目的：:观察局部应用螺旋藻多糖提取物（PSP）对大白兔金黄色葡萄球菌性角膜炎的治疗效果。方法：:实验研究。从钝顶螺旋藻干粉中提取PSP，并制备0.01% PSP滴眼液。在45只大白兔右眼角膜中央采用基质注射针基质注射5 μl金黄色葡萄球菌菌液[（ATCC25923，约100个菌落形成单位（CFU）]，构建兔金黄色葡萄球菌性角膜炎模型。角膜基质注射菌液8 h后，将兔随机分成基底对照组、0.9%氯化钠溶液组和PSP组3组，每组15只。0.9%氯化钠溶液组和PSP组分别给予0.9%氯化钠溶液或PSP点眼给药，每15 min点眼1次，持续点眼5次后，改为每30 min点眼1次，持续点眼14次，最后1次点眼后1 h，角膜荧光素钠染色，裂隙灯显微镜下观察兔实验眼角膜上皮缺损情况并给予临床评分，角膜取材后对CFU进行测定；每组随机取3只眼球进行组织病理学观察，采用实时定量PCR检测角膜中炎症因子的表达。组间数据比较采用独立样本 t检验。 结果：:0.9%氯化钠溶液组角膜上皮缺损严重，PSP组角膜上皮缺损较少。与0.9%氯化钠溶液组相比，PSP组临床指标评分明显降低，差异有统计学意义（ t=5.293， P<0.001）。与0.9%氯化钠溶液组相比，PSP组的CFU明显减少，差异有统计学意义（ t=4.383， P<0.001）。组织病理学结果显示0.9%氯化钠溶液组有明显的炎症细胞浸润；PSP组与0.9%氯化钠溶液组相比，眼部结构相对良好，炎细胞浸润较少。实时定量PCR结果显示PSP组角膜组织中炎症因子白细胞介素-6、白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α的表达明显低于0.9%氯化钠溶液组。 结论：:0.01% PSP滴眼液能明显降低金黄色葡萄球菌性角膜炎病变的严重程度和角膜细菌载量，提示PSP对金黄色葡萄球菌性角膜炎可能具有潜在的治疗价值。

磷元素对微藻的生长代谢具有重要作用.为了探究磷源浓度调控海水螺旋藻主要代谢产物合成积累的可行性.以改良的Zarrouk海水培养基为基础,通过设置5种K2HPO3浓度(0.005-0.04 g/L),分析不同磷浓度对海水螺旋藻的生长及生理生化指标的影响.结果显示,海水螺旋藻生物质浓度和蛋白质含量随着磷源浓度的升高而增加,0.04 g/L处理组达到最大值,分别为0.48±0.02 g/L和59.23±0.61％DW;总多糖含量随着磷源浓度增加先显著下降,0.005 g/L处理组含量最高(25.96±1.61％DW);C-藻蓝蛋白、别藻蓝蛋白和总藻胆蛋白含量随着磷源浓度增加,先升后降,0.03 g/L处理组含量最高,分别为14.56±0.99％DW、4.21±0.19％DW和18.77±0.39％DW;叶绿素a与类胡萝卜素含量随着磷源浓度的增加而升高,最高含量分别为1.01±0.01％DW和0.35±0.02％DW;而磷源浓度的变化对总脂含量和脂肪酸组成总体上无显著影响(P>0.05).低磷源浓度有利于多糖积累,高磷源浓度则促进蛋白质和藻蓝蛋白、叶绿素和类胡萝卜素的合成,通过磷源调节可有效定向诱导海水螺旋藻主要高值化产物的合成积累.

功能性便秘是近几年比较常见的一种肠道疾病.越来越多的证据证明一些生物源功能活性物质对于治疗便秘有积极的疗效.螺旋藻富含多糖化合物,且具有广泛的生理功能.本文分析不同剂量螺旋藻多糖(PSP)对地芬诺酯诱导便秘小鼠的治疗效果,检测各组小鼠的体重、首次排便时间和数量、肠道酶活性,菌群组成以及相关功能基因表达等.结果显示,PSP低、中、高剂量组小鼠六小时内排便数量都显著增加(P<0.05),且首次排黑便时间缩短.同时,小鼠的体重增长没有受到显著影响.PSP治疗后,便秘小鼠肠道内木聚糖酶和蛋白酶活性恢复到正常组水平(P<0.05).此外,PSP处理改变了便秘小鼠肠道主要微生物菌群组成,上调了一些有益功能基因的丰度,从而达到缓解便秘的效果.PSP处理上调KO0845(葡萄糖激酶)丰度水平,能维持机体血糖平衡.这些发现表明,PSP饲喂处理可显著改善小鼠肠道微生态,缓解小鼠便秘病症,为解决慢性便秘提供一种有效的食疗方案.

[目的]选育高沥水性的螺旋藻新品系,显著降低藻粉生产中干燥的能耗.[方法]以用于工厂化培植的钝顶螺旋藻ZJU0115为出发品系,用组织匀浆-离心沉降法制得其原生质球,并先以0.6％ EMS处理30 min再用2.4 kGy的60Coγ射线辐照,经含0.02％黄原胶(xanthan gum)的Zarrouk's培养液筛选、藻丝单体分离培养、藻泥持水率和胞外多糖(EPS)等检测及生产培植试验.[结果]获得了一株产量、蛋白质和多糖含量与ZJU0115相当,而藻泥持水率和EPS含量分别下降5.9％和29.7％的突变体,命名为ZJU0115(HD).超微结构与随机扩增多态性DNA标记(random amplified polymorphic DNA,RAPD)分析结果显示,与其亲本ZJU0115相比,ZJU0115(HD)藻丝表面更光滑,可能为酸性多糖的乳白状粘附物也更少;ZJU0115(HD)细胞内的多磷酸盐颗粒显著变小且呈弥散状;基因组DNA在随机引物S90的扩增产物中显示出多态性差异.[结论]ZJU0115(HD)在工厂化培植中生产性状好、高沥水性能稳定,藻泥的干燥能耗降低了近50％,它的育成与应用,有助于推进当前螺旋藻产业迈向高效、节能、绿色、环保发展的新阶段.

急性过量饮酒会导致急性酒精中毒,引起胃出血、诱发心脑血管等疾病,已成为临床上最为常见的症状之一.目前治疗急性酒精中毒的合成药物会对身体产生副作用,急需发掘一种天然活性物质可代替人工合成药物.选择钝顶螺旋藻多糖作为研究对象,探讨螺旋藻多糖对急性酒精中毒损伤的影响.将30只小鼠作为处理对象随机分为空白、模型、阳性对照、低剂量及高剂量组,每组连续灌胃给药21 d(1次/d);第22天除正常组外,其余组通过灌胃方式给予12 mL/kg的50％乙醇,12 h后处死,解剖肾、心、肝及胸腺,研磨取上清,通过检测各组织中过氧化氢酶、谷胱甘肽、丙二醛以及肝中丙氨酸氨基和天冬氨酸氨基转移酶活性,探究钝顶螺旋藻多糖对急性酒精中毒后生理指标的影响.结果表明,与模型组相比,螺旋藻多糖组中的过氧化氢酶和谷胱甘肽含量有显著提升,丙二醛含量显著降低;肝组织中,丙氨酸氨基和天冬氨酸氨基转移酶含量明显下降,恢复至阳性对照组水平.研究结果为治疗急性酒精性中毒引起的肾、心、肝及胸腺的氧化损伤提供了科学依据.

近年来,子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)发病率明显增加,给女性身心健康带来极大危害.螺旋藻多糖(polysaccharides from Spirulina,PSP)是一类具有多重功效的天然生物大分子,具有抗炎、抗细胞增殖等多种功能,药理学上具有治疗EMs的潜力.为了探讨PSP对EMs大鼠血清指标的影响及分子机制,本实验首先通过水提法提取PSP,柱层析法测得纯度为89％;以SD大鼠为模式动物,采用自体移植术成功制备了大鼠EMs模型,通过饲喂不同剂量的PSP,观察对EMs的治疗效果;用Western blot和RT-PCR检测PI3K/Akt/mTOR通路蛋白及mRNA含量.结果表明:与对照组相比,模型组EMs可显著增加大鼠血清中TNF-α、VEGF、MMP-2的水平;与模型组相比,不同剂量的PSP均可缓解EMs症状,具体表现为EMs病灶减小,血清TNF-α、VEGF、MMP-2等含量的降低.模型组中,PI3K、AKT、mTOR在转录水平与蛋白水平表达量均显著升高,而PSP治疗组PI3K、AKT、mTOR在转录水平与蛋白水平表达量显著降低.研究结果提示PSP可能通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路进而改善EMs症状.

目的 研究螺旋藻多糖(SPP)对人急性T淋巴细胞白血病细胞系Jurkat的杀伤作用.方法 取对数生长期Jurkat细胞,分为对照组和1 g/L、2 g/L、5 g/L SPP组.采用MTT法检测SPP对Jurkat细胞增殖的影响,Western blot法检测凋亡蛋白caspase-3、细胞膜表面受体CD45、CD71以及细胞内部信号分子p-ERK、p-JNK、t-ERK和t-JNK蛋白表达水平.结果 1 g/L、2 g/L和5 g/L SPP组细胞增殖抑制率依次升高,分别为53.286％±3.112％、80.075％±4.240％和86.430％±4.614％.2 g/L、5 g/L SPP组cleaved caspase-3蛋白表达水平高于对照组,5 g/L SPP组高于1 g/L SPP组(P<0.05).1 g/L、2 g/L SPP组CD45蛋白表达水平高于对照组(P<0.05),CD71蛋白表达水平与对照组差异无统计学意义;5 g/L SPP组CD45蛋白表达水平均高于对照组、1 g/L和2 g/L SPP组;CD71蛋白表达水平低于对照组(P<0.05),与1 g/L和2 g/L SPP组差异无统计学意义.对照组、1 g/L SPP组、2 g/L SPP组和5 g/L SPP组p-ERK蛋白表达水平依次升高,组间多重比较差异均有统计学意义;各组间t-ERK、p-JNK和t-JNK蛋白表达水平差异均无统计学意义.结论 SPP对Jurkat细胞具有杀伤作用,其机制可能是SPP通过影响细胞膜表面受体CD45和CD71的表达,将凋亡信号传递到细胞内部,通过活化ERK,最终活化caspase-3,诱导细胞凋亡.

目的 探究黑果枸杞配方液对肿瘤细胞的生物学活性检测.方法 以无菌幼苗茎段为外植体,不同浓度的6-呋喃氨基嘌呤(KT)、2,4-二氯苯氧乙酸(2.4-D)及吲哚丁酸(IBA)考察组织培养条件,比较组培生根苗抗氧化能力差异,超声法提取黑果枸杞叶中黄酮,噻唑兰(MTT)法检测黑果枸杞黄酮多种配方液在体外对肿瘤细胞的生物学活性.结果 愈伤组织最佳诱导培养基为MS +2.4-D0.50 mg·mL-1+ KT0.20 mg·mL-1+蔗糖309·L-1+琼脂8.0g·L-1,分化培养最佳培养基为植物组织培养基(MS)和激动素(KT)0.15 mg·mL-1 +IBA 0.01 mg· mL-1,根诱导最适培养基为1/2MS;黑果枸杞组培苗提取物的过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)及超氧化物歧化酶(SOD)活性明显优于移栽苗;当超声功率270 W、超声时间35 min、乙醇浓度体积分数70％和料液比1∶25时粗黄酮得率为5.54％,当黑果枸杞组培叶黄酮-锁阳多糖-螺旋藻多糖为3∶1∶1,终浓度为160μg·mL-1,作用48h后,体外对人黑色素瘤B16-F0细胞的抑制率最大为52.53％.结论 黑果枸杞黄酮与锁阳多糖配方液在体外对多种肿瘤细胞均有抑制作用,为充分利用黑果枸杞及锁阳在抗肿瘤方面的开发和应用提供数据基础及参考.

目的 探讨改进螺旋藻多糖提取工艺及其抗衰老作用的研究.方法 将螺旋藻粉低温破壁,离心获取上清,通过凝胶过滤层析方法提取螺旋藻多糖,经红外光谱技术检测螺旋藻多糖提取物的成分,采用硫酸-蒽酮比色法检测提取物中螺旋藻多糖提取物的含量.经口饲喂果蝇分别为0.125％、0.250％、0.500％浓度的螺旋藻多糖提取物,观察其对果蝇的寿命、飞行能力和性活力的影响.结果 通过以上方法获得的螺旋藻粉提取物,经红外光谱技术检测其在1170 cm-1和1028 cm-1附近的吸收峰存在C-O的伸缩振动.经硫酸-蒽酮比色法测得提取物多糖的含量为78.67％±3.51％,得率12.33％±2.52％.喂养不同浓度螺旋藻多糖提取物的实验组能不同程度的延长雌雄果蝇平均寿命,最高寿命和半数死亡期,提高飞行能力,性活力,尤以0.500％浓度效果最佳.结论 改进工艺低温提取和凝胶过滤层析方法提取高得率和含量的螺旋藻多糖,红外光谱技术制定多糖提取物的质量标准化,提取物螺旋藻多糖有抗衰老作用.