程序性死亡受体1(PD-1)是近年来发现的一种重要的负性共刺激分子，诱导性表达于T、B细胞表面，在调控细胞免疫应答及免疫耐受等过程中起着重要的作用。PD-1与程序性死亡-配体1(PD-L1)结合后通过募集磷酸化的SHP2减弱下游如PI3K/Akt和ERK等信号通路的传导，进而抑制T细胞的增生和细胞因子的产生，抑制免疫应答，参与大量炎症性疾病的发生和发展。PD-1在眼科领域的研究尚处于起步阶段，除参与眼科炎症性疾病如葡萄膜炎、交感性眼炎、变态反应性结膜炎等疾病的发病以外，也参与角膜移植排斥反应、视神经损伤、视神经脊髓炎、糖尿病视网膜病变、甲状腺相关眼病及黑色素瘤等疾病，因而阻断PD-1及其配体PD-L1之间的相互作用有可能成为治疗眼部肿瘤、炎症、免疫性、退变性疾病的潜在的靶点。本文就PD-1及其配体PD-L1在眼部疾病发病中作用的最新研究进展作一综述。

目的:通过检测滤泡辅助性T细胞（Tfh）相关分子诱导性共刺激分子（ICOS）及程序性细胞死亡受体1（PD-1）在大疱性类天疱疮（BP）患者皮损中的表达，探讨Tfh在BP发病机制中的作用。方法:收集大连市皮肤病医院2014—2017年间确诊的BP患者石蜡组织标本21份，其中女7例，男14例，平均年龄72.57岁。应用免疫组化SP法检测BP皮损中ICOS与PD-1的表达，以10例正常皮肤组织作为对照组。结果:ICOS、PD-1在BP皮损中均主要表达于表皮基底层、棘细胞层、颗粒层、角质层，以棘细胞层表达最为显著，细胞质、细胞核均见表达，偶见细胞膜表达，真皮层炎症细胞中亦有表达；正常皮肤组织中ICOS、PD-1表达少见。BP组ICOS表达率为85.71%（18/21），PD-1表达率为47.62%（10/21），均高于正常对照组（均为0），差异有统计学意义（ P值分别<0.001、<0.05）。 结论:Tfh细胞相关分子ICOS、PD-1在BP发病机制中可能发挥重要作用。

目的:探讨滤泡辅助性T淋巴(Tfh)细胞在儿童嗜酸性粒细胞性胃肠炎(EG)发病中的作用及临床意义。方法:选取2018年10月至2020年1月在南京医科大学附属儿童医院消化科住院的EG患儿17例作为EG组，以同期结肠息肉患儿15例为对照组。采用流式细胞术检测2组患儿外周血中Tfh细胞及其功能性分子可诱导性共刺激分子(ICOS)、程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)的表达。结果:EG组与对照组患儿外周血Tfh细胞频率的中位数(四分位间距)分别为7.3(2.6)%、2.8(1.4)%，2组比较差异有统计学意义( P<0.05)。EG组与对照组患儿Tfh细胞上ICOS、PD-1的表达水平的中位数(四分位间距)分别为1.5(1.3)%、1.8(3.2)%及0.1(0.2)%、0.7(0.6)%，2组比较差异均有统计学意义(均 P<0.05)。EG组患儿外周血中Tfh细胞频率与ICOS、PD-1表达量及免疫球蛋白E(IgE)水平均呈正相关( r＝0.746、0.893、0.587，均 P<0.05)。 结论:EG患儿外周血Tfh细胞增多，高表达ICOS、PD-1，处于增殖活化状态；EG患儿外周血Tfh细胞数量与IgE水平呈正相关性；Tfh细胞及其相关分子的异常表达在EG的发生机制中可能起促进作用。

目的 观察诱导性共刺激分子(ICOS)靶点用于小鼠佐剂诱导型关节炎(AIA)模型的可行性.方法 选取20只BALB/c小鼠,于右后爪分别注射等剂量完全弗氏佐剂(AIA组,n=10)或磷酸盐缓冲液(对照组,n=10),之后经尾静脉分别注射ICOS-IRD680 mAb探针(AIA组)或IgG-IRD680 mAb探针对照组,比较24及48 h后2组近红外荧光成像右爪与左爪荧光强度比值;提取小鼠总RNA行转录组测序,筛选并分析差异表达基因.针对对照组提取脾脏原代T细胞并分选磁珠阴性T细胞,以佛波酯/离子霉素刺激、诱导活化T细胞形成,检测其表面ICOS蛋白表达水平,并进行安全性评价.结果 相比对照组,AIA组ICOS基因表达显著上调、T细胞占比增高,FoxP3+调节性T细胞、CD8+T细胞及CD4+T细胞中ICOS分布较多.对照组分选磁珠阴性T细胞前、后CD3+T细胞纯度分别为65.31％和90.14％;其中,ICOS蛋白阳性小鼠CD4+T细胞在活化前、后占比分别为7.14％及31.20％,且活化CD4+T细胞ICOS蛋白平均荧光强度(586±25)显著高于未活化者(161±31)(t=25.390,P＜0.001).注射探针后24及48 h,AIA组右爪/左爪荧光强度比值均高于对照组(t=34.600、P＜0.001;t=23.380、P＜0.001).相比对照组,AIA组小鼠心、肝、肾组织未见明显病理改变,且组间血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶及肌酐无明显差异(P均＞0.05).结论 ICOS靶点用于小鼠AIA模型安全、可行.

目的 探讨特应性皮炎(AD)患者外周血滤泡性辅助性 T(Tfh)细胞的表达特征,分析其在特应性皮炎发病机制中的作用.方法 选择该院20例AD患者(AD组),运用欧洲特应性皮炎评分系统(SCORAD)评估病情严重程度.采用中药汤剂口服和他克莫司软膏外用治疗,治疗时间1个月.使用流式细胞技术检测患者治疗前、治疗1个月后和12例健康对照者(健康对照组)外周血T fh细胞的频率及其表面程序性死亡受体1(PD-1)、诱导性共刺激分子(ICOS)的表达水平,并分析其与AD严重程度的相关性.结果 与健康对照组比较,AD组外周血Tfh细胞频率明显升高,差异有统计学意义(P<0.05).Tfh细胞PD-1、ICOS 表达水平在AD组患者显著升高,差异有统计学意义(P<0.05).Tfh细胞频率与AD严重程度呈正相关关系(P<0.05), Tfh细胞PD-1、ICOS表达水平仅SCORAD评分升高而升高,但差异无统计学意义(P>0.05).经1个月治疗,患者皮疹好转、瘙痒减轻,外周血 Tfh 细胞频率及其表面 PD-1、ICOS 表达水平较治疗前明显降低(P<0.05).结论 Tfh细胞频率和功能在AD患者外周血均发生改变,该细胞可能在AD的免疫学发病机制中具有重要的临床作用.

目的:探讨胶原诱导性关节炎(CIA)小鼠炎症条件下,诱导的调节性T细胞( iTregs)与B细胞的相互作用模式.方法:分别从正常DBA1/J和免疫后第35天的关节炎小鼠的脾脏细胞分选出CD19+细胞( N-B和CIA-B细胞),以此细胞作为抗原提呈细胞观察其诱导Tregs生成的差异;经典方法制备iTregs,将CIA-B细胞与iTregs共培养,观察其对iTregs自身的增殖及iTregs表达CTLA-4的影响;观察iTregs对CIA-B细胞共刺激分子(CD80,CD86)和MHCⅡ类分子表达的影响,并设立Transwell实验探讨作用机制.结果:CIA-B较N-B诱导更多Tregs的生成;CIA-B促进iTregs的增殖并上调iTregs细胞表面CTLA-4的表达,后者的作用是通过细胞直接接触的途径实现;同时,iTregs促进CIA-B细胞表面共刺激分子和MHCⅡ类分子的表达且该作用也通过细胞直接接触途径而实现.结论:在CIA炎症条件下,iTregs通过与B细胞的相互作用来发挥其免疫抑制作用,两者的相互作用通过细胞直接接触实现.

目的 分析尘螨阳性的哮喘患儿外周血辅助性T淋巴细胞(Th)和调节性T淋巴细胞(Treg)的表达及其临床意义.方法 选取尘螨阳性的哮喘患儿(尘螨阳性哮喘组)和健康儿童(健康对照组)各30例.采集2组儿童外周血,密度梯度离心法分离获得外周血单个核细胞(PBMC),胞内染色技术和流式细胞术检测尘螨刺激前后CD4+T淋巴细胞内干扰素-γ(IFN-γ)、IL-4和叉状头螺旋转录因子(Foxp3)的表达,尘螨刺激后,PBMC中分别加入阻断型抗人可诱导共刺激分子(ICOS)、抗人CD2s或抗人细胞毒T淋巴细胞相关抗原(CTLA-4)单克隆抗体共培养3d后,检测Th1(CD4+ IFN-γ+T淋巴细胞)、Th2(CD4+ IL-4+T淋巴细胞)和Treg(CD4+CD25+ Foxp3+T淋巴细胞)的表达,比较各组之间的差异.结果 与健康对照组相比,尘螨阳性哮喘组尘螨刺激前外周血Th1细胞显著增加(P＜0.05),Treg细胞显著减少(P＜0.05),Th2细胞差异无统计学意义(P＞0.05);与刺激前相比,尘螨刺激后Th1和Treg细胞变化均无统计学意义(P均＞0.05),Th2细胞显著增加(P＜0.01);加入抗ICOS和抗CD28单克隆抗体后,Th1细胞和Treg细胞变化无统计学意义,Th2细胞显著减少(P均＜0.0001);加入抗CTLA-4单克隆抗体后,Th1、Th2和Treg细胞变化差异均无统计学意义(P均＞0.05).结论 尘螨变应性哮喘患儿外周血中存在组成性的不依赖抗原刺激的Th1异常表达和Treg的表达减少,同时存在抗原诱导性,依赖ICOS和CD28信号的Th2异常活化.

目的 探究尿胰蛋白酶抑制剂(UTI)对重症结核病患者的免疫调节作用.方法 选取杭州市红十字会医院2015年1月至2017年11月收治的84例重症结核病患者,采用随机数字表法分为UTI组和对照组,每组各42例.对照组给予常规治疗,UTI组在常规治疗基础上于入住ICU第2天给予UTI 10万单位静脉注射,每8小时1次,连续治疗7 d.比较两组患者的一般资料、急性病生理学和长期健康评价(APACHE)Ⅱ评分和外周血液中白细胞介素2(IL-2)、IL-6、IL-10、IL-12、干扰素γ(INF-γ)、转化生长因子β(TGF-β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞、Tregs细胞及诱导性共刺激分子(ICOS)+Tregs细胞表达水平.结果 治疗后,UTI组及对照组重症结核病患者APACHEⅡ评分[(22.5±2.2)分vs.(25.8±1.5)分,t=2.025,P=0.043]、IL-6[(137±33)ng/L vs.(116±42)ng/L,t=2.785,P=0.045]、IL-10[(29±6)ng/L vs.(26±5)ng/L,t=2.143,P=0.039]、IL-12[(84±26)ng/L vs.(65±22)ng/L,t=2.009,P=0.043]、TGF-β[(8.5±2.3)ng/L vs.(9.8±2.8)ng/L,t=1.613,P=0.045]、CD8+T淋巴细胞[(43±13)％vs.(38±12)％,t=1.856,P=0.043]及Tregs细胞[(5.8±1.1)％vs.(5.1±0.9)％,t=1.645,P=0.045]比率比较,差异均有统计学意义;而IL-2[(835±188)ng/L vs.(744±324)ng/L,t=0.656,P=0.458]、INF-γ[(200±88)ng/L vs.(203±78)ng/L,t=0.912,P=0.061]、TNF-α[(854±256)μg/L vs.(808±213)μg/L,t=0.956,P=0.785]、CD4+T淋巴细胞[(48±8)％vs.(49±14)％,t=0.756,P=0.985]及ICOS+Tregs细胞[(1.0±0.7)％vs.(1.0±0.9)％,t=0.956,P=0.089]比率比较,差异均无统计学意义.结论 UTI能够调节危重症结核病患者的细胞免疫,减轻重症结核病患者体内炎症因子的释放,从而改善其APACHEⅡ评分及预后.

Na?ve CD4+T细胞在接触抗原刺激后,具有向不同的Th细胞分化的潜力.诱导性协同共刺激分子(inducible synergistic co-stimulation molecules,ICOS),作为CD28超家族中的一员,表达在激活后的T细胞表面,参与调节T细胞的增殖分化和效应功能.ICOS分子表达的上调或下调与自身免疫性疾病和多种肿瘤性疾病的发生和发展密切相关.研究ICOS分子,ICOS与Th细胞免疫,以及ICOS与自身免疫性疾病和肿瘤性疾病之间的内在联系,可为寻找临床治疗靶点提供新观点.

类风湿性关节炎(RA)患者体内滤泡辅助性T(Tfh)细胞异常表达,与RA的发生发展相关.目前,Tfh细胞调控RA发生机制的研究仍处于初级阶段.此外,Tfh细胞表面分子CXC趋化因子受体5(CXCR5)、诱导性共刺激分子(ICOS)和程序性死亡蛋白1 (PD-1)及其分泌的白细胞介素21(IL-21)、B细胞淋巴瘤因子6(BCL.6)均被证实与RA的发生有关.我们主要从Tfh细胞表面分子及其分泌的因子的角度研究其调控RA发生的机制,分析与Tfh细胞相关的各分子对RA发生的作用,探讨各分子对RA临床诊断的意义和以各分子为靶点治疗RA的潜在途径.