目的:建立蜡样芽孢杆菌性小鼠眼内炎模型，探讨蜡样芽孢杆菌强致病性的原因，以及可能与疾病预后相关的因素。方法:选取6~8周龄C57BL/6J品系小鼠，向一侧玻璃体腔注射1 μl含有100 CFU蜡样芽孢杆菌的PBS溶液，向对侧眼球注射1 μl无菌PBS作为对照。以同样方法复制表皮葡萄球菌性眼内炎小鼠模型作为疾病对照。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和ELISA检测炎性细胞因子水平。组织学、视网膜电图和透射电子显微镜检测眼内炎进程和视网膜功能。结果:蜡样芽孢杆菌在C57BL/6小鼠眼中快速生长，且明显快于表皮葡萄球菌，感染12 h后逐渐移至角膜。透射电镜结果显示，蜡样芽孢杆菌感染小鼠眼球后，色素颗粒稀疏的虹膜组织区域中细菌含量较多，而表皮葡萄球菌感染小鼠玻璃体腔后未能在眼前节检测到细菌。视网膜电图结果显示，蜡样芽孢杆菌性眼内炎小鼠的A波、B波幅度在感染6 h后显著降低，感染12 h后检测不出B波信号，且在不同时间点的降低幅度均显著高于表皮葡萄球菌性眼内炎。组织学检测发现，蜡样芽孢杆菌性眼内炎相比表皮葡萄球菌性眼内炎，其前房和玻璃体腔的炎性细胞数量显著增加，浸润程度更高，对组织结构的破坏性更强；ELISA结果显示，蜡样芽孢杆菌性眼内炎的髓过氧化物酶(MPO)活性显著强于表皮葡萄球菌性眼内炎，提示发生更严重的炎症反应。蜡样芽孢杆菌性眼内炎小鼠模型中IL-6、TNF-α和IL-1β的转录水平和蛋白质水平均明显高于表皮葡萄球菌性眼内炎模型。结论:蜡样芽孢杆菌具有快速的生长能力和迁移速率，且眼球感染后可诱发严重的眼内炎及组织结构的破坏，是导致视力丧失的重要因素。

目的:探讨早产儿蜡样芽孢杆菌败血症的临床特征及诊疗情况。方法:选择2011年2月至2021年2月郑州大学第三附属医院新生儿科收治的早产儿蜡样芽孢杆菌败血症患儿进行回顾性分析，分析其临床特征和治疗结局。结果:共收治10例蜡样芽孢杆菌败血症早产儿，男女各5例，胎龄27 +2~35 +2周，出生体重940~2 430 g，起病日龄7~35 d，10例起病时均有反应差、频繁呼吸暂停，肤色发灰8例，发热7例，感染性休克7例，惊厥5例，腹胀4例；合并化脓性脑膜炎7例，合并坏死性小肠结肠炎3例。9例病初有血白细胞和血小板明显下降，C反应蛋白及降钙素原明显升高；7例化脓性脑膜炎中5例合并多发脑软化。死亡4例，存活6例中治愈3例，遗留严重神经系统后遗症3例。 结论:早产儿蜡样芽孢杆菌败血症起病急骤，进展迅速，易发生化脓性脑膜炎，病死率高，即使存活，遗留严重神经系统后遗症几率大。

目的:探讨极低出生体重儿经外周中心静脉置管（peripherally inserted central venous catheter，PICC）导管相关血流感染（catheter-related bloodstream infections，CRBSI）的病原学及临床特点。方法:选择2018年11月至2021年10月郑州大学第三附属医院新生儿重症监护病房收治的PICC后发生CRBSI的极低出生体重儿进行回顾性研究，分析病原菌分布及耐药性。将细菌感染的患儿分为革兰阴性（G -）菌组和革兰阳性（G +）菌组，比较两组患儿的一般情况、PICC留置时间、留置部位、感染时体重、脂肪乳和预防性抗生素使用情况、临床表现及实验室检查结果。 结果:共纳入70例CRBSI患儿，检出70株病原菌。G -菌占50.0%（35/70），以肺炎克雷伯菌（34.3%，12/35）和粘质沙雷菌（34.3%，12/35）为主，肺炎克雷伯菌耐药更严重；G +菌占47.1%（33/70），主要为表皮葡萄球菌（45.5%，15/33），大多为耐甲氧西林菌株（86.7%，13/15），蜡样芽孢杆菌仅占6.1%（2/33），但2例蜡样芽孢杆菌CRBSI均导致患儿很快死亡；真菌占2.9%（2/70）。患儿主要临床表现为呼吸暂停，最常见的并发症为休克，G +菌组与G -菌组在临床表现、实验室检查及预后方面的差异均无统计学意义（ P>0.05），但G +菌组胎龄、感染时脂肪乳用量均大于G -菌组，感染时体重小于G -菌组，差异有统计学意义（ P<0.05）。 结论:新生儿重症监护病房极低出生体重儿PICC引起的CRBSI多为条件致病菌，根据临床表现及常规生化检查难以判断感染菌种，但胎龄较大、体重较小、脂肪乳用量较大者更易感染G +菌。

目的:获得不同方案培养海南岛东北部沿岸表层海水中快速生长型细菌的多样性和丰度，从而为海水来源的细菌样本分离以及海洋源病原菌感染预防提供参考。方法:基于分类设计原则，在2021年3月、6月、10月和12月对海南岛东北部沿岸6个地点的表层海水进行收集采样。然后，使用传统沙门菌、弧菌、类鼻疽伯克霍尔德菌、放线菌以及通用海洋细菌培养方案进行细菌的富集培养。之后，使用16S rDNA一代测序和宏基因组测序鉴定细菌物种分类。结果:5种方案共培养到了1 151株快速生长型可培养细菌，可鉴定为66个属，213个种。在不同培养方案中，芽孢杆菌（ Bacillus）和克雷伯菌（ Klebsiella）具有广泛的鉴别优势，并且数量排名前列。方案1的优势属为埃希菌（ Escherichia）、克雷伯菌（ Klebsiella）以及柠檬酸杆菌（ Citrobacter）。在实验已论证的病原菌中，方案1的优势检出菌为肺炎克雷伯菌（ Klebsiella pneumoniae）和大肠杆菌（ Escherichia coli），数量分别为37株和29株，独特检出菌为肠道沙门菌（ Salmonella enterica），数量为7株。方案2的优势属为变形杆菌（ Proteus）、肠球菌（ Enterococcus）和普罗威登斯菌（ Providencia）。方案2的优势检出病原菌为奇异变形杆菌（ Proteus mirabilis），数量为66株，丰度较高的独特检出菌为霍乱弧菌（ Vibrio cholerae），数量为6株。方案3的优势菌属为克雷伯菌 、埃希菌和不动杆菌（ Acinetobacter）。方案3的优势检出病原菌为肺炎克雷伯菌，数量为53株。丰度较高的独特检出菌是医院不动杆菌（ Acinetobacter nosocomialis），共培养到7株。方案4的优势属为弧菌（ Vibrio）和假交替单胞菌（ Pseudoalteromonas），在分离培养海洋性弧菌上具有优势。方案5的优势属为微小杆菌（ Exiguobacterium） 、葡萄球菌（ Staphylococcus）和芽孢杆菌（ Bacillus）。优势检出病原菌为蜡样芽孢杆菌（ Bacillus cereus）和乳酸乳球菌（ Lactococcus lactis），数量为20株和15株，丰度较高的独特检出菌也是乳酸乳球菌。宏基因组测序发现，肺炎克雷伯菌具有显著优势，基因丰度达到51.11%，其次为 Alcanivorax sp.，占比12.57%。 结论:海南岛东北部沿岸表层海水中的细菌具有丰富的多样性，肺炎克雷伯菌在该区域海水中丰度很高。不同培养方案对不同菌属和病原菌的选择性优势不同，个别海洋细菌需要进一步优化培养条件。

蜡样芽孢杆菌是一种需氧的革兰阳性杆菌，广泛存在于自然环境中，可引起食物中毒，出现呕吐、腹泻等消化道症状，在血液标本中培养出该菌常易被认为是污染菌。但对于免疫功能低下尤其接受肿瘤化疗的患者，需警惕该菌引起的感染，以期早期识别、早期治疗。本文报道1例由蜡样芽孢杆菌引起的败血症、感染性休克，经积极抗感染、抗休克治疗成功患者。

目的 对河北省承德市某幼儿园一起疑似食源性疾病暴发事件进行调查分析,明确污染因子及途径,查清事件发生原因,为预防今后类似事件发生以及处置类似事件提供参考.方法 利用描述流行病学方法分析病例的临床特征、三间分布特征及相关危险因素,运用病例对照研究推测可疑餐次及可疑食品;采集样本进行致病因子实验室检测,并结合卫生学调查情况,综合分析暴发事件污染环节和发生原因.结果 共搜索到病例25例,罹患率为17.40％,症状主要为呕吐、腹痛等.流行曲线提示为点源暴露模式,潜伏期中位数为9.5 h(1～20 h),病例对照研究结果显示,2021年4月8日午餐中大米饭为可疑食物,并在可疑食物大米饭中检出蜡样芽孢杆菌.结论 本次事件为一起因蜡样芽孢杆菌污染大米饭引起的食源性疾病暴发事件,污染原因为剩余大米饭室温下长时间放置,回锅时未加热彻底.

目的 分析北京市部分零售预包装冷藏膳食微生物污染情况以及细菌群落特征.方法 2022年7月,从北京市零售环节采集65件预包装冷藏膳食,采用食品微生物检验国家标准方法分别对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、蜡样芽孢杆菌进行计数,对沙门菌、单核细胞增生李斯特菌和致泻大肠埃希菌进行分离培养,使用宏基因组测序技术对食品中细菌群落进行注释.结果 2件样品大肠埃希菌计数＞10 CFU/g,7件样品蜡样芽孢杆菌计数＞103 CFU/g,所有样品金黄色葡萄球菌计数均＜10 CFU/g.5件样品中分离出单核细胞增生李斯特菌,所有样品中均未分离出沙门菌和致泻大肠埃希菌.使用宏基因组测序注释124个门,621个科,2 315个属,11 631个物种,发现两类预包装冷藏膳食中大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特菌和蜡样芽孢杆菌的相对丰度分别排在物种层面的第3、23、7、121位和第8、5、13和287位.结论 北京市零售预包装冷藏膳食存在致病菌污染,单核细胞增生李斯特菌是微生物控制的重点,传统的培养方法可能低估致病菌的污染状况,结合宏基因组测序技术可以更全面的评估微生物污染状况.

目的 了解淮安市婴幼儿食品中蜡样芽胞杆菌污染现状及其对药物敏感、主要毒力基因携带情况.方法 2022～2023年抽取淮安市七个县区的婴幼儿奶粉及婴幼儿辅助食品共218批,根据GB4789.14-2014《食品安全国家标准食品微生物学检验蜡样芽胞杆菌检验》蜡样芽胞杆菌平板计数法(第一法)进行检测,并进行药物敏感性试验,采用荧光定量PCR对检出的蜡样芽胞杆菌进行溶血性(hblC)基因、非溶血性基因(nheB)、呕吐毒素基因(ces)检测.结果 218批婴幼儿食品中蜡样芽胞杆菌检出39批次,检出率达17.89％.在23种药物敏感性试验中,蜡样芽胞杆菌对庆大霉素、阿米卡星、替考拉宁、万古霉素、氯霉素、利奈唑胺、呋喃妥因、利福平、左氧氟沙星、莫西沙星、诺氟沙星敏感率100％,对环丙沙星、米诺环素、四环素、红霉素、克林霉素、莫匹罗星高浓度、复方新诺明、苯唑西林敏感率分别为97.44％、92.31％、89.74％、82.05％、38.46％、23.08％、20.51％、5.13％,对达托霉素非敏感,对头孢洛林、氨苄西林、青霉素全部耐药.溶血性hblC基因携带率高达100％,非溶血性基因nheB携带率为58.97％,本次试验未检出呕吐毒素基因ces.结论 婴幼儿食品蜡样芽孢杆菌检出率较高且检出菌中携带至少一种毒力基因的概率高达100％.对头孢洛林、氨苄西林、青霉素全部耐药,对达托霉素、苯唑西林等药物敏感性差,可为临床用药方案提供指导.

蜡样芽孢杆菌属于革兰氏阳性菌,分布广泛,具有一定的致病性.不同的蜡样芽孢杆菌携带有不同的毒力因子,这直接决定了蜡样芽孢杆菌株致病性的差异.研究和探讨毒力因子分布以及具体毒素的生物活性有助于对蜡样芽孢杆菌病采取更科学的防控.本研究通过原核表达系统将溶血素BL三亚基重组表达,并对表达蛋白进行了纯化和部分生物学活性的检测.研究结果表明,牛源致病性蜡样芽孢杆菌溶血素BL可以在原核表达系统中成功表达和纯化,牛源致病性蜡样芽孢杆菌溶血素BL拥有溶血性、细胞毒性、很好的免疫原性以及对小鼠具有一定的免疫保护性.本研究表达了溶血素BL三亚基,并探究了牛源致病性蜡样芽孢杆溶血素BL的生物学活性.本研究为进一步揭示蜡样芽孢杆菌溶血素 BL 的致病作用机制和建立针对牛源致病性蜡样芽孢杆菌病的检测方法奠定了理论基础.

目的 了解江北区市售食品中常见致病菌的污染情况,分析危害因素的可能来源,为食品安全风险评估提供科学依据.方法 依据现行有效的国家标准及《重庆市食品安全风险监测工作手册》,2016-2022年随机采集810件市售食品样品,包含即食食品680件和需加工后食用食品130件,对4种常见致病菌(沙门氏菌、单核细胞增生李斯特氏菌、蜡样芽孢杆菌及金黄色葡萄球菌)进行分离鉴定.结果 检测的810件食品样品中,共检出45株致病菌,检出率为5.56%,其中生畜禽肉类食品致病菌检出率最高(53.33%);4种致病菌中以沙门氏菌检出率最高(2.88%);2016-2022年抽检食品样品中致病菌的检出率分别为18.00%、3.75%、0.00%、5.00%、4.55%、8.46%、8.00%;即食食品中致病菌检出率为3.97%,明显低于需加工后食用食品的13.85%(P<0.05).结论 重庆市江北区市售食品中存在不同程度常见致病菌污染风险,其中沙门氏菌污染风险较高,相关部门应加强监管,减少食源性疾病的发生.