组比较,玉屏风散低剂量组和高剂量组对被动皮肤过敏大鼠背部的蓝斑直径均有不同程度的减小;低剂量组1∶5稀释抑制率为11.87％,高剂量组1∶5稀释抑制率为13.76％,两组抑制率比较,差异有统计学意义(P＜0.05).对1∶10稀释的血清处皮斑直径均有缩小作用,低剂量组为9.80％,高剂量组为11.54％,两组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).模型组大鼠脾脏指数为55.72±14.00,醋酸泼尼松组为37.44±9.65,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);玉屏风散高剂量组脾脏指数为44.04±11.04,与模型组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:玉屏风散对Ⅰ型变态反应引起的过敏性皮肤病具有良好的抗过敏作用,并且没有明显的免疫抑制不良反应.

目的 比较氢氧化铝佐剂、弗氏完全佐剂对大鼠被动皮肤过敏试验结果的影响.方法 以卵白蛋白为致敏原,分别加入2种佐剂,研究不同佐剂、不同致敏剂量(10,20 mg/只)、不同致敏途径(腹腔注射,皮下注射)条件下,大鼠被动皮肤过敏试验的敏感性.结果 大鼠给予卵白蛋白剂量分别为10,20 mg/只时,加入氢氧化铝佐剂、弗氏完全佐剂诱导的大鼠被动皮肤过敏试验阳性反应发生率均为100％,且各注射点蓝斑直径均大于5 mm.同等条件下,氢氧化铝佐剂组大鼠过敏反应蓝斑直径大于弗氏完全佐剂组.结论 大鼠被动皮肤过敏试验,卵白蛋白剂量为10 mg/只时,选用氢氧化铝佐剂或弗氏完全佐剂,均能得到较好的阳性结果.

目的 探究全身过敏反应对ApoE-/-C57BL/6小鼠动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)斑块以及肥大细胞数量的影响.方法 15只ApoE-/-C57BL/6小鼠髙脂饮食喂养后随机分成三组:对照组、10μg卵清蛋白(ovalbumin,OVA)免疫组和50μg OVA免疫组.激发过敏反应2 h后处死小鼠,取血取材.异种被动皮肤过敏(passive cutaneous anaphylaxis,PCA)实验检测免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)相对含量,小鼠主动脉HE染色观察AS斑块大小;甲苯胺蓝染色法观察肥大细胞数量.结果 OVA激发使小鼠发生过敏反应,体温明显下降,且50μg剂量组体温下降程度明显大于10μg剂量组;OVA激发过敏反应组的PCA试验为阳性结果,且50μg剂量组蓝斑直径大于10ug剂量组,差异有统计学意义[(8.10±0.60)比(4.20±0.20),t=6.17,P<0.05];10μg剂量组的小鼠斑块大小基本无变化,50μg剂量组的斑块大于对照组,差异有统计学意义[(0.53±0.04)比(0.30±0.02),t=4.95,P<0.05];对照组和10μg剂量组肥大细胞的数量差别不大(P>0.05);50μg剂量组相对对照组可观察到较多数的肥大细胞,差异有统计学差异[(21.20±2.33)比(3.75±1.44),t=5.96,P<0.05].结论 不同浓度的OVA作用ApoE-/-C57BL/6小鼠时可使其产生不同程度的过敏反应,出现较重过敏症状的ApoE-/-C57BL/6小鼠动脉粥样硬化血管有较多的肥大细胞聚集.