目的:评价孤儿核受体Nur77在衣霉素(TM)诱导小鼠海马神经元损伤中的作用及其与内质网应激的关系。方法:小鼠HT22细胞，采用随机数字表法分为4组( n＝10)：对照组(C组)、Nur77特异性激动剂Csn-B组(Csn-B组)、内质网应激诱导剂TM组(TM组)和TM+Csn-B组。C组细胞正常培养24 h；Csn-B组培养基中加入Csn-B(终浓度为10 μg/ml)培养细胞24 h；TM组培养基中加入TM(终浓度为200 ng/ml)培养24 h诱导细胞内质网应激损伤；TM+Csn-B组培养基中加入Csn-B(终浓度为10 μg/ml)预处理细胞15 min后，给予TM(终浓度为200 ng/ml)共同培养24 h。各组细胞处理结束后采用CCK-8试剂盒检测细胞活力，Western blot法检测内质网应激相关蛋白CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、caspase-3和活化的caspase-3(cleaved-caspase-3)的表达。 结果:与C组比较，TM组细胞活力下降，CHOP、GRP78、Bax和cleaved-caspase-3表达上调，Bcl-2和caspase-3表达下调( P<0.05或0.01)；与TM组比较，TM+Csn-B组细胞活力升高，CHOP、GRP78、Bax和cleaved-caspase-3表达下调，Bcl-2和caspase-3表达上调( P<0.05或0.01)。 结论:孤儿核受体Nur77参与了TM诱导小鼠海马神经元损伤的过程，与激活内质网应激有关。

目的:探讨外源性左旋肉碱对过度内质网应激介导的严重烫伤大鼠肝细胞焦亡的影响及其分子机制。方法:采用实验研究方法。将15只6~8周龄雌性SD大鼠按随机数字表法（分组方法下同）分为假伤组、单纯烫伤组、烫伤+肉碱组，每组5只，单纯烫伤组和烫伤+肉碱组大鼠背部制作30%体表总面积的Ⅲ度烫伤，其中烫伤+肉碱组大鼠另外给予腹腔注射左旋肉碱。伤后72 h，采用全自动生化仪检测肝损伤生物化学指标天冬氨酸转氨酶（AST）和丙氨酸转氨酶（ALT）水平，样本数为5。伤后72 h，采用苏木精-伊红染色观察肝组织损伤情况。伤后72 h，采用实时荧光定量反转录PCR（RT-qPCR）法检测肝组织中细胞焦亡相关标志物核苷酸结合寡聚化结构域蛋白样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）、胱天蛋白酶1（caspase-1）、消皮素D和白细胞介素1β（IL-1β）以及内质网应激相关标志物葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）的mRNA水平；采用蛋白质印迹法检测肝组织中GRP78、CHOP、NLRP3、caspase-1、caspase-1/p20、消皮素D-N、剪切型IL-1β蛋白表达水平，样本数均为5。取人肝癌细胞HepG2，分为二甲基亚砜（DMSO）组、0.1 μmol/L衣霉素组、0.2 μmol/L衣霉素组、0.4 μmol/L衣霉素组、0.8 μmol/L衣霉素组，分别作相应处理。培养24 h后，采用细胞计数试剂盒8法检测细胞活力并筛选衣霉素干预浓度（样本数为5）。取HepG2人肝癌细胞，分为DMSO组、单纯衣霉素组和衣霉素+肉碱组，分别作相应处理。培养24 h后，采用蛋白质印迹法检测细胞中GRP78、CHOP、NLRP3、caspase-1、caspase-1/p20、消皮素D-N、剪切型IL-1β蛋白表达水平，样本数均为3。对数据行单因素方差分析和LSD- t检验。 结果:伤后72 h，单纯烫伤组大鼠血清中AST和ALT水平分别为（640±22）、（157±8）U/L，均分别明显高于假伤组的（106±13）、（42±6）U/L（ t值分别为-46.78、-25.98， P<0.01）；烫伤+肉碱组大鼠血清中AST和ALT水平分别为（519±50）、（121±10）U/L，均明显低于单纯烫伤组（ t值分别为4.93、6.06， P<0.01）。伤后72 h，假伤组大鼠肝组织形态基本正常，未见明显的炎症细胞浸润；与假伤组相比，单纯烫伤组大鼠肝组织可见大量的炎症细胞浸润，细胞排列紊乱；与单纯烫伤组相比，烫伤+肉碱组大鼠肝组织可见少量的炎症细胞浸润。伤后72 h，单纯烫伤组大鼠肝组织中NLRP3、caspase-1、消皮素D和IL-1β mRNA表达水平均明显高于假伤组（ t值分别为34.42、41.93、30.17、15.68， P<0.01）；烫伤+肉碱组大鼠肝组织中NLRP3、caspase-1、消皮素D和IL-1β mRNA表达水平均明显低于单纯烫伤组（ t值分别为34.40、37.20、19.95、7.88， P<0.01）。伤后72 h，与假伤组相比，单纯烫伤组大鼠肝组织中NLRP3、caspase-1、caspase-1/p20、消皮素D-N、剪切型IL-1β蛋白表达水平均明显升高（ t值分别为12.28、26.92、5.20、10.02、24.78， P<0.01）；与单纯烫伤组相比，烫伤+肉碱组大鼠肝组织中NLRP3、caspase-1、caspase-1/p20、消皮素D-N、剪切型IL-1β蛋白表达水平均明显下降（ t值分别为10.99、27.96、12.69、8.96、12.27， P<0.01）。伤后72 h，单纯烫伤组大鼠肝组织中GRP78、CHOP的mRNA水平均明显高于假伤组（ t值分别为21.00、16.52， P<0.01），烫伤+肉碱组大鼠肝组织中GRP78、CHOP的mRNA水平均明显低于单纯烫伤组（ t值分别为8.92、8.21， P<0.01）；单纯烫伤组大鼠肝组织中GRP78、CHOP的蛋白表达水平均明显高于假伤组（ t值分别为22.50、14.29， P<0.01），烫伤+肉碱组大鼠肝组织中GRP78、CHOP的蛋白表达水平均明显低于单纯烫伤组（ t值分别为14.29、5.33， P<0.01）。培养24 h后，与DMSO组相比，0.1 μmol/L衣霉素组、0.2 μmol/L衣霉素组、0.4 μmol/L衣霉素组、0.8 μmol/L衣霉素组细胞存活率均明显下降（ t值分别为4.90、9.35、18.64、25.09， P<0.01）；选择0.8 μmol/L作为后续衣霉素的干预浓度。培养24 h后，与DMSO组相比，单纯衣霉素组细胞GRP78、CHOP的蛋白表达水平均明显升高（ t值分别为10.48、17.67， P<0.01）；与单纯衣霉素组相比，衣霉素+肉碱组细胞GRP78、CHOP的蛋白表达水平均明显下降（ t值分别为8.08、13.23， P<0.05或 P<0.01）。培养24 h后，与DMSO组相比，单纯衣霉素组细胞NLRP3、消皮素D-N蛋白表达水平均明显升高（ t值分别为13.44、27.51， P<0.01），caspase-1、caspase-1/p20、剪切型IL-1β蛋白表达水平均无明显变化（ P>0.05）；与单纯衣霉素组相比，衣霉素+肉碱组细胞NLRP3、消皮素D-N蛋白表达水平均明显下降（ t值分别为20.49、21.95， P<0.01），caspase-1、caspase-1/p20、剪切型IL-1β蛋白表达水平均无明显变化（ P>0.05）。 结论:在严重烫伤大鼠中，外源性左旋肉碱可能通过抑制过度内质网应激介导的细胞焦亡相关通路发挥对肝损伤的保护作用。

目的:探讨内质网应激（endoplasmic reticulum stress，ERS）与细胞自噬机制在坏死性小肠结肠炎（necrotizing enterocolitis，NEC）大鼠中的作用。方法:新生SD大鼠39只，随机分为3组，建立NEC组（人工喂养+缺氧刺激+胃内注射LPS）、ERS拮抗组（人工喂养+缺氧刺激+胃内注射脂多糖+腹腔注射4-苯基丁酸）、ERS诱发组（人工喂养+缺氧刺激+胃内注射脂多糖+腹腔注射衣霉素）大鼠模型。造模成功后处死大鼠，留取肠道组织，电镜下观察大鼠肠道病理，酶联免疫吸附法检测肠型脂肪酸结合蛋白（intestinal fatty acid binding protein，I-FABP）水平，实时定量聚合酶链反应法测定葡萄糖调节蛋白78（glucose regulated protein 78，GRP78）mRNA、氧调节蛋白150（oxygen-regulated protein 150，ORP150）mRNA表达水平，Western-blot检测p62和自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3（microtubule-associated protein 1 light chain 3，LC3）Ⅱ、LC3Ⅰ的表达水平，计算LC3Ⅱ/ LC3Ⅰ比值。结果:（1）造模结束后，大鼠肠道病理评分均≥2分。（2）ERS诱发组临床表现评分、病理评分、I-FABP值、GRP78 mRNA值、ORP150 mRNA值、LC3Ⅱ/ LC3Ⅰ高于NEC组和ERS拮抗组，NEC组高于ERS拮抗组，差异均有统计学意义（ P<0.05）；ERS诱发组p62表达量低于NEC组和ERS拮抗组，NEC组低于ERS拮抗组，差异均有统计学意义（ P<0.05）。（3）LC3Ⅱ/ LC3Ⅰ比值和临床表现评分、病理评分、I-FABP均呈正相关（ P<0.05）；p62表达量和临床表现评分、病理评分、I-FABP均呈负相关（ P<0.05）；GRP78、ORP150 mRNA和临床表现评分、病理评分、I-FABP均呈正相关（ P<0.05）；LC3Ⅱ/ LC3Ⅰ比例和GRP78、ORP150 mRNA值呈正相关（ P<0.05）；p62表达量和GRP78、ORP150 mRNA值呈负相关（ P<0.05）。 结论:内质网应激和NEC发病有关，抑制内质网应激可抑制自噬反应，改善NEC肠道屏障功能及临床症状。

目的:探讨宏基因组二代测序(mNGS)在免疫缺陷并发重症肺炎患儿中的应用，了解病原体分布，为临床经验性预防和治疗提供参考。方法:收集2019年7月至2020年7月在我院PICU确诊为重症肺炎的免疫缺陷患儿的一般临床资料、传统检测方法报告及mNGS结果，评估两者与临床判断的一致性。结果:23例患儿中，男15例，女8例，年龄1个月28 d～10岁，平均年龄(3.67±3.20)岁，共7例治愈，2例好转，14例死亡。均行mNGS检测，其中血标本21例，肺泡灌洗液标本2例。23例患儿中，单一感染者5例，混合感染15例。检测的病原中真菌15例(65.22%)，其中耶氏肺孢子菌12例，烟曲霉2例，白色念珠菌2例；病毒14例(60.87%)，其中巨细胞病毒10例(8例合并有耶氏肺孢子菌感染)，疱疹病毒3例，细环病毒2例(1例合并疱疹病毒感染)；细菌10例，其中不动杆菌3例，肺炎克雷伯杆菌1例，嗜麦芽窄食单胞菌1例，皮疽诺卡菌1例，葡萄球菌4例，地衣芽孢杆菌1例；支原体3例，且均为混合感染。mNGS的检验阳性率及与临床判断符合率均高于传统检验方法，差异有统计学意义( P<0.05)。共19例使用激素或免疫抑制剂，当发生重症肺炎时，使用时间1～6个月者达17例。 结论:免疫缺陷并发重症肺炎患儿多为混合感染，其常见病原菌为耶氏肺孢子菌及巨细胞病毒，使用mNGS可显著提高病原检出率，有效指导治疗。

目的:评价长链非编码RNA NORAD在氯胺酮诱发小鼠海马神经元毒性中的作用及其与内质网应激的关系。方法:分离并培养原代小鼠海马神经元，采用随机数字表法分为5组( n＝36)：对照组(C组)、氯胺酮组(K组)、氯胺酮+pcDNA3.1-NORAD质粒组(K+NORAD组)、氯胺酮+对照质粒组(K+NC组)和氯胺酮+NORAD+衣霉素组(K+NORAD+TM组)。C组使用正常培养基培养24 h；K组加入40 μmol/L氯胺酮孵育24 h；K+NORAD组先转染pcDNA3.1-NORAD质粒至神经元中，48 h后加入氯胺酮40 μmol/L孵育24 h；K+NC组先转染pcDNA3.1(+)质粒至神经元中，48 h后加入氯胺酮40 μmol/L孵育24 h；K+NORAD+TM组先转染pcDNA3.1-NORAD质粒，24 h后加入内质网应激激活剂衣霉素1 μg/ml孵育24 h，然后再加入氯胺酮40 μmol/L孵育24 h。采用CCK-8法检测神经元活力，检测乳酸脱氢酶(LDH)释放量，采用TUNEL法和流式细胞术检测细胞凋亡情况，Real-time PCR法测定NORAD表达，Western blot法检测蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、磷酸化PERK (p-PERK)和C/EBP同源蛋白(CHOP)的表达。 结果:与C组相比，K组神经元活力降低，LDH释放量增加，凋亡神经元百分比和细胞凋亡率升高，NORAD表达下调，CHOP表达上调，p-PERK/PERK升高( P<0.05)；与K组相比，K+NORAD组神经元活力升高，LDH释放量减少，凋亡神经元百分比和细胞凋亡率降低，NORAD表达上调，CHOP表达下调，p-PERK/PERK降低( P<0.05)，K+NC组上述指标差异无统计学意义( P>0.05)；与K+NORAD组相比，K+NORAD+TM组神经元活力降低，LDH释放量增加，凋亡神经元百分比和细胞凋亡率升高，CHOP表达上调，p-PERK/PERK升高( P<0.05)，NORAD表达差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:过表达NORAD可通过抑制内质网应激，减轻氯胺酮诱发的小鼠海马神经元毒性。

目的:探究内质网应激对棕色脂肪组织(BAT)脂质组成的影响。方法:雄性C57BL/6小鼠腹腔注射衣霉素溶液(2.5 mg/kg)18 h后取肩胛区BAT，采用超高效液相色谱(UPLC)仪串联SCIEX QTRAP 6500 PLUS质谱仪进行UPLC-MS/MS高覆盖率靶向脂质组学检测和分析。结果:内质网应激导致BAT脂质组成发生显著改变，其中溶血磷脂二酸(LBPA)总含量升高最显著，此外，17种脂质亚类也显著升高，1种脂质亚类显著降低。结论:内质网应激对BAT脂质组学整体有明显影响，其差异脂质代谢物有望为代谢性疾病的诊断与治疗提供潜在的靶点。

目的:探讨床边诊断性支气管镜检查对重症鹦鹉热衣原体肺炎早期病原体的快速评估，旨在宏基因组二代测序（mNGS）检测结果出来前开始有效的抗感染治疗。方法:回顾性分析2020年10月至2021年6月新疆医科大学第一附属医院、新疆阿克苏地区第一人民医院以及新疆生产建设兵团第一师医院成功救治的３例重症鹦鹉热衣原体肺炎患者的临床资料，包括床边诊断性支气管镜检查对病原体的快速评估结果以及开始抗感染的抗菌药物使用情况。结果:3例患者均为男性，年龄分别为63、45和58岁；发病前均有明确的鸟类接触史；临床表现主要为发热、干咳、气短及呼吸困难，其中1例伴嗜睡、腹痛。实验室检查结果显示，入院后及入重症监护病房（ICU）时，2例患者外周血白细胞计数（WBC）偏高〔（10.2~11.9）×10 9/L〕，3例患者中性粒细胞百分比均升高（85.2%~94.6%），淋巴细胞百分比均降低（3.2%~7.7%）。3例患者入院后降钙素原（PCT）升高，至入ICU时仍升高（0.3~4.8 ng/L）；C-反应蛋白（CRP）均升高（58.0~162.0 mg/L），红细胞沉降率（ESR）均升高（36.0~90.0 mm/1 h）。入院后血清丙氨酸转氨酶（ALT）升高2例（136.7 U/L、220.5 U/L），天冬氨酸转氨酶（AST）升高2例（249.6 U/L、164.2 U/L）；入ICU时3例患者ALT（162.2~267.9 U/L）、AST（189.8~223.2 U/L）均升高。3例患者入院后、入ICU时血肌酐（SCr）均正常。3例患者胸部CT表现为急性间质性肺炎、支气管肺炎以及肺实变，以1个肺叶为主的多肺叶受累，其中2例伴少量胸腔积液，1例伴较多规则的小气囊。3例患者入ICU时氧合指数（PaO 2/FiO 2）分别为100.0、57.5和105.4 mmHg（1 mmHg≈0.133 kPa），符合中重度急性呼吸窘迫综合征（ARDS），均接受气管插管机械通气。3例患者床边支气管镜下均可见黏膜明显充血、水肿，无脓性分泌物，有1例黏膜出血。3例患者床边诊断性支气管镜检查病原体评估结果可能为非典型病原体感染，分别快速给予莫西沙星、希舒美和多西环素静脉注射，同时联合碳青霉烯类抗菌药物静脉注射。3 d后支气管肺泡灌洗液（BALF）的mNGS结果提示只有鹦鹉热衣原体感染，此时病情明显改善，PaO 2/FiO 2明显升高，故抗菌药物治疗方案不变，mNGS仅起到验证初始诊断的作用。2例患者分别于入ICU 7 d、12 d拔管，1例因发生院内感染于入ICU 16 d拔管。3例患者均在病情平稳后转入呼吸科病房。 结论:以临床特点为基础的床边诊断性支气管镜检查，不仅有助于重症鹦鹉热衣原体肺炎早期病原体的快速评估，并且在mNGS检测结果回报之前开始有效的抗感染治疗，还可弥补mNGS检测结果滞后性及不确定性等缺陷。

目的:探讨自噬诱导剂雷帕霉素及抑制剂3-甲基腺嘌呤对水痘-带状疱疹病毒（VZV）感染豚鼠背根神经节模型中病毒结构及功能蛋白生物合成的影响及机制。方法:在人胚肺成纤维细胞（HELF）中培养扩增VZV，同时分离提取豚鼠外周血单个核细胞（PBMC），VZV-HELF与PBMC共培养18~20 h，离心收集VZV-PBMC。32只豚鼠随机平均分为4组，每组8只：空白对照组于内眦静脉丛注射自体PBMC；自噬抑制组、自噬诱导组、VZV感染组分别先腹腔注射3 mg/kg 3-甲基腺嘌呤溶液、0.5 mg/kg雷帕霉素溶液、相同体积的0.9% NaCl溶液，2 h后均于内眦静脉丛注射VZV-PBMC 50 μl。14 d后，处死各组豚鼠，取背根神经节组织，透射电镜观察病毒颗粒形态及自噬囊泡形态及数目，Western印迹检测VZV核衣壳蛋白（NCP）和立即早期蛋白62（IE62）及自噬相关蛋白Beclin-1和p62的表达，免疫组化检测VZV感染的背根神经节中抗VZV抗体的表达。统计分析采用两独立样本 t检验、单因素方差分析、LSD- t检验或Kruskal-Wallis H检验。 结果:透射电镜下，VZV感染组背根神经节中可见核衣壳病毒粒子及散在的自噬体结构。空白对照组、VZV感染组、自噬诱导组及自噬抑制组自噬囊泡数量[ M（ Q1， Q3）]分别为0、5（4，6）、7（5，9）、0个，差异有统计学意义（ H = 135.60， P<0.01），VZV感染组显著高于空白对照组及自噬抑制组（均 P<0.05），但与自噬诱导组差异无统计学意义（ P>0.05），而自噬诱导组显著高于自噬抑制组（ P<0.05）。Western印迹显示，VZV感染组IE62蛋白表达水平（1.49 ± 0.06）显著高于空白对照组（0.50 ± 0.09）， t = 9.17， P<0.05；自噬抑制组抗VZV抗体表达显著低于自噬诱导组和VZV感染组（ t值分别为9.24、7.78，均 P < 0.01），而自噬诱导组与VZV感染组抗VZV抗体表达差异无统计学意义（ P > 0.05）。 结论:VZV感染豚鼠背根神经节后发生了自噬；通过抑制自噬，豚鼠背根神经节中部分VZV结构及功能蛋白的表达水平下降。

患者男，67岁，因"乏力发热伴咳嗽咳痰、胸闷气促10 d"于2022年05月16日入院。患者10 d前打扫鸭舍后出现乏力伴全身酸痛、发热，体温最高40.0℃，寒战伴大汗，随后出现咳嗽咳痰，较剧烈，黄色大量黏痰，伴胸闷气促。自行服用退热、止咳药物，无好转且症状逐渐加重，7 d后至当地医院住院就诊，神志尚清，但血压降低，考虑为"重症肺炎，脓毒性休克"，予亚胺培南/西司他丁钠（泰能）针1 g/8h抗感染、抗休克等治疗。3 d后发热、咳嗽及胸闷等症状未见好转，遂至本院急诊科就诊，予面罩吸氧、止咳化痰、泰能抗感染治疗，呼吸科会诊认为不除外非典型病原体感染，建议并加用"多西环素胶囊"。既往"冠状动脉粥样硬化性心脏病"病史15年余（具体诊断经过不详）。吸烟50余年，约每日40支，未戒，饮酒50余年，每次杨梅酒250 mL，未戒。1弟因"心脏扩大，心力衰竭"已故，父亲及其余3兄弟均有类似"心脏扩大"疾病史，健在。患者入院第2天，拟"重症肺炎，呼吸衰竭，脓毒性休克？"收入重症医学科进一步治疗。

目的:评价某型潜艇长航后舱室微生物气溶胶污染状况对艇员身体健康造成的影响。方法:（1）富集长航前后舱室空气样本，分析其气载微生物构成变化。（2）采用随机抽样法对长航后31名艇员进行9种病原菌IgM抗体和曲霉菌IgG抗体检测；对30名艇员长航前后血清IgG、IgA、IgM及白细胞介素（IL）-2、IL-4、IL-8、炎症蛋白-10（IP-10）进行配对检测。结果:（1）潜艇长航前可培养微生物分类为21个属56个种，长航后为37个属80个种；长航后丝状真菌和革兰氏阴性杆菌占比明显增加；长航前后均未检测到呼吸道病毒、支原体、衣原体、嗜肺军团菌核酸。（2）长航后艇员血清IgG和IgA水平较长航前显著升高（ P<0.01）；血清IL-2和IL-8水平降低，IL-4和IP-10水平升高，各组分变化均有统计学意义（ P<0.05）；长航后肺炎支原体IgM抗体阳性率为21.62%，乙型流感病毒IgM抗体阳性率为5.41%，副流感病毒IgM抗体阳性率为2.70%，曲霉菌IgG抗体阳性率为16.67%。 结论:某型潜艇长航后舱室气载微生物种群的生物多样性增加，以真菌和革兰氏阴性杆菌增加为主要特征；多种病原菌特异性抗体的产生可能与舱室微生物气溶胶污染存在相关性；血清学标志物检测结果佐证了艇员可能因微生物气溶胶暴露产生了适应性免疫反应。