目的:分析去白细胞单采血小板保存期末的凝血因子活性及血栓弹力图(TEG)，为指导去白细胞单采血小板临床输注提供参考。方法:于2017年6月至2019年6月，采用随机抽样法选择日照市中心血站采集的65人份去白细胞单采血小板为研究对象。去白细胞血小板采用MCS＋型血细胞分离机及其配套管路耗材采集。分别于去白细胞单采血小板保存前、(22±2)℃振荡保存第5天和第7天时，对其血小板计数、FⅧ活性、FⅨ活性和TEG进行检测。对以上指标3个不同保存时间点的总体比较，采用单因素重复测量方差分析；不同时间点的两两比较，采用最小显著性差异(LSD)法。本研究遵循的程序符合2013年修订的《世界医学协会赫尔辛基宣言》要求。结果:①本研究65人份去白细胞单采血小板，于保存前、保存第5天和第7天时，血小板计数分别为(10.8±0.5)×10 11/L、(8.7±1.1)×10 11/L、(8.2±1.5)×10 11/L，FⅧ活性分别为(105.9±38.2)%、(57.2±22.4)%、(30.5±17.5)%，FⅨ活性分别为(97.8±27.5)%、(54.9±19.7)%、(38.4±12.4)%。保存前、保存第5天和第7天时，上述3项指标分别总体比较，差异均有统计学意义( F＝93.90， P<0.001； F＝126.16， P<0.001； F＝141.04， P<0.001)；保存第5天与保存前分别比较，差异均有统计学意义(LSD- t＝10.52， P<0.001；LSD- t＝10.13， P<0.001；LSD- t＝11.76， P<0.001)，保存第7天与第5天分别比较，差异亦均有统计学意义(LSD- t＝2.34， P＝0.020；LSD- t＝5.53， P<0.001；LSD- t＝4.50， P<0.001)。② 65人份去白细胞单采血小板，于保存前、保存第5天和第7天时，TEG参数R值、K值、α角、MA值依次分别为(8.8±0.5)min、(14.1±0.7)min、(16.1±0.6)min，(1.7±0.1)min、(1.8±0.5)min、(1.9±0.6)min，(69.7±3.4)°、(69.1±1.8)°、(69.2±2.6)°，(86.7±2.6)mm、(82.2±3.1)mm、(80.5±3.3)mm；R值、K值、MA值分别总体比较，差异均有统计学意义( F＝2 522.59， P<0.001； F＝3.15， P＝0.045； F＝73.42， P<0.001)。其中，保存第5天与保存前比较，R值显著升高，MA值显著降低，并且差异均有统计学意义(LSD- t＝49.90， P<0.001；LSD- t＝8.51， P<0.001)；保存第7天与第5天比较，R值亦显著升高，MA值亦显著降低，差异均有统计学意义(LSD- t＝18.83， P<0.001；LSD- t＝3.22， P＝0.002)。 结论:去白细胞单采血小板于保存期末，即(22±2)℃振荡保存第5天时，其凝血活性成分明显损耗，凝血功能有所下降。临床输注去白细胞单采血小板时，应根据不同的治疗目的，选择使用不同保存期的去白细胞单采血小板。

目的:探讨COBE Spectra血细胞分离机不同采集程序采集儿童自体外周血造血干细胞的效果。方法:回顾性分析苏州大学附属儿童医院2018年7月至2020年1月采用COBE Spectra血细胞分离机单个核细胞（MNC）或全自动外周血干细胞（AutoPBSC）程序采集自体外周血造血干细胞的10例患儿临床资料，年龄3~10岁，体质量15~31 kg。MNC组5例，AutoPBSC组5例。结果:共采集自体外周血造血干细胞25次，平均采集2.5次（1~4次），MNC组采集10次，AutoPBSC组采集15次。采集前干细胞数[中位数（范围）]MNC组为19.3/μl（3.5~129.0/μl），AutoPBSC组为9.4/μl（2.2~38.7/μl）；单次采集获得CD34 +细胞数MCN组为1.22×10 6/kg（0.18×10 6/kg~6.30×10 6/kg），AutoPBSC组为0.85×10 6/kg（0.13×10 6/kg~2.64×10 6/kg）。相关性分析显示，采集获得CD34 +细胞数和采集前干细胞数呈正相关（AutoPBSC组： r=0.921， P<0.01；MNC组： r=0.833， P=0.003）。采集效率MNC组为5.4%（3.4%~11.2%），AutoPBSC组为10.4%（4.7%~13.9%），差异有统计学意义（ Z=2.163， P=0.031）。 结论:COBE Spectra血细胞分离机AutoPBSC程序采集儿童自体外周血造血干细胞的效果优于MNC程序。

目的:研究严重创伤患者细胞免疫功能动态变化规律及其在创伤预后评估中的作用。方法:采用前瞻性队列研究设计，连续纳入重庆市急救医疗中心2019年11月至2020年1月收治的创伤患者为研究对象。采集患者伤后1、3、5、7、14 d外周血，分离白细胞，采用流式细胞分析技术检测中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞表面CD64、CD274、CD279表达及CD3 +总T淋巴细胞、CD4 +、CD8 + T淋巴细胞亚群。根据损伤严重度评分（ISS）和伤后28 d内是否发生脓毒症分组，分析患者细胞免疫指标的动态变化及与创伤严重程度、感染并发症的关系；进一步采用Pearson检验分析细胞免疫指标与急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ（APACHEⅡ）、序贯器官衰竭评分（SOFA）、ISS评分的相关性。 结果:共纳入42例创伤患者，其中ISS>25分的严重伤患者8例，16分

目的:探讨乳酸乳球菌温敏水凝胶对糖尿病小鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响及其机制。方法:(1)按照菌与培养基体积比为1∶100用M17GS液体培养基培养约5×10 8集落形成单位/mL乳酸乳球菌(浓度下同)，分别于培养0(即刻)、2、4、6、8、10、12 h用酶标仪观测其生长情况。另取该菌菌落同前处理并于相同时间点收集培养基分离细菌培养上清液，用台式pH计测定pH值，并用L-乳酸检测分析试剂盒测定培养0(即刻)、2、4、8、12 h的L-乳酸浓度(样本数为3)。(2)将泊洛沙姆温敏聚合物与M17GS液体培养基按照质量与体积比为0.2 g∶1 mL充分混匀，制备单纯温敏水凝胶。按照菌与水凝胶体积比1∶100在单纯温敏水凝胶中加入乳酸乳球菌，充分混匀后制备乳酸乳球菌温敏水凝胶，分别在4、37 ℃孵育以及成胶后再4 ℃孵育观察其形态；通过流变仪测定乳酸乳球菌温敏水凝胶在10～40 ℃的储能模量与损耗模量，同时观察成胶温度；将乳酸乳球菌温敏水凝胶冷冻干燥后，通过扫描电子显微镜观察其表面及其中乳酸乳球菌的形态结构。(3)将小鼠巨噬细胞系Raw264.7细胞用终质量浓度分别为100、10 ng/mL内毒素/脂多糖与γ干扰素培养24 h刺激M1型极化，将细胞分为空白对照组(不做其他处理)、乳酸乳球菌温敏水凝胶组和乳酸组。乳酸乳球菌温敏水凝胶组细胞加入1 mL乳酸乳球菌温敏水凝胶，乳酸组细胞加入终物质的量浓度为30 mmol/L乳酸，37 ℃培养24 h后，通过实时荧光定量反转录PCR(RT-PCR)法检测M2型巨噬细胞标志物精氨酸酶1、CD206的mRNA表达量(样本数为3)，采用免疫荧光法检测精氨酸酶1和CD206的蛋白定位与表达。(4)取15只8～10周龄雌性BALB/c小鼠，通过链脲佐菌素联合高糖高脂饲料的方法诱导为糖尿病小鼠模型后，在每只小鼠背部制作直径6 mm全层皮肤缺损创面，采用随机数字表法将小鼠分为空白对照组(不做其他处理)、单纯温敏水凝胶组和乳酸乳球菌温敏水凝胶组，每组5只。水凝胶处理2组小鼠伤后即刻分别滴加200 μL相应水凝胶至创面，每天更换水凝胶。水凝胶处理2组小鼠处理0(即刻)、3、6、9、12 d后，观察创面愈合情况，测量创面面积；处理12 d后，取创面组织，行苏木精-伊红染色观察肉芽组织厚度，采用免疫荧光法观测CD206、M1型巨噬细胞标志物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)阳性细胞。空白对照组小鼠于前述相同时间点进行相应观测。(5)取9只8～10周龄雌性BALB/c小鼠同实验(4)方法诱导糖尿病小鼠模型后，采用随机数字表法分为正常皮肤组(不做其他处理)、单纯创面组、乳酸乳球菌温敏水凝胶组，每组3只。单纯创面组与乳酸乳球菌温敏水凝胶组小鼠按照实验(4)方法制成全层皮肤缺损创面，前一组小鼠伤后不做其他处理，后一组小鼠伤后即刻滴加200 μL乳酸乳球菌温敏水凝胶至创面。水凝胶处理组小鼠处理1 d后，取创面组织，通过实时荧光定量RT-PCR法检测白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和核因子κB mRNA表达量；眼球取血后，通过全自动血细胞分析仪检测外周血白细胞计数、淋巴细胞计数和单核细胞计数，通过L-乳酸检测分析试剂盒测定血清L-乳酸浓度。于前述相同时间点，取正常皮肤组小鼠相应部位正常皮肤组织、单纯创面组小鼠创面组织及2组小鼠血液进行相应检测。对数据行单因素方差分析、重复测量方差分析、Tukey和Dunnett检验。 结果:(1)乳酸乳球菌于培养约6 h生长达到平台期。乳酸乳球菌培养上清液中，pH值逐渐降低，至培养8 h下降至最低值4.9左右；L-乳酸浓度逐渐升高，至培养8 h达到最高值约70 mmol/L。(2)乳酸乳球菌温敏水凝胶在4 ℃为液体溶胶态，在37 ℃为固体凝胶态，成胶后于4 ℃孵育后再次变为液体溶胶态；成胶温度约为25 ℃，成胶后储能模量约为3 000 Pa、损耗模量约为1 000 Pa。扫描电子显微镜下可见，乳酸乳球菌温敏水凝胶为疏松三维多孔结构，乳酸乳球菌为椭球形并被包裹在水凝胶内部。(3)培养24 h，与空白对照组比较，乳酸乳球菌温敏水凝胶组、乳酸组巨噬细胞中精氨酸酶1表达量显著升高( q＝11.620、15.250， P<0.01)、CD206 mRNA表达量显著升高( q＝16.770、19.030， P<0.01)，定位于细胞膜的CD206蛋白和定位于细胞质的精氨酸酶1蛋白表达明显升高；乳酸组巨噬细胞中精氨酸酶1、CD206 mRNA表达量与乳酸乳球菌温敏水凝胶组相近( q＝3.629、2.259， P>0.05)。(4)处理3～12 d后，与空白对照组和单纯温敏水凝胶组比较，乳酸乳球菌温敏水凝胶组小鼠创面愈合速度更快，创面面积明显缩小，创缘炎症减轻。乳酸乳球菌温敏水凝胶组小鼠处理3、6、9、12 d后创面面积[(25.8±5.9)、(21.2±4.6)、(16.0±2.4)、(8.4±2.4)mm 2]较空白对照组[(31.8±5.3)、(28.0±3.4)、(22.6±3.7)、(17.0±1.0)mm 2]显著缩小( q＝3.506、3.973、3.856、5.025， P<0.05或 P<0.01)，处理3、6 d后创面面积较单纯温敏水凝胶组显著缩小( q＝3.739、3.739， P<0.05)。处理12 d后，与空白对照组和单纯温敏水凝胶组比较，乳酸乳球菌温敏水凝胶组小鼠创面肉芽组织更厚，创面组织中iNOS阳性细胞明显减少且CD206阳性细胞明显增多。(5)处理1 d后，单纯创面组小鼠创面组织中IL-1β、TNF-α和核因子κB mRNA表达量显著高于正常皮肤组小鼠正常皮肤组织( q＝9.253、4.819、6.020， P<0.01)，与乳酸乳球菌温敏水凝胶组相近( q＝2.850、2.735、2.556， P>0.05)；单纯创面组小鼠外周血白细胞计数、淋巴细胞计数与单核细胞计数显著高于正常皮肤组( q＝3.523、5.373、5.279， P<0.05或 P<0.01)，与乳酸乳球菌温敏水凝胶组相近( q＝0.621、1.240、1.293， P>0.05)；3组小鼠血清L-乳酸浓度均保持在正常范围内且组间总体比较差异无统计学意义( F＝4.095， P>0.05)。 结论:乳酸乳球菌温敏水凝胶在糖尿病全层皮肤缺损小鼠创面局部使用安全，能够通过原位生产投递乳酸，促进巨噬细胞从M1型向M2型极化，重塑创面愈合微环境，促进创面的高效愈合。

目的:观察外周血造血干细胞采集效果，并探讨其影响因素。方法:采用费森尤斯血细胞分离机、迈瑞血细胞分析仪及BD流式细胞仪，对采集过程的参数、血常规指标及产品的单个核细胞（MNC）和CD 34+计数进行检测。回顾性分析陆军军医大学西南医院2013年1月至2021年1月共72例行自体外周血造血干细胞移植患者的性别、年龄、血常规指标、采集循环量与采集物MNC和CD 34+计数相关性以及各因素对外周血干细胞采集效果的影响。 结果:不同年龄、性别和疾病类型的患者外周血干细胞采集效果差异无统计学意义（ P>0.05）。所有患者采集物的MNC与采集循环量（ r = 0.33， P<0.001）、动员后白细胞计数（ r = 0.41， P<0.001）呈正相关，CD 34+计数与动员后MNC计数（ r = 0.38， P<0.001）和收集白膜量（ r = 0.48， P<0.001）呈正相关。多元回归分析结果显示，动员后MNC计数[ P<0.001，95% CI 0.07（0.05 ~ 0.09）]、采集循环量[（ P<0.001，95% CI 0.00（0.00 ~ 0.00）]、采后总量[ P<0.001，95% CI 0.07（0.05 ~ 0.10）]是采集物MNC计数的影响因素。此外，动员后MNC计数[ P<0.001，95% CI 0.09（0.04 ~ 0.14）]、采集循环量[ P = 0.003，95% CI 0.00（0.00 ~ 0.00）]、采后总量[ P = 0.005，95% CI 0.08（0.03 ~ 0.14）]也是CD 34+计数的影响因素。 结论:外周血干细胞的采集效率个体差异大，动员后MNC计数越多，采集到的外周血干细胞量越多。要想获得高的采集效率，需要有针对性地调整好采集前外周血MNC等参数，并注意采集循环量、采后总量和收集白膜量。

两栖动物来源的多肽以及微小RNA（miR）在促进慢性创面的愈合方面具有很大的研发潜能，发现新的多肽药物以及其相关miR，并开发相应的miR靶向药物对于促进创面愈合具有重要的价值。昆明医科大学基础医学院杨新旺教授团队近期于《Burns & Trauma》发文《Amphibian-derived peptide homodimer OA-GL17d promotes skin wound regeneration through the miR-663a/TGF-β1/Smad axis》，该研究采用凝胶过滤层析及反相高效液相色谱法从青蛙皮肤分泌物中分离出来一种新的多肽（命名为OA-GL17d），通过Edman降解、质谱法和与互补DNA克隆相结合的方法对其氨基酸序列进行了测定，通过钙黄绿素乙酰氧基甲酯/碘化丙啶对人永生化表皮细胞HaCaT的双重染色实验、小鼠血细胞的溶血活性实验和小鼠对急性毒性反应实验评估了该多肽的毒性，采用淋巴细胞增殖检测实验、细胞划痕试验、与HaCaT细胞进行Transwell共培养实验、小鼠全层皮肤损伤及烫伤模型等实验观察了OA-GL17d的促愈合效果并采用miR转录组测序分析、ELISA、实时荧光定量RT-PCR分析和蛋白质印迹法等方法探讨了其分子机制。研究显示OA-GL17d在肽单体的第16个半胱氨酸残基和序列“GLFKWHPRCGEEQSMWT”之间含有二硫键，OA-GL17d无溶血活性或急性毒性，能有效促进KC增殖和迁移，强烈刺激小鼠背侧全层皮肤损伤创面和烫伤创面的修复，在机制上，OAGL17d降低了miR-663a的水平，增加了TGF-β1的水平，并激活了TGF-β1/Smad信号通路，从而加速了皮肤创面的再上皮化和肉芽组织形成。该研究提示OA-GL17d是一种用于皮肤创面修复的新型多肽候选药物，并表明miR-663a可能是一种促进皮肤修复的有效靶点，为临床促进创面愈合提供了一种潜在的方法。

治疗性血液成分单采技术(therapeutic hemapheresis)是指通过设置血细胞分离机相关程序，采集患者血液后，进行病理成分分离、去除或置换，同时对患者进行正常血液成分的回输和适当补充血液制剂或替代溶液，去除或减少血液中病理性成分对患者的致病作用，以达到治疗或辅助治疗目的的临床治疗技术。由于该技术具有疗效可靠、安全性佳、操作简单等优点，而被广泛应用于难治和重症疾病患者的临床治疗中。《治疗性血液成分单采技术标准专家共识(第2版)》是在第1版《治疗性血液成分单采技术标准专家共识》基础上，笔者通过2年临床实践进行修正、完善，进一步对治疗性血液成分单采技术进行规范性术语定义而成。笔者拟从治疗性血液成分单采技术的适应证分类、技术方案、所导致的不良反应和并发症，以及相对禁忌证等方面进行详细阐述，旨在为该技术的临床开展提供规范化指导，同时为临床医师在采用该技术治疗相关疾病过程中提供参考。

目的:探讨6.4版Trima血细胞分离机采集血小板发生聚集的原因以及2种干预措施的效果.方法:收集2020年61例献血者血小板捐献聚集次(n=61)与非聚集次(n=323)数据,分析聚集原因;将2021年单采过程中出现聚集的72例次随机分为干预A组和干预B组,干预A组提高抗凝剂与血液的比率,干预B组对献血者捐献侧手臂进行电热毯包裹保暖,提高献血者的血流速度.对比2组采集时间、平均血流速度、机器报警次数、抗凝剂使用量、产品下机解聚、献血者枸橼酸盐反应等情况.结果:聚集与平均血流速度呈负相关(r=-0.394),与采集时间呈正相关(r=0.458);经贝叶斯与Fisher判别分析,分别对聚集和非聚集构建了方程式,该方程判别分析预测的正确率为77.1％.2种干预措施效果比较,B组平均血流速度高于A组;采集时间、机器报警次数和抗凝剂使用量、献血者枸橼酸盐反应例数均明显低于A组(P＜0.05);2021年的整个队列中,90.28％的产品下机立即解聚,9.72％的产品4 h内解聚,2种干预措施组产品下机解聚情况对比差异没有统计学意义(P＞0.05).结论:单采血小板过程中可用构建的聚集和非聚集方程式进行聚集发生概率的预判,并可提前做出干预.2种干预措施对降低血小板聚集都有效,但措施B具有提高采血速度、缩短采集时间、减少报警次数和抗凝剂用量、降低献血者枸橼酸盐反应发生率等优点.

目的 分析患者嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)前体细胞采集前后血液成分变化,为CAR-T前体细胞采集工作提供借鉴.方法 选取2022年1月-2023年12月徐州医科大学附属医院血液科应用COM.TEC型血细胞分离机收集CAR-T前体细胞的129例患者作为研究对象,回顾性分析相关资料.观察采集前后白细胞(WBC)计数、淋巴细胞计数、红细胞(RBC)计数、血红蛋白(Hb)、血细胞比容(HCT)、血小板(PLT)计数及电解质Ca2+、K+、Na+、Cl-变化差异.记录采集过程的不良反应,分析血液成分变化的原因.将性别、年龄、体重、疾病类型以及采集前WBC计数、淋巴细胞计数、PLT计数、HCT与终产品单个核细胞(MNC)计数进行多元线性回归分析.结果 129例患者CAR-T前体细胞均采集成功,MNC计数均值为7.4x109/L(1.4x109/L～38.0x109/L),无重度单采不良事件发生.采集后淋巴细胞计数、RBC计数、Hb、HCT及PLT计数较采集前显著下降(P＜0.05),WBC计数较采集前上升,但差异无统计学意义(P＞0.05);K+、Cl-浓度显著下降(P＜0.05),Ca2+、Na+浓度较采集前差异无统计学意义(P＞0.05).多元线性回归分析显示,采集前WBC计数、淋巴细胞计数、HCT及体重与终产品MNC计数密切相关(P＜0.05).结论 通过COM.TEC型血细胞分离机采集患者CAR-T前体细胞安全可行.采集前保持较高的WBC计数、淋巴细胞计数、HCT及适当的体重可有效提高采集效果.

目的 降低低体重高血小板计数的女性献血者血小板采集过程中,献血不良反应的发生,提高献血者在血小板采集过程中的舒适度,增加重复献血者比例.方法 采取对照组(n=32)、观察组(n=18)对比方法,利用Mcs+中的血液采集过程程序软件,寻找采集循环中可能引起献血不良反应的诱因,通过增加10％葡萄糖酸钙的口服次数,增加采集循环数,降低最后1个循环的峰值血浆量等改善措施,对比观察献血反应发生率是否减少.结果 每一循环的峰值血浆量能够体现影响诱因,两组人群对比后发现,观察组的献血者献血不良反应发生率为16.7％(3/18),对照组献血不良反应发生率为81.2％(26/32);观察组再次献血人数比例为77.7％(14/18),对照组的再次献血人数比例为31.2％(10/32),提高献血者献血满意度,可有效提高再次献血者比例.结论 低体重,高血小板计数的女性单采血小板献血者,应在采集过程中被给予更多的关怀,增加10％葡萄糖酸钙的口服次数,工作人员应主动增加一个采集循环,降低每个循环内献血者峰值血浆量的收集,并在有条件的情况下补充上盐水,可有效降低献血者献血反应的发生,提高献血者献血满意度,增加再次献血人群的比例.