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基于超高效液相色谱-质谱技术分析蜱传脑炎患者脂质代谢分布
编辑人员丨2天前
目的:分析蜱传脑炎患者的代谢情况,研究蜱传脑炎对脂质代谢的影响,并阐明可能的发病机制。方法:基于液相色谱-质谱(liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)联用技术对呼伦贝尔地区的50名蜱传脑炎患者及39名健康组样本进行脂质组学研究。利用主成分分析和正交偏最小二乘-判别分析等多元统计分析方法,对患者的血清样本进行分析。结果:在样本中共检测出465个质谱峰,鉴定出磷脂及甘油酯等代谢物。对显著变化( P<0.01,VIP>1,FC>2)的差异物进行鉴定,共筛选出26种差异代谢物,与机体的抗炎等代谢通路存在一定相关性,其中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺等磷脂类整体趋于上调[log 2(Fold change)>0],甘油二酯、甘油三酯等甘油酯类呈现下降趋势[log 2(Fold change)<0]。且所得潜在标志物的AUC值为0.999,可用于疾病组与健康组的诊断。 结论:经病毒侵染后,人体内磷脂代谢及甘油酯代谢通路会发生一定变化,且所得差异代谢物可作为潜在标志物可用于蜱传脑炎疾病诊断,为疾病进一步研究提供理论依据。
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编辑人员丨2天前
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蜱传脑炎病毒感染引起脑组织星形胶质细胞活化和RANTES表达水平升高
编辑人员丨2天前
目的:通过研究蜱传脑炎病毒(tick-borne encephalitis virus, TBEV)感染小鼠引起神经退行性疾病探讨中枢神经系统可能存在的致病机制。方法:小鼠颅内接种TBEV,8 d后处死取脑组织,HE染色观察脑组织病变以验证造模成功;免疫组化检测小鼠脑组织内神经元细胞核(neuronal nuclei, NeuN)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)和调节激活正常T细胞表达和分泌因子(reduced upon activation, normal T cell expressed and secreted, RANTES)的表达,统计阳性细胞数量或分析灰度值计算评分;免疫荧光结合激光共聚焦观察NeuN、GFAP的阳性细胞分布和RANTES、PCNA的表达情况。结果:TBEV感染后小鼠脑组织NeuN阳性细胞数减少,GFAP阳性细胞数增加,星形胶质细胞增殖多于神经元,且RANTES主要由星形胶质细胞产生。结论:TBEV感染会引起脑组织的神经毒性反应,导致神经细胞死亡,星形胶质细胞活化并产生大量趋化因子RANTES。
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编辑人员丨2天前
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森林脑炎的病原学诊断方法及研究进展
编辑人员丨2天前
森林脑炎是经硬蜱叮咬传播的自然疫源性疾病,其病原为黄病毒科中蜱传脑炎病毒。森林脑炎病死率较高,实验室检测对此病诊断有重要意义。本文对森林脑炎的病原学诊断方法及研究新进展进行阐述。森林脑炎实验室检测主要为常规检查、血清学检测、病毒分离、分子生物学检测。森林脑炎病毒血清特异性IgM抗体对早期诊断有重要价值,特异性IgG抗体可作为与其他疾病鉴别的"金标准"。酶联免疫吸附试验或间接免疫荧光法测血清和/或脑脊液中特异性IgM抗体,血清血凝抑制试验或血清补体结合试验,双份血清血凝抑制试验或补体结合试验均有助于早期诊断。分子技术检测方法发展迅速,代谢组学、数字PCR、基质金属蛋白酶亦应用于森林脑炎的早期诊断。
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编辑人员丨2天前
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小鼠抗寨卡病毒包膜蛋白胞外区(Eecto)单克隆抗体的制备
编辑人员丨2024/7/20
目的 制备小鼠抗寨卡病毒(ZIKV)包膜蛋白胞外区(Eecto)单克隆抗体.方法 首先构建ZIKV Eecto的原核表达质粒pET28a-ZIKV-Eecto,将其转化至大肠杆菌感受态BL21后,利用异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达.重组Eecto蛋白以包涵体形式表达,经过变性、复性和超滤获得纯化的蛋白.将Eecto蛋白3次免疫后,获得多克隆抗体血清,进行效价测定,并利用ZIKV prME真核表达质粒转染的HEK293T细胞进行Western blot法和免疫荧光法分析.取效价较高的小鼠脾脏制备脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合,通过有限稀释法获取分泌抗体的杂交瘤细胞,并进一步制备腹水.对腹水进行抗体效价测定、亚类分析.以ZIKV同属病毒日本脑炎病毒(JEV)、黄热病病毒(YFV)、登革病毒1-4(DENV1-4)、蜱传脑炎病毒(TBEV)的Eecto为包被抗原,利用ELISA分析ZIKV单克隆抗体的交叉反应性,进一步对效价高、特异性强的抗体进行特异性分析.结果 成功构建了原核表达质粒pET28a-ZIKV-Eecto,并获得纯化的Eecto蛋白,该蛋白具有良好的免疫原性;制备筛选得到1D6、4F11、4H7、4F8四株单克隆抗体,其中三株(1D6、4H7、4F8)为IgGK型抗体,一株(4F11)为IgMκ,1D6腹水效价大于1∶108;其中1D6和4H7为ZIKV特异性抗体,与其他黄病毒无交叉反应.结论 成功制备了小鼠抗ZIKV Eecto单克隆抗体,为后续建立ZIKV检测方法及致病机制研究提供了实验材料.
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编辑人员丨2024/7/20
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蜱传脑炎病毒感染BALB/c小鼠模型的建立
编辑人员丨2023/8/19
本文建立了蜱传脑炎病毒(tick-borne encephalitis virus,TBEV)感染的动物模型,为筛选抗TBEV药物提供合适的工具.选取BALB/c小鼠,经皮下注射途径接种TBEV,观察其感染症状、体重及生存率.检测小鼠脑、脾、肾组织中TBEV抗原分布、病毒滴度、组织病理和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)、干扰素β(interferon β,IFN-β)mRNA表达水平的动态变化.结果表明,感染小鼠出现弓背、后肢瘫痪的症状;与未感染病毒的小鼠相比,感染小鼠的体重及生存率显著降低;TBEV抗原分布在小鼠的脑、脾、肾组织;脑组织中病毒滴度高且发生病理改变;感染鼠脑、脾、肾组织中TNF-α与IFN-β mRNA的表达水平呈动态变化.本文采用皮下注射攻毒途径成功建立了 TBEV感染的BALB/c小鼠模型.
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编辑人员丨2023/8/19
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中朝边境地区林区鼠类几种重要蜱媒病原体感染的血清学调查
编辑人员丨2023/8/6
为了解东北林区啮齿动物蜱媒传染病感染状况,采用间接免疫荧光法对吉林省集安、辽宁省宽甸林区捕获的野鼠进行7种蜱媒病原体IgG抗体检测,检测鼠血清75份,斑点热立克次体、粒细胞无形体、查菲埃立克体、伯氏疏螺旋体、蜱媒脑炎病毒、新布尼亚病毒、土拉弗菌抗体阳性率分别为13.33%、8.00%、14.67%、4.00%、1.33%、6.67%、1.33%,统计学处理差异非常显著(χ2=19.83,P=0.003).不同鼠种对7种蜱媒病原体抗体检出阳性率各不相同,但差异无统计学意义.75份野鼠标本中,复合感染率为8%.调查地区野鼠中7种蜱媒病原体感染比较普遍,以斑点热立克次体和查菲埃立克体阳性率为高.
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编辑人员丨2023/8/6
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我国森林脑炎临床流行病学研究现状
编辑人员丨2023/8/6
目的:调查了解我国森林脑炎的临床流行病学研究现状.方法:借助解放军医学图书馆资源,输入“森林脑炎”、“自然疫源性疾病”、“蜱传疾病”、“鼠源疾病”、“全国各省(市、区)”等关键词进行检索,将检索到的文献资料按照病原学、流行病学和临床学分类整理并进行统计分析.结果:森林脑炎是由携带森林脑炎病毒的硬蜱叮咬所致的自然疫源性急性传染病,且近年来该病在我国的分布范围逐渐扩大.结论:做好森林脑炎的防治工作,应加强野外防蜱、灭蜱,以降低蜱暴露概率,并且对森林工作人员定期接种森林脑炎疫苗.
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编辑人员丨2023/8/6
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新型布尼亚病毒脑炎一例
编辑人员丨2023/8/6
新型布尼亚病毒是近年来发现的一种可导致以发热、血小板减少以及多器官功能障碍的新型RNA病毒,以蜱为主要传播媒介.我们报道了1例经二代基因测序确诊的新型布尼亚病毒脑炎,临床表现为发热、意识障碍、抽搐等,伴血小板明显降低及酶学指标显著升高,经积极地抗病毒联合对症支持治疗后,预后良好.本文旨在提示,在流行季节里,当发现以发热、意识障碍、抽搐等临床表现起病,且合并血小板明显减少者,需考虑到新型布尼亚病毒相关脑炎的可能,病毒核酸检测及二代基因测序技术有助于及时诊治,减低病死率.
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编辑人员丨2023/8/6
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蜱传脑炎病毒感染引发细胞信号转导的研究进展
编辑人员丨2023/8/6
人类高致病性虫媒传播蜱传脑炎病毒(tick-borne encephalitis virus, TBEV)是蜱传脑炎的重要病原体,疾病表现为伴有或不伴有脊髓炎的急性脑膜炎.TBEV在自然界中的生存依赖于硬蜱和野生脊椎动物宿主.最近30年,TBEV在全球的地理分布呈持续扩张趋势.报道认为,TBEV感染所致细胞异常信号转导是病毒致病的分子机制.文章综述了TBEV感染引发细胞信号转导事件及其与病毒致病机制的关联.
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编辑人员丨2023/8/6
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蜱携带重要人畜共患病毒研究概况
编辑人员丨2023/8/6
蜱能够传播多种病毒,已知有6个病毒科的病毒能通过蜱虫吸血传播,分别是黄病毒科、布尼亚病毒科、正粘病毒科、弹状病毒科、呼肠孤病毒科和非洲猪瘟病毒科.除非洲猪瘟病毒科外,其余病毒均为核糖核酸(RNA)病毒.黄病毒科和布尼亚病毒科病毒可在人类引起脑炎和出血热,因此其意义尤为重要.森林脑炎病毒、波瓦生病毒和克里米亚-刚果热病毒等蜱传病毒引起的人畜共患疾病,近年来在世界上多个地区重新流行.新型蜱传病毒及相关病例不断被发现,例如我国发现的发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)以及国外发现的Heartland和波本(Bourbon)病毒等,引起了医学界的广泛重视.随着人类对自然资源的开发,与自然界蜱的接触机会日益增加,导致蜱传病毒性疾病的发病率上升.为了做好及时应对这种潜在公共健康威胁的准备,本文对蜱及其携带的重要病毒特点进行了综述.
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编辑人员丨2023/8/6
