目的 建立南果梨中霜霉威、氧乐果、特丁硫磷、西玛津、抗蚜威、噻节因、氟虫腈、二甲戊灵、氟菌唑、嘧菌环胺、虫螨腈、吡草醚、噁霜灵、溴螨酯、三氯杀螨砜及精噁唑禾草灵等16种农药残留同时检测的QuEChERS-气相色谱-串联质谱分析方法.方法 使用乙腈提取样品中的农药,经N-丙基乙二胺(PSA)分散固相萃取净化,再经气相色谱-三重四级杆串联质谱分析.结果 16种农药在线性范围内相关系数均大于0.994.方法检出限范围(S/N=3)为0.01～1.62μg/kg,方法定量限范围为0.02～5.40 μg/kg.当加标水平为62.5 μg/kg时,其回收率在78.5％～98.6％之间,相对标准偏差(RSD)在3.8％～11.4％之间.结论 该方法具有操作简单、快速、灵敏的特点,适用于南果梨中农药多残留的检测.

目的 研究除草剂西玛津对非洲爪蟾肝脏的毒性及相关基因表达的影响.方法 随机选取第46阶段(孵化后第6天)健康混合性别的非洲爪蟾蝌蚪600只,分别于0[对照(0.01％DMSO)]、0.1、1、10、100μg/L西玛津溶液中连续饲养100 d.观察非洲爪蟾肝脏组织的病理学改变;采用Q-RT-PCR法检测雌雄爪蟾肝脏相关基因(hsp70、hsp90、ar、er、gr、vtga2)的表达水平.结果 10、100μg/L西玛津可使肝脏细胞萎缩、坏死和空泡.西玛津对雌雄非洲爪蟾肝脏组织中的hsp90、ar、er、gr、vtga2基因表达量未见显著影响,只有0.1μg/L西玛津显著诱导了雌性爪蟾肝脏中的hsp70的表达水平上调(P<0.05).结论 西玛津可对非洲爪蟾的肝脏组织学结构产生病理损伤,但未显示出内分泌干扰物的特性.

目的 研究与探讨西玛津对小鼠精母细胞(GC-2 spd)增殖的影响及作用机制.方法 COS-7细胞共转染pAP1-luc和Spag6基因的表达质粒,荧光素酶报告基因实验检测SPAG6对AP-1转录活性的影响.以不同浓度西玛津(0、5、25、125 μg/mL)染毒GC-2 spd细胞24、48和72 h,采用CCK-8法检测细胞存活率.西玛津染毒24h后,western blot检测SPAG6和COPS5蛋白的表达变化,qPCR检测促凋亡因子Bax及抗凋亡因子Bcl-2 mRNA的表达.结果 COS-7细胞内过表达SPAG6能抑制AP-1的转录活性.与对照组比较,25和125 μ g/mL西玛津染毒组中GC-2spd细胞存活率、细胞内SPAG6蛋白及Bax mRNA的表达水平均下降,差异具有统计学意义(P＜0.05),然而COPS5蛋白及Bcl-2mRNA的表达没有显著变化,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 西玛津对GC-2spd细胞具有毒性作用,可能通过抑制SPAG6蛋白表达从而调节AP-1介导的凋亡基因的表达,诱导生精细胞凋亡.

[背景]三嗪类除草剂是我国目前生产应用较多的除草剂之一,其很难被生物降解,具有持续高生态毒性,会对环境产生影响,包括对水生生物的慢性毒性、生态系统中的蓄积以及对人体健康的危害.[目的]将固相萃取法和液相色谱-串联质谱法相结合,建立检测水中莠去津、草净津、异丙甲草胺、草克津、扑草净、西玛津6种三嗪类除草剂的新方法.[方法]优化仪器条件和前处理条件,用Waters Oasis HLB萃取小柱净化,甲醇洗脱,90％甲醇水复溶,超高效液相色谱串联质谱法用电喷雾离子化源正离子模式进行多反应检测模式监测,对质谱测定的目标离子进行选择,外标法定量.应用建立的方法检测4份太湖水样、3份水源水样和10份生活饮用水样.[结果]6种三嗪类除草剂在0～250.0μg·L-1范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999,检出限为0.54～1.44μg·L-1,定量限为1.8～4.8μg·L-1,平均回收率为75.0％～93.3％,精密度为0.6％～5.0％.水源水和生活饮用水中均未检出三嗪类除草剂,某湖水样本中测得草克津质量浓度为0.16～0.17μg·L-1,其他5种物质未检出.[结论]方法操作简便,检出限低,灵敏度高,经实际湖水样品测试,可以满足水样中6种除草剂残留的同时分析测定.

本研究采用富集培养技术自莠去津污染的活性污泥中分离筛选到一株具有降解三嗪类除草剂功能的菌株SB5,经形态学和16S rRNA基因分析将其初步鉴定为类节杆菌属细菌.其具有已知莠去津降解相关基因trzN、atzB及atzC.在培养基中添加葡萄糖、蔗糖、柠檬酸钠、酵母浸粉和蛋白胨可显著提高菌株SB5的生物量和对莠去津的降解效率;外加(NH4) 2SO4和NH4C1对该菌生物量起到抑制作用,但不影响其对莠去津的降解效率;外加淀粉对菌株的生物量影响不显著,但会影响其对莠去津的降解.菌株SB5在4～42℃、4～10初始pH及50～1000 mg·L-1莠去津初始浓度范围内均具有较好的莠去津耐受性和莠去津降解能力.以100 mg·L-1莠去津为唯一碳源,在37℃、初始pH 8.0的最佳条件下,菌株SB5在36 h内对其降解率可达到100％.降解谱分析结果表明,菌株SB5对100 mg·L-1初始浓度的西玛津、特丁津、扑灭津、氰草津、莠灭净和扑草净6种三嗪类除草剂同样具有较好的降解效果,培养48 h后的降解率分别为86.4％、92％、98.6％、95.6％、100％和99.2％,是一株高效广谱的降解菌.菌株SB5进一步丰富了莠去津生物降解的菌种资源,其对三嗪类除草剂的高效和广谱降解功能赋予其在三嗪类除草剂复合污染的生物修复和治理技术研发方面的潜在应用价值.

目的 探讨均三氮苯类除草剂阿特拉津(ATR)、西玛津(SIM)和氰草津(CYA)致PC-12细胞凋亡及其机制.方法 常规培养大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤PC-12细胞株,于细胞对数生长期分别以200μmol/L的ATR、SIM和CYA不同分组处理24 h,另设对照组仅添加相同溶剂.采用CCK-8法检测细胞存活率;ROS试剂盒检测PC-12细胞内活性氧(ROS)含量;Real-time PCR和Western blotting法检测Bax、p53、Bcl-2和Caspase-3 mRNA和蛋白表达.结果 与对照组相比,ATR组、SIM组和CYA组细胞的存活率均明显下降,细胞内ROS活性均显著升高,Bax、p53和Caspase-3 mRNA及蛋白表达均升高,Bcl-2 mRNA及蛋白表达均明显降低(P<0.01).与ATR组相比,SIM组和CYA组细胞的存活率均明显上升,细胞内ROS活性均显著下降,p53和Caspase-3 mRNA及蛋白表达均明显降低,Bcl-2 mRNA及蛋白表达均明显升高(P<0.01).与SIM组相比,CYA组细胞的存活率明显上升,细胞内ROS活性显著下降,Bax、p53和Caspase-3 mRNA及蛋白表达明显降低,Bcl-2 mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.01).结论 ATR、SIM和CYA这3种不同的均三氮苯类除草剂均可促进PC-12细胞发生凋亡,其中ATR作用最强,CYA作用最弱.